虎力散片止血活血藥理活性實(shí)驗(yàn)研究

江西漢和生物科技有限公司（330096）章卉

廣東省珠海市婦幼保健院（519000）魏妍

虎力散片劑收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑》第十冊(cè)，由制草烏、三七、斷節(jié)參、白云參等藥材組成；具有驅(qū)風(fēng)除濕、舒筋活絡(luò)、行瘀、消腫定痛的功效，主要用于風(fēng)濕麻木、筋骨疼痛、跌打損傷、關(guān)節(jié)炎等癥[1]。目前，有關(guān)虎力散的研究主要集中在質(zhì)量研究與臨床應(yīng)用方面，少見虎力散藥理試驗(yàn)的相關(guān)報(bào)道。相關(guān)質(zhì)量研究表明，虎力散中含有三七皂苷R1與人參皂苷Rg1等皂苷類成分[2]、核酸與堿基類成分[3]、生物堿類成分[4]等。臨床應(yīng)用方面，虎力散具有抗炎鎮(zhèn)痛及加速傷口愈合等作用[5][6][7]，臨床上常用于手術(shù)切口腫脹[8]、關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)痛[9]、靜脈給藥所致的靜脈炎、強(qiáng)直性脊柱炎等癥的治療。

本實(shí)驗(yàn)采用大鼠止血活血模型，研究虎力散不同粉碎組（100、200～300、400～600目）止血活血藥理活性，為其藥品工藝生產(chǎn)與臨床用藥提供依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥材 虎力散片不同粉碎組（100、200～300、400～600目）由江西青春康源制藥有限公司提供（批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字Z20090272）。

1.2 實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物 SPF級(jí)雄性SD大鼠，100只，體重180～220g（湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK[湘]2011～0003），實(shí)驗(yàn)期間室溫（18±2）℃。

1.3 試劑 云南白藥膠囊（批號(hào)：ZJA1413，云南白藥集團(tuán)股份有限公司）；生理鹽水（批號(hào)：100405P1，江西科倫藥業(yè)有限公司）；其余試劑均為分析純；水為雙蒸水。

1.4 儀器 TDL-5型臺(tái)式低速離心機(jī)（Anke公司）；BS124s型分析天平（德國Sartorius公司）；LYB-NJ4型血小板聚集儀（北京普利生儀器有限公司）；Coatron M2型半自動(dòng)血凝儀（德國TECO公司）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 止血活血試驗(yàn)

2.1.1 凝血酶原時(shí)間試驗(yàn) 取SD大鼠50只隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白對(duì)照組、陽性藥物對(duì)照組（云南白藥）、虎力散（100目粉碎）組、虎力散（200～300目粉碎）組、虎力散（400～600目粉碎）組。其中空白對(duì)照組給藥劑量為10 mL/kg（蒸餾水），云南白藥給藥劑量為200 mg/kg，虎力散各組給藥劑量為60mg/kg，以上各組連續(xù)ig給藥5天，每天1次。第5天于給藥后1h從大鼠眼眶靜脈叢取血，枸櫞酸鈉抗凝，靜置1h后3000 rpm/min離心15min，取上清液，采用半自動(dòng)血凝儀測(cè)定凝血酶原時(shí)間。

2.1.2 血小板聚集試驗(yàn)大鼠分組、給藥方法與給藥周期同“2.1.1”項(xiàng)。第5天于給藥后1h從大鼠眼眶靜脈叢取血，枸櫞酸鈉抗凝，靜置1h后800 rpm/min離心10 min制備富血小板血樣；然后3000 rpm/min離心10 min制備貧血小板血樣，采用血小板聚集儀測(cè)定血小板聚集率。

2.2 統(tǒng)計(jì)分析 采用Excel軟件統(tǒng)計(jì)分析模塊進(jìn)行處理（TTEST檢驗(yàn)：雙尾，雙樣本異方差），實(shí)驗(yàn)結(jié)果用±s表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 凝血酶原時(shí)間試驗(yàn) 與空白組比較，虎力散片不同粉碎方法組大鼠凝血酶原時(shí)間顯著縮短（P＜0.05，P＜0.01），實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，虎力散片不同粉碎方法組能夠顯著縮短大鼠凝血酶原時(shí)間，具有較好的止血效果。詳見附表1。

附表1 凝血酶原時(shí)間試驗(yàn)（±s，n=10）

附表1 凝血酶原時(shí)間試驗(yàn)（±s，n=10）

注：*表示與空白組比較，P＜0.05，**表示與空白組比較，P＜0.01。

組別 劑量（mg/kg） PT（s）空白對(duì)照組 - 17.64±0.47云南白藥組 200 16.68±0.83**虎力散100目組 60 16.98±0.75*虎力散200～300目組 60 16.82±0.77**虎力散400～600目組 60 17.03±0.68*

附表2 血小板聚集率試驗(yàn)（±s，n=10）

附表2 血小板聚集率試驗(yàn)（±s，n=10）

注：*表示與空白組比較，P＜0.05，**表示與空白組比較，P＜0.01。

組別 劑量（mg/kg） 血小板聚集率（%）空白對(duì)照組 - 50.66±9.16云南白藥組 200 38.01±9.43**虎力散100目組 60 40.70±7.19**虎力散200～300目組 60 41.86±8.34*虎力散400～600目組 60 38.81±8.12**

3.2 血小板聚集試驗(yàn) 與空白組比較，虎力散片不同粉碎方法組大鼠血小板聚集率顯著減少（P＜0.05，P＜0.01）。結(jié)果表明，虎力散片不同粉碎方法組能夠顯著降低大鼠血小板聚集率，具有較好的活血化瘀作用。詳見附表2。

4 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，虎力散片不同粉碎組（100、200～300、400～600目）能夠顯著縮短大鼠凝血酶原時(shí)間與血小板聚集率，表現(xiàn)出良好的止血活血藥理活性。另一方面，虎力散抗炎、鎮(zhèn)痛與止血活血藥物效應(yīng)并未隨粉碎目數(shù)的增大而增強(qiáng)；不同粉碎組之間結(jié)果表明，其藥理活性未見差異（P＞0.05）。相關(guān)試驗(yàn)結(jié)果為其臨床應(yīng)用與工藝生產(chǎn)提供了一定的動(dòng)物試驗(yàn)依據(jù)。