甲胎蛋白聯(lián)合異常凝血酶原檢測在肝癌早期診斷及療效評估中的價值分析

林炳柱，劉小燕

(廣東省云浮市人民醫(yī)院檢驗科，廣東 云浮 527100)

·論著·

甲胎蛋白聯(lián)合異常凝血酶原檢測在肝癌早期診斷及療效評估中的價值分析

林炳柱，劉小燕

(廣東省云浮市人民醫(yī)院檢驗科，廣東 云浮 527100)

目的探討甲胎蛋白(alpha-fetoprotei，AFP)和異常凝血酶原(abnormal prothrombin，APT)聯(lián)合檢測在肝癌早期診斷及療效評估中的臨床價值。方法選擇肝細胞性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)患者52例、肝硬化患者38例，同時隨機抽取健康體檢者30例為對照組。比較對照組、肝硬化組和HCC組AFP及APT的檢測值；計算AFP、APT單獨檢測及聯(lián)合檢測HCC的特異度、靈敏度及準確度；分析HCC血清中AFP與APT的關系。結果HCC組AFP、APT檢測值明顯高于肝硬化組和對照組(P<0.05)。APT單獨檢測HCC的特異度明顯高于AFP(P<0.05)；AFP、APT聯(lián)合檢測HCC的靈敏度明顯高于AFP、APT單獨檢測(P<0.05)；AFP、APT聯(lián)合檢測HCC的特異度(2項同時超過臨界值判定為陽性)明顯高于AFP單獨檢測(P<0.05)；AFP、APT聯(lián)合檢測HCC的準確度明顯高于AFP單獨檢測(P<0.05)。Spearman相關分析顯示AFP和APT均為獨立升高，兩者無相關性(P>0.05)。結論AFP、APT是臨床診斷HCC的重要血清學指標，良好地區(qū)分了HCC和肝硬化，二者聯(lián)合檢測可顯著提高檢測的靈敏度，并一定程度上改善了檢測準確度，2項同時超過臨界值判定為陽性時特異度也保持在較高水平，對HCC具有重要診斷價值。

肝腫瘤；甲胎蛋白類；異常凝血酶原

肝細胞性肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)屬于高發(fā)病率的惡性腫瘤，在國內(nèi)比較常見，病死率居惡性腫瘤第二位，預后較差，術后復發(fā)率高。相關研究顯示，在今后十幾年內(nèi)HCC發(fā)病率還將繼續(xù)升高[1]。大部分HCC患者初次就診時已到中晚期，喪失了最佳的手術治療時機，故對早期有效診斷HCC是非常必要的。診斷HCC主要根據(jù)影像學檢查和肝組織病理活檢等方法，不具備普查性，給肝癌早期診斷和篩查帶來困難[2]。HCC早期診斷成為HCC研究的重點，腫瘤標志物檢測對患者無損傷，性價比較高，已普遍被患者認可。目前證實，甲胎蛋白(alpha-fetoprotei，AFP)是首選的肝癌診斷和判斷預后的血清標志物[3]。但臨床實踐發(fā)現(xiàn)，AFP特異度和靈敏度均不甚理想，對HCC的診斷價值不高。異常凝血酶原(abnormalprothrombin，APT)是目前比較常用的標志物，其特異度較高，對HCC診斷有較高的臨床價值[4]。APT作為HCC高特異度的血清標志物，在20世紀80年代就受到了臨床廣泛關注，但目前其應用較少[5]。雖然每一種血清標志物對HCC早期診斷均具有一定臨床意義，但它們的靈敏度及特異性并不十分理想，均具有一定局限性。本研究旨在探討APT和AFP聯(lián)合檢測在HCC早期診斷中的臨床意義，報告如下。

1 資 料 與 方 法

1.1 一般資料 選擇2014年8月—2015年8月在我院就診的HCC患者52例，均通過CT、MRI以及病理活組織檢查確診，男性33例，女性19例，年齡26～79歲，平均年齡(53.81±8.67) 歲，均未接受肝動脈化療栓塞、射頻消融、肝臟外科切除等肝癌相關治療；肝硬化患者38例，通過臨床表現(xiàn)、超聲和CT等檢查排除HCC，男性25例，女性13例，年齡38～81歲，平均(55.62±9.73) 歲。同時隨機抽取在我院進行體檢的健康者30例為對照組，男性19例，女性11例，年齡26～75歲，平均(52.18±5.46)歲。在近3個月內(nèi)所有受檢者均未服用華法林抗凝劑和維生素K等藥物。3組性別、年齡差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準后實施，所有患者均對本研究目的和檢查方法知情同意，主動簽署知情同意書，所有患者的臨床資料均不公開，充分尊重患者的隱私權。

1.2 方法 采集各組受檢者清晨空腹血液，分離血清，-80 ℃條件下保存。采用電化學發(fā)光法測定AFP，試劑盒由羅氏公司提供，應用東槽AIA2000全自動免疫分析儀，操作均嚴格按照試劑說明書和實驗室內(nèi)質控文件進行。

1.3 觀察指標 ①比較對照組、肝硬化組和HCC組AFP和APT檢測值。②計算AFP和APT單獨檢測及聯(lián)合檢測HCC的特異度、靈敏度及準確度。③分析HCC血清中AFP與APT的相關性。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS20.0統(tǒng)計學軟件分析數(shù)據(jù)。計量資料比較分別采用單因素方差分析和q檢驗；靈敏度、特異度及準確度計算采用四格表診斷性試驗；相關性采用Spearman相關分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 3組AFP和APT檢測值比較HCC組AFP、APT值明顯高于肝硬化組和對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；肝硬化組與對照組AFP、APT值差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組AFP和APT檢測值比較Table 1 Comparison of AFP and APT detection values among 3 groups

*P<0.05與對照組比較 #P<0.05與肝硬化組比較(q檢驗)

2.2 AFP和APT單獨檢測及聯(lián)合檢測HCC的特異度和靈敏度 AFP、APT單獨檢測HCC靈敏度差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.854，P=0.457)；APT單獨檢測HCC的特異度與AFP比較明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=6.585，P=0.003)；AFP、APT聯(lián)合檢測HCC的靈敏度(任何1項超過臨界值判定為陽性)明顯高于AFP、APT單獨檢測(χ2=5.319、5.953，P=0.004、0.003)；AFP、APT聯(lián)合檢測HCC的特異度(2項同時超過臨界值判定為陽性)明顯高于AFP單獨檢測(χ2=6.179，P=0.003)；AFP、APT聯(lián)合檢測HCC的準確度(任何1項超過臨界值判定為陽性)明顯高于AFP單獨檢測(χ2=5.148，P=0.005)。見表2。

表2 AFP和APT單獨檢測及聯(lián)合檢測HCC的特異度和靈敏度比較Table 2 Comparison of specificity and sensitivity for detecting HCC by single or combined AFP and APT (例數(shù))

2.3 HCC中血清AFP與APT的關系 52例HCC患者中，AFP和APT同時升高27例(51.92%)；APT升高9例(17.31%)，但AFP水平處于臨界值以下；AFP升高11例(21.15%)，但 APT水平處于臨界值以下。通過散點圖和Spearman相關分析綜合分析發(fā)現(xiàn)，AFP和APT均為獨立升高，兩者無相關性(rs=0.048，P=0.621)。

3 討 論

HCC是惡性腫瘤中的一種，具有較高病死率，發(fā)病隱匿，疾病早期缺乏典型臨床癥狀，就診時多數(shù)已為中晚期[6]。近年來，由于醫(yī)學技術的不斷發(fā)展，HCC生存率有了一定程度的提高，但5年生存率仍然較低，未超過10%。為了提高HCC生存率，早期診斷顯得至關重要。AFP是一種與胚胎具有相關性的蛋白質，是目前為止發(fā)現(xiàn)最早和應用最廣的腫瘤標志物，廣泛應用于HCC的普查、診斷中，在判斷治療效果和預測復發(fā)等方面同樣具有重要的臨床價值[7]。臨床研究顯示，AFP的生物學功能較復雜，具有促進肝癌細胞增殖、抑制凋亡和免疫逃避的作用[8]。AFP已被研究證實在HCC患者血清中的陽性百分比較高，是HCC診治應用最廣的血清學標志物之一[9]。但由于血液中AFP濃度與癌腫直徑、分化、生長及變性壞死有密切關系，故HCC患者有一部分也會表現(xiàn)為AFP濃度低或AFP檢測陰性，且AFP在小肝癌患者中的檢出率較低，會發(fā)生假陽性和假陰性病例。本研究結果顯示，HCC組血清AFP水平明顯高于肝硬化組和對照組；AFP對HCC診斷的準確度為75.56%，特異度為78.95%，靈敏度為73.08%，均有待提高。AFP雖然被認為是診斷HCC的首選指標，但HCC患者仍有20%多的比例處于正常AFP水平，而一部分惡性腫瘤患者的AFP值也會有所升高，限制了AFP單獨檢測在HCC早期診斷中的臨床價值[10-11]。為此，尋找特異度和靈敏度更高的HCC標志物意義重大。

蛋白組學和分子生物學技術在近幾年不斷發(fā)展，其應用也越來越廣泛，在HCC標志物的研究方面目前取得了重大進步[12]。然而，大部分HCC標志物如高爾基蛋白73、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、某些生長因子或細胞因子等還只是停留在實驗室研究階段。研究顯示，這些腫瘤標志物密切關系著HCC的發(fā)生和發(fā)展，但其自身檢測方法存在敏感度和特異度不高等問題，使其臨床應用價值受到限制[13]。在以往的研究中發(fā)現(xiàn)，相比于AFP來說，高爾基蛋白73診斷HCC的敏感度和特異度較高[14]。但高爾基蛋白73的檢測試劑目前只有免疫印跡法，此種方法重復性和精確度差，耗費時間和精力，故未得到廣泛推廣。

本研究重點分析AFP和APT聯(lián)合檢測對HCC診斷的臨床意義。APT的產(chǎn)生與肝細胞病變密切相關，但至今仍未完全清楚其發(fā)生機制[15]。目前認為APT的產(chǎn)生與肝癌細胞內(nèi)凝血酶原前體異常羧基化和缺乏維生素K相關[16]。一般條件下，在維生素K的參與下，羧化凝血酶原前體的谷氨酸氨基端產(chǎn)生正常凝血素，其含有10個γ-羧基谷氨酸端，如果肝細胞發(fā)生病變，不成熟的、缺乏羧基谷氨酸端的凝血素分泌入血液而被檢測到[17]。因此，APT又稱為右旋-γ-羧基凝血酶原、維生素K缺乏或拮抗劑Ⅱ誘導的蛋白質，其檢測經(jīng)相關臨床研究證實對診斷原發(fā)性肝癌的臨床價值較高，進一步提高了HCC的診斷水平[2，4]。

相關臨床調查顯示，APT診斷HCC的特異度較高，APT單獨檢測診斷HCC的特異度為91.1%，HCC經(jīng)APT和AFP聯(lián)合檢測診斷的特異度為94.1%[18]。本研究結果與之相近。本研究HCC經(jīng)AFP、APT單獨檢測診斷的靈敏度(73.08%、69.23%)差異無統(tǒng)計學意義；HCC經(jīng)APT單獨檢測診斷的特異度(92.11%)與AFP(78.95%)比較明顯升高；AFP、APT聯(lián)合檢測診斷HCC的靈敏度(任何1項超過臨界值判定為陽性)明顯高于AFP和APT單獨檢測，準確度也較AFP和APT單獨檢測高；而特異度相較于AFP和APT單獨檢測雖然有所降低，但仍維持在一個較高的水平。提示HCC經(jīng)AFP、APT聯(lián)合檢測(任何1項超過臨界值判定為陽性)診斷既彌補了AFP、APT單獨檢測時的低靈敏度，又一定程度上提高了檢測的準確度，同時特異度也可維持在較高水平。通過散點圖和Spearman相關分析綜合分析發(fā)現(xiàn)，AFP和APT均獨立升高，兩者無相關性，這可能與2種標記物在細胞中合成途徑不同有關。以上結果表明，在診斷HCC方面，AFP和APT具有互補性，這就為進一步探討AFP、APT聯(lián)合檢測在診斷HCC中的臨床價值提供了理論依據(jù)。此外，癌細胞是否有轉移或治療后是否有復發(fā)可以通過血清APT水平變化監(jiān)測[19]。治療前血清APT水平升高的患者預后效果往往差于治療前血清APT水平低的患者[20]。所以，APT既可以作為區(qū)分良惡性HCC的重要血清標志物，也可以作為臨床評估HCC預后的重要預測因子。表明AFP、APT聯(lián)合檢測為HCC臨床診斷提供了有價值的參考，可以更好地指導臨床工作。

綜上所述，AFP、APT是臨床診斷HCC的重要血清學指標，可良好地區(qū)分HCC和肝硬化，二者聯(lián)合檢測(任何1項超過臨界值判定為陽性)可顯著提高檢測的靈敏度，并一定程度上改善檢測準確度，2項同時超過臨界值判定為陽性時特異度也保持在較高水平，對HCC具有重要診斷價值。

[1] 趙惠柳，朱波，歐超.肝癌腫瘤標志物的應用研究現(xiàn)狀[J].實驗與檢驗醫(yī)學，2015，33(5)：523-527，548.

[2] Nanashima A，Abo T，Taura N，et al. NX-PVKA levels before and atier hepatectomy of hepatocellular carcinoma as predictors of patient survival：a preliminary evaluation of an improved assay for PIVKA-Ⅱ[J]. Anticancer Res，2013，33(6)：2689-2697.

[3] 席強，孫桂榮，叢培珊，等.血清異常凝血酶原和甲胎蛋白聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的臨床價值[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2014，37(12)：928-932.

[4] 朱宇，王海，王宏潔，等.血清PIVKA-Ⅱ在肝癌診斷中的應用[J].臨床和實驗醫(yī)學雜志，2014，13(7)：513-516.

[5] 滕瑞軍，陳虎，黃儒飛.血清總膽汁酸測定在肝病診斷中的價值分析[J/CD].轉化醫(yī)學電子雜志，2015，2(3)：113-114.

[6] Yamashiki N，Sugawara Y，Tamura S，et al. Diagnostic accuracy of α-fetoprotein and des-γ-carboxy prothrombin in screening for hepatocellular carcinoma in liver transplant candidates[J]. Hepatol Res，2011，41(12)：1199-1207.

[7] 鄭海倫，趙睿，李大鵬，等.原發(fā)性肝癌患者介入治療前后血清異常凝血酶原和甲胎蛋白變化的意義[J].蚌埠醫(yī)學院學報，2014，39(8)：1012-1014.

[8] 田貴金，唐瑞峰，孫超，等. 白細胞介素2和白細胞介素6對肝癌細胞表達血管內(nèi)皮生長因子B的調節(jié)[J].河北醫(yī)科大學學報，2014，35(2)：142-145.

[9] Tameda M，Shiraki K，Sugimoto K，et al. Des-γ-carboxy prothrombin ratio measured by P-11 and P-16 antibodies is a novel biomarker for hepatocellular carcinoma[J]. Cancer Sci，2013，104(6)：725-731.

[10] 陳繼軍，楊宏勛，李超，等.AFP和DCP在肝癌患者預后評價中的作用[J].國際外科學雜志，2013，40(4)：233-237.

[11] 高嵐，凌明智，陳青珍，等.DCP、GP73和AFP聯(lián)合檢測在肝細胞癌早期診斷中的價值[J].中國實用醫(yī)刊，2015，42(18)：85-86.

[12] Ertle JM，Heider D，Wichert M，et al. A combination of α-fetoprotein and des-γ-carboxy prothrombin is superior in detection of hepatocellular carcinoma[J]. Digestion，2013，87(2)：121-131.

[13] 劉慧敏，劉平.采用ROC曲線評價a-L-巖藻糖苷酶，5-核苷酸酶，甲胎蛋白在肝癌診斷、預后預測中的價值[J].臨床薈萃，2016，31(4)：414-417.

[14] 濮玨彪，王學鋒，彭奕冰.血清異常凝血酶原檢測在原發(fā)性肝癌臨床診斷中的應用[J].檢驗醫(yī)學，2014，29(3)：270-273.

[15] Matsubara M，Shiraha H，Kataoka J，et al. Des-γ-carboxyl prothrombin is associated with tumor angiogenesis in hepatocellular carcinoma[J]. J Gastroenterol Hepatol，2012，27(10)：1602-1608.

[16] 黃婭，張鳳美，范志娟，等.甲胎蛋白、異常凝血酶原聯(lián)合檢測在肝細胞肝癌診斷中的臨床意義[J].中國實驗診斷學，2013，17(5)：882-885.

[17] 鄭海倫，趙睿，李大鵬，等.腫瘤標志物DCP和AFP在原發(fā)性肝癌中的診斷價值[J].中華全科醫(yī)學，2016，14(1)：29-31.

[18] 紀文斌，肖年軍，羅英，等.甲胎蛋白與異常凝血酶原在鑒別診斷肝細胞癌中的價值[J].中華肝膽外科雜志，2016，22(3)：145-149.

[19] Toyoda H，Kumada T，Osaki Y，et al. Novel method to measure serum levels of des-γ-carboxy prothrombin for hepatocellular carcinoma in patients taking warfarin：a preliminary report[J]. Cancer Sci，2012，103(5)：921-925.

[20] 楊貴敏，楊運強，趙運勝.血清異常凝血酶原磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3聯(lián)合甲胎蛋白檢測在原發(fā)性肝癌診斷中的臨床意義[J].山西醫(yī)藥雜志，2013，42(13)：783-785.

(本文編輯：趙麗潔)

AnalysisofthevalueofAFPcombinedwithabnormalprothrombinintheearlydiagnosisandcurativeeffectevaluationoflivercancer

LINBing-zhu，LIUXiao-yan

(DepartmentofLaboratory,YunfuPeople′sHospital,GuangdongProvince,Yunfu527100，China)

ObjectiveTo analyze the clinical value of combined detection of alpha-fetoprotein(AFP) and abnormal prothrombin(APT) in the early diagnosis and therapeutic evaluation of hepatocellular carcinoma.MethodsFifty-two patients with hepatocellular carcinoma(HCC) and 38 patients with cirrhosis were selected, and 30 healthy subjects were randomly selected as the control group.The detection values of AFP and APT were compared among 3 groups. The specificity, accuracy and sensitivity of AFP and APT single or combine detected for HCC were compared. The relationship between AFP and APT in serum of HCC was analyzed.ResultsThe values of AFP and APT in HCC patients were significantly higher than those in liver cirrhosis group and normal group(P<0.05).The specificity of APT alone detection for HCC was significantly higher than that of AFP(P<0.05). The sensitivity of the combined detection of AFP and APT for HCC was significantly higher than that in the single detection(P<0.05).The specificity of combined detection of AFP and APT for HCC was significantly higher than that in AFP single detection(P<0.05). The sensitivity of the combined detection of AFP and APT for HCC was significantly higher than that in AFP single detection(P<0.05). The relationship of AFP and APT were independent, and there was no correlation between them through the analysis of scatter plots and Spearman correlation analysis(P>0.05).ConclusionAPT and AFP were important serological markers for clinical diagnosis of HCC, which could distinguish HCC and cirrhosis. Combined detection of AFP and APT could improve the diagnostic accuracy and sensitivity, and the diagnostic specificity remained at a high level. They have a profound diagnostic value for HCC.

liverneoplasms；alpha-fetoproteins；abnormalprothrombin

R735.7

A

1007-3205(2017)10-1193-04

2016-11-08；

2016-12-25

林炳柱(1980-)，男，廣東湛江人，廣東省云浮市人民醫(yī)院副主任檢驗師，醫(yī)學學士，從事臨床檢驗學研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2017.10.018