T細(xì)胞亞群及其細(xì)胞因子在尋常型銀屑病中的作用機(jī)制研究*

丁 琦,傅琳玲,符 梅,蔡恒驥,季周婧,邵紅梅

(南通大學(xué)附屬醫(yī)院皮膚性病科,江蘇南通 226001)

·經(jīng)驗(yàn)交流·

T細(xì)胞亞群及其細(xì)胞因子在尋常型銀屑病中的作用機(jī)制研究*

丁 琦,傅琳玲△,符 梅,蔡恒驥,季周婧,邵紅梅

(南通大學(xué)附屬醫(yī)院皮膚性病科,江蘇南通 226001)

目的探討T細(xì)胞亞群及其細(xì)胞因子在尋常型銀屑病發(fā)病中的作用機(jī)制。方法連續(xù)性收集2014年1月至2016年2月該院門診診治的尋常型銀屑病患者50例作為研究組，同期收集50例至該院體檢的健康成人50例作為對(duì)照組。觀察兩組患者外周血中Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞，白細(xì)胞介素(IL)-2、IL-10、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)、IL-17和IL-23。結(jié)果與對(duì)照組比較，研究組患者Th17細(xì)胞顯著增加[(0.28±0.08)%vs.(0.88±0.14)%,P=0.000]；Treg細(xì)胞顯著減少[(6.27±2.47)%vs.(3.85±1.27)%,P=0.000]。與對(duì)照組比較，研究組患者IL-2、IL-17、IL-23水平顯著升高，IL-10、TGF-β顯著降低(P<0.05)。銀屑病患者PASI評(píng)分為(18.58±6.49)分。Pearson線性相關(guān)性分析顯示PASI與Th17、IL-2和IL17顯著正相關(guān)，與Treg和TGF-β顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05)。多元線性回歸分析顯示Th17、Treg和IL-17是影響銀屑病患者PASI的免疫因素(P<0.05)。結(jié)論尋常型銀屑病患者Th17、Treg細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子水平平衡失調(diào)，且與病情嚴(yán)重度相關(guān)。

T淋巴細(xì)胞亞群；銀屑??；白細(xì)胞介素；尋常型銀屑??；發(fā)??；細(xì)胞因子

銀屑病是皮膚科常見的疾病之一，成年人銀屑病的發(fā)病率為0.51%～11.43%[1]。尋常型銀屑病是銀屑病中最常見的類型，臨床上多急性發(fā)病。目前，銀屑病的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，可能與遺傳、感染、免疫功能異常和內(nèi)分泌等因素有關(guān)[2-4]。尋常型銀屑病的主要臨床表現(xiàn)為皮膚出現(xiàn)境界清晰的紅斑，形狀大小不一，邊緣常常伴有炎性的紅暈，皮損部位表現(xiàn)覆蓋有多層的銀白色鱗屑，皮損部位常見于頭部、四肢等，嚴(yán)重影響了患者身心健康和生活質(zhì)量[5-8]。近些年來，學(xué)者發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞及其細(xì)胞因子失衡在銀屑病的發(fā)病中具有重要意義。2016年Wang等[9]研究顯示白細(xì)胞介素(IL)-21可以通過誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞分化為Th17細(xì)胞，進(jìn)而使銀屑病患者病情加重。也有研究同樣表明T細(xì)胞失衡在銀屑病的發(fā)病中具有重要意義[10-12]。但是Th17/Treg等T細(xì)胞亞群及其細(xì)胞因子在尋常型銀屑病患者發(fā)病中的研究仍缺乏。因此筆者對(duì)其進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 連續(xù)性收集2014年1月至2016年2月本院收治的尋常型銀屑病患者50例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)典型的紅斑、銀白色鱗屑，組織病理檢查確診為尋常型銀屑??；(2)年齡18～65歲；(3)入組前未接受特殊治療[包括免疫抑制(氨甲蝶呤、乙亞胺等)、抗感染和激素類等特殊治療]；(4)同意參與本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)半年內(nèi)曾使用皮質(zhì)類固醇；(2)半年內(nèi)曾使用免疫調(diào)節(jié)劑；(3)肝腎等臟器功能不全；(4)免疫抑制；(5)自身免疫性疾??；(6)合并其他皮膚病。研究期間，根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)，共納入銀屑病患者50例作為研究組。同期收集至本院體檢的健康成人50例作為對(duì)照組。研究組男27例，女23例，年齡18～64歲，平均(39.27±9.88)歲；對(duì)照組男24例，女26例，年齡18～64歲，平均(40.07±10.46)歲；兩組患者年齡和性別比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究中所有患者均知情同意并簽署知情同意書，本研究通過本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法 主要觀察指標(biāo)為兩組患者外周血中Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞、IL-2、IL-10、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)、IL-17和IL-23。同時(shí)測(cè)定銀屑病患者嚴(yán)重性指數(shù)(PASI)。(1)外周血中Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞：取患者靜脈血2 mL進(jìn)行流失細(xì)胞儀(Cytomics FC500，購(gòu)自美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司)檢測(cè)。(2)IL-2、IL-10、TGF-β、IL-17和IL-22：清晨空腹條件下，抽取患者肘靜脈血2 mL，3 000 r/min離心后取上層血清，使用ELISA法檢測(cè)IL-2、IL-10、TGF-β、IL-17和IL-23，試劑盒均購(gòu)買上海越研生物科技有限公司。(3)PASI:銀屑病患者PASI評(píng)分由同一醫(yī)生進(jìn)行評(píng)估[13]。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者外周血中Th17和Treg細(xì)胞比較 與對(duì)照組比較，研究組患者Th17細(xì)胞顯著增加[(0.28±0.08)%vs.(0.88±0.14)%,P=0.000]；Treg細(xì)胞顯著減少[(6.27±2.47)%vs.(3.85±1.27)%,P=0.000]，見圖1。

2.2兩組患者外周血T細(xì)胞因子比較 與對(duì)照組比較，研究組患者IL-2、IL-17、IL-23水平顯著升高，IL-10、TGF-β顯著降低(P<0.05)，見表1。

A：對(duì)照組Th17細(xì)胞；B：研究組Th17細(xì)胞；C：對(duì)照組Treg細(xì)胞；D：研究組Treg細(xì)胞

圖1 兩組患者外周血Th17和Treg細(xì)胞比較

2.3銀屑病患者PASI評(píng)分與免疫指標(biāo)的相關(guān)性分析 銀屑病患者PASI評(píng)分為(18.58±6.49)分。Pearson線性相關(guān)性分析顯示PASI與Th17、IL-2和IL17呈正相關(guān)，與Treg和TGF-β呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，見表2。

表2 PASI與免疫指標(biāo)的相關(guān)性

2.4影響銀屑病患者PASI的免疫因素分析 多元線性回歸分析顯示Th17、Treg和IL-17是影響銀屑病患者PASI的免疫因素(P<0.05)，見表3。

表3 影響銀屑病患者PASI的免疫因素分析

3 討 論

作為一種慢性炎癥性疾病，銀屑病又稱牛皮癬，病程長(zhǎng)，易復(fù)發(fā)，可嚴(yán)重影響患者的身心健康。臨床表現(xiàn)以紅斑，鱗屑為主，全身均可發(fā)病，以頭皮，四肢伸側(cè)較為常見，多在冬季加重，其中以常見型銀屑病最為常見。為探討尋常型銀屑病與患者免疫功能的關(guān)聯(lián)性，2016年Wang等[14]研究納入了32例尋常型銀屑病患者和13例年齡和性別匹配的健康成人，結(jié)果顯示尋常型銀屑病患者外周血中Th17水平顯著升高，且與患者病情嚴(yán)重度呈正相關(guān)(P<0.05)。2013年Ekman等[15]和2012年Niu等[16]研究同樣表明Th17在常見型銀屑病患者中顯著升高。上述研究支持本研究，本研究顯示與健康對(duì)照組相比，銀屑病患者外周血中Th17水平顯著升高，且與銀屑病患者PASI評(píng)分正相關(guān)，多元線性回歸分析顯示Th17是銀屑病患者PASI評(píng)分的影響因素(P<0.05)。提示降低患者Th17水平，或許可以改善銀屑病患者臨床預(yù)后。2012年學(xué)者Antiga等[17]研究顯示依那西普可降低患者Th17水平，并降低IL-17比例。提示該藥或許可以改善尋常型銀屑病患者臨床預(yù)后，但該研究?jī)H有15例患者，臨床證據(jù)等級(jí)較低，但尚需要進(jìn)一步的臨床研究證實(shí)。另外，IL-17可引起自身免疫性疾病等，Th17是分泌IL-17的主要細(xì)胞[18-19]，本研究同樣觀察到尋常型銀屑病患者IL-17水平顯著高于健康成人，且與疾病嚴(yán)重程度正相關(guān)，與2014年Li等[20]研究一致。另外，本研究顯示常見型銀屑病患者IL-23水平顯著升高(P<0.05)。IL-23可以通過誘導(dǎo)T細(xì)胞產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，進(jìn)而促進(jìn)炎癥反應(yīng)。研究顯示IL-23可以通過促進(jìn)IL-17水平，進(jìn)而介導(dǎo)銀屑病的發(fā)病[21-22]。但本研究顯示IL-23與PASI評(píng)分無明顯相關(guān)。目前同樣有研究顯示Treg細(xì)胞與尋常型銀屑病的發(fā)病有一定關(guān)聯(lián)。本研究顯示與健康成人相比，銀屑病患者Treg細(xì)胞顯著降低，與2014年Zhao等[23]研究一致。Treg細(xì)胞是控制自身免疫反應(yīng)性的T細(xì)胞亞群，早期稱為抑制性T細(xì)胞，可以產(chǎn)生IL-10和TGF-β等免疫因子，抑制體內(nèi)炎性反應(yīng)，而抑制促炎因子IL-2的產(chǎn)生，在防止免疫過度和自身免疫性疾病中具有重要作用[24-25]。2016年Zhang等[11]研究顯示銀屑病兒童Treg顯著降低，與病情嚴(yán)重度負(fù)相關(guān)。2013年我國(guó)學(xué)者同樣表明銀屑病患者外周血中存在Th17/Treg細(xì)胞免疫失衡，在銀屑病的發(fā)病中具有重要作用[26]。以上研究均支持本研究，本研究表明Treg細(xì)胞功能越低，患者PASI評(píng)分越低。提高銀屑病患者外周血Treg水平或許有助于降低患者病情嚴(yán)重度[27]。2015年我國(guó)學(xué)者付丹丹等[28]研究使用Runx3干預(yù)尋常型銀屑病患者，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Runx3可以誘導(dǎo)Th17/Treg的分為，這為以后加強(qiáng)銀屑病的免疫干預(yù)提供了新方向，但目前這方面的研究偏少。尚需要進(jìn)一步的臨床研究進(jìn)行深入探討。

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B

1671-8348(2017)26-3711-04

2017-02-28

2017-06-16)

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.26.041

南通市科技項(xiàng)目(MS22015128)。

丁琦(1981-)，主治醫(yī)師，碩士，主要從事免疫性皮膚病方面研究?！?/p>

,E-mail:ntjixingxing@163.com。