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    同位素稀釋質(zhì)譜法在美國(guó)CDC-CRMLN計(jì)劃中的比對(duì)結(jié)果分析*

    2017-10-12 08:37:11周偉燕李紅霞張傳寶楊睿悅張江濤張?zhí)鞁?/span>閆穎曾潔王抒陳文祥董軍
    臨床檢驗(yàn)雜志 2017年9期
    關(guān)鍵詞:組內(nèi)甘油均值

    周偉燕 ,李紅霞,張傳寶,楊睿悅,張江濤,張?zhí)鞁?,閆穎,曾潔,王抒,陳文祥,董軍

    (北京醫(yī)院 國(guó)家老年醫(yī)學(xué)中心,a.衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心,b.衛(wèi)生部老年醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100730)

    ·質(zhì)量管理研究·

    同位素稀釋質(zhì)譜法在美國(guó)CDC-CRMLN計(jì)劃中的比對(duì)結(jié)果分析*

    周偉燕a,李紅霞b,張傳寶a,楊睿悅b,張江濤a,張?zhí)鞁蒩,閆穎a,曾潔a,王抒b,陳文祥a,董軍b

    (北京醫(yī)院 國(guó)家老年醫(yī)學(xué)中心,a.衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心,b.衛(wèi)生部老年醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100730)

    目的總結(jié)并回顧性分析同位素稀釋質(zhì)譜法在美國(guó)疾病預(yù)防控制中心(CDC)膽固醇參考方法實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)(CRMLN)中的比對(duì)結(jié)果,為我國(guó)血脂測(cè)定提供質(zhì)量保證。方法采用我國(guó)建立的同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(ID-LC/MS/MS)測(cè)定血清總膽固醇(TC)和三酰甘油(TG)的方法參加CRMLN比對(duì)。2016年之前每3個(gè)月1次,每次4種樣品,測(cè)定2批。2016年之后每半年比對(duì)1次,每次4種樣品,測(cè)定2批。每次測(cè)定中至少同時(shí)測(cè)定2個(gè)有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為質(zhì)控品。結(jié)果15次TC比對(duì)結(jié)果顯示,本血脂參考實(shí)驗(yàn)室(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“本室”)平均CV為0.43%,CDC各參加實(shí)驗(yàn)室間CV為0.42%,本室與實(shí)驗(yàn)室間總體均值的偏移為0.22%,與CDC靶值的偏移為0.58%。15次TG比對(duì)結(jié)果顯示,本室平均CV為0.62%,本室測(cè)定TG的結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室間均值的偏移為-0.98%,與CDC靶值的偏移為-0.80%。TC和TG各60個(gè)比對(duì)結(jié)果中,98%(59/60)的TC測(cè)定CV滿(mǎn)足CDC的精密度要求,70%(42/60)的測(cè)定滿(mǎn)足TC準(zhǔn)確度要求(TC:CV≤1%,偏移≤1%);92%(55/60)的TG測(cè)定準(zhǔn)確度滿(mǎn)足CDC的要求(TG:偏移≤2.55%)。結(jié)論ID-LC/MS/MS測(cè)定血清TC和TG的方法在CRMLN比對(duì)中數(shù)據(jù)良好,與CDC及各網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果一致,有望在我國(guó)血脂標(biāo)準(zhǔn)化中發(fā)揮重要作用并為參考測(cè)量比對(duì)計(jì)劃提供經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)支持。

    美國(guó)疾病預(yù)防控制中心;膽固醇參考方法實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò);膽固醇;三酰甘油;同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜

    Abstract:ObjectiveTo summarize and review the comparative results of the isotope dilution mass spectrometry in Cholesterol Reference Method Laboratory Network (CRMLN)project of the Centers for Disease Control and Prevention (CDC)of the United States in order to provide quality controls for determination of blood lipid.MethodsThe isotope dilution liquid chromatography tandem mass spectrometry (ID-LC/MS/MS)methods for determination of serum total cholesterol (TC)and triglycerides (TG)were developed to participate in the comparison of CRMLN. The survey was conducted every three months before 2016 and every half year from 2016. Four kinds of reference materials with two parallel tubes for each material and each tube in duplicate were determined in every survey. At least two certified reference materials used as quality control samples were analyzed simultaneously in each determination.ResultsIn the 15 comparisons theCVof the TC determination method in our laboratory was 0.43% while theCVof all the participated laboratories in CRMLN was 0.42%. Thebiasfrom the overall mean value in our laboratory was 0.22% while thebiasfrom the CDC target values was 0.58%. TheCVof the TG determination method in 15 tests of our laboratory was 0.62% and thebiaswas -0.98% from the overall mean value and -0.80% from the target values of CDC. Among the 60 results for comparison, 98% (59/60)ofCVin the TC determination met with CDC requirement for precision (CV≤1%), and 70% ofbias(42/60)of the results met with CDC requirement for accuracy (bias≤1%). For the 60 results in comparison of TG determination, 92% (55/60)ofbiasof the results met with the accuracy requirement of CDC (bias≤2.55%).ConclusionIn CRMLN comparison the results of TC and TG determined by ID-LC/MS/MS method were consistent with the values which were certified by CDC and determined by other network laboratories. The comparative surveys may play an important role in the standardization of lipid determination, and should be expected to provide experiences and technical supports in the comparative plan for reference measurement in our country.

    Keywords:Centers for Disease Control and Prevention; Cholesterol Reference Method Laboratory Network; cholesterol; triglycerides; isotope dilution liquid chromatography tandem mass spectrometry

    “標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃”是將常規(guī)測(cè)定結(jié)果與參考方法相聯(lián)系的過(guò)程,是指通過(guò)一級(jí)參考物質(zhì)和/或參考測(cè)量程序使結(jié)果溯源至SI單位制。目前全球范圍內(nèi)最有影響力的標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃之一就是美國(guó)疾病預(yù)防控制中心(Centers for Disease Control and Prevention,CDC)的血脂標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃[1-2]。該計(jì)劃最初通過(guò)參考方法定值的血清參考物質(zhì)進(jìn)行量值傳遞與溯源。但由于參考物質(zhì)代表性有限,且很多需要經(jīng)過(guò)樣品制備如凍干,使其性質(zhì)發(fā)生改變,在很多分析系統(tǒng)上不具有互通性。1989年CDC建立了膽固醇參考方法實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)(cholesterol reference method laboratory network,CRMLN)[3]組織,定期參考比對(duì),為血脂試劑生產(chǎn)廠(chǎng)家和臨床實(shí)驗(yàn)室提供分析系統(tǒng)溯源認(rèn)證服務(wù)。本血脂參考實(shí)驗(yàn)室(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“本室”)1992年成為該網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室成員,用CDC的參考方法測(cè)定總膽固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)等。2012年4月CDC開(kāi)展了同位素稀釋質(zhì)譜(isotope dilution mass spectrometry,ID-MS)測(cè)定TC、三酰甘油(triglycerides,TG)的比對(duì)計(jì)劃。

    ID-MS技術(shù)是國(guó)際物質(zhì)量咨詢(xún)委員會(huì)公布的基準(zhǔn)測(cè)量原理之一,在臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域發(fā)展迅速。近些年基于ID-MS技術(shù)建立了許多項(xiàng)目的參考方法。本室也分別建立了同位素稀釋氣相色譜質(zhì)譜(isotope dilution gas chromatograpy mass spectrometry,ID-GC/MS)、同位素稀釋液相色譜質(zhì)譜(isotope dilution liquid chromatograpy tandem mass spectrometry,ID-LC/MS/MS)測(cè)定血清TC[4-5]、總甘油[6]和游離甘油的參考方法。本室用建立的ID-LC/MS/MS方法參加了CRMLN的參考實(shí)驗(yàn)室比對(duì),成為CDC第一批質(zhì)譜方法網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室。

    本研究匯總ID-LC/MS/MS方法檢測(cè)TC和TG的比對(duì)結(jié)果,并介紹近幾年TC和TG的方法比對(duì)情況。

    1 材料與方法

    1.1化學(xué)試劑 膽固醇純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW 09203b(衛(wèi)生部老年醫(yī)學(xué)研究所),純度為(99.7±0.1)%。甘油一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09149(溶液狀態(tài)),認(rèn)定值為(0.103 6±0.000 4)g/g。同位素內(nèi)標(biāo)為[25,26,27-13C3]膽固醇和[13C3]甘油(均購(gòu)自美國(guó)Cambridge Isotope公司),標(biāo)示同位素豐度均大于99%。常溫密封保存。

    1.2血清樣品 所測(cè)定的評(píng)價(jià)樣品為美國(guó)CDC提供的新鮮冰凍人血清樣品,通過(guò)冷鏈運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室。質(zhì)控血清為我國(guó)血脂一級(jí)血清標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09178a~GBW180a、GBW09178b~GBW180b,國(guó)際有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)SRM909b、SRM909c、SRM1951b。每次測(cè)定至少分析2個(gè)質(zhì)控物質(zhì)。

    1.3儀器設(shè)備 主要分析儀器是液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)(LC/MS/MS),包括Agilent 1200高效液相色譜儀(美國(guó)Agilent公司)、API 4000串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜儀和Analyst 1.4.2數(shù)據(jù)處理軟件(美國(guó)Applied Biosystems公司)。樣品制備使用的主要儀器包括十萬(wàn)分之一天平(美國(guó)Sartorius公司)、MicroLab 500型稀釋器(美國(guó)Hamilton公司)。

    1.4方法 采用ID-LC/MS/MS法測(cè)定TC,該法已列入國(guó)際臨床化學(xué)會(huì)(International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine,IFCC)參考方法列表,為國(guó)際公認(rèn)的參考方法[4-5]。用ID-LC/MS/MS測(cè)定總甘油[6]和游離甘油,兩者之差即為T(mén)G結(jié)果。其他實(shí)驗(yàn)室測(cè)定TG的方法包括酶法和化學(xué)法直接測(cè)定TG、ID-GC/MS法測(cè)定總甘油和游離甘油(兩者之差為T(mén)G)、ID-GC/MS法測(cè)定總甘油。由于TG測(cè)定方法和原理不統(tǒng)一,比對(duì)數(shù)據(jù)存在一定差異,本研究介紹的TG比對(duì)結(jié)果均為總甘油結(jié)果。

    1.5參加實(shí)驗(yàn)室 CDC官網(wǎng)上列出的能提供血脂標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù)的網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室有8家,2016年7月份又有2家實(shí)驗(yàn)室加入網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室,但尚未在提供服務(wù)的列表中。CRMLN網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室參加的項(xiàng)目及提供的服務(wù)[7]見(jiàn)表1。

    1.6測(cè)定過(guò)程 2012年4月至2015年12月,CDC每年發(fā)放下一年度比對(duì)樣品。每個(gè)季度測(cè)定1次,每次4種樣品,每種樣品2個(gè)平行管,分2批盲樣測(cè)定。每批每個(gè)樣品測(cè)定2次,即每種樣品有4個(gè)結(jié)果。2016年1月至今,改為每半年測(cè)定1次,每次4種樣品,分2批盲樣測(cè)定。本室每次測(cè)定均分析至少2個(gè)有證參考物質(zhì)作為質(zhì)控樣品,質(zhì)控樣品的偏移滿(mǎn)足本室的要求(TC偏移≤1%,TG偏移≤1.5%)則認(rèn)為該次測(cè)定值有效。

    1.7數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 對(duì)于每個(gè)比對(duì)樣品,各網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室均向CDC報(bào)告4個(gè)結(jié)果,CDC將4個(gè)結(jié)果的均值作為該實(shí)驗(yàn)室的最終測(cè)定值,計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差(s)和CV,并分析各實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果,計(jì)算實(shí)驗(yàn)室間均值作為組內(nèi)均值。CDC靶值的定值方法如下:TC,ID-GC/MS;總甘油,ID-GC/MS;TG,化學(xué)法;游離甘油,以上總甘油和TG的差值。CDC靶值的數(shù)據(jù)處理方法未知。CDC設(shè)定的網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量指標(biāo)如下:TC的偏移和CV均為1%,2016年之前總甘油和TG的偏移和CV均為3%,2016年7月以后取消TG,只評(píng)價(jià)總甘油。根據(jù)多年來(lái)各實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的情況,將判定標(biāo)準(zhǔn)改為單個(gè)樣品的偏移±2.55%,4種樣品平均偏移±2.00%,單個(gè)樣品的偏移范圍(最大偏移與最小偏移的差值,n=4)≤3.95%,4種樣品平均偏移范圍(最大偏移與最小偏移的差值,n=16)≤6.96%。本室所有數(shù)據(jù)處理均在EXCEL2007上完成。

    表1 CRMLN網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室成員及比對(duì)項(xiàng)目

    注:*,暫不提供分析系統(tǒng)認(rèn)證服務(wù);“-”,不參加;Y,參加;AK,Abell-Kendall法;UC,超速離心法;DCM,硫酸葡聚糖鎂離子沉淀法。

    2 結(jié)果

    2.1TC測(cè)定結(jié)果 2012年4月至2015年12月,每3個(gè)月測(cè)定2次,一年測(cè)定4次;2016年1月至今,每半年測(cè)定1次。至今一共18次TC結(jié)果比對(duì),2014年4、7月,2015年4月由于樣品清關(guān)等問(wèn)題本室沒(méi)有參加TC比對(duì),實(shí)際考核15次??偨Y(jié)和匯總15次TC比對(duì)結(jié)果,共有60個(gè)樣品,240個(gè)結(jié)果。結(jié)果顯示,本室內(nèi)TC平均CV為0.43%(0.1%~1.1%),CDC各網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室間CV為0.42%(0.1%~1.7%),本室與實(shí)驗(yàn)室間均值(組內(nèi)均值)的偏移為0.22%(-0.9%~1.4%),與CDC靶值的偏移為0.58%(-0.8%~2.2%)。本研究將本室測(cè)定值與組內(nèi)均值和CDC靶值進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析,本室測(cè)定值與CDC靶值和組內(nèi)均值均具有良好的相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)(r)均大于0.999 7,兩條回歸直線(xiàn)幾乎重合,說(shuō)明對(duì)于TC項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室間測(cè)定結(jié)果與CDC靶值一致。

    比對(duì)計(jì)劃以盲樣形式測(cè)定,但在15次比對(duì)中有12個(gè)比對(duì)樣品重復(fù)出現(xiàn),重復(fù)出現(xiàn)的次數(shù)為2~6次,分析這些樣品的測(cè)定數(shù)據(jù),計(jì)算同一樣品多次測(cè)定的均值和CV,結(jié)果顯示本室測(cè)定的平均CV為0.54%(0.20%~1.00%),與組內(nèi)均值的平均偏移為0.30%(-0.21%~0.75%),與CDC靶值的平均偏移為0.60%(-0.31%~1.48%),結(jié)果見(jiàn)表2。

    CDC匯總了網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室ID-MS法測(cè)定TC的18次結(jié)果,計(jì)算實(shí)驗(yàn)室組均值與CDC靶值的偏移和實(shí)驗(yàn)室間CV,結(jié)果顯示除2016年2次比對(duì)的偏移略大于CDC的偏移指標(biāo)1%之外,其他均在1%以?xún)?nèi);18次結(jié)果的CV均小于0.7%。見(jiàn)圖1。

    表2 TC比對(duì)樣品重復(fù)測(cè)定的結(jié)果

    圖1 2012年4月至2016年7月CRMLN計(jì)劃TC測(cè)定結(jié)果的偏移圖和CV圖

    2.2總甘油測(cè)定結(jié)果 與TC一樣,總甘油測(cè)定一共18次比對(duì),實(shí)際考核15次。本研究總結(jié)和匯總15次總甘油比對(duì)結(jié)果,共有60個(gè)樣品,240個(gè)結(jié)果。結(jié)果顯示,本室總甘油CV為0.62%(0.2%~1.5%),本室測(cè)定結(jié)果與組內(nèi)均值的偏移為-0.98%(-3.5%~2.3%),與CDC靶值的偏移為-0.80%(-4.2%~2.9%)。18個(gè)樣品CDC沒(méi)有提供TG靶值,因此不做評(píng)價(jià)。本研究將本室測(cè)定值與組內(nèi)均值和CDC靶值進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析,本室總甘油測(cè)定值與CDC靶值和組內(nèi)均值均具有良好的相關(guān)性,r均大于0.999 5,兩條回歸直線(xiàn)幾乎重合,說(shuō)明對(duì)于TC項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室間測(cè)定結(jié)果與CDC靶值一致。

    在18次比對(duì)中有13個(gè)比對(duì)樣品重復(fù)出現(xiàn),重復(fù)出現(xiàn)的次數(shù)為2~8次,計(jì)算同一樣品多次測(cè)定的均值和CV,結(jié)果顯示本室測(cè)定的平均CV為1.04%(0.33%~1.59%),與組內(nèi)均值的平均偏移為-0.86%(-0.23%~1.74%),與CDC的平均偏移為-0.73%(-1.92%~2.35%),結(jié)果見(jiàn)表3。

    CDC匯總網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室ID-MS法測(cè)定總甘油的結(jié)果,計(jì)算實(shí)驗(yàn)室組均值同CDC靶值的偏移和實(shí)驗(yàn)室間的CV,結(jié)果顯示17次比對(duì)的偏移均小于CDC的偏移指標(biāo)2%;16次結(jié)果的CV均小于1%。見(jiàn)圖2。

    表3 總甘油比對(duì)樣品重復(fù)測(cè)定的結(jié)果

    圖2 2012年4月至2016年7月CRMLN計(jì)劃總甘油測(cè)定結(jié)果的偏移圖和CV圖

    3 討論

    目前全球范圍內(nèi)最有影響力的標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃主要是始于1957年美國(guó)CDC的血脂標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃[1-3]、1993年美國(guó)臨床化學(xué)協(xié)會(huì)的美國(guó)國(guó)家糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃[8-10]和1995年IFCC開(kāi)始的糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃[11-12]。其中血脂標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃是開(kāi)展最早、影響最大、最有成效的一項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃。TC標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃開(kāi)始之初主要針對(duì)TC項(xiàng)目,后來(lái)發(fā)展為包括TC、TG、HDL-C和LDL-C,主要通過(guò)參考方法定值的冰凍血清參考物質(zhì)傳遞其準(zhǔn)確性。為克服參考物質(zhì)代表性差、缺乏互通性等問(wèn)題,并方便全球?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行血脂標(biāo)準(zhǔn)化,1989年建立了CRMLN,全球有資質(zhì)的血脂參考實(shí)驗(yàn)室可通過(guò)考核成為網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室一員。CRMLN主要包括兩部分,一部分針對(duì)參加計(jì)劃的網(wǎng)絡(luò)參考實(shí)驗(yàn)室,定期進(jìn)行參考比對(duì),另一部分針對(duì)廠(chǎng)家和臨床實(shí)驗(yàn)室,臨床實(shí)驗(yàn)室和廠(chǎng)家可就近選擇其網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析系統(tǒng)認(rèn)證。此計(jì)劃在國(guó)際血脂標(biāo)準(zhǔn)化中發(fā)揮著重要作用。

    CRMLN比對(duì)的項(xiàng)目包括AK法測(cè)定TC[13]、ID-MS法測(cè)定TC、TG比對(duì)(ID-MS法、酶法、化學(xué)法[14])、指定比對(duì)方法測(cè)定HDL[15](硫酸鎂葡聚糖鎂離子沉淀法,也稱(chēng)DCM法)、超速離心化學(xué)沉淀法測(cè)定HDL[16]、超速離心化學(xué)沉淀法(即β定量法)測(cè)定LDL[17]。TC的AK法是上世紀(jì)CDC建立的TC參考方法,在國(guó)際上影響力很大,至今為止很多TC分析系統(tǒng)仍溯源到此參考方法。ID-MS方法是近些年建立起來(lái)的參考方法,研究顯示AK法由于方法特異性的問(wèn)題,檢測(cè)的血清TC中包括一些植物甾醇,比ID-MS檢測(cè)結(jié)果平均高1.6%[18]。2012年至今,CDC共進(jìn)行了18次TC比對(duì),共72個(gè)樣品,AK法和ID-MS法比對(duì)平行進(jìn)行,CDC分別采用AK法和ID-GC/MS法對(duì)兩種比對(duì)樣品進(jìn)行靶值測(cè)定。經(jīng)統(tǒng)計(jì),這些比對(duì)樣品AK法靶值與ID-MS法靶值的平均偏移為1.48%(-0.2%~-2.8%)。盡管ID-MS法檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠,但是由于很多流行病學(xué)研究、參考區(qū)間研究、分析系統(tǒng)溯源都是基于AK法,因此AK法仍是美國(guó)CDC系統(tǒng)中TC測(cè)定的經(jīng)典參考方法。2012年4月CDC開(kāi)展了ID-MS測(cè)定TC和TG的比對(duì),本室成為其質(zhì)譜測(cè)定的首批網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室,采用ID-LC/MS/MS法參加了近幾年比對(duì)。TC-ID-MS項(xiàng)目中,現(xiàn)有5家國(guó)際實(shí)驗(yàn)室參加,除本室之外均采用ID-GC/MS方法。該項(xiàng)目的質(zhì)量指標(biāo)與判定標(biāo)準(zhǔn)與TC-AK法相同,偏移±1%,CV≤1%。所有實(shí)驗(yàn)室5年的比對(duì)數(shù)據(jù)顯示,除2016年兩次比對(duì)的偏移略大于CDC的偏移指標(biāo)1%之外,其他均在1%以?xún)?nèi);17次結(jié)果的CV均小于0.7%。

    CRMLN中TG是唯一一個(gè)沒(méi)有指定比對(duì)方法的項(xiàng)目,參加比對(duì)的方法有酶法、化學(xué)法、ID-MS法,測(cè)定分析物包括總甘油、TG、游離甘油,CDC對(duì)這3個(gè)分析物的靶值測(cè)定方法為用ID-GC/MS法測(cè)定總甘油,化學(xué)法測(cè)定TG,兩者的差值為游離甘油。參加實(shí)驗(yàn)室采用酶法或化學(xué)法直接測(cè)定TG,或采用總甘油和游離甘油的差值進(jìn)行測(cè)定。比對(duì)結(jié)果顯示,本室TG測(cè)定值與組內(nèi)均值的偏移為-2.4%(-6.59%~0),與CDC靶值的偏移為-2.6%(-5.72%~0.92%)。由于TG的測(cè)定方法原理不同,因此CRMLN中TG的比對(duì)結(jié)果不太理想。另外,考慮到臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域TG的測(cè)定大都測(cè)定的總甘油,2016年7月起CRMLN取消了TG比對(duì),只對(duì)總甘油進(jìn)行比對(duì)。現(xiàn)有6家國(guó)際實(shí)驗(yàn)室參加,美國(guó)西北脂類(lèi)和糖尿病研究實(shí)驗(yàn)室采用酶法,加拿大實(shí)驗(yàn)室采用化學(xué)法,其他4家實(shí)驗(yàn)室采用ID-MS方法。該項(xiàng)目的質(zhì)量指標(biāo)與判定標(biāo)準(zhǔn)改為單個(gè)樣品的偏移±2.55%,4種樣品平均偏移±2.00%,單個(gè)樣品的偏移范圍(最大偏移與最小偏移的差值,n=4)≤3.95%,4種樣品平均偏移范圍(最大偏移與最小偏移的差值,n=16)≤6.96%。

    CRMLN比對(duì)的結(jié)果表明,越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室采用ID-MS方法參加該計(jì)劃,比對(duì)結(jié)果顯示各實(shí)驗(yàn)室間測(cè)定結(jié)果可滿(mǎn)足CDC的分析質(zhì)量要求,精密度好、準(zhǔn)確度高,測(cè)定結(jié)果可靠、可比。CRMLN模式發(fā)展至今近30年,具有很多的優(yōu)勢(shì),為全球血脂標(biāo)準(zhǔn)化和溯源提供了重要的質(zhì)量保證。我國(guó)室間質(zhì)評(píng)計(jì)劃中的參考測(cè)量比對(duì)可借鑒CRMLN的成功的經(jīng)驗(yàn),有望為我國(guó)臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域重要常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目提供方便、準(zhǔn)確、可靠的溯源基礎(chǔ)和保障。

    [1]Myers GL,Cooper GR,Winn CL,etal. The Centers for Disease Control -National Heart,Lung and Blood Institute Lipid Standardization Program:An approach to accurate and precise lipid measurements[J]. Clin Lab Med,1989,9(1):105-135.

    [2]Myers GL,Cooper GR,Henderson LO,etal. Standardization of lipid and lipoprotein measurements. Rifai N Warnick GR eds. Laboratory measurement of lipids,lipoproteins and apolipoproteins[M]. Washington DC:AACC Press,1994:177-205.

    [3]Myers GL,Kimberly MM,Waymack PP,etal. A reference method laboratory network for cholesterol:a model for standardization and improvement of clinical laboratory measurements[J]. Clin Chem,2000,46(11):1762-1772.

    [4]Zhou W,Li H,Dong J,etal. Serum cholesterol measured by isotope dilution liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Clin Chem Lab Med,2011,49(4):669-676.

    [5]劉蕾,周偉燕,孫春華,等.同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定血清總TC[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(3):250-254.

    [6]周偉燕,劉蕾,張傳寶,等. 同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定血清總甘油[J].. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,31(3):254-257.

    [7]Cholesterol Reference Method Laboratory Network[DB/OL]. http://www.cdc.gov/labstandards/crmln.html.

    [8]Little RR,England JD,Wiedmeyer HM,etal. Interlaboratory standardization of glycated hemoglobin determinations[J]. Clin Chem,1986,32(2):358-360.

    [9]Little RR,Wiedmeyer HM,England JD,etal. Interlaboratory comparison of glycohemoglobin results:College of American Pathologists Survey data[J]. Clin Chem,1991,37(1):1725-1729.

    [10]Little RR,Wiedmeyer HM,England JD,etal. Interlaboratory standardization of measurements of glycohemoglobins[J]. Clin Chem,1992,38(12):2472-2478.

    [11]Hoelzel W,Weykamp C,Jeppsson JO,etal. IFCC reference system for measurement of hemoglobin A1c in human blood and the national standardization schemes in the United States,Japan,and Sweden:a method-comparison study[J]. Clin Chem,2004,50(1):166-174.

    [12]IFCC network laboratories for HbA1c[DB/OL]. http://www.ifcchba1c.net.

    [13]Duncan IW,Mather A,Cooper GR. The procedure for the proposed cholesterol reference method[M]. Atlanta,GA:Centers for Disease Control,1988.

    [14]Stein EA,Myers GL. National Cholesterol Education Program recommendations for triglyceride measurement:executive summary. The National Cholesterol Education Program Working Group on Lipoprotein Measurement[J]. Clin Chem,1995,41(10):1421-1426.

    [15]Warnick GR,Wood PD. National Cholesterol Education Program recommendations for measurement of high-density lipoprotein cholesterol:executive summary. The National Cholesterol Education Program Working Group on Lipoprotein Measurement[J]. Clin Chem,1995,41(10):1427-1433.

    [16]Dong J,Guo H,Yang R,etal. Serum LDL- and HDL-cholesterol determined by ultracentrifugation and HPLC[J]. J Lipid Res,2011,52(2):383-388.

    [17]Bachoric GR,Ross JW. National Cholesterol Education Program recommendations for measurement of low-density lipoprotein cholesterol:executive summary. The National Cholesterol Education Program Working Group on Lipoprotein Measurement[J]. Clin Chem,1995,41(10):1414-1420.

    [18]Ellerbe P,Myers GL,Cooper GR,etal. A comparison of results for cholesterol in human serum obtained by the Reference Method and by the Definitive Method of the National Reference System for cholesterol[J]. Clin Chem,1990,36(2):370-375.

    AnalysisforcomparativeresultsofisotopedilutionmassspectrometryinCDC-CRMLNproject

    ZHOUWei-yana,LIHong-xiab,ZHANGChuan-baoa,YANGRui-yueb,ZHANGJiang-taoa,ZHANGTian-jiaoa,YANYinga,ZENGJiea,WANGShub,CHENWen-xianga,DONGJunb

    (a.NationalCenterforClinicalLaboratories;b.TheKeyLaboratoryofGeriatrics,BeijingInstituteofGeriatrics,NationalCenterofGerontology,BeijingHospital,Beijing100730,China)

    R446

    A

    2017-07-05)

    (本文編輯王海燕)

    國(guó)家自然科學(xué)基金(81201337,81472035);國(guó)家科技基礎(chǔ)性工作專(zhuān)項(xiàng)(2013FY113800);北京生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)跨越發(fā)展工程項(xiàng)目(G20工程,Z161100001816043)。

    周偉燕,1982年生,女,副研究員,博士,主要從事臨床化學(xué)質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)化研究。

    董軍,研究員,博士研究生導(dǎo)師,E-mail:jun_dong@263.net。

    10.13602/j.cnki.jcls.2017.09.13

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