黑果腺肋花楸的組織培養(yǎng)快繁技術

馬冬菁

（遼寧省林業(yè)科學研究院，遼寧沈陽 110032）

黑果腺肋花楸的組織培養(yǎng)快繁技術

馬冬菁

（遼寧省林業(yè)科學研究院，遼寧沈陽 110032）

為建立黑果腺肋花楸高效的離體再生體系，對其組織培養(yǎng)快繁技術進行系統(tǒng)研究。結果表明：以莖尖和幼嫩莖段為外植體，最佳誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA1 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1，誘導率均在90%以上；最佳增殖培養(yǎng)基MS+6-BA1 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1，增殖系數(shù)達9.0；最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+ABT 6.0 mg·L-1，生根率達100%。

黑果腺肋花楸；組織培養(yǎng)；快速繁殖

黑果腺肋花楸Aronia melanocarpa系薔薇科腺肋花楸屬落葉灌木，漿果，果實甜酸略微澀，富含黃酮、花青素和多酚等物質，其提取物對治療心臟病、高血壓等心腦血管疾病有特效。在歐美和東亞地區(qū)，該樹種在園林綠化方面的應用非常廣泛；由果實加工的藥品、保健飲料和食品在市場上非常普及和流行。該樹種適應性強、結果早、經濟價值高，無論作為特種經濟林栽培，還是用于園林綠化，都具有廣闊的市場前景。因此，開展該樹種的組織培養(yǎng)快繁技術研究，為該樹種的快速開發(fā)推廣奠定了技術基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

遼寧省林業(yè)科學研究院鳳城苗圃引進栽植的2～3年生黑果腺肋花楸扦插苗，剪取幼嫩枝條作為外植體。

1.2 試驗方法

1.2.1 外植體的消毒處理

將外植體去掉葉片，用清水沖洗2～3 h；剪取黑果腺肋花楸的莖尖和帶腋芽的莖段部位，切割成長3～5 cm的材料；先用稀釋15倍的潔爾滅溶液浸泡3 min，再用流水沖洗30 min左右；置于超凈工作臺上用70%的酒精加兩滴土溫20消毒40 s，用無菌水沖洗3次后，再用濃度0.1%HgCl2浸泡5～7 min，無菌水沖洗5次后放在培養(yǎng)皿中，切成1.0～2.0 cm的單芽備用。

1.2.2 培養(yǎng)基的篩選

誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1；繼代培養(yǎng)以MS為基礎培養(yǎng)基，分別添加 6-BA(0.5、1.0 mg·L-1)和 NAA(0.1、0.2、0.3、0.5 mg·L-1)共8個處理，各接種15個單芽莖段，培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計不同激素濃度對增殖效果的影響；壯苗培養(yǎng)基為6-BA0.15 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1；生根培養(yǎng)基以1/2 MS為基礎，添加生根粉ABT（2、4、6 mg·L-1）、IBA(0.1、0.2、0.5 mg·L-1)和NAA(0.1、0.2、0.5 mg·L-1)共12個處理，20 d后觀察生根情況，統(tǒng)計生根率和生長狀況等指標。上述培養(yǎng)基均添加蔗糖30 g·L-1，瓊脂粉6 g·L-1，pH值5.8。培養(yǎng)溫度(25±2)℃，每日光照16 h，黑暗8 h，光照強度為2 000～2 500 lx。

1.2.3 生根苗的馴化移栽

當試管苗長至5 cm左右、苗根長1.5 cm時，把生根瓶苗放在室內自然光下煉苗2～3 d，打開封口膜，控制溫度在15～26℃、濕度≥60%，向瓶內噴少量水，瓶苗葉片濕潤即可，使瓶苗接觸有菌環(huán)境；2 d后將生根苗從瓶中取出，用自來水沖洗凈根部培養(yǎng)基，以避免移栽后爛根；然后將組培苗移栽到用0.1%高錳酸鉀消毒過的裝有細河沙和珍珠巖（2∶1）的育苗穴盤中，噴施10%(體積濃度)的蒸騰抑制劑[1]，遮蔭、澆水，保持濕度70%以上，光照1 500～2 000lx，20 d后揭開覆蓋物，成活率達90%以上。

2 結果與分析

2.1 芽的誘導分化

黑果腺肋花楸不同的取材部位在誘導培養(yǎng)基上接種10 d后，芽開始萌發(fā)，莖尖生長較快，20 d后芽可伸長至2～3 cm。對不同取材部位的芽誘導情況進行了統(tǒng)計（表1），莖尖和幼嫩莖段的芽誘導率均在90%以上[2]。

表1 不同取材部位對黑果腺肋花楸芽誘導分化的影響

2.2 不同激素濃度配比對黑果腺肋花楸芽繼代增殖的影響

不同的激素濃度對黑果腺肋花楸芽的生長有一定的影響。隨著激素水平的提高，芽的長勢和增殖都在逐漸提高，當6-BA濃度1.0 mg·L-1、NAA濃度0.3 mg·L-1時，逐漸出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象，莖芽的生長質量下降（表2）。而當6-BA濃度為1.0 mg·L-1，NAA濃度為0.2 mg·L-1時增殖效果最好，增殖系數(shù)達到9.0。

表2 不同激素濃度對黑果腺肋花楸芽繼代增殖的影響

2.3 不同激素濃度對黑果腺肋花楸生根的影響

將組培苗壯苗培養(yǎng)后，接種到生根培養(yǎng)基上，10 d左右莖段基部產生根原基，20 d后長出4～6條白色嫩根，平均根長約3.5 cm，生根率達100%。由表3和表4可以看出，培養(yǎng)基1/2MS+ABT 6.0 mg·L-1的生根效果最好，根系發(fā)達，且苗長勢好。

表3 IBA和NAA配比對黑果腺肋花楸苗生根的影響

表4 ABT濃度對黑果腺肋花楸苗生根的影響

3 結 論

以黑果腺肋花楸莖尖和幼嫩莖段作為外植體，70%的酒精加兩滴土溫20消毒40 s、0.1%HgCl2消毒5～7 min，接種在培養(yǎng)基MS+6-BA 1 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1中的誘導率均在90%以上。最佳增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 1 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1，增殖系數(shù)達9.0，苗木生長旺盛，基部產生大量叢生芽。最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+ABT 6.0 mg·L-1，生根效果顯著，生根率達100%，根系發(fā)達，苗木粗壯。生根苗馴化后移栽到裝有基質細河沙和珍珠巖（2∶1）的育苗穴盤中，成活率在90%以上。

［1］葉景豐.美國白蠟組培快繁技術研究[J].林業(yè)實用技術，2010，（11）：30-31.

［2］陳罡.貼梗海棠組培快繁技術研究[J].北方園藝，2008，（8）：186-187.

（責任編輯：張素清）

S793.9

A

1001-1714（2017）05-0034-02

2017-03-30

馬冬菁（1979-），女，高級工程師，主要從事林木組培技術研究。E-mail：413577543@qq.com。