磷對水稻鎘的亞細(xì)胞分布及化學(xué)形態(tài)的影響

李 桃，李 軍，韓 穎，耿 杰，薛 飛，陳 凱

磷對水稻鎘的亞細(xì)胞分布及化學(xué)形態(tài)的影響

李 桃，李 軍*，韓 穎，耿 杰，薛 飛，陳 凱

（沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)土地與環(huán)境學(xué)院，沈陽110866）

為了探討磷對水稻耐鎘性的影響，采用盆栽實驗，以沈農(nóng)315（耐性）和花粳1417（敏感性）水稻為研究對象，對分蘗末期水稻根系及莖葉中鎘的亞細(xì)胞分布以及化學(xué)形態(tài)進(jìn)行比較分析。結(jié)果表明：增施磷肥顯著降低了兩品種水稻的鎘含量，沈農(nóng)315根系鎘含量明顯高于花粳1417，莖葉鎘含量低于花粳1417；兩品種各部位細(xì)胞壁鎘的分配比例隨磷的增加而明顯增加，細(xì)胞器鎘的分配比例逐漸降低。鎘的化學(xué)結(jié)合形態(tài)整體上呈現(xiàn)為氯化鈉提取態(tài)＞醋酸提取態(tài)＞去離子水提取態(tài)＞乙醇提取態(tài)＞鹽酸提取態(tài)，其中醋酸提取態(tài)所占比例隨磷增加而增加，沈農(nóng)315和花粳1417的增幅分別為19.70%～31.32%、10.05%～16.36%，氯化鈉提取態(tài)顯著降低，降幅分別為23.38%～40.11%、22.55%～39.56%。由此說明，增施磷肥能有效增加水稻對鎘的耐受性，且不同品種表現(xiàn)不同。

水稻；磷；鎘；亞細(xì)胞分布；化學(xué)形態(tài)

鎘是環(huán)境中具有高毒害性的重金屬元素，其生物遷移性強(qiáng)，極易被植物吸收和積累[1]，進(jìn)而對植株產(chǎn)生毒害使可食用部分鎘含量超標(biāo)，威脅食品安全，危害人類健康。水稻是人類主要食用的糧食作物之一，同時也是易積累鎘的農(nóng)作物之一，有研究表明，不同基因型水稻間各部位的鎘含量分配存在顯著差異[2]，鎘在植株內(nèi)的轉(zhuǎn)運情況、存在形態(tài)以及分布特征也不相同[3]。水稻根系及地上部主要通過細(xì)胞壁固持[4]、細(xì)胞可溶部分區(qū)室化[5]作用結(jié)合并束縛大量的鎘[6]，減少進(jìn)入細(xì)胞器的鎘含量，以減少自由態(tài)的鎘紊亂植株細(xì)胞內(nèi)的代謝功能[7]，從而緩解鎘對水稻的毒害作用。這是水稻細(xì)胞層面上主要的耐鎘機(jī)制。

磷素是植物生長必需的營養(yǎng)元素之一，通過多種途徑參與植物代謝過程[8]。水稻分蘗期是植株主要的營養(yǎng)吸收時期。有研究發(fā)現(xiàn)，磷酸鹽可以抑制植物對鎘的吸收[9-10]，其中鎘的醋酸提取態(tài)，主要通過二代磷酸鹽與重金屬結(jié)合形成螯合物[11]，以減少鎘在植株內(nèi)的移動性，從而降低鎘對植株的毒害作用。此外，磷營養(yǎng)可以增加細(xì)胞壁的厚度從而固持更多的鎘。但磷對植物鎘積累的影響因植株基因型不同而異，因此研究磷對鎘在不同水稻亞細(xì)胞的分布及化學(xué)結(jié)合形態(tài)積累的影響，為進(jìn)一步闡明磷對水稻的耐鎘機(jī)理提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

盆栽試驗用土取自沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)稻作所試驗田耕層0～20 cm水稻土，風(fēng)干后過3 mm篩用于水稻種植。取過1 mm和0.25 mm篩的土樣，采用常規(guī)方法，土壤基本理化性質(zhì)分析結(jié)果：pH 6.64；全氮1.43 g·kg-1；全磷0.71 g·kg-1；全鉀15.5 g·kg-1；堿解氮98 mg·kg-1；速效磷12.08 mg·kg-1、速效鉀12.16 mg·kg-1；有機(jī)質(zhì)21.2 g·kg-1；全鎘0.49 mg·kg-1。

供試水稻為沈農(nóng)315（耐性）、花粳1417（敏感型），稻苗均由沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)稻作所提供。

1.2 實驗設(shè)置與處理

選用氮、磷、鉀肥分別為脲、磷酸二氫鈉、氯化鉀；鎘為氯化鎘。實驗設(shè)置基肥氮（N）為100 mg·kg-1，鉀（K2O）為150 mg·kg-1，磷（P2O5）設(shè)4個水平分別為0 mg·kg-1（P0）、150 mg·kg-1（P1）、450 mg·kg-1（P2）、900 mg·kg-1（P3），鎘為5 mg·kg-1（Cd5），采用全因素設(shè)計，每處理6次重復(fù)。將過篩土以每盆4 kg裝入口徑20 cm、高25 cm的塑料盆，將Cd以溶液形式加入土壤充分?jǐn)嚢杌靹虿⒀退胶?0 d，之后將基肥氮、磷、鉀肥分別以溶液形式加入土壤混勻并淹水平衡24 h。挑選長勢均勻的水稻幼苗于5月29日移栽至盆中，每盆一穴，每穴2株，水面保持2～3 cm，在水稻種植25 d時追施分蘗肥（N：50 mg·kg-1），待水稻種植45 d后選取長勢均衡的植株在分蘗末期采樣。每處理取3個重復(fù)用于實驗室分析。

1.3 試驗方法

1.3.1 植株全鎘含量測定

將采集的水稻根部與地上部清洗干凈，于105℃殺青20 min，70℃烘干2 h，粉碎過60目篩，并稱取0.5 g，加入HNO3-HClO4（體積比1∶4）混合酸10 mL過夜。調(diào)節(jié)沙浴逐級升溫至（196±5）℃，消煮至澄清，剩余近2 mL，待冷卻，潤洗過濾，純水定容至25 mL待測。將待測液用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀ICPOES（VISTA-MPX，美國）測定鎘含量。

1.3.2 植株亞細(xì)胞組分鎘含量測定

將采集的植株鮮樣用蒸餾水清洗后以紗布吸干表面水分，按料液比1∶10稱取根系、莖葉各1 g樣品，加入配制的預(yù)冷緩沖液[蔗糖250 mmol·L-1，Tris-HCl（pH 7.4）50 mmol·L-1，DTT 1 mmol·L-1]5 mL冰浴研磨至勻漿，再加5 mL沖洗缽體，勻漿與沖洗液同置于15 mL離心管中。采用差速離心（Thermo Scientific Sorvall LYNX 4000），參照Weigel等[12]的技術(shù)，按照王芳等[13]的方法略有改動。所有處理均在4℃下進(jìn)行：按2400 r·min-1離心15 min得到沉淀部分為細(xì)胞壁組分；將上清液以12 000 r·min-1離心45 min得到沉淀部分為細(xì)胞器組分；上清液為細(xì)胞可溶部分。將細(xì)胞壁、細(xì)胞器組分于70℃烘干，加入混合酸10 mL，轉(zhuǎn)入三角瓶放置過夜（≥10 h），消煮、潤洗過濾、定容至10 mL，測定鎘含量。

1.3.3 植株鎘化學(xué)形態(tài)測定

將植株鮮樣清洗拭干，稱取1 g剪為1～2 mm2的碎片置于離心管，加入10 mL提取劑浸提，于25℃恒溫箱內(nèi)放置20 h，之后25℃恒溫振蕩2 h，以4000 r·min-1離心10 min，倒出上清液，再加入同體積提取劑，恒溫振蕩2 h、離心10 min，將兩次上清液同置于三角瓶備用。采用以下5種提取劑逐步浸提：80%乙醇、去離子水、1 mol·L-1氯化鈉、2%醋酸、0.6 mol·L-1鹽酸。所得上清液置于電熱板蒸發(fā)至近干（1～2 mL），加酸、消煮、潤洗過濾、10%硝酸定容至10 mL，測定鎘含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

實驗數(shù)據(jù)應(yīng)用Excel軟件進(jìn)行統(tǒng)計整理，應(yīng)用SPSS 18.0進(jìn)行數(shù)據(jù)差異性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同施磷量對水稻鎘含量的影響

由圖1可以看出，兩品種水稻根部鎘含量明顯高于莖葉。在P0處理下水稻根及莖葉鎘含量均最高，說明此時植株受鎘的毒害作用最大。與P0相比，各施磷處理均明顯降低了兩品種根系的鎘含量，且隨施磷水平的提高鎘含量顯著降低，沈農(nóng)315和花粳1417分別降低了16.68%～27.37%、18.27%～28.09%，在P3水平上降低幅度最大。與P1相比，隨著磷的增加水稻根及莖葉中鎘含量的降低幅度呈逐漸減緩趨勢，且P2、P3處理之間的鎘含量差異不顯著，說明增施磷肥可以緩解鎘對水稻的毒害，但磷對鎘的抑制存在一定閾值，磷過量對鎘的抑制作用不明顯。兩個水稻品種莖葉的鎘含量在不同磷處理中的變化趨勢與根部相似，同樣表現(xiàn)出了鎘含量隨磷增加而逐漸降低的趨勢。沈農(nóng)315與花粳1417的降低幅度分別為32.20%～64.02%、33.22%～66.44%，在P3水平上降低幅度最大，但P2、P3處理之間的鎘含量差異不顯著。可見磷對莖葉鎘含量的影響大于根部。

圖1 不同磷水平下水稻根及莖葉鎘含量Figure 1 Effects of different phosphorus levels on cadmium content in roots and stems of rice

相較兩個品種而言，沈農(nóng)315根部鎘含量明顯高于花粳1417，而莖葉鎘含量明顯低于花粳1417。這可能是由于沈農(nóng)315對重金屬的轉(zhuǎn)運能力較低，能將更多的鎘富集在根部，減少了鎘向地上部的遷移。花粳1417莖葉鎘含量較高可能是由于其對鎘的遷移能力較強(qiáng)，向莖葉轉(zhuǎn)運鎘量較多所致。這說明植株對鎘的吸收積累情況受基因型的影響。

2.2 不同施磷量對水稻亞細(xì)胞鎘含量的影響

由表1可以看出，在4個磷處理中兩品種根及莖葉亞細(xì)胞各組分鎘含量的分配比例均呈現(xiàn)細(xì)胞壁＞細(xì)胞可溶部分＞細(xì)胞器的趨勢，說明不同鎘耐性的水稻其鎘的亞細(xì)胞分布趨勢是一致的。

在植株根系中，與P0相比，施磷明顯降低了各亞細(xì)胞組分中的鎘含量，改變了鎘在亞細(xì)胞各組分中的分配比例。水稻細(xì)胞壁和細(xì)胞可溶部分的鎘占比在P0水平中最少，說明缺磷時植株細(xì)胞壁及細(xì)胞可溶部分對鎘的固持和束縛作用較弱，自由態(tài)鎘離子數(shù)量相對較多，對植株的脅迫作用更大；而細(xì)胞器中鎘含量及所占比例在P0處理中最高，沈農(nóng)315和花粳1417分別達(dá)到26.67%、29.87%，細(xì)胞器是植株主要的代謝場所，若鎘濃度較高會對水稻生長產(chǎn)生脅迫效應(yīng)，說明在缺磷處理中，水稻根細(xì)胞受鎘毒害作用比其他磷處理更大。與P0相比，磷的增加明顯提高了兩品種根部鎘在細(xì)胞壁及細(xì)胞可溶部分的比例，降低了鎘在細(xì)胞器中的比例，且細(xì)胞壁中鎘分配率的增長和細(xì)胞器中鎘分配率的降低更為明顯，均在P3處理時變化最大：沈農(nóng)315和花粳1417細(xì)胞壁鎘分別增長了13.11和10.94個百分點，細(xì)胞器鎘分別降低了15.60和14.02個百分點。這說明磷的增加主要增強(qiáng)了根細(xì)胞壁對鎘的束縛，減少了進(jìn)入細(xì)胞器的鎘含量，從而減少鎘與蛋白質(zhì)結(jié)合干擾植株生理代謝的毒害作用，進(jìn)而緩解了植株鎘脅迫。

在莖葉中，兩品種亞細(xì)胞組分中鎘的分配比例變化規(guī)律與根部相似，在缺磷時植株受鎘毒害作用最大，隨磷的增加鎘毒害逐漸減輕，與P0相比，在P3處理時磷對莖葉鎘脅迫的緩解效果最好。兩品種細(xì)胞器中鎘的分配比例明顯低于根部，說明鎘對莖葉的毒害小于根部。在相同磷水平下，沈農(nóng)315莖葉細(xì)胞壁鎘的分配比例明顯大于根部，達(dá)到50.09%～58.13%，細(xì)胞可溶部分鎘的分配比例略有增加；而花粳1417莖葉細(xì)胞壁鎘的分配比例與根部相差不大，細(xì)胞可溶部分鎘的分配比例明顯增加。這說明兩品種莖葉中的耐鎘機(jī)制存在差異。

表1 不同磷水平下水稻根與莖葉亞細(xì)胞各組分鎘含量（mg·kg-1DW）Table 1 Effects of different P levels on subcellular fractions of Cd in rice root and stem leaf（mg·kg-1DW）

對于兩品種而言，沈農(nóng)315根細(xì)胞壁對鎘的固持能力比花粳1417更強(qiáng)，進(jìn)入細(xì)胞器參與代謝的鎘更少，減少了其向地上部的運輸，但兩品種根細(xì)胞可溶部分的鎘含量及分配比例差異不顯著。在莖葉中，花粳1417的細(xì)胞壁分配比例更小，細(xì)胞可溶部分分配比例更大。這說明兩品種莖葉在對鎘的脅迫表現(xiàn)上存在較大差異，可能與磷的吸收利用差異有關(guān)。

2.3 不同施磷量對水稻鎘化學(xué)形態(tài)的影響

由表2可以看出，鎘形態(tài)的回收率為91.13%～97.26%，說明本實驗所采用的提取方法能較好地用于鎘化學(xué)結(jié)合形態(tài)的研究。兩品種根部各提取態(tài)的分配比例呈現(xiàn)為氯化鈉提取態(tài)＞醋酸提取態(tài)＞去離子水提取態(tài)＞乙醇提取態(tài)＞鹽酸提取態(tài)，說明不同鎘耐性的水稻其鎘化學(xué)形態(tài)分布趨勢是一致的。

與P0相比，增施磷明顯改變了水稻鎘各提取態(tài)的分配比例。鎘的氯化鈉提取態(tài)、乙醇提取態(tài)所占比例隨磷的增加逐漸降低，以氯化鈉提取態(tài)變化最為明顯，沈農(nóng)315和花粳1417的降幅分別為23.38%～40.11%、22.55%～39.56%，在各施磷水平間鎘含量降低差異顯著，P3處理降到最低，但P2、P3處理間差異不顯著。鎘的氯化鈉提取態(tài)是鎘與蛋白質(zhì)結(jié)合的形態(tài)，干擾酶活性，影響作物正常生長發(fā)育，氯化鈉提取態(tài)占比越多的作物，鎘耐性越低；乙醇提取態(tài)遷移能力更強(qiáng)，毒性更高。磷的增加顯著降低了鎘氯化鈉提取態(tài)和乙醇提取態(tài)，說明磷對植株抑制鎘毒害效果顯著。鎘的醋酸提取態(tài)和去離子水提取態(tài)的分配比例隨磷的增加而逐漸增加，其中以醋酸提取態(tài)變化最為明顯，沈農(nóng)315和花粳1417的增幅分別為19.70%～31.32%、10.05%～16.36%，在各施磷水平間鎘含量差異顯著，P3處理降到最低，但P2、P3處理間差異不顯著。醋酸提取態(tài)是鎘與二代磷酸鹽結(jié)合的形態(tài)，磷酸鹽類吸附鎘，使活性態(tài)鎘數(shù)量減少，降低了鎘在植株內(nèi)的遷移，從而提高了植株對鎘的耐受性。

相對而言，相同磷水平上，沈農(nóng)315的氯化鈉提取態(tài)和乙醇提取態(tài)鎘含量均低于花粳1417，而醋酸提取態(tài)及分配比例明顯高于花粳1417，鹽酸提取態(tài)略有增加但變化不明顯，兩品種間變化不顯著。

3 討論

3.1 施磷量對水稻植株鎘含量的影響

磷是植物生長必需的營養(yǎng)元素之一，參與植株碳水化合物、蛋白質(zhì)的合成與代謝，可促進(jìn)植株生長，增強(qiáng)植物抗逆能力[14-15]，從而在一定程度上緩解鎘的毒害作用。在本實驗中添加鎘為5 mg·kg-1，缺磷條件下植株鎘含量最高，此時對植株的毒害程度最大，隨施磷量增加，兩品種水稻各部位的鎘含量逐漸降低，說明施磷對緩解植株鎘毒害有一定的作用。在磷為900 mg·kg-1時鎘含量降至最低，但與磷為450 mg·kg-1時差異不顯著。這與一些學(xué)者的研究結(jié)果不盡相同：董善輝等[16]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)施磷量為450 mg·kg-1時，水稻各部位鎘含量均達(dá)到最低值；Singh[17]發(fā)現(xiàn)常量磷供應(yīng)下燕麥和油菜的鎘含量不受磷影響，但在高磷水平下，植株體內(nèi)的鎘含量明顯上升；高超等[18]研究施用磷酸鈣（SSP）和磷酸二銨（DAP）對水稻鎘含量的影響，結(jié)果表明鎘隨磷施用量增加而減少，在磷為900 mg·kg-1時鎘含量最低。

表2 不同磷水平水稻根系Cd形態(tài)含量Table 2 Effects of different P levels on chemical forms of Cd in rice root

3.2 施磷量對水稻亞細(xì)胞鎘含量的影響

水稻主要通過細(xì)胞壁、細(xì)胞可溶部分束縛和固持植株中鎘來達(dá)到緩解重金屬毒害的作用。劉清泉等[19]認(rèn)為，在細(xì)胞壁中鎘含量最高，是因為細(xì)胞壁中含有大量的負(fù)電荷基團(tuán)，這些基團(tuán)通過與帶正電荷的重金屬離子沉淀絡(luò)合，使大部分鎘被束縛在細(xì)胞壁中。在磷供應(yīng)充足情況下，植株細(xì)胞壁多糖含量降低從而減少與重金屬的結(jié)合位點[20]，進(jìn)而提高植株金屬耐性。磷與鎘在植株細(xì)胞壁形成金屬螯合物，減少了Cd2+在木質(zhì)部的長距離輸送，降低了向地上部的遷移率[21]。所以隨著施磷量的增加植株細(xì)胞壁的鎘含量所占比例也會增加。本實驗得出水稻亞細(xì)胞各組分鎘含量為細(xì)胞壁＞細(xì)胞可溶部分＞細(xì)胞器，與前人研究結(jié)果一致[3，7，14]。水稻根及莖葉亞細(xì)胞鎘含量變化趨勢與水稻鎘全量保持一致。

3.3 施磷量對水稻鎘化學(xué)結(jié)合形態(tài)的影響

水稻體內(nèi)的鎘以不同的化學(xué)結(jié)合形態(tài)存在于植株的不同部位[3]，其不同的化學(xué)形態(tài)可以反映鎘的不同活性、毒性、遷移能力以及與基質(zhì)分離的難易程度[22]。一般而言，植株中的鎘主要以氯化鈉結(jié)合形態(tài)存在，因為鎘對蛋白質(zhì)或其他有機(jī)化合物中巰基有很強(qiáng)的親和力[23]，在本實驗中也表現(xiàn)出鎘在水稻內(nèi)主要以氯化鈉提取態(tài)存在。當(dāng)磷濃度增加時，沈農(nóng)315、花粳1417的總提取態(tài)下降，具有高遷移活性的乙醇提取態(tài)、氯化鈉提取態(tài)不斷降低，占比也不斷減少，而遷移活性較弱的醋酸提取態(tài)及鹽酸提取態(tài)有所增加；去離子水提取態(tài)的有機(jī)酸鹽和金屬一代磷酸鹽可與鎘在原生質(zhì)膜表面的結(jié)合位置上形成螯合物[24]，從而限制鎘在水稻內(nèi)遷移性，因此隨磷酸鹽增加鎘去離子提取態(tài)逐漸增加。兩品種間存在鎘含量變化的顯著差異，則可能是由于兩種水稻存在基因型上的差異亦或是對磷的吸收利用效率的差異[25]。

4 結(jié)論

（1）兩品種水稻根系及莖葉的鎘含量隨施磷量的增加呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢，降低幅度逐漸減緩，當(dāng)磷為900 mg·kg-1時鎘含量最低，但與磷為450 mg·kg-1時差異不顯著。沈農(nóng)315主要將鎘富集在根部，花粳1417的鎘向地上部遷移較多。

（2）水稻根與莖葉亞細(xì)胞各組分鎘的分布為細(xì)胞壁＞細(xì)胞可溶部分＞細(xì)胞器。磷濃度越高，鎘在細(xì)胞壁的分配比例越多，細(xì)胞器比例越少。沈農(nóng)315將更多的鎘束縛在根細(xì)胞壁，減少了鎘向地上部的轉(zhuǎn)運。花粳1417細(xì)胞器鎘比例較高。

（3）水稻鎘的化學(xué)結(jié)合形態(tài)分配比例呈現(xiàn)為氯化鈉提取態(tài)＞醋酸提取態(tài)＞去離子水提取態(tài)＞乙醇提取態(tài)＞鹽酸提取態(tài)。隨著磷的增加鎘的氯化鈉提取態(tài)、乙醇提取態(tài)比例逐漸降低，醋酸提取態(tài)、去離子水提取態(tài)比例逐漸增加，鹽酸提取態(tài)比例略有增加但變化不明顯。沈農(nóng)315的氯化鈉提取態(tài)比例顯著低于花粳1417，而醋酸提取態(tài)比例顯著高于花粳1417。

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Effects of phosphorus on subcellular distribution and chemical speciation of cadmium in rice

LI Tao,LI Jun*,HAN Ying,GENG Jie,XUE Fei,CHEN Kai
（College of Land and Environment,Shenyang Agricultural University,Shenyang 110866,China）

To determine the effect of phosphorus on cadmium tolerance in rice,a pot experiment was carried out with two genotypes of rice：Shennong315,a cadmium－tolerant variety,and Huajing1417,a cadmium－sensitive variety.The subcellular distribution and chemical form of cadmium in these two varieties were analyzed at the end of the tillering stage of rice.The results showed that the application of phosphate fertilizer significantly reduced the cadmium content of the two cultivars.The content of cadmium in roots of Shennong315 was higher than that of Huajing1417,and the content of cadmium in stem and leaves was lower than that of Huajing1417.The proportion of cadmium in the cell wall of the cultivars increased significantly with increase in phosphorus,and the proportion of cadmium in the organelle gradually reduced.The chemical binding morphology of cadmium overall proceeded in the order sodium chloride extract＞acetic acid extract＞distilled water extract＞ethanol extract＞hydrochloric acid extract.The proportion of acetic acid extract increased with increase in phosphorus.Shennong315 increased by 19.70%～31.32%and Huajing1417 increased by 10.05%～16.36%.The proportion of sodium chloride extract was significantly decreased with increase in phosphorus.Shennong315 fell by 23.38%～40.11%and Huajing1417 fell by 22.55%～39.56%.Therefore,the application of phosphate fertilizer can effectively increase the tolerance of rice to cadmium,and different varieties have different performances.This study provides a scientific basis for the use of phosphorus to alleviate cadmium toxicity in rice.

rice;phosphorus;cadmium;subcellular distribution;chemical form

X171.5

A

1672－2043（2017）09－1712－07

10.11654/jaes.2017－0267

李 桃，李 軍，韓 穎，等.磷對水稻鎘的亞細(xì)胞分布及化學(xué)形態(tài)的影響[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報,2017,36（9）：1712－1718.

LI Tao,LI Jun,HAN Ying,et al.Effects of phosphorus on subcellular distribution and chemical speciation of cadmium in rice[J].Journal of Agro-Environment Science,2017,36（9）:1712－1718.

2017－03－03

李 桃（1991—），女，遼寧阜新人，碩士研究生，從事重金屬污染土壤修復(fù)研究。E－mail：1457872377@qq.com

*通信作者：李 軍E－mail：syau_lijun@163.com

2012年遼寧省科學(xué)基金項目（L2012241）

Project supported：The Science Foundation of the Liaoning Province,China（L2012241）