海南砂仁脂溶性成分的GC-MS分析△

董琳，王勇，張小坡，魏娜，李友賓，張俊清*，羅喻超

(1.海南醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，海南 ?？?571199；2.海南省熱帶藥用植物研究開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南 海口 571199；3.?？谑欣枳遽t(yī)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南 ?？?571199)

·基礎(chǔ)研究·

海南砂仁脂溶性成分的GC-MS分析△

董琳1，2，3，王勇1，2，3，張小坡1，魏娜1，李友賓1，2，3，張俊清1，2，3*，羅喻超1

(1.海南醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，海南 海口 571199；2.海南省熱帶藥用植物研究開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南 海口 571199；3.?？谑欣枳遽t(yī)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南 ?？?571199)

目的：研究海南砂仁的脂溶性成分。方法：利用溶劑分步萃取，得到各萃取部位；采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用技術(shù)對(duì)其石油醚部位的成分進(jìn)行測(cè)定，并與標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照，確定化合物成分，經(jīng)色譜峰面積歸一化法確定各成分的相對(duì)百分含量。結(jié)果：從海南砂仁石油醚萃取部位中共分離出76個(gè)組分，鑒定了其中的56種成分，所鑒定的成分占總脂溶性成分的68.81%，其中相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高的成分有對(duì)苯二酚(7.74%)、Z，E-2，13-十八碳二烯-1-醇(6.86%)、E，E-2，13-十八碳二烯-1-醇(5.44%)、4-十一烷基苯酚(3.71%)、(Z)-9-十八碳烯醛(3.65%)、順式-異油酸(3.39%)及(E，E)-大牻牛兒-3，7(11)，9-三烯-6-酮(3.05%)等。結(jié)論：本研究首次對(duì)海南砂仁的石油醚部位的化學(xué)成分進(jìn)行了分析，該研究為海南砂仁的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供了基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)。

海南砂仁；脂溶性成分；氣相色譜-質(zhì)譜；海南

海南砂仁為姜科豆蔻屬植物海南砂仁AmomumlongiligulareT.L.Wu的干燥成熟果實(shí)。主產(chǎn)于海南澄邁、陵水、樂東、三亞、儋州等縣，生長(zhǎng)于低海拔林中或栽培。廣東省也有分布。味辛，性溫。具有化濕開胃、溫脾止瀉、理氣安胎之功效；黎族地區(qū)用其果實(shí)煎湯治療消化不良[1-2]。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)砂仁的研究主要集中在對(duì)陽(yáng)春砂仁的揮發(fā)油成分及其藥理作用的研究，而對(duì)海南砂仁的化學(xué)成分研究甚少，文獻(xiàn)報(bào)道了海南砂仁的揮發(fā)油成分及其醇提物的二氯甲烷部位的化學(xué)成分，分離得到的化學(xué)成分主要有二芳基庚烷類、黃酮類、揮發(fā)油等[3-6]。為了開發(fā)利用該藥用植物資源，本實(shí)驗(yàn)利用溶劑分步萃取，得到石油醚萃取部位，并采用GC-MS法首次分析了該部位的化學(xué)成分。

1 儀器與材料

1.1 儀器

SF-180型號(hào)高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(中國(guó)泰州市天泰制藥機(jī)械廠)，GCMS-QP2010 Plus氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(日本島津)，質(zhì)譜圖庫(kù)：NIST08和NIST08s。色譜柱：RTX-5MS毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)(USA，RESTEK)。

1.2 材料

海南砂仁果實(shí)采自海南瓊中，由海南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院曾念開教授鑒定為姜科豆蔻屬植物海南砂仁AmomumlongiligulareT.L.Wu的果實(shí)。

工業(yè)乙醇，石油醚(60～90 ℃)、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇均為分析純，購(gòu)自中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司。

2 方法

2.1 供試品溶液的制備

將海南砂仁果實(shí)(6 kg)破殼粉碎，用乙醇冷浸提取4次，每次5 d，合并提取液，減壓濃縮得到乙醇濃縮液。再依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇反復(fù)萃取，得石油醚萃取部位114.1 g。取石油醚萃取部位適量，加正己烷溶解制成2 mg ·mL-1的溶液，取溶液適量過0.45 μm微孔濾膜，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.2 GC-MS分析條件

氣相色譜：GCMS-QP 2010 Plus氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(日本島津)，RTX-5MS石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；程序升溫(初始溫度70 ℃，先

以10 ℃·min-1升到200 ℃，保持2 min，再以3 ℃·min-1升到290 ℃，保持15 min)，載氣為氦氣，柱流量為1 mL·min-1，吹掃流量為3 mL·min-1，進(jìn)樣量為1.0 μL，進(jìn)樣口溫度為260 ℃，分流比為30∶1。

質(zhì)譜：EI電離方式，電子倍增管電壓為1847 V，電子能量為70 eV，離子源溫度為230 ℃，接口溫度為280 ℃，掃描間隔為0.5 s，掃描速度為1250，掃描質(zhì)量范圍m/z50～600。

2.3 成分分析

按GC-MS分析條件，取供試品溶液1.0 μL進(jìn)樣，得石油醚萃取部位的總離子流圖，見圖1，各色譜峰相應(yīng)的質(zhì)譜圖經(jīng)人工解析及NIST08、NIST08s數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，按各色譜峰的質(zhì)譜碎片圖與文獻(xiàn)核對(duì)，對(duì)基峰質(zhì)荷比和相對(duì)豐度等方面進(jìn)行直觀比較鑒定各成分，同時(shí)采用色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，以峰面積歸一化法計(jì)算海南砂仁石油醚部位脂溶性成分中各組分的相對(duì)百分含量。

圖1 海南砂仁脂溶性成分的GC-MS總離子流圖

3 結(jié)果

從海南砂仁石油醚萃取部位中共分離出76個(gè)組分，鑒定了其中的56個(gè)成分，占總脂溶性成分的68.81%，其中相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高的成分有對(duì)苯二酚(7.74%)、Z，E-2，13-十八碳二烯-1-醇(6.86%)、E，E-2，13-十八碳二烯-1-醇(5.44%)、4-十一烷基苯酚(3.71%)、(Z)-9-十八碳烯醛(3.47%)、順式-異油酸(3.39%)及(E，E)-大牻牛兒-3，7(11)，9-三烯-6-酮(3.05%)等。結(jié)果見表1。

表1 海南砂仁脂溶性成分分析

表1(續(xù))

表1(續(xù))

4 討論

本研究采用GC-MS技術(shù)首次對(duì)海南砂仁石油醚萃取部位的化學(xué)成分進(jìn)行了分析，從海南砂仁石油醚萃取部位中共分離出76個(gè)組分，鑒定了其中的56個(gè)成分，所鑒定的成分占總脂溶性成分的68.81%，得到的主要化合物類型有酚酸類、烯醇類、酯類、長(zhǎng)鏈脂肪酸類成分，而單萜、倍半萜類成分較少，未見文獻(xiàn)報(bào)道的海南砂仁中常見的主要的揮發(fā)性成分乙酸龍腦酯等[4]，可能是由于提取方法的不同，從而使得到的化合物組分有所差別。

在本研究中，被鑒定出的含量較高的脂溶性成分中，對(duì)苯二酚常應(yīng)用于抗氧劑、黑白顯影劑和穩(wěn)定劑，還應(yīng)用于化妝品中的美白劑等[7]。說明海南砂仁脂溶性提取物應(yīng)該具有較好的抗氧化活性。本研究可為海南砂仁的進(jìn)一步研究開發(fā)和利用提供基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)。

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[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：253.

[3] 陸山紅，趙榮華，幺晨，等.砂仁的化學(xué)及藥理研究進(jìn)展[J].中藥藥理與臨床，2016，32(1)：227-229.

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GC-MSAnalysisofLipidSolubleCompositionfromFruitsofAmomumlongiligulare

DONGLin1，2，3，WANGYong1，2，3，ZHANGXiaopo1，WEINa1，LIYoubin1，2，3，ZHANGJunqing1，2，3*，LUOYuchao1

(1.SchoolofPharmaceuticalSciences，HainanMedicalUniversity，Haikou571199，China； 2.HainanProvincialKeyLaboratoryofR&DonTropicalMedicinalHerbs，Haikou571199，China； 3.HaikouMunicipalKeyLaboratoryofLiNationalityMedicines，Haikou571199，China)

Objective：To investigate the chemical constituents in the lipid soluble composition from the fruits ofAmomumlongiligulare.Methods：The petroleum ether fraction was extracted by solvent step by step and its chemical constituents were separated，determined and identified by gas chromatography-mass spectrometry combined with computer retrieval in compound databases.The relative percentage content of each compound was calculated by peak area normalization method.Results：76 compounds were separated and 56 of them were identified，which covered 68.81% of the total lipid soluble composition.The major constituents with higher relative content were hydroquinone(7.74%)，Z，E-2，13-octadecadien-1-ol(6.86%)，E，E-2，13-octadecadien-1-ol(5.44%)，4-undecylphenol(3.71%)，(Z)-9-octadecenal(3.65%)，cis-vaccenic acid(3.39%)and(E，E)-germacra-3，7(11)，9-trien-6-one(3.05%).Conclusion：Chemical constituents of the petroleum ether fraction from the fruits ofA.longiligularewere analyzed for the first time.The present study provides a chemical basis forA.longiligulare.

AmomumlongiligulareT.L.Wu；lipid soluble composition；GC-MS；Hainan

海南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(20158370)

] 張俊清，教授，研究方向：南藥黎藥的研究與開發(fā)；Tel：(0898)66893826，E-mail：Jqzhang2011@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.2.006

2016-07-19)

*[