向日葵花盤揮發(fā)油的GC-MS定性分析△

張玲玲，湯依娜，唐思麗，黃文菁，林敏婷，劉韻，張建業(yè)*

(1.廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院，廣東 廣州 510700；2.廣州醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，廣東 廣州 511436；3.四川省中醫(yī)藥科學(xué)院，四川 成都 610041)

·基礎(chǔ)研究·

向日葵花盤揮發(fā)油的GC-MS定性分析△

張玲玲1，2，湯依娜3，唐思麗2，黃文菁2，林敏婷2，劉韻2，張建業(yè)2*

(1.廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院，廣東 廣州 510700；2.廣州醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，廣東 廣州 511436；3.四川省中醫(yī)藥科學(xué)院，四川 成都 610041)

目的：通過(guò)GC-MS來(lái)定性分析向日葵花盤的揮發(fā)油成分，為進(jìn)一步對(duì)其研究開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。方法：采用水蒸氣蒸餾法提取，運(yùn)用GC-MS聯(lián)用并結(jié)合計(jì)算機(jī)相似度檢索鑒定向日葵花盤揮發(fā)油的化學(xué)成分，應(yīng)用色譜峰面積歸一化法測(cè)定各成分的相對(duì)百分含量。結(jié)果：從向日葵花盤的揮發(fā)油中鑒定出了29種化學(xué)成分，其中萜類化合物較多，其中含量較高的成分為α-蒎烯(21.95%)、檜烯(15.66%)、β-蒎烯(4.03%)、白菖油萜(3.29%)、大根香葉烯D(3.62%)、4-松油醇(2.68%)、檸檬烯(2.2%)等。結(jié)論：向日葵花盤的揮發(fā)油成分多為萜類化合物，有較高的藥用價(jià)值，具有很大研究?jī)r(jià)值和廣闊市場(chǎng)前景。

向日葵花盤；揮發(fā)油；GC-MS

向日葵HelianthusannuusL.為菊科向日葵屬(Helianthus)植物，起源于北美西南部，在引入歐洲后由觀賞植物逐漸改造成油料作物，在我國(guó)已有400余年種植歷史[1]。向日葵除了具有經(jīng)濟(jì)效益外，也有很高的藥用價(jià)值。向日葵味甘，性溫，是蒙族、景頗族等多個(gè)少數(shù)民族的傳統(tǒng)藥，根、莖、葉、花和子實(shí)均能入藥[2]。其中，向日葵花瓣有祛風(fēng)明目，治頭暈、牙痛功效；花盤可清濕熱，利小便、消炎癥、降血壓[3]?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，向日葵具有抗菌、降血壓、提高免疫力、抗腫瘤活性、防治泌尿系統(tǒng)疾病等[4-5]作用。

氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用法是一種高選擇性、高靈敏度、高效能的分析方法，尤其適合于揮發(fā)性化合物的分析。本文利用GC-MS定性分析采自南沙的向日葵花盤揮發(fā)油成分，為向日葵的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與材料

QP2010 GC-MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(Shimadzu公司)；揮發(fā)油提取器(常規(guī)玻璃儀器)；乙酸乙酯為色譜純。

本文所用的向日葵花盤，采自廣州市南沙區(qū)，由香港浸會(huì)大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院的陳虎彪教授鑒定，標(biāo)本存放于廣州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院。

2 方法

2.1 揮發(fā)油的提取和后處理

稱取200 g經(jīng)剪碎的新鮮向日葵花盤，置燒瓶中，加水1000 mL與數(shù)粒玻璃珠，振搖混合后，連接揮發(fā)油測(cè)定器與回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充滿揮發(fā)油測(cè)定器的刻度部分，并溢流入燒瓶時(shí)為止。置電熱套中緩緩加熱至沸，并保持微沸5 h，至測(cè)定器中油量不再增加，停止加熱，放置片刻，開(kāi)啟測(cè)定器下端的活塞，將水緩緩放出，收集上層向日葵花盤揮發(fā)油。實(shí)驗(yàn)得到黃色透明具有特殊濃郁氣味的油狀液體，以無(wú)水硫酸鈉干燥，稱量，向日葵花盤的揮發(fā)油含量(得率)為0.29%。所得到的揮發(fā)油以色譜純乙酸乙酯稀釋1萬(wàn)倍，裝瓶待測(cè)。

2.2 GC-MS分析條件

2.2.1 氣相色譜條件 色譜柱DB-5ms型(30 m × 0.25 mm，0.25 μm)；載氣：高純氦；載氣流速：3.0 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度：230 ℃；采用程序升溫，初始溫度50 ℃，保持1 min，以5 ℃·min-1的速率升溫至140 ℃后，又以8 ℃·min-1的速率升溫至230 ℃；再以10 ℃·min-1的速率升溫至280 ℃，保持5 min；進(jìn)樣模式為分流進(jìn)樣，分流比為10∶1；線速度：39.0 cm·s-1。

2.2.2 質(zhì)譜條件 離子源：電子轟擊(EI)源；離子源溫度：200 ℃；電子能量：70 eV；接口溫度：280 ℃；溶劑延遲：5.5 min；質(zhì)量范圍m/z：40～

400；檢測(cè)電壓：0.3 kV。檢索譜庫(kù)為NIST27、NIST147。

3 結(jié)果

向日葵花盤提取的揮發(fā)油經(jīng)GC-MS分離與鑒定，得到揮發(fā)油的總離子流圖。圖1為溶劑乙酸乙酯的總離子流圖，圖2為揮發(fā)油的總離子流圖。對(duì)離子流圖中的各峰經(jīng)質(zhì)譜掃描后得質(zhì)譜圖，經(jīng)計(jì)算機(jī)NIST27、NIST147譜庫(kù)檢索和人工解析、查閱相關(guān)文獻(xiàn)共鑒定出29種化合物，并以峰面積歸一法計(jì)算出各色譜峰的相對(duì)百分含量，見(jiàn)表1。

圖1 乙酸乙酯的總離子流圖

圖2 向日葵花盤揮發(fā)油總離子流圖

編號(hào)保留時(shí)間/min相對(duì)分子質(zhì)量分子式化合物名稱相對(duì)百分含量/%15.917136C10H16羅勒烯0.9226.000136C10H16α-側(cè)柏烯1.2936.167136C10H16α-蒎烯21.9546.633136C10H16莰烯1.21

表1(續(xù))

4 討論

揮發(fā)油，又稱精油，是中藥中具有廣泛生物活性的一類重要成分，由于其具有揮發(fā)性，沸點(diǎn)一般不超過(guò)300 ℃，故適用于GC-MS分析。向日葵花盤的揮發(fā)油成分多為萜類化合物且有較高的藥用價(jià)值，具有很大研究?jī)r(jià)值和廣闊市場(chǎng)前景。本文采用GC-MS來(lái)快速鑒定向日葵花盤的揮發(fā)油成分。

本實(shí)驗(yàn)從向日葵花盤揮發(fā)油中鑒定了29個(gè)化合物，分別為：羅勒烯、α-側(cè)柏烯、α-蒎烯、莰烯、檜烯、β-蒎烯、水芹醛、(+)-4-蒈烯、檸檬烯、γ-萜品烯、2-蒈烯、1，1-二甲基-3-亞甲基-2-乙烯基環(huán)己烷、D-馬鞭草烯醇、Z-馬鞭草烯醇、E-對(duì)薄荷-2，8-二烯醇、3-乙酰氧基-4-(1-羥基-1-甲基乙基)-1-甲基-環(huán)己烯、4-松油醇、(1α，3β，4β，6α)-4，7，7三甲基-二環(huán)[4.1.0]庚-3-醇、醋酸異冰片、β-欖香烯、石竹烯、白菖油萜、大根香葉烯D、(-)斯巴醇、6，10，14-三甲基-2-十五烷酮、十九烷、[3R-(3α，4aβ，6aα，10aβ，10bα)]-3-乙烯基十二氫3，4A，7，7，10a五甲基-1H-萘并[2，1-b]吡喃、13β甲基-13-乙烯基-羅漢松-7-烯-3-酮、[4aS-(4aα，5α，8aβ)]-十氫1，1，4a三甲基-6-亞甲基-5-(3-甲基-2，4-戊二烯基)-萘。主要成分為萜類化合物。

索金玲[6]利用GC-MS對(duì)新疆向日葵花盤揮發(fā)油進(jìn)行分析得：花期的揮發(fā)油鑒定出39個(gè)化合物，成熟期的揮發(fā)油鑒定出36個(gè)化合物，其中17個(gè)化合物為二者共有，以R-α-蒎烯、白菖油萜為主。本文結(jié)果與文獻(xiàn)[6]相比，相同的化合物為α-蒎烯、β-蒎烯、莰烯、檸檬烯、白菖油萜、4-松油醇、順式-馬鞭草烯醇、β-欖香烯、大根香葉烯D、醋酸異冰片、石竹烯、γ-萜品烯、(-)斯巴醇等。彼此間也存在有差異，可能的原因是向日葵的產(chǎn)地不同、實(shí)驗(yàn)方法存在差異或所使用的檢索譜庫(kù)不同。

在向日葵花盤揮發(fā)油中獲得的多種活性成分中，α-蒎烯具有有鎮(zhèn)咳、祛痰、抗菌及抗真菌作用，可治共濟(jì)失調(diào)、皮膚發(fā)疹、腎功能損害，并常用于樟腦、驅(qū)蟲(chóng)劑、香料及松節(jié)油的合成原料[7-8]；β-蒎烯已被廣泛應(yīng)用于用于香料、醫(yī)藥、食品、農(nóng)業(yè)、高分子材料等行業(yè)中，其衍生物具有抑菌及抗腫瘤活性等[9]作用；4-松油醇具有平喘、抗氧化、體外抗菌等[10]作用；欖香烯具有較好的抗腫瘤活性[11]；檸檬烯具有抑菌、增香、止咳、平喘、抗癌等[12]作用等?？梢?jiàn)，向日葵花盤揮發(fā)油具有十分重要的生物學(xué)活性，其藥理活性值得進(jìn)一步深入研究。

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GC-MSAnalysisofVolatileOilfromDiscofHelianthusannuus

ZHANGLingling1，2，TANGYina3，TANGSili2，HUANGWenjing2，LINMinting2，LIUYun2，ZHANGJianye2*

(1.TheFifthAffiliatedHospitalofGuangzhouMedicalUniversity，Guangzhou510700，China； 2.SchoolofPharmaceuticalSciences，GuangzhouMedicalUniversity，Guangzhou511436，China； 3.SichuanProvincialAcademyofChineseMedicineSciences，Chengdu610041，China)

Objective：The experiment aims to qualitatively analyze the volatile oil from the disc ofHelianthusannuuswith GC-MS to provide a scientific basis for the further research and development.Methods：The volatile oil was extracted by steam distillation.GC-MS and similarity retrieval of the computer in conjunction were used to identify the chemical constituents of volatile oil from the disc.The relative percentage contents of each chemical component were determined by using chromatographic peak area normalization method.Results：29 compounds were identified from the disc.The main components of volatile oil are different kinds of terpenoids.And the high relative percentage content are α-pinene(21.95%)，sabinene(15.66%)，β-pinene(4.03%)，germacrene D(3.62%)，calarene(3.29%)，4-terpineol(2.68%)，limonene(2.2%)and so on.Conclusions：Components of the volatile oil from the disc ofH.annuusare mostly terpenoids with high medicinal value.It has great research value and broad market prospects.

Helianthusannuus；volatile oil；GC-MS

廣州市屬高?？蒲许?xiàng)目(1201410039)；廣東省教育廳項(xiàng)目(2015KTSCX112)

] 張建業(yè)，副教授，研究方向：中藥化學(xué)；Tel：(020)37103255，Email：jianyez@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.2.005

2016-04-22)

*[