天名精全草揮發(fā)油化學成分的SPME-GC/MS分析△

沈冰冰，唐雪陽，陳林，2，張水寒，2，唐純玉

(1.湖南省中醫(yī)藥研究院 中藥研究所，湖南 長沙 410013；2.湖南省中藥原料質量監(jiān)測技術服務中心，湖南 長沙 410013；3.湖南省抗感染中藥工程技術研究中心，湖南 長沙 410116；4.永州特色藥材高效利用創(chuàng)新研究平臺，湖南 永州 425000；5.湖南時代陽光藥業(yè)股份有限公司，湖南 永州 425000)

天名精全草揮發(fā)油化學成分的SPME-GC/MS分析△

沈冰冰1，唐雪陽1，陳林1，2，張水寒1，2，唐純玉3，4，5*

(1.湖南省中醫(yī)藥研究院 中藥研究所，湖南 長沙 410013；2.湖南省中藥原料質量監(jiān)測技術服務中心，湖南 長沙 410013；3.湖南省抗感染中藥工程技術研究中心，湖南 長沙 410116；4.永州特色藥材高效利用創(chuàng)新研究平臺，湖南 永州 425000；5.湖南時代陽光藥業(yè)股份有限公司，湖南 永州 425000)

目的：采用固相微萃取(SPME)-GC/MS 聯(lián)用技術分析天名精全草揮發(fā)油化學成分。方法：通過4個不同的SPME萃取頭(DVB/PDMS、CAR/PDMS、PDMS和PA)，在最佳條件下，對揮發(fā)油進行了化學成分研究。結果：總共檢測出135個揮發(fā)油化學成分，DVB/PDMS、CAR/PDMS、PDMS和PA 4種萃取頭分別檢測出88、77、56和42個揮發(fā)性成分。其中，酯類和倍半萜類化合物是天名精揮發(fā)油中主要的化學成分類型。結論：SPME-GC/MS技術可快速分析天名精全草揮發(fā)油化合物的類型以及相對含量，對天名精的進一步研究具有一定指導意義。

天名精；揮發(fā)油；SPME；GC/MS

天名精為菊科天名精屬植物CarpesiumabrotanoidesL.的干燥全草，味苦、辛，性寒，具有清熱解毒、破瘀、殺蟲和止血等功效，其果實名鶴虱[1]。文獻總結發(fā)現(xiàn)天名精主要含有倍半萜類化合物[2-3]，具有抗氧化、抗炎、殺蟲、抗腫瘤等功效[4-7]。目前對于天名精揮發(fā)油化學成分的研究較少[8]，現(xiàn)采用固相微萃取(SPME)聯(lián)合GC/MS技術對天名精揮發(fā)油的化學成分進行分析。

1 儀器與材料

2010/2010 plus氣相色譜-質譜聯(lián)用儀(日本島津集團)；AL204型電子天平[梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司]；SPME手動進樣手柄和4種萃取頭(65 μm DVB/PDMS、75 μm CAR/PDMS、100 μm PDMS和85 μm PA)(美國Supelco公司)；天名精藥材(湖南時代陽光藥業(yè)股份有限公司)，經湖南中醫(yī)藥研究院中藥研究所助理研究員劉浩鑒定為菊科天名精屬植物天名精。

2 方法

2.1 樣品制備

稱取天名精干燥藥材50 g，粉粹，以備用。精密稱取藥材粉末1.000 0 g，于15 mL專用采樣瓶中，置于溫度為60 ℃的水浴鍋中，插入已老化(250 ℃下活化5 min)的裝有萃取頭的手動進樣器，推出針頭，萃取30 min后取出，立即插入氣相進樣口，脫附5 min(250 ℃下)。

2.2 GC-MS條件

GC條件：Rxi-5MS(30 m×0.25 mm，0.25 μm)彈性石英毛細管柱；載氣為高純氦氣(純度99.999%)；進樣口溫度：250 ℃；柱流量：1.0 mL·min-1；升溫程序：初始80 ℃，保持2 min，以6 ℃·min-1升到140 ℃，保持2 min；進樣分流比30∶1。電離方式EI；能量70 eV；離子源溫度200 ℃；接口溫度250 ℃；四極桿溫度200 ℃；全掃描模式；掃描質量范圍m/z10～500。采用計算機譜庫(NIST)檢索分析化合物，定量采用峰面積歸一化法計算各揮發(fā)性成分的相對含量。

3 結果與討論

3.1 4種SPME萃取頭的總離子流圖比較

通過前期條件摸索實驗最終確定最佳條件為：萃取時間30 min、萃取溫度60 ℃、分流比30∶1。在此條件下進行不同SPME萃取頭實驗，得到各總離子流圖，如圖1所示。

圖1 4種不同SPME萃取頭的總離子流圖

3.2 揮發(fā)油化學成分分析

對4種不同SPME萃取頭進行GC/MS分析，通過NIST譜庫檢索分析揮發(fā)油的分子式，并且核對標準質譜圖，確定了天名精的135個揮發(fā)油化學成分。并且用峰面積歸一化法計算出各揮發(fā)性成分的相對含量，結果見表1。

通過比較，4種SPME萃取頭檢測到的揮發(fā)油化合物各類型的相對含量和數(shù)目，發(fā)現(xiàn)存在一定差異，結果見表2。DVB/PDMS萃取頭檢測出其中88個化合物，占總峰面積95.29%。相對含量從大到?。乎ヮ惢衔?倍半萜>雜環(huán)化合物>醇類化合物。CAR/PDMS萃取頭檢測出其中77個化合物，占總峰面積91.29%，相對含量從大到?。罕栋胼?雜環(huán)化合物>酯類化合物含量>單萜。PDMS萃取頭檢測出其中56個化合物，占總峰面積89.59%，相對含量從大到?。乎ヮ惢衔?倍半萜>雜環(huán)化合物>醇類化合物。PA萃取頭檢測出其中42個化合物，占總峰面積91.80%，相對含量從大到小(酯類化合物>倍半萜>醇類化合物>雜環(huán)化合物)，說明酯類和倍半萜類化合物是天名精揮發(fā)油的主要類型成分。另外，分析檢測出的揮發(fā)油化合物數(shù)目DVB/PDMS>CAR/PDMS>PDMS>PA。

表1 GC/MS分析得到的無名精全草揮發(fā)油化合物

表1(續(xù))

表1(續(xù))

表1(續(xù))

注：N.D表示未檢測到

表2 4種SPME萃取頭揮發(fā)油類型的相對含量和數(shù)目比較

4種SPME萃取頭共同檢測出了15個化合物：酮類(植酮)，酯類(異丁酸香葉酯)，單萜(芳樟醇和橙花醇)，倍半萜[(-)-α-蒎烯、β-欖香烯、β-石竹烯、α-律草烯、(S)-β-甜沒藥烯、d-杜松烯、石竹素、環(huán)氧化蛇麻烯II、Α-畢橙茄醇和桉葉-7(11)-烯-4-醇)]，雜環(huán)化合物(正戊基2-呋喃酮)。其中，DVB/PDMS萃取頭檢測出的揮發(fā)油主要含有異丁酸香葉酯(19.19%)、丙酸香葉酯(11.56%)、橙花醇(4.46%)、β-石竹烯(5.38%)、d-杜松烯(4.68%)、正戊基2-呋喃酮(11.20%)；CAR/PDMS萃取頭檢測出的揮發(fā)油主要含有異丁酸香葉酯(10.59%)、丙酸香葉酯(4.16%)、橙花醇(4.33%)、β-石竹烯(8.21%)、佛術烯(4.18%)、d-杜松烯(4.81%)、正戊基-2-呋喃酮(16.92%)；PDMS萃取頭檢測出的揮發(fā)油主要含有異丁酸香葉酯(22.29%)、丙酸香葉酯(18.34%)、3-甲基-丁酸-1-乙基-1，5-二甲基-4-己烯酯(5.83%)、β-石竹烯(5.00%)、d-杜松烯(5.59%)，石竹素(4.30%)；PA萃取頭檢測出的揮發(fā)油主要含有異丁酸香葉酯(15.48%)、3-烯丙基-2-甲氧基苯酚(10.59%)、正戊基2-呋喃酮(12.88%)、5-甲?；?2，4-二甲基吡咯-3-甲腈(9.47%)。研究發(fā)現(xiàn)酯類化合物異丁酸香葉酯和丙酸香葉酯在4種SPME萃取頭中所占的比例都較大，是其主要揮發(fā)油成分。倍半萜類型化合物的相對含量之和都在前兩位，且數(shù)目最多，是特征性化合物類型，所以該類型化合物是研究天名精這一植物的重要方向。

使用SPME-GC/MS技術可快速分析出天名精揮發(fā)油化合物的類型以及相對含量，這為進一步研究其化學成分具有一定指導作用，尤其是研究特征性化合物類型——倍半萜類。

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AnalysisofVolatileConstituentsfromAerialPartofCarpesiumabrotanoidesbySPME-GC/MS

SHEN Bingbing1，TANGXueyang1，CHENLin1，2，ZHANGShuihan1，2，TANGChunyu3，4，5*

(1.InstituteofChineseMateriaMedica，HunanAcademyofChineseMedicine，Changsha410013，China；2.HunanTCMRawMaterialsQualityMonitoringTechnicalServiceCenter，Changsha410013，China；3.HunanAnti-InfectionTCMEngineeringTechnologyResearchCenter，Changsha410116，China；4.YongzhouInnovativeResearchPlatformforEfficientUtilizationofHerbs，Yongzhou425000，China；5.HunanTimesSunshinePharmaceuticalCorp.，Yongzhou425000，China)

Objective：To analyze the volatile constituents from aerial part ofCarpesiumabrotanoidesby solid-phase microextraction (SPME)-GC/MS.Methods：The volatile constituents were analyzed by four different SPME extraction heads (DVB/PDMS，CAR/PDMS，PDMS and PA) under the optimum conditions.Results：A total of 135 volatile constituents were identified.88，77，56 and 42 compounds were detected by DVB/PDMS，CAR/PDMS，PDMS and PA，respectively.Among them，esters and sesquiterpenes were the mainly types in the volatile constituents.Conclusion：SPME-GC/MS can be used to analyze the types of volatile constituents and their relative contents，which was of great significance to the further study ofC.abrotanoides.

CarpesiumabrotanoidesL.；volatile constituents；SPME；GC/MS

中醫(yī)藥公共衛(wèi)生專項(財社[2011]-76)；湖南省科技計劃重點項目(2012SK2008)

] 唐純玉，主管中藥師，研究方向：中藥新藥研發(fā)、工藝摸索、質量標準研究；E-mail：434733348@qq.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.7.012

2016-12-13)

*[