4B級以上D3胚胎囊胚形成影響因素分析

兗娜娜，楊菁，徐望明，龍文，謝青貞，蘇紅，李風(fēng)和，羅金，漆倩容，尹太郎

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院生殖中心，武漢 430061)

·臨床研究·

4B級以上D3胚胎囊胚形成影響因素分析

兗娜娜，楊菁*，徐望明，龍文，謝青貞，蘇紅，李風(fēng)和，羅金，漆倩容，尹太郎

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院生殖中心，武漢 430061)

目的探究4B級以上D3胚胎形成囊胚的能力差異，以及差異相關(guān)的影響因素分析。方法回顧性分析D3胚胎移植/冷凍后有剩余胚胎繼續(xù)囊胚培養(yǎng)的949個(gè)IVF/ICSI-ET周期的臨床資料及繼續(xù)囊胚培養(yǎng)結(jié)局，根據(jù)繼續(xù)囊胚培養(yǎng)的D3胚胎質(zhì)量分為優(yōu)質(zhì)組(≥6B，507周期)和非優(yōu)質(zhì)組(4B～5B，442周期)，比較兩組的囊胚形成率、可利用囊胚形成率、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率及其他臨床和實(shí)驗(yàn)室影響因素。結(jié)果兩組間患者基本資料及臨床結(jié)局無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；與優(yōu)質(zhì)組相比，非優(yōu)質(zhì)組的囊胚形成率(31.44% vs.64.33%)、可利用囊胚形成率(20.36% vs.51.76%)、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率(7.03% vs.25.93%)均顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)；且優(yōu)質(zhì)組D5優(yōu)質(zhì)囊胚形成率顯著高于非優(yōu)質(zhì)組(55.93% vs.26.36%，P<0.05)；優(yōu)質(zhì)組D1 0原核(0PN)構(gòu)成(17.89% vs.9.73%)、≤10%碎片構(gòu)成(21.69% vs.9.73%)、胚胎不對稱性(28.28% vs.14.95%)顯著高于非優(yōu)質(zhì)組，而非優(yōu)質(zhì)組D1 2PN構(gòu)成(83.87% vs.77.31%)、>20%碎片構(gòu)成(34.59% vs.8.87%)顯著高于優(yōu)質(zhì)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)；在優(yōu)質(zhì)組中，年齡≤35歲者囊胚形成率、可利用囊胚形成率、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均顯著高于年齡>35歲者(P<0.001)，而非優(yōu)質(zhì)組未見年齡組間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；與不對稱胚胎相比，優(yōu)質(zhì)組對稱胚胎的囊胚形成率(68.03% vs.54.95%)、可利用囊胚形成率(55.42% vs.42.49%)、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率(28.98% vs.18.19%)均顯著增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。結(jié)論不同質(zhì)量的D3胚胎有不同的發(fā)育能力，女方年齡、D1 PN構(gòu)成、D3胚胎碎片率、胚胎不對稱性均影響可利用囊胚及優(yōu)質(zhì)囊胚的形成，優(yōu)質(zhì)胚胎形成囊胚較快(D5)，非優(yōu)質(zhì)囊胚形成囊胚較晚(D6)。

D3胚胎； 囊胚形成； 優(yōu)質(zhì)囊胚形成； 影響因素

(JReprodMed2017，26(9)：851-856)

正常妊娠過程中，受精卵于第5天(D5)末或D6初，以胚泡的形式進(jìn)入子宮內(nèi)膜，此時(shí)的胚泡相當(dāng)于體外受精卵培養(yǎng)至D5或D6的囊胚。囊胚移植可以提高子宮與胚胎的同步性，在培養(yǎng)過程中使胚胎進(jìn)行自我選擇，因此可以減少移植數(shù)目，降低多胎妊娠率，增加活產(chǎn)率[1]。囊胚的形成受多種因素的影響，如女方年齡、卵裂期細(xì)胞形態(tài)[2]、培養(yǎng)條件[3]等。本研究通過比較卵裂期不同質(zhì)量的胚胎進(jìn)行囊胚培養(yǎng)后的囊胚形成率，分析卵裂期胚胎形成囊胚的發(fā)育潛能。

資料與方法

一、研究對象

收集2016年3～6月在我院生殖中心行常規(guī)體外受精/卵胞漿內(nèi)單精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治療的所有患者。

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)首次IVF/ICSI-ET治療周期；(2)新鮮周期除去移植、冷凍的優(yōu)質(zhì)胚胎尚有剩余胚胎進(jìn)行囊胚培養(yǎng)。經(jīng)患者知情同意后將剩余胚胎轉(zhuǎn)囊胚培養(yǎng)，繼續(xù)觀察并記錄囊胚形成情況，有囊胚形成時(shí)根據(jù)形成囊胚的質(zhì)量選擇凍存或丟棄。

共納入949個(gè)有剩余囊胚培養(yǎng)的治療周期，根據(jù)D3轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)的胚胎質(zhì)量分為優(yōu)質(zhì)組(507個(gè)周期)和非優(yōu)質(zhì)組(442個(gè)周期)。

二、治療方法回顧

1.促排卵治療方案及受精方式：使用本中心常規(guī)促排卵方案[4]。陰道B超監(jiān)測到3個(gè)或以上直徑≥18 mm卵泡時(shí)，肌肉注射5 000 U～10 000 U HCG(雪蘭諾，瑞士)，36 h后在陰道B超監(jiān)測下采卵。根據(jù)男方精子質(zhì)量決定IVF或ICSI受精方式。

2.胚胎質(zhì)量評估及移植：根據(jù)胚胎形態(tài)學(xué)評估D3胚胎質(zhì)量：胚胎碎片率≤20%定義為B級，>20%定義為C級。優(yōu)質(zhì)胚胎定義為包含6個(gè)或以上均勻一致的卵裂球，且胚胎碎片率<20%者(即≥6B)；其余為非優(yōu)質(zhì)胚胎，包括包含4個(gè)或5個(gè)大小不一的卵裂球，且胚胎碎片率>20%的胚胎(即4B～5B)。根據(jù)患者年齡、內(nèi)膜情況以及胚胎質(zhì)量決定是否行新鮮胚胎移植，移植胚胎數(shù)目一般為2～3個(gè)。行鮮胚移植的患者移植后肌注黃體酮針劑行黃體支持，并口服戊酸雌二醇。移植后12 d查血β-HCG>10 U/L者，于2周后陰道B超監(jiān)測到孕囊確定為臨床妊娠。

3.囊胚培養(yǎng)、分級：經(jīng)患者知情同意后，將除外移植、凍存的卵裂期胚胎于Quinns AdvantageTM(SAGE，美國)進(jìn)行囊胚序貫培養(yǎng)至D5/D6，觀察并記錄囊胚形成情況。

本中心囊胚評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[5]：囊胚發(fā)育分I～VI期，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分為A～C級，滋養(yǎng)層細(xì)胞分為A～C級。將D5和D6評分>ⅢCC定義為可利用囊胚，≥ⅢBB定義為優(yōu)質(zhì)囊胚。

三、評價(jià)指標(biāo)

根據(jù)轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)的剩余D3胚胎質(zhì)量分為優(yōu)質(zhì)組(≥6B)和非優(yōu)質(zhì)組(4B～5B)，收集分析兩組患者年齡、不育類型、不育年限、內(nèi)膜厚度、不孕原因、采卵數(shù)、D1原核(PN)數(shù)、D3胚胎碎片率、D3胚胎對稱性、轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)的胚胎數(shù)及形成的囊胚數(shù)。

判斷標(biāo)準(zhǔn)、計(jì)算方法：囊胚形成率=形成的囊胚數(shù)/轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)的胚胎數(shù)；可利用囊胚形成率=可利用囊胚數(shù)/轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)的胚胎數(shù)；優(yōu)質(zhì)囊胚形成率=優(yōu)質(zhì)囊胚數(shù)/轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)的胚胎數(shù)。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、兩組患者基本資料

按轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)的剩余D3胚胎質(zhì)量分為優(yōu)質(zhì)組和非優(yōu)質(zhì)組。優(yōu)質(zhì)組包含507個(gè)周期，2 896個(gè)胚胎轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)；非優(yōu)質(zhì)組包含442個(gè)周期，1 110個(gè)胚胎轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)。

優(yōu)質(zhì)組與非優(yōu)質(zhì)組女方年齡、不育類型、不育年限、獲卵數(shù)、內(nèi)膜厚度比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；不育原因包括男性因素、女性因素及不明原因的不育，兩組間不育原因構(gòu)成比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)(表1)。

表1 兩組患者基本資料 [(-±s)，n (%)]

注：*不育原因有重疊的分別計(jì)數(shù)

二、兩組患者D3胚胎實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

兩組間D1 PN構(gòu)成比、D3碎片率構(gòu)成比及胚胎不對稱率比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001)，優(yōu)質(zhì)組0PN構(gòu)成比(17.89%)顯著高于非優(yōu)質(zhì)組(9.73%)(P<0.001)；優(yōu)質(zhì)組碎片率≤10%構(gòu)成比(21.69%)顯著高于非優(yōu)質(zhì)組(9.73%)，而碎片率>20%構(gòu)成比(8.87%)顯著低于非優(yōu)質(zhì)組(34.59)(P<0.001)；優(yōu)質(zhì)組胚胎不對稱率(28.28%)顯著高于非優(yōu)質(zhì)組(14.95%)(P<0.001)(表2)。

表2 兩組患者D3胚胎實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 [n (%)]

注：與優(yōu)質(zhì)組相比，*P<0.001

三、兩組胚胎的囊胚形成情況

優(yōu)質(zhì)組共2 896個(gè)胚胎轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)。囊胚形成率64.33%(1 863/2 896)，其中D5形成55.93%，D6形成44.07%；可利用囊胚形成率51.76%(1 499/2 896)，其中D5形成65.31%，D6形成34.69%；優(yōu)質(zhì)囊胚形成率25.93%(751/2 896)，其中D5形成80.29%，D6形成19.71%。

非優(yōu)質(zhì)組共1 110個(gè)胚胎轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)。囊胚形成率31.44%(349/1 110)，其中D5形成26.36%，D6形成73.64%；可利用囊胚形成率20.36%(226/1 110)，其中D5形成32.74%，D6形成67.26%；優(yōu)質(zhì)囊胚形成率7.03%(78/1 110)，其中D5形成48.72%，D6形成51.28%。

優(yōu)質(zhì)組的囊胚形成率、可利用囊胚形成率、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均顯著高于非優(yōu)質(zhì)組(P<0.001)，且D5、D6形成率的構(gòu)成比均有顯著差異(P<0.001)，即優(yōu)質(zhì)組趨于D5形成囊胚、可利用囊胚及優(yōu)質(zhì)囊胚，而非優(yōu)質(zhì)組趨于D6形成(表3)。

表3 兩組胚胎的囊胚形成情況 [n (%)]

注：與非優(yōu)質(zhì)組相比，*P<0.001

四、兩組囊胚形成的年齡影響

將優(yōu)質(zhì)組與非優(yōu)質(zhì)組按女方年齡各分兩組：≤35歲組、>35歲組。優(yōu)質(zhì)組中≤35歲組與>35歲組相比，囊胚形成率、可利用囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。非優(yōu)質(zhì)組中兩個(gè)年齡組間的囊胚形成率、可利用囊胚形成率、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。優(yōu)質(zhì)組與非優(yōu)質(zhì)組相比，同一年齡組間囊胚形成率、可利用囊胚形成率、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均有顯著差異(P<0.05)(表4)。

表4 兩組囊胚形成的年齡影響 [n (%)]

注：與優(yōu)質(zhì)組年齡>35歲者比較，*P<0.05；與優(yōu)質(zhì)組同年齡組比較，#P<0.05

五、胚胎不對稱性對囊胚形成的影響

將優(yōu)質(zhì)組與非優(yōu)質(zhì)組按D3胚胎對稱與否各分兩組：A組(胚胎對稱)、B組(胚胎不對稱)。優(yōu)質(zhì)組中A組與B組比較，囊胚形成率、可利用囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001)。非優(yōu)質(zhì)組中兩亞組間的囊胚形成率、可利用囊胚形成率、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)(表5)。

六、兩組患者臨床結(jié)局

優(yōu)質(zhì)組507個(gè)周期中，共283個(gè)移植周期，隨訪丟失8個(gè)，臨床妊娠率49.45%(136/275)，生化妊娠率6.55%，異位妊娠率4.54%，早期流產(chǎn)率7.14%；非優(yōu)質(zhì)組442個(gè)周期中，共235個(gè)移植周期，隨訪丟失7個(gè)，臨床妊娠率45.61%(104/228)，生化妊娠率7.02%，異位妊娠率3.33%，早期流產(chǎn)率9.17%。兩組臨床妊娠率、生化妊娠率、異位妊娠率、早期流產(chǎn)率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)(表6)。

對于鮮胚移植未孕者，由于患者個(gè)體差異，其凍胚移植情況及臨床結(jié)局仍在隨訪中。

表5 胚胎不對稱性對囊胚形成的影響 [n (%)]

注：與優(yōu)質(zhì)組B組比較，*P<0.001

表6 兩組患者的臨床結(jié)局比較 [n (%)]

討 論

囊胚形成受多種因素的影響。隨著女性年齡的增高，卵母細(xì)胞與胚胎發(fā)生染色體異常的概率增大[6]。胚胎染色體異常是妊娠失敗的主要原因[7]，研究發(fā)現(xiàn)許多評分較高的卵裂期胚胎是非整倍體，而整倍體胚胎可表現(xiàn)出較差的形態(tài)[8]，因此，囊胚培養(yǎng)可使胚胎進(jìn)一步自我選擇，從而提高著床率[9]。本研究納入了IVF/ICSI-ET周期中有剩余胚胎繼續(xù)囊胚培養(yǎng)的患者，按照轉(zhuǎn)囊胚培養(yǎng)的D3胚胎質(zhì)量分為優(yōu)質(zhì)組(≥6B)和非優(yōu)質(zhì)組(4B～5B)，兩組患者年齡、不育年限、采卵數(shù)、內(nèi)膜厚度、不育類型、不育原因等均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。而兩組剩余胚胎繼續(xù)培養(yǎng)的囊胚形成差異主要與D1 PN數(shù)、卵裂期細(xì)胞數(shù)、碎片率及胚胎對稱性相關(guān)。

本研究顯示，卵裂期非優(yōu)質(zhì)胚胎、優(yōu)質(zhì)胚胎繼續(xù)培養(yǎng)的囊胚形成率、可利用囊胚形成率、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。這說明隨著卵裂速度增加，囊胚形成率、可利用囊胚形成率、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率將增高。且優(yōu)質(zhì)組胚胎趨于D5形成囊胚，非優(yōu)質(zhì)胚胎趨于D6形成囊胚，說明發(fā)育速度快的胚胎活力更高，其發(fā)育成囊胚、優(yōu)質(zhì)囊胚的潛能更大。以往研究表明，D3胚胎7～9個(gè)細(xì)胞時(shí)，囊胚形成率最高，這說明卵裂速度過慢或過快都會對囊胚形成產(chǎn)生影響[10]。本研究主要比較卵裂速度增加對囊胚形成率的影響，在以后的研究中可以通過大樣本分析，比較本中心繼續(xù)囊胚培養(yǎng)中不同的卵裂速度對囊胚形成的影響，為囊胚形成的預(yù)測提供依據(jù)，為患者提供最佳的個(gè)體化治療方案。

有學(xué)者應(yīng)用延時(shí)拍攝技術(shù)發(fā)現(xiàn)胚胎碎片最早從第一次減數(shù)分裂開始產(chǎn)生[11]，且處于動(dòng)態(tài)變化中。碎片的形成可導(dǎo)致染色體異常，影響囊胚的形成[12]。研究表明，移除碎片可以明顯降低Ⅳ期胚胎的凋亡指數(shù)，有助于優(yōu)質(zhì)囊胚的形成[13]。本研究中非優(yōu)質(zhì)組胚胎碎片率較高，并影響囊胚形成。

D3卵裂期胚胎通常用細(xì)胞數(shù)目、碎片及細(xì)胞對稱性進(jìn)行評分。Magdalena[14]綜合分析了以往對小鼠胚胎分列模式的研究，發(fā)現(xiàn)在小鼠胚胎正常發(fā)育的8細(xì)胞階段，卵裂球細(xì)胞骨架和細(xì)胞表面的成分重排，對稱的細(xì)胞發(fā)生極化，出現(xiàn)頂部和底部，隨后16細(xì)胞的桑椹胚發(fā)生不對稱分裂使細(xì)胞分別發(fā)育成內(nèi)胚層和外胚層，形成囊胚。本研究中優(yōu)質(zhì)組不對稱胚胎的囊胚形成率、可利用囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均明顯低于對稱胚胎(P<0.05)，我們推測D3胚胎不對稱性的發(fā)生可能影響卵裂球細(xì)胞骨架的變化趨勢和極化，從而影響囊胚的形成；而非優(yōu)質(zhì)組不對稱胚胎和對稱胚胎的囊胚形成率、可利用囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，其原因可能是胚胎發(fā)育速度及碎片的產(chǎn)生成為影響囊胚形成的主要因素。

35歲被認(rèn)為是女性生育力的轉(zhuǎn)折點(diǎn)，隨著年齡增加，卵巢卵母細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量都逐漸下降[15]。本研究中，優(yōu)質(zhì)組年齡≤35歲的患者周期中，囊胚形成率、可利用囊胚形成率以及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率略高于年齡>35歲的患者；而非優(yōu)質(zhì)組年齡>35歲的患者周期中，囊胚形成率、優(yōu)質(zhì)囊胚形成率略高于年齡≤35歲的患者，雖然無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，仍提示在同一年齡組中，優(yōu)質(zhì)組的囊胚形成率、可利用囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均高于非優(yōu)質(zhì)組。但年齡>35歲的患者轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)的胚胎較少，可能影響囊胚形成結(jié)果的比較。

胚胎的卵裂速度及囊胚發(fā)育的速度可預(yù)測胚胎的著床能力，發(fā)育越慢，著床率越低[16-18]。本研究中兩組患者的臨床結(jié)局沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，分析原因可能與優(yōu)質(zhì)組患者一樣，非優(yōu)質(zhì)組患者在當(dāng)周期行胚胎移植時(shí)，優(yōu)先選擇優(yōu)質(zhì)胚胎，剩余非優(yōu)質(zhì)胚胎才轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)。

本研究存在一定局限性。優(yōu)質(zhì)組與非優(yōu)質(zhì)組轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)的胚胎數(shù)存在差異，這可能影響囊胚形成的比例。綜上所述，非優(yōu)質(zhì)胚胎仍有發(fā)育成囊胚、可利用囊胚及優(yōu)質(zhì)囊胚的潛能，但其潛能低于優(yōu)質(zhì)胚胎。本研究排除年齡、不育年限、采卵數(shù)、內(nèi)膜厚度、不育類型、不育原因及促排卵方案的差異，分析了卵裂期細(xì)胞數(shù)、碎片率及胚胎對稱性對囊胚形成的影響，結(jié)果顯示卵裂期胚胎細(xì)胞數(shù)目、碎片率及胚胎對稱性影響可利用囊胚及優(yōu)質(zhì)囊胚的形成率。對于沒有優(yōu)質(zhì)胚胎或優(yōu)質(zhì)胚胎少的患者，可考慮選擇囊胚培養(yǎng)，以期獲得較好的臨床結(jié)局。

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[編輯：羅宏志]

AnalysisofinfluencingfactorsforformingclassIVaboveembryosonDay3

YANNa-na，YANGJing*，XUWang-ming，LONGWen，XIEQing-zhen，SUHong，LIFeng-he，LUOJin，QIQian-rong，YINTai-lang

ReproductiveMedicalCenter，RenminHospitalofWuhanUniversity，WuHan430061

Objective： To analyze the factors affecting the formation of class 4B above embryos on Day 3.

Methods： The clinical data and the outcome of 949 IVF/ICSI-ET cycles in which the remaining embryos continued to be cultured after transferring/freezing Day 3 embryo were analyzed.The cycles were divided into two groups：top quality embryo (≥6B) group (507 cycles) and non-top quality embryo (4B-5B) group (442 cycles) according to the quality of Day3 embryos.The blastulation rate，available blastulation rate，high quality blastulation rate and other clinical and lab factors were compared between the two groups.

Results： There were no significant differences of clinical data and pregnancy outcomes between the two groups (P>0.05).The blastulation rate (31.44% vs.64.33%)，available blastulation rate (20.36% vs.51.76%)，high quality blastulation rate (7.03% vs.25.93%) in the non-top quality embryo group was significantly lower than that of the top quality embryo group (P<0.001).The rate of blastulation on Day 5 in top quality embryo group (55.93% vs.26.36%) was significantly higher than that in non-top quality embryo group (P<0.05).The constituent ratio of Day1 0PN (17.89% vs.9.73%)，fragment≤10% (21.69% vs.9.73%) and embryo asymmetry (28.28% vs.14.95%) in top quality embryo group were significantly higher than that of non-top quality embryo group (P<0.001).And the constituent ratio of D1 2PN (83.87% vs.77.31%)，fragment>20% (34.59% vs.8.87%) in non-top quality embryo group were significantly higher than that in top quality embryo group (P<0.001).In the top quality embryo group，the blastulation rate，available blastulation rate，and high quality blastulation rate in ≤35 years group were significantly higher than those in >35 years group (P<0.001)，but there were no significant differences in the non-top quality embryo group (P>0.05).In the top quality embryo group，the rate of blastulation (68.03% vs.54.95%)，available blastulation (55.42% vs.42.49%)，high quality blastulation (28.98% vs.18.19%) in symmetric embryo group was significantly higher than that of asymmetric embryo group (P<0.001).

Conclusions： Different quality D3 embryos have different developmental abilities.Female age，number of D1 PN，D3 fragment rate and embryo symmetry affect the available blastulation rate and high quality blastulation rate.The velocity of blastulation in top quality embryo group (Day 5) was faster than that in non-top quality embryo group (Day 6).

Day3 embryo； Blastulation/blastocyst formation； High quality blastulation； Impact factors

10.3969/j.issn.1004-3845.2017.09.001

2017-01-12；

2017-04-04

國家自然科學(xué)基金(81370767，81401276，81571513)；湖北省衛(wèi)生計(jì)生委基金項(xiàng)目(WJ2015MA006，WJ2015Q017)

兗娜娜，女，河南周口人，碩士，生殖醫(yī)學(xué)專業(yè).(*

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