酵母菌高溫發(fā)酵用種子培養(yǎng)基對比與篩選試驗

王方方，杜風(fēng)光，劉 鉞，徐靈鶴，姜 超，馬煥新，鄭 彬，張彩瑩

(1.河南天冠企業(yè)集團(tuán)有限公司，河南南陽473000； 2.南陽師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，河南南陽473000)

酵母菌高溫發(fā)酵用種子培養(yǎng)基對比與篩選試驗

王方方1，杜風(fēng)光1，劉 鉞1，徐靈鶴1，姜 超1，馬煥新1，鄭 彬1，張彩瑩2

(1.河南天冠企業(yè)集團(tuán)有限公司，河南南陽473000； 2.南陽師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，河南南陽473000)

主要研究了酵母菌種子培養(yǎng)基的替代問題。通過將玉米醪液、玉米濾液與傳統(tǒng)麥芽汁培養(yǎng)基培養(yǎng)的酵母菌種進(jìn)行38℃發(fā)酵對比試驗，發(fā)酵不同濃度梯度木薯、玉米發(fā)酵醪，發(fā)酵液酒度差異顯著，如在玉米∶水=1∶2時，玉米原料種子培養(yǎng)基培養(yǎng)的酵母菌進(jìn)行高溫發(fā)酵的發(fā)酵液酒精度較麥芽汁高1%vol左右；更換酵母菌菌種進(jìn)行發(fā)酵對比試驗，發(fā)酵液酒精度相當(dāng)或者玉米種子培養(yǎng)基略占優(yōu)勢；從原料價格成本進(jìn)行比較，玉米培養(yǎng)基的價格顯著低于麥芽汁培養(yǎng)基。

酵母菌； 麥芽汁； 玉米醪液； 玉米濾液； 高溫發(fā)酵

在當(dāng)前石油問題日益嚴(yán)峻及大氣污染日趨嚴(yán)重的形勢下，乙醇作為可持續(xù)的清潔燃料倍受青睞。發(fā)酵法生產(chǎn)乙醇技術(shù)逐漸成熟，生產(chǎn)工藝更是向著無污染、零排放的環(huán)保目標(biāo)不斷改進(jìn)[1]。酒精屬于綠色產(chǎn)品，酒精的生產(chǎn)工藝也正在向著綠色、環(huán)保、節(jié)能的方向邁進(jìn)。酵母菌的高溫發(fā)酵不僅能夠解決夏季部分地區(qū)因為溫度太高導(dǎo)致酵母菌無法正常發(fā)酵的問題，還可以節(jié)約大量冷卻水的使用[2-4]。目前，人們正采用不同的手段，從不同的角度來改進(jìn)酒精酵母的生產(chǎn)性能，并取得了一定的進(jìn)展[5-6]。

菌種種子培養(yǎng)基的選用是菌種能夠正常生長和良好發(fā)酵的前提。培養(yǎng)基的選用原則是在滿足菌體的生長和發(fā)酵需求的基礎(chǔ)上，力求經(jīng)濟(jì)節(jié)約，也是微生物發(fā)酵進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)時需要進(jìn)行考量的很重要的一個方面。在本研究中將選用替代培養(yǎng)基與傳統(tǒng)培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵對比，在發(fā)酵結(jié)果和經(jīng)濟(jì)性方面進(jìn)行評估，擇優(yōu)選擇。

1 材料與方法

1.1 材料

木薯粉：取天冠乙醇公司生產(chǎn)車間木薯塊，加工粉碎；玉米粉：取自天冠乙醇公司粉碎車間。

菌種：所用菌種為酵母菌1308經(jīng)自然選育所得，編號為Tg1308，保存于車用生物燃料技術(shù)國家重點實驗室菌種選育與保藏中心。

1.2 實驗方法

1.2.1 種子培養(yǎng)基制備方法

14°Bx麥芽汁培養(yǎng)基：將大米和大麥芽按1∶3質(zhì)量比混勻，大米首先蒸熟，然后在60～65℃條件下糖化4～6 h，過濾，稀釋至所需濃度；自然pH值。

玉米醪液培養(yǎng)基：將玉米和水按1∶2的比例混合后，加入液化酶，升溫至90℃，保溫2 h，分裝。

玉米濾液培養(yǎng)基：將玉米醪液進(jìn)行過濾，所得濾液進(jìn)行分裝，滅菌。

1.2.2 發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法

玉米或木薯與自來水按照一定的比例進(jìn)行混合，調(diào)節(jié)其pH5.50左右，按照20 U/g干料量加入液化酶（酶活為30000 U/mL），將料液以86℃液化1 h，液化完畢立即進(jìn)行冷卻并補足液化期間揮發(fā)水分。

1.2.3 種子轉(zhuǎn)接及擴(kuò)培方法

液體試管接種：從Tg斜面上挑取1環(huán)接入不同的培養(yǎng)基中，以30℃培養(yǎng)16 h。

小三角瓶接種及培養(yǎng)：將液體試管搖勻后接入小三角瓶中，以30℃、160 r/min培養(yǎng)。

發(fā)酵培養(yǎng)基接種：發(fā)酵培養(yǎng)基按照干料量的2.8‰、1.3‰添加尿素、磷酸氫二鉀和硫酸鎂，120 U/g干料糖化酶（酶活為100000 U/mL），按照30%接種量進(jìn)行接種，搖勻后置于38℃下發(fā)酵，定時稱重，以失重小于0.2 g/h作為判斷發(fā)酵結(jié)束的標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.4 測定方法

1.2.4.1 細(xì)胞數(shù)測定[7]

發(fā)酵液稀釋至合適梯度，搖勻后通過細(xì)胞計數(shù)板16×25進(jìn)行計數(shù)。計數(shù)時統(tǒng)計計數(shù)板四角和中央的中格（共5個中方格）內(nèi)酵母細(xì)胞的總細(xì)胞數(shù)，求和后通過公式（1）計算1 mL發(fā)酵液中的總細(xì)胞數(shù)：

注：5個中方格的總細(xì)胞數(shù)為A，稀釋倍數(shù)為B。

1.2.4.2 種子液糖含量的測定

培養(yǎng)基中可供異養(yǎng)小球藻利用的糖主要為麥芽糖和葡萄糖，糖的測定通過高效液相色譜法進(jìn)行。取適量種子液，3000 r/min離心，取上清液進(jìn)行測定。分離柱為AminexHPX-87H，L×HD為300× 7.8，流動相為0.003 mol/L稀H2SO4溶液，流速為0.5 mL/min，葡萄糖保留時間為10.34 min。進(jìn)樣量為5μL，柱溫65℃。

1.2.4.3 發(fā)酵液酒精度測定方法[8]

準(zhǔn)確量取發(fā)酵醪100 mL，注入1000 mL平底燒瓶內(nèi)，加水120 mL，將平底燒瓶和冷凝器連接好，注意勿漏氣。置電爐上加熱蒸餾，餾出液收集于100 mL量筒內(nèi)，當(dāng)餾出液達(dá)到100 mL刻度時，取下?lián)u勻，以酒度計與溫度計同時測其酒精度和溫度，根據(jù)酒精度和溫度換算表，換算成20℃時的酒精度。

2 結(jié)果與討論

2.1 傳統(tǒng)培養(yǎng)基與新培養(yǎng)基種子培養(yǎng)對比試驗

為了考察傳統(tǒng)麥芽汁培養(yǎng)基與玉米醪液培養(yǎng)基在培養(yǎng)酵母菌后種子液中糖分的消耗情況及酵母菌細(xì)胞數(shù)，進(jìn)行了對比試驗。從酵母斜面上各挑1環(huán)接入不同的10 mL液體試管種子培養(yǎng)基中，以30℃培養(yǎng)16 h，轉(zhuǎn)接入100 mL/250 mL小三角瓶培養(yǎng)基中，試管和小三角瓶種子液均進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)，結(jié)果見表1；試管種子液離心后上清液進(jìn)行液相色譜分析，結(jié)果見表2。

表1 液體試管與小三角瓶細(xì)胞數(shù)計數(shù)情況(108cfu/mL)

從不同種子培養(yǎng)基種子液中細(xì)胞數(shù)可以看出，經(jīng)過液體試管培養(yǎng)后細(xì)胞數(shù)差別不大，而經(jīng)小三角瓶轉(zhuǎn)接培養(yǎng)后傳統(tǒng)麥芽汁培養(yǎng)基中細(xì)胞數(shù)明顯高于玉米粉醪液和濾液中酵母細(xì)胞數(shù)。對于發(fā)酵而言，接入發(fā)酵培養(yǎng)基中細(xì)胞數(shù)并非越多越好，因為發(fā)酵培養(yǎng)基的作用是為菌體的生長和目標(biāo)產(chǎn)物的合成提供營養(yǎng)，若接種量過多，造成過多的營養(yǎng)用于菌體的生長而用于代謝產(chǎn)物合成的營養(yǎng)較少；若接種量偏少，造成培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分利用不徹底，故接入的菌體數(shù)量不宜太少或過多。

表2 試管接種前后培養(yǎng)基中各成分含量變化 (g/100 mL)

由表2可以看出，種子培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的含量變化主要體現(xiàn)在葡萄糖的消耗上，由于培養(yǎng)基中葡萄糖含量充足，因而酵母菌沒有消耗麥芽糖，從糖的消耗情況和種子液中酵母細(xì)胞數(shù)進(jìn)行比較，耗糖多者生成的酵母細(xì)胞數(shù)亦多。

2.2 不同種子培養(yǎng)基發(fā)酵對比試驗

僅通過比較種子液中酵母菌細(xì)胞數(shù)和糖耗情況無法確定培養(yǎng)基的優(yōu)劣，還需從不同種子培養(yǎng)基培養(yǎng)的酵母菌在產(chǎn)物合成方面的差異進(jìn)行對比，即發(fā)酵結(jié)果的對比。按照木薯與水質(zhì)量比1∶2進(jìn)行配料、液化，接種后以38℃發(fā)酵，發(fā)酵結(jié)束后對發(fā)酵液進(jìn)行理化指標(biāo)分析，結(jié)果見表3。

表3 不同種子培養(yǎng)基發(fā)酵結(jié)果對比

從表3可以看出，在接種量、發(fā)酵培養(yǎng)基、發(fā)酵條件完全相同的條件下，不同種子培養(yǎng)基接種發(fā)酵后結(jié)果差別很大，在料水比1∶2的配料濃度下，發(fā)酵液酒精度可相差0.8%vol左右，說明玉米培養(yǎng)基中存在提高酵母菌酒精轉(zhuǎn)化率的物質(zhì)。

2.3 不同配料濃度下種子培養(yǎng)基發(fā)酵對比

由于2.2所述試驗為初步嘗試，在初步發(fā)現(xiàn)不同種子培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌進(jìn)行高溫發(fā)酵效果有了顯著差異后，為了獲得更為精準(zhǔn)的試驗數(shù)據(jù)，選用粒度更細(xì)、質(zhì)量更好的木薯粉進(jìn)行發(fā)酵試驗，希望在更大程度上避免因為原料的不均勻性導(dǎo)致的數(shù)據(jù)誤差。為了考察種子培養(yǎng)基對不同發(fā)酵醪濃度的發(fā)酵效果，分別配制了料水比為1∶1.8、1∶1.9和1∶2.0的木薯液化醪，按干料比例加入相應(yīng)量的無機(jī)鹽后，置于38℃下靜置發(fā)酵64 h，發(fā)酵結(jié)果見表4。

表4 種子培養(yǎng)基對不同濃度發(fā)酵醪的發(fā)酵效果

從表4可看出，更換新的木薯原料后，菌種對于料水比1∶2.0的發(fā)酵培養(yǎng)基與之前所用原料的發(fā)酵效果（表3）進(jìn)行對比發(fā)現(xiàn)，酒精度均提升了1%vol；另從對較高濃度液化醪的發(fā)酵效果看，菌種在38℃條件下的發(fā)酵還有提升的空間，從殘總糖數(shù)據(jù)看，菌種對料水比1∶1.9的配料濃度可以在38℃的溫度條件下發(fā)酵徹底，考慮到通過料水比表達(dá)發(fā)酵能力的不準(zhǔn)確性，折算成更為精確的淀粉含量，通過測定得出，木薯粉中淀粉含量為72.40%，則液化醪中的淀粉含量為24.13%，即在38℃條件下酵母菌可以徹底發(fā)酵淀粉含量為24.13%的液化醪，得出此結(jié)論的前提是所用種子培養(yǎng)基為玉米培養(yǎng)基。

2.4 不同種子培養(yǎng)基對玉米液化醪的發(fā)酵效果

考慮所用原料的差異是否會對發(fā)酵產(chǎn)生一定的影響，使用玉米液化醪進(jìn)行試驗，以檢驗在不同的液化培養(yǎng)基中酵母的發(fā)酵效果。試驗仍采用不同的濃度梯度，按照料水比1∶1.8、1∶1.9和1∶2.0的配比進(jìn)行液化、接種，置于搖床中以38℃靜置發(fā)酵48 h，發(fā)酵結(jié)果見表5。

表5 種子培養(yǎng)基在不同濃度玉米醪中發(fā)酵結(jié)果

由表5可以看出，玉米種子培養(yǎng)基在玉米液化醪中的發(fā)酵結(jié)果優(yōu)于麥芽汁種子培養(yǎng)基，在料水比1∶2.0的液化醪中發(fā)酵，發(fā)酵液酒精度可提高1%vol，料水比濃度升高至1∶1.8，發(fā)酵液酒精度也可提高0.6%vol，而且是在糖耗相當(dāng)?shù)那疤嵯?。這說明玉米培養(yǎng)基是提高發(fā)酵液酒精度的關(guān)鍵因素。

2.5 更換酵母菌種進(jìn)行發(fā)酵對比試驗

為了考察種子培養(yǎng)基對酵母菌種的適用性，選擇生產(chǎn)常用的MZ和1308菌株進(jìn)行發(fā)酵試驗，按照料水比1∶2配制木薯料液進(jìn)行液化、接種后以38℃發(fā)酵，發(fā)酵結(jié)果見表6。

表6 MZ和1308對種子培養(yǎng)基的適用性試驗

通過MZ和1308菌種的發(fā)酵結(jié)果可以看出，1308在麥芽汁培養(yǎng)基培養(yǎng)后，接種到發(fā)酵醪后可將其中淀粉糖徹底發(fā)酵，而接種玉米培養(yǎng)基后發(fā)酵液中殘還原糖和殘總糖稍高，但是所得發(fā)酵液酒精度略高于麥芽汁培養(yǎng)基；MZ的發(fā)酵結(jié)果與1308相似，只是玉米培養(yǎng)基接種發(fā)酵醪后所得發(fā)酵液酒精度顯著高于麥芽汁培養(yǎng)基的發(fā)酵結(jié)果，推測其原因可能是MZ較1308菌株具有更強的濃醪發(fā)酵能力。由上可以說明，玉米培養(yǎng)基對酵母菌株具有較好的適用性。

2.6 酒精度提升原因探究試驗

為了查找玉米種子培養(yǎng)基和麥芽汁種子培養(yǎng)基對相同液化醪發(fā)酵結(jié)果存在的差異及原因，需從接入菌種的兩個方面著手：一是比較種子液中各種成分的含量，確定是否是因為營養(yǎng)成分的增加導(dǎo)致的發(fā)酵差距；二是比較接入的酵母菌細(xì)胞的差異，查找是否因為種子培養(yǎng)基的不同導(dǎo)致培養(yǎng)出的酵母細(xì)胞的發(fā)酵性能存在差別。

按照料水比1∶2.0的配比將木薯和玉米分別進(jìn)行液化，以270 g/500 mL三角瓶進(jìn)行分裝，依據(jù)比例加入尿素和無機(jī)鹽、糖化酶等。接種時先稱取30 g菌液，離心后上清液進(jìn)行液相色譜分析，菌泥加無菌水洗滌后再次離心，棄上清液，菌泥用無菌水轉(zhuǎn)移至發(fā)酵瓶中，轉(zhuǎn)移量為30.0 g。隨后以38℃靜置發(fā)酵，為了保證試驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，每組接種6瓶進(jìn)行平行性發(fā)酵，結(jié)果見表7和表8。

表7 使用木薯培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵的結(jié)果

從表7可以看出，將種子液上清液離心并將菌泥進(jìn)行洗滌后接種，進(jìn)行高溫發(fā)酵。麥芽汁培養(yǎng)基與玉米濾液的發(fā)酵結(jié)果一致，而玉米醪液的酒精度和淀粉利用率仍較高，推測其原因應(yīng)該是玉米醪液中含有大量顆粒狀的物質(zhì)，經(jīng)離心后和菌泥共同沉淀，被接入至發(fā)酵培養(yǎng)基中，在接種的同時等同于向培養(yǎng)基中接入了一定量的培養(yǎng)基，或者說是增加了發(fā)酵醪的濃度。該濃度處于菌種發(fā)酵能力范圍內(nèi)，因而發(fā)酵液可以獲得較高的酒度。

為了了解接種方式對玉米醪培養(yǎng)基發(fā)酵的影響，按照相同的操作方法對玉米發(fā)酵醪進(jìn)行試驗，試驗結(jié)果見表8。

表8 使用玉米培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵的結(jié)果

從表8可以看出，使用玉米發(fā)酵醪進(jìn)行發(fā)酵的結(jié)果與木薯的發(fā)酵結(jié)果比較相似，推測是由于其中營養(yǎng)成分含量的差異導(dǎo)致發(fā)酵結(jié)果的差異，為了更進(jìn)一步分析其中的原因，對離心后種子液的上清液進(jìn)行體積統(tǒng)計（以30 g種子液為準(zhǔn)）和液相色譜分析，其中麥芽汁和濾液的體積為29 mL，而醪液的體積只有12 mL，液相分析結(jié)果見表9。

表9 三角瓶種子上清液液相分析結(jié)果 (g/100 mL)

比較上清液中的營養(yǎng)成分，主要比較其中麥芽糖和葡萄糖含量?？梢钥闯觯惨汉蜑V液中葡萄糖的含量較高，而麥芽汁中葡萄糖含量很低，麥芽糖含量很高，從一個麥芽糖分子可轉(zhuǎn)化為兩個葡萄糖分子的角度考慮，麥芽汁中糖含量并不低，為什么酵母菌接種發(fā)酵后發(fā)酵液酒精度偏低呢？是否是因為其中的麥芽糖不能較快地為酵母菌所利用？為此，在試管培養(yǎng)成熟向小三角瓶轉(zhuǎn)接時，對小三角瓶培養(yǎng)基進(jìn)行滴加2滴糖化酶的處理，以提高小三角瓶種子液中葡萄糖含量，加入糖化酶后的小三角瓶酵母種子上清液中麥芽糖含量為3.206 g/100 mL，葡萄糖含量為9.286 g/100 mL，其糖含量與玉米濾液中糖含量比較接近。接種木薯發(fā)酵醪（料水比1∶ 2），38℃搖床培養(yǎng)后發(fā)酵結(jié)果見表10。

表10 麥芽汁種子培養(yǎng)基加入糖化酶后發(fā)酵對比結(jié)果

由表10可以看出，麥芽汁搖瓶種子培養(yǎng)基加入2滴糖化酶后進(jìn)行種子培養(yǎng)和發(fā)酵，其發(fā)酵結(jié)果和沒有進(jìn)行糖化酶添加的發(fā)酵結(jié)果較接近，說明發(fā)酵液酒精度的提高原因并非是由于種子液中的營養(yǎng)物質(zhì)影響的，或者說是并非是由液相檢測到的幾種營養(yǎng)物質(zhì)所影響的。具體的原因還需進(jìn)一步研究確定。

2.7 種子培養(yǎng)基原料成本核算

玉米醪液培養(yǎng)基與麥芽汁培養(yǎng)基的制備成本進(jìn)行比較，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)是產(chǎn)生一定體積的14°Bx麥芽汁需要的大麥芽和大米的重量以及產(chǎn)生干物質(zhì)含量為30%的玉米醪所需的玉米的重量，具體結(jié)果見表11。

表11 產(chǎn)生相同體積培養(yǎng)基所需原料質(zhì)量對比

由表11可以看出，制備相同量的麥芽汁培養(yǎng)基和玉米醪培養(yǎng)基，所需原料的質(zhì)量差別較大，制備麥芽汁所需的大麥芽和大米的質(zhì)量明顯多于制備玉米醪的玉米的質(zhì)量。而從市場價格來說，大麥芽和大米的市場價格應(yīng)為玉米市場價格的2倍以上。因此，從原料成本的角度考慮，玉米培養(yǎng)基優(yōu)于麥芽汁培養(yǎng)基。

3 結(jié)論

通過以上試驗結(jié)果，可以看出，玉米培養(yǎng)基作為酵母菌傳統(tǒng)種子培養(yǎng)基的替代培養(yǎng)基，在利用其培養(yǎng)的菌種以38℃發(fā)酵時顯示出明顯的優(yōu)勢，具體如下：

（1）用不同種子培養(yǎng)基培養(yǎng)的酵母菌種接種木薯發(fā)酵培養(yǎng)基，所接木薯培養(yǎng)基配制成不同濃度梯度，發(fā)酵結(jié)束時所得發(fā)酵醪酒精度指標(biāo)進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，對于相同濃度的木薯發(fā)酵醪而言，用玉米培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌種接種后的發(fā)酵醪酒精度顯著高于麥芽汁培養(yǎng)基菌種的發(fā)酵結(jié)果，不同濃度梯度的發(fā)酵培養(yǎng)基均顯示出相同的酒精度差異；為了驗證培養(yǎng)基對原料的適用性，進(jìn)行玉米發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵對比試驗，由于玉米原料淀粉含量顯著低于木薯的淀粉含量，導(dǎo)致相同配料濃度下發(fā)酵醪酒精度較低，但是比較不同種子培養(yǎng)基接種相同濃度發(fā)酵醪的發(fā)酵結(jié)果，可以看出玉米培養(yǎng)基的發(fā)酵醪酒精度仍具有顯著優(yōu)勢。

（2）通過更換酵母菌種接種麥芽汁培養(yǎng)基和玉米培養(yǎng)基進(jìn)行高溫發(fā)酵對比試驗，可以看出玉米培養(yǎng)基所得發(fā)酵液酒精度稍高于或顯著高于麥芽汁培養(yǎng)基，這取決于所用酵母菌種的濃醪發(fā)酵能力。

（3）為了探究玉米種子培養(yǎng)基具有顯著的發(fā)酵優(yōu)勢的原因，進(jìn)行了接種方式對比試驗、種子上清液液相成分檢測以及更換酵母菌種進(jìn)行發(fā)酵對比試驗，推測酒精度提高的原因是玉米培養(yǎng)基中具有比麥芽汁培養(yǎng)基更為豐富的營養(yǎng)成分，且這些營養(yǎng)成分可為Tg菌種利用，或者說是可為具有濃醪發(fā)酵能力的酵母菌種利用。

（4）種子培養(yǎng)基成本對比：通過對比制備相同量的種子培養(yǎng)基所需的原料質(zhì)量，發(fā)現(xiàn)制備麥芽汁培養(yǎng)基所需原料量多于玉米培養(yǎng)基所需量，加之麥芽汁原料大麥芽和大米的市場價格顯著高于玉米的市場價格，說明麥芽汁的成本高于玉米。綜上所述，本文所選的麥芽汁替代培養(yǎng)基——玉米培養(yǎng)基適用于Tg酵母的高溫發(fā)酵，更確切的說是適合具有濃醪發(fā)酵能力的酵母的發(fā)酵，對于普通酵母的發(fā)酵而言，玉米培養(yǎng)基具有和麥芽汁培養(yǎng)基相同的發(fā)酵效果，因此可以作為酵母菌的一種替代種子培養(yǎng)基進(jìn)行使用。

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“大醬仁”第二屆國家品酒師資格培訓(xùn)班在仁懷舉辦

本刊訊：由中國酒業(yè)協(xié)會和貴州省質(zhì)檢院仁懷分院共同主辦的“大醬仁”第二屆國家品酒師資格考核培訓(xùn)班于2017年8月1日至8日在貴州省質(zhì)檢院仁懷分院舉辦。來自仁懷市酒類企業(yè)及河南、陜西、浙江、深圳等地的學(xué)員共153名參加了培訓(xùn)考核。中國酒業(yè)協(xié)會劉秀華副理事長出席了開班典禮，中國酒業(yè)協(xié)會培訓(xùn)部毛雪主任到場監(jiān)考并參加了結(jié)業(yè)典禮。本次培訓(xùn)考核由貴州省著名白酒專家及取得品酒師教師資格證書的教師組成的專家組組織實施。培訓(xùn)考核內(nèi)容包括理論和實操，理論培訓(xùn)內(nèi)容以中國酒業(yè)協(xié)會編寫修訂的《品酒師培訓(xùn)教材》為主，包括各種香型白酒工藝特點、酒體風(fēng)格特征、風(fēng)味成分分析等知識講座，結(jié)合貴州白酒行業(yè)的實際情況，增加了醬香輪次酒的認(rèn)識和勾調(diào)實操內(nèi)容。實操培訓(xùn)包括香型鑒別、各香型質(zhì)量差、酒度差、單體化合物鑒別等內(nèi)容。學(xué)員紛紛表示此次培訓(xùn)班內(nèi)容豐富，專家授課內(nèi)容貼近生產(chǎn)實際，課程安排充實緊湊，學(xué)員受益匪淺。（駱佳龍、小雨、螢子、曉文）

Comparison and Screening of Culture Mediums of Yeast Strains for High-Temperature Fermentation

WANG Fangfang1,DU Fengguang1,LIU Yue1,XU Linghe1，JIANG Chao1，MA Huanxin1，ZHENG Bin1and ZHANG Caiying2
(1.Tianguan Group Co.Ltd.,Nanyang,Henan 473000;2.School of Life Science and Technology, Nanyang Normal University,Nanyang,Henan 473000,China)

In this study,the substitute of culture mediums of yeast strains was explored.The fermentation contrast experiment was performed at 38℃of yeast strains cultured by corn mash,corn filtrate,and traditional wort respectively.The results suggested that there was significant difference in alcohol content fermented by yeast strains cultured by mediums of different concentration.For example, while the ratio of corn and water was 1∶2,alcohol content of fermenting broth by yeast strains cultured by corn mash was 1%vol higher than that cultured by wort.Meanwhile,contrast experiment of different yeast strains cultured by the same culture mediums was performed.The results suggested that corn mash was a better choice.Compared with wort culture mediums,the price of corn culture mediums was evidently lower.

yeast;wort;corn mash;corn filtrate;high temperature fermentation

TS262.3；TS261.1；TS261.4

A

1001-9286（2017）09-0078-06

10.13746/j.njkj.2017123

2017-05-09

王方方（1983-），女，碩士研究生，主要從事菌種的保藏與篩選工作。

優(yōu)先數(shù)字出版時間：2017-07-14；地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20170714.1000.004.html。