多效唑與矮壯素對不同彩色馬蹄蓮品種微球的誘導(dǎo)差異

羅珍珍+由翠榮+孔艷輝

摘要：以紫色、凍糕、火焰3個品種的試管苗為試材，比較多效唑（PP333）、矮壯素（CCC）對不同彩色馬蹄蓮品種微球的誘導(dǎo)差異。結(jié)果表明，低濃度PP333、CCC促進(jìn)各彩色馬蹄蓮品種微球塊莖的生長，高濃度則起抑制作用；1/2 MS+0.2 mg/L 萘乙酸（NAA）+2.0 g/L 活性炭+7.0 g/L 瓊脂+60.0 g/L 蔗糖基本培養(yǎng)基中添加不同濃度PP333、CCC時，添加PP333對紫色、火焰的誘導(dǎo)效果相對最好，最佳添加濃度分別為4.0、6.0 mg/L，添加CCC對凍糕的誘導(dǎo)效果相對最好，最佳添加濃度為8.0 mg/L；PP333、CCC對3個品種有根苗根與葉的誘導(dǎo)效果優(yōu)于無根苗。

關(guān)鍵詞：彩色馬蹄蓮；微球；誘導(dǎo)；多效唑；矮壯素

中圖分類號： S682.2+64.04+3文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號：1002-1302（2017）12-0099-04

彩色馬蹄蓮（Zantedeschia hybrida）為天南星科馬蹄蓮屬植物，近年來成為世界新興而富有發(fā)展?jié)摿Φ那蚋ɑ?，色彩艷麗，形態(tài)高雅，是觀賞價值極高的切花和盆栽植物[1-3]。目前，對彩色馬蹄蓮的組織培養(yǎng)快繁技術(shù)已有許多報道[1，4-5]。筆者采用塊莖芽作為外植體建立了彩色馬蹄蓮的離體快繁體系，也獲得大量的新品種組培苗，且在研究中發(fā)現(xiàn)，誘導(dǎo)試管塊莖可大大縮短彩色馬蹄蓮的營養(yǎng)生長時期，實(shí)現(xiàn)彩色馬蹄蓮盡早開花，且試管中誘導(dǎo)出的小塊莖比一般組培苗更易移栽成活。

目前，試管貯藏器官誘導(dǎo)成功的觀賞植物主要有百合、石蒜、小蒼蘭、番紅花、嘉蘭、大巖桐、紅花酢漿草等[6-13]，對彩色馬蹄蓮的試管成球也有一些研究，但植物調(diào)節(jié)劑對不同彩色馬蹄蓮品種微球誘導(dǎo)的差異尚未見報道。有研究表明，多效唑（PP333）、矮壯素（CCC）等植物生長調(diào)節(jié)劑在植物體內(nèi)可抑制內(nèi)源激素赤霉素（GA3）的生物合成，常用于控制園藝植物的生長[14-15]，對彩色馬蹄蓮微球誘導(dǎo)和種質(zhì)資源的長期保存有較好的效果，且不影響彩色馬蹄蓮種質(zhì)的遺傳穩(wěn)定性。本試驗(yàn)研究探討PP333、CCC對彩色馬蹄蓮試管苗微型塊莖誘導(dǎo)形成的影響，以期調(diào)控植物生長調(diào)節(jié)劑的使用，為生產(chǎn)中彩色馬蹄蓮微型塊莖質(zhì)量和產(chǎn)量的提高提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

以彩色馬蹄蓮的塊莖新生芽為外植體，在煙臺市園林管理處科研所組培室經(jīng)過約2年的離體培養(yǎng)，獲得大批量試管苗。在此基礎(chǔ)上，以紫色、凍糕、火焰3個品種為材料，選取在生根培養(yǎng)基上生長25 d左右、植株整齊一致、株高3～5 cm、具良好根系的健壯試管苗進(jìn)行微型塊莖誘導(dǎo)試驗(yàn)。

1.2試驗(yàn)方法

將0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 mg/L PP333和0、2.0、4.0、80、16.0 mg/L CCC分別添加到1/2MS+ 0.2 mg/L 萘乙酸（NAA）+2.0 g/L 活性炭+7.0 g/L 瓊脂+60.0 g/L 蔗糖的基本培養(yǎng)基中，分別以添加0 mg/L PP333和0 mg/L CCC為對照組，進(jìn)行試管苗帶根、不帶根處理，每處理10瓶，每瓶 5～6株苗；離體培養(yǎng)40 d，培養(yǎng)條件為溫度24～26 ℃，光照度 2 000～3 000 lx，光照8 h/d；統(tǒng)計(jì)微球直徑、葉片數(shù)、新生根條數(shù)等生長指標(biāo)。重復(fù)3次。培養(yǎng)基高壓滅菌前調(diào)整pH值至5.8～6.0，121 ℃滅菌25 min。

1.3統(tǒng)計(jì)分析

運(yùn)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA）；采用LSD、Duncans新復(fù)極差法等檢驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)果的差異顯著性。

2結(jié)果與分析

2.1多效唑?qū)?種彩色馬蹄蓮微球誘導(dǎo)的差異

2.1.1對微球塊莖生長的影響由圖1可見，隨著PP333使用濃度的升高，3個彩色馬蹄蓮品種的微球直徑多呈先增大后減小的趨勢；紫色品種和凍糕品種的有根苗、無根苗均在PP333濃度為4.0 mg/L時微球直徑相對最大，微球直徑分別為0.75、0.70 cm和0.70、0.70 cm，與其他濃度處理相比差異顯著（P<0.05）；火焰品種有根苗在PP333濃度為6.0 mg/L時的微球塊莖相對最大，平均直徑為0.80 cm，與其他濃度處理相比差異顯著（P<0.05），無根苗也在PP333濃度為6.0 mg/L時的微球塊莖相對最大，平均直徑為0.70 cm，但與其他濃度處理相比差異不顯著（P>0.05）。

2.1.2對葉片生長的影響由圖2可見，不同濃度PP333處理時，紫色、凍糕品種有根苗及火焰無根苗的葉片數(shù)與對照差異不顯著（P>0.05），紫色品種無根苗與對照差異顯著（P<0.05）；PP333 1.0 mg/L時的凍糕品種無根苗、火焰有根苗葉片數(shù)的分別為2.2、3.1 張，稍低于對照，與對照差異不顯著（P>0.05），其他濃度處理顯著低于對照（P<0.05）。

2.1.3對根生長的影響由圖3可見，在一定濃度范圍內(nèi)，使用不同濃度PP333可不同程度促進(jìn)紫色品種有根苗與無根苗、凍糕品種無根苗的生根，抑制凍糕品種有根苗、火焰品種有根苗與無根苗的生根；PP333為6.0 mg/L時，紫色品種有根苗的新生根條數(shù)相對最多，平均為3.4條，與對照相比差異顯著（P<0.05）。

2.2矮壯素對3種彩色馬蹄蓮微球誘導(dǎo)的差異

2.2.1對微球塊莖生長的影響由圖4可見，培養(yǎng)基中添加不同濃度CCC，低濃度CCC（0～8.0 mg/L）可促進(jìn)3個彩色馬蹄蓮微球塊莖的生長，超過一定濃度范圍（16.0 mg/L）則會抑

制微球塊莖的增大；CCC濃度為8.0 mg/L時，3個彩色馬蹄蓮微球塊莖直徑均相對最大，紫色、凍糕、火焰品種有根苗與無根苗的微球塊莖直徑為分別為0.70、0.90、0.70 cm與0.68、080、0.68 cm，紫色有根苗顯著高于其他處理（P<0.05），紫色無根苗、凍糕有根苗與無根苗顯著高于對照（P<0.05），而火焰有根苗與無根苗各處理間差異不顯著（P>0.05）。endprint

2.2.2對葉片生長的影響由圖5可見，CCC濃度為4.0 mg/L 時，紫色品種有根苗與無根苗的葉片數(shù)平均分別為1.9、1.7張，明顯低于其他處理，與對照差異不顯著（P>005）；不同濃度CCC處理可抑制凍糕品種有根苗的長葉、促進(jìn)凍糕品種無根苗的長葉，處理間差異不顯著（P>0.05）；CCC濃度為2.0 mg/L時，火焰品種有根苗的葉片數(shù)相對最多，平均為3.1張，顯著高于其他處理（P<0.05），CCC濃度為8.0 mg/L時，其葉片數(shù)相對最少，平均為1.6張，與CCC濃度為4.0 mg/L處理的差異不顯著（P>0.05），與其他處理差異顯著（P<0.05）。

2.2.3對根生長的影響由圖6可見，使用CCC處理，可明顯促進(jìn)紫色品種有根苗與無根苗、凍糕有根苗根的生長；CCC濃度為8.0 mg/L時，紫色品種有根苗的新生根相對最多，為2.4條，與其他處理差異不顯著（P>0.05）；CCC濃度為4.0 mg/L 時，凍糕品種有根苗、無根苗的新生根相對最多，分別為2.6、1.7條，凍糕品種有根苗的生根與其他處理差異不顯著（P>0.05），無根苗的生根與其他處理相比差異顯著（P<0.05）；CCC濃度為16.0 mg/L時，火焰品種有根苗、無根苗的新生根相對最多，分別3.2、2.4條，其中火焰品種無根苗的生根與除8.0 mg/L處理外的其他處理相比差異顯著（P<0.05）。

3結(jié)論與討論

彩色馬蹄蓮試管苗塊莖的形成及發(fā)育受多因素控制，其中，植物生長調(diào)節(jié)劑可促進(jìn)微球塊莖的形成[5]。張翠萍等發(fā)現(xiàn)，多效唑（PP333）與矮壯素（CCC）均對彩色馬蹄蓮微球塊莖的形成與增大有明顯的促進(jìn)作用，分別添加PP333 4.0 mg/L、CCC濃度為 8.0 mg/L時的誘導(dǎo)效果相對最好，并在適宜蔗糖濃度條件下，PP333對彩色馬蹄蓮微球誘導(dǎo)的形成作用明顯優(yōu)于CCC；PP333和CCC對彩色馬蹄蓮的根、葉生長有抑制作用， 濃度越高抑制越明顯[16]，彭峰等試驗(yàn)并未發(fā)現(xiàn)PP333對彩

色馬蹄蓮塊莖的誘導(dǎo)產(chǎn)生顯著影響[5，17]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，一定濃度的PP333與CCC都能促進(jìn)彩色馬蹄蓮微球塊莖的生長且影響顯著，PP333對紫色、火焰品種微球塊莖的誘導(dǎo)效果優(yōu)于CCC，PP333濃度分別為4.0、6.0 mg/L時，紫色、火焰品種有根苗微球塊莖的直徑相對最大，分別為0.75、0.80 cm，CCC對凍糕品種微球的誘導(dǎo)效果相對好于PP333，CCC濃度為 8.0 mg/L 時凍糕品種有根苗微球的直徑相對最大，為 0.90 cm，這可能與品種間的遺傳特性、生命特征有關(guān)；3個彩色馬蹄蓮品種的有根苗與無根苗在添加不同PP333濃度培養(yǎng)基上的生長狀況稍有不同，在CCC中的誘導(dǎo)趨勢基本一致，有根苗的微球直徑要大于無根苗，有根苗的根葉誘導(dǎo)效果好于無根苗；PP333可抑制火焰品種葉片的生長，且高濃度時抑制作用增強(qiáng)，低濃度PP333促進(jìn)紫色品種根的生長，CCC未對3個彩色馬蹄蓮品種的根、葉表現(xiàn)出抑制作用。

有研究表明，PP333對某些植物根、葉生長的抑制作用可促使光合產(chǎn)物向地下部轉(zhuǎn)運(yùn)，從而誘導(dǎo)塊莖、鱗莖和球莖的形成和膨大[18-19]。而本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，紫色、凍糕品種有根苗在添加PP333的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，根與葉多時能促進(jìn)微球塊莖的增大。不同彩色馬蹄蓮對相同植物生長調(diào)節(jié)劑的反應(yīng)不同，可能是由植物材料本身的生理狀態(tài)及培養(yǎng)基成分不同造成的[20]，而同一種彩色馬蹄蓮對不同植物生長調(diào)節(jié)劑的反應(yīng)不同，這可能與內(nèi)源激素的合成和代謝差異有密切關(guān)系[21-23]。因此，找出影響每個彩色馬蹄蓮品種的植物生長調(diào)節(jié)劑種類、濃度及配比，對生產(chǎn)中彩色馬蹄蓮微型塊莖質(zhì)量和產(chǎn)量的提高有非常重要的意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]余樹勛，吳應(yīng)祥.花卉詞典[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1993：312.

[2]趙健，張翠萍，李秀娟，等. GA3處理和不同栽培基質(zhì)對彩色馬蹄蓮生長的影響[J]. 廣西植物，2008，28（3）：407-410.

[3]李秀娟，趙健，張翠萍，等. 彩色馬蹄蓮種球培育和儲藏技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，2011，42（8）：979-983.

[4]張?zhí)扃?，李榮旗，王玉忠，等. 細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)彩色馬蹄蓮試管微型種球[J]. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報，2005，27（3）：108-111.

[5]彭峰，陳嫣嫣，郝日明，等. 彩色馬蹄蓮試管塊莖誘導(dǎo)研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006（3）：94-96.

[6]張潔，蔡宣梅，林真，等. 百合試管鱗莖誘導(dǎo)及膨大技術(shù)的研究[J]. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報，2010，25（3）：328-331.

[7]王曉麗，韓立群，劉杰，等. 活性炭和PP333對垂花百合試管鱗莖膨大的影響[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（19）：11429-11430.

[8]王光萍，陳英，周堅(jiān)，等. 長筒石蒜鱗片誘導(dǎo)和植株再生[J]. 植物生理學(xué)通訊，2005，41（4）：457-460.

[9]趙東雄. 小蒼蘭脫毒苗的試管成球試驗(yàn)初報[J]. 上海農(nóng)學(xué)院學(xué)報，1989，7（3）：197-198.

[10]楊繼祥，苗淑俠. 番紅花球莖的誘導(dǎo)[J]. 中藥材科技，1984（6）：1-2.

[11]郭志剛，五井正憲. 嘉蘭莖尖培養(yǎng)與塊莖形成的研究[J]. 園藝學(xué)報，1998，25（2）：179-183.

[12]戴黎鳴，周偉，陳軍峰，等. 影響大巖桐試管塊莖形成的若干因素[J]. 上海師范大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2006，35（5）：71-75.

[13]李春芳，羅吉鳳，程治英，等. 紅花酢漿草試管根莖誘導(dǎo)和快速繁殖研究[J]. 云南農(nóng)業(yè)科技，2011（4）：16-18.

[14]朱佳文，洪亞輝，蕭浪濤，等. PPP333 和B9 對白蘭花生長的影響[J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2003，29（6）：482-484.

[15]呂長平，陳海霞. PP333對盆栽花葉美人蕉的矮化效果[J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2003，29（2）：129-130.

[16]張翠萍，趙健，唐鳳鸞，等. 多效唑、矮壯素對彩色馬蹄蓮試管微型種球誘導(dǎo)的影響[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，2011，42（11）：1320-1323.

[17]張?zhí)扃鳎顦s旗，王玉忠.PP333對彩色馬蹄蓮試管苗生長及微型種球誘導(dǎo)的影響[J]. 北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院學(xué)報，2008，22（2）：29-35.

[18]馬國華，張啟明. PP333在唐菖蒲組織培養(yǎng)中的作用[J]. 園藝學(xué)報，1994，21（3）：288-292.

[19]張志，李會珍，姚宏亮，等. PP333對馬鈴薯試管苗生長和塊莖形成的影響[J]. 浙江大學(xué)學(xué)報（農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版），2004，30（3）：318-322.

[20]任春林，尹靜，潘亞婕，等. 水楊酸對白樺懸浮細(xì)胞中齊墩果酸積累及防御酶活性的影響[J]. 中草藥，2012，43（5）：972-977.

[21]孫扣忠，赫明濤. 4種植物生長調(diào)節(jié)劑對玉米產(chǎn)量及抗性的調(diào)節(jié)效應(yīng)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（12）：80-81.

[22]顧克余，周蓓蓓，宋長年，等. 植物生長調(diào)節(jié)劑及其在葡萄生產(chǎn)上的應(yīng)用綜述[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（7）：13-16.

[23]彭艷華，劉成運(yùn). 脫落酸與胚胎發(fā)育的關(guān)系及作用方式的研究進(jìn)展[J]. 武漢植物學(xué)研究，1991，9（3）：289.騫光耀，孔祥生，張淑玲. 3個牡丹品種對高溫脅迫的生理響應(yīng)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，45（12）：103-105.endprint