飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿生長性能、血清生化指標(biāo)及初角茸生長的影響

張 婷 王曉旭 王 卓 李仁德 孫偉麗 鮑 坤 鐘 偉 李光玉

(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林省特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物分子生物學(xué)省部共建實(shí)驗(yàn)室，長春130112)

飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿生長性能、血清生化指標(biāo)及初角茸生長的影響

張 婷 王曉旭 王 卓 李仁德 孫偉麗 鮑 坤 鐘 偉 李光玉*

(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林省特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物分子生物學(xué)省部共建實(shí)驗(yàn)室，長春130112)

本試驗(yàn)旨在研究飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿生長性能、血清生化指標(biāo)及初角茸生長的影響。選取40只7月齡平均體重為(39.64±4.10) kg的健康雄性梅花鹿，隨機(jī)分成4組，每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只，分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧(含5 mg/kg β-胡蘿卜素)中添加0(對(duì)照組)、2 500、5 000 和10 000 IU/kg維生素A的試驗(yàn)飼糧。試驗(yàn)期從7月齡開始至12月齡結(jié)束。結(jié)果表明：1)飼糧維生素A添加水平對(duì)梅花鹿生長性能無顯著性影響(P>0.05)。2)與對(duì)照組相比，飼糧添加2 500、5 000 IU/kg維生素A顯著提高梅花鹿血清免疫球蛋白A(IgA)含量、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性(P<0.05)，飼糧添加2 500、5 000、10 000 IU/kg維生素A顯著提高谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05)，飼糧維生素A添加水平對(duì)血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、丙二醛(MDA)、睪酮(T)及雌二醇(E2)含量無顯著性影響(P>0.05)。3)5 000 IU/kg維生素A添加組初角茸干茸重顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，但與其他2組差異不顯著(P>0.05)。由此得出，在本試驗(yàn)條件下，適量添加維生素A能夠增強(qiáng)7～12月齡梅花鹿免疫和抗氧化功能，提高初角茸干茸重。7～12月齡梅花鹿飼喂以玉米和苜蓿草粉為主的飼糧時(shí)，飼糧維生素A適宜添加水平為2 500～5 000 IU/kg。

梅花鹿；維生素A；生長性能；血清生化指標(biāo)；初角茸

維生素A是含有β-白芷酮環(huán)的不飽和一元醇，是人和動(dòng)物所必需的脂溶性維生素。維生素A參與許多機(jī)體生理過程包括細(xì)胞代謝、組織分化、繁殖、免疫和骨骼發(fā)育等[1-3]。在反芻動(dòng)物營養(yǎng)上，Eldaim等[4]發(fā)現(xiàn)飼糧中添加維生素A有利于提高羔羊日增重。Kleczkowski等[5]研究表明維生素A添加有利于提高肉牛機(jī)體抗氧化水平。Lu等[6]報(bào)道維生素A有利于提高奶牛機(jī)體免疫水平。而維生素A在鹿科動(dòng)物上的研究報(bào)道較少，且主要集中在維生素A代謝產(chǎn)物視黃酸調(diào)控角基萌發(fā)進(jìn)而影響鹿茸生長方面。Kierdorf等[7]研究發(fā)現(xiàn)，向白尾鹿角基注射視黃酸加快了鹿茸生長。Allen等[8]研究表明，視黃酸受體在鹿茸組織中表達(dá)，并且激活該受體促進(jìn)了軟骨組織細(xì)胞分化。梅花鹿是我國主要飼養(yǎng)的鹿種之一，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。幼齡梅花鹿生長發(fā)育快，通常體重的大小關(guān)系到繁殖性能和鹿茸產(chǎn)量[9]，因此在冬季缺少青綠飼料的圈養(yǎng)條件下，為幼鹿提供充足的維生素A將有助于提高健康水平和經(jīng)濟(jì)效益。本試驗(yàn)旨在研究不同維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿生長性能、免疫及抗氧化水平和初角茸生長的影響，為梅花鹿機(jī)體維生素A營養(yǎng)狀況的評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)，以期指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐。

1 材料與方法

1.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理

選取40只7月齡平均體重為(39.64±4.10) kg的健康雄性梅花鹿，隨機(jī)分成4組，每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只，分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧(含5 mg/kg β-胡蘿卜素)中添加0(對(duì)照組)、2 500、5 000 和10 000 IU/kg維生素A的試驗(yàn)飼糧?；A(chǔ)飼糧為以玉米、豆粕、苜蓿草粉、玉米胚芽、食鹽、預(yù)混料等按不同比例制成的粉狀全混合日糧(TMR)，其組成及營養(yǎng)水平見表1。飼養(yǎng)試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所茸鹿試驗(yàn)基地進(jìn)行，試驗(yàn)期從7月齡開始至12月齡結(jié)束。試驗(yàn)時(shí)間為2016年1月至2016年6月。試驗(yàn)期間，由專人飼喂，早晚各1次，稱量記錄每組鹿的給料量和剩料量，以計(jì)算每只鹿的平均日采食量，并根據(jù)生長狀況每周調(diào)整1次飼喂量，保證充足潔凈的飲水。

1.2樣品采集

試驗(yàn)期末于晨飼前向每頭鹿注射0.6～1.3 mg/kg BW的鹽酸塞拉嗪進(jìn)行麻醉。稱體重，頸靜脈采血10 mL，放置至血清析出，4 000 r/min離心5 min，收集血清于-20 ℃保存待測(cè)。同時(shí)，由專業(yè)人員在距離角柄上方2 cm處將初角茸平行鋸下，稱重后放入自封袋中-20 ℃保存待測(cè)干物質(zhì)含量。采樣結(jié)束后，注射1.5 mL/kg BW尼可剎米解除麻醉。

1.3樣品測(cè)定

飼糧粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定采用凱氏定氮法，參照GB/T 6432—1994；粗脂肪含量測(cè)定采用索氏提取儀，參照GB/T 6433—1994；粗灰分含量按照GB/T 6438—1992測(cè)定；鈣含量測(cè)定采用乙二胺四乙酸(EDTA)絡(luò)合滴定法，參照GB/T 6436—1992；磷含量測(cè)定采用釩鉬酸銨比色法，參照GB/T 6437—1992;酸性洗滌纖維(ADF)和中性洗滌纖維(NDF)含量測(cè)定采用范氏(Van Soest)洗滌纖維分析法，參照GB/T 20806—2006;β-胡蘿卜素含量參照GB/T 5009.83—2003進(jìn)行測(cè)定。

采用還原型谷胱甘肽(GSH)消耗法測(cè)定血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性；黃嘌呤氧化法測(cè)定血清總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性；硫代巴比妥酸法測(cè)定血清丙二醛(MDA)含量，測(cè)定試劑盒均購自中生北控生物科技有限公司。血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、睪酮(T)及雌二醇(E2)采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELASA)法測(cè)定，試劑盒購自上海雙贏生物科技有限公司。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)每千克預(yù)混料含有One kilogram of premix contained the following：Mg 76 mg，Cu 36 mg，Mn 43 mg,Fe 53 mg，Zn 45 mg，Se 31 mg，VD3496.8 IU，VE 82.8 IU，VK30.23 mg，VB110.092 mg，VB20.69 mg，VB121.38 mg，葉酸 folic acid 0.023 mg，煙酸 nicotinic acid 1.62 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 1.15 mg，CaHPO45.17 g，CaCO34.57 g。

2)實(shí)測(cè)值 Measured values。

新鮮初角茸經(jīng)切片后放入真空冷凍干燥機(jī)中-40 ℃干燥48 h，干物質(zhì)含量依據(jù)以下公式計(jì)算：

干物質(zhì)含量(%)=(干茸重/鮮茸重)×100。

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003進(jìn)行整理，采用SPSS 9.13軟件中GLM程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多重比較采用Duncan氏法進(jìn)行，其中P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié) 果

2.1飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿生長性能的影響

由表2可知，飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿平均日采食量、平均日增重和料重比均無顯著性影響(P>0.05)。

2.2飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿血清生化指標(biāo)的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加2 500、5 000 IU/kg維生素A顯著提高血清IgA含量和T-SOD活性(P<0.05)，飼糧添加2 500、5 000、10 000 IU/kg維生素A顯著提高血清GSH-Px活性(P<0.05)。飼糧維生素A添加水平對(duì)血清IgG、IgM、MDA、T及E2含量無顯著性影響(P>0.05)。

表2 飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無小寫字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with the same or no small letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表3 飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿血清生化指標(biāo)的影響

2.3飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿初角茸生長的影響

由表4可知，5 000 IU/kg維生素A添加組梅花鹿初角茸干茸重顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，但與其他2組差異不顯著(P>0.05)。飼糧維生素A添加水平對(duì)初角茸干物質(zhì)含量、茸高、鮮茸重?zé)o顯著性影響(P>0.05)。

表4 飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿初角茸生長的影響

3 討 論

3.1飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿生長性能的影響

作為動(dòng)物機(jī)體必需的脂溶性維生素，飼糧中添加適量維生素A有利于提高反芻動(dòng)物生長性能。魏立民等[10]研究表明維生素A可以顯著提高海南和牛的日增重，并且以7 500 IU/kg 添加量效果最好。Eldaim等[4]報(bào)道飼糧中添加維生素A可增加羔羊的初生重和日增重。但是本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿生長性能無顯著性影響。這與Arnett等[11]在羔羊和Gibb等[12]在肉牛上的研究結(jié)果一致。分析可能原因有：一方面，雖然對(duì)照組沒有額外添加維生素A，但是基礎(chǔ)飼糧中含有少量β-胡蘿卜素，β-胡蘿卜素在鹿體內(nèi)轉(zhuǎn)化為維生素A以補(bǔ)充飼糧維生素A的不足[13]。另一方面，當(dāng)梅花鹿7～9月齡時(shí)正值北方冬季，寒冷的天氣條件下鹿群生長慢，從而導(dǎo)致整個(gè)試驗(yàn)期各組梅花鹿之間生長性能指標(biāo)差異不顯著。

3.2飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿血清生化指標(biāo)的影響

GSH-Px和T-SOD是機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶。GSH-Px以GSH為還原劑分解體內(nèi)的脂質(zhì)過氧化物，阻斷活性氧自由基對(duì)機(jī)體的進(jìn)一步損傷，因而可防止細(xì)胞膜和其他生物組織免受過氧化損傷。超氧化物歧化酶(SOD)的主要功能是催化超氧化陰離子自由基發(fā)生歧化反應(yīng)，保護(hù)生物膜免受過氧化物引起的氧化損傷和增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力，進(jìn)而增強(qiáng)機(jī)體抗病能力。大量研究表明，維生素A可有效提高動(dòng)物機(jī)體抗氧化能力。Lu等[6]報(bào)道奶牛飼糧添加高水平維生素A(220 IU/kg BW)顯著提高血清GSH-Px和T-SOD活性。劉汝祥等[14]研究發(fā)現(xiàn)不同維生素A水平對(duì)荷斯坦種公牛血清GSH-Px和T-SOD活性影響顯著。本試驗(yàn)結(jié)果表明添加維生素A可顯著提高7～12月齡梅花鹿機(jī)體抗氧化水平。這主要是由于維生素A本身具有的抗氧化和清除自由基功能[15]。

維生素A與動(dòng)物免疫應(yīng)答有著密切的關(guān)系，它可以通過非特異性免疫反應(yīng)、細(xì)胞免疫和體液免疫維持機(jī)體健康。維生素A能夠促進(jìn)巨噬細(xì)胞活化，增強(qiáng)其對(duì)特異抗原的作用，促進(jìn)B淋巴細(xì)胞活性增強(qiáng)，增加IgA、IgG和IgM合成與分泌，從而影響免疫[16]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加2 500、5 000 IU/kg維生素A可提高7～12月齡梅花鹿血清IgA含量，說明飼糧添加維生素A有利于提高梅花鹿機(jī)體免疫水平，這與Soliman[17]和王平等[18]在山羊上的研究結(jié)果一致。

作為雄性梅花鹿的第二性征，鹿茸的生長與發(fā)育與性激素密切相關(guān)，其中T和E2被認(rèn)為是控制鹿茸生長和骨化的主要因素[19-20]。T是一種產(chǎn)生于間質(zhì)細(xì)胞的雄激素，能促進(jìn)雄性動(dòng)物的第二性征的表現(xiàn)、雄性生殖道及附性腺的發(fā)育，并刺激精子的發(fā)生。E2是機(jī)體內(nèi)生物活性最高的雌激素，有利于促進(jìn)雌性動(dòng)物生殖器官的發(fā)育和發(fā)情行為的產(chǎn)生。在非反芻動(dòng)物上，Huang等[21]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)維生素A添加可以顯著提高小鼠體內(nèi)T的基礎(chǔ)分泌量。接永澤[22]研究表明，低溫條件下提高飼料維生素A水平可以顯著提高公鴨血清T含量。而在本試驗(yàn)中，飼糧維生素A添加水平未對(duì)7～12月齡梅花鹿血清T和E2含量產(chǎn)生顯著性影響。

3.3飼糧維生素A添加水平對(duì)7～12月齡梅花鹿初角茸生長的影響

鹿茸是生長在雄鹿(馴鹿除外)額骨頂端未骨化密生絨毛的嫩角[23]。前人研究表明，維生素A能夠促進(jìn)骨骼的生長發(fā)育，維持成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞正常功能,保障骨細(xì)胞正常代謝[24]。鹿茸生長受到多方面因素的調(diào)控，包括激素、體重、天氣、飼養(yǎng)密度和營養(yǎng)等因素[25-27]。國外有關(guān)維生素A對(duì)鹿茸生長影響的研究主要集中在其代謝產(chǎn)物視黃酸調(diào)控角基萌發(fā)進(jìn)而影響鹿茸生長方面。Bubenik[28]研究發(fā)現(xiàn)，向白尾鹿角基注射全反式視黃醇提高了鹿茸生長速率。Allen等[8]研究表明視黃酸受體在鹿茸組織中表達(dá)，并且體外試驗(yàn)表明激活該受體促進(jìn)了軟骨組織細(xì)胞分化。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加維生素A對(duì)初角茸高度無顯著性影響，但是與對(duì)照組相比，5 000 IU/kg維生素A的添加顯著提高了干茸重,具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，適量添加維生素A能夠增強(qiáng)梅花鹿免疫和抗氧化功能，提高初角茸干茸重。7～12月齡梅花鹿飼喂以玉米和苜蓿草粉為主的飼糧時(shí)，飼糧維生素A適宜添加水平為2 500～5 000 IU/kg。

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*Corresponding author, professor, E-mail： tcslgy@126.com

(責(zé)任編輯 王智航)

Effects of Dietary Supplemental Level of Vitamin A on Growth Performance, Serum Biochemical Indictors and First Antler Growth of 7- to 12-Month-Old Sika Deer (Cervus nippon)

ZHANG Ting WANG Xiaoxu WANG Zhuo LI Rende SUN Weili BAO Kun ZHONG Wei LI Guangyu*

(Jilin Provincial Key Laboratory for Molecular Biology of Special Economic Animals, Institute of Special Animal and Plant Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130112, China)

This experiment was conducted to study the effects of dietary supplemental level of vitamin a on growth performance, serum biochemical indictors and first antler growth of 7- to 12-month-old sika deer (Cervusnippon). Forty healthy 7-month-old male sika deer [initial body weight: (39.64±4.10) kg] were randomly assigned to 4 groups, and each group contained 10 replicates with 1 deer per replicate. Deer in different groups were fed a basal diet (containing 5 mg/kg β-carotene) supplemented with 0 (control group), 2 500, 5 000 and 10 000 IU/kg vitamin A, respectively. The experiment was started from 7 to 12 months of age. The results showed as follows: 1) dietary vitamin A supplementation had no significant effects on growth performance of deer (P>0.05). 2) Compared with control group, serum immunoglobulin A (IgA) content and total superoxide dismutase (T-SOD) activity were significantly increased by dietary supplementation of vitamin A at 2 500 and 5 000 IU/kg (P<0.05), and serum glutathione peroxidase (GSH-Px) activity was significantly increased by dietary supplementation of vitamin A at 2 500， 5 000 and 10 000 IU/kg (P<0.05), while serum contents of immunoglobulin G (IgG), immunoglobulin M (IgM), malondialdehyde (MDA), testosterone (T) and estradiol (E2) were not significantly affected (P>0.05). 3) Deer

diet supplemented with 5 000 IU/kg vitamin A had significantly higher dry antler weight compared with control group (P<0.05), but had no significant difference compared with the other two groups (P>0.05). In conclusion, proportional adding of vitamin A can improve immunity and antioxidant capacity, increase dry antler weight of 7- to 12-month-old sika deer under the present experimental conditions. The suitable vitamin A supplemental level is 2 500 to 5 000 IU/kg of diet mainly consist of corn and alfalfa meal.[ChineseJournalofAnimalNutrition,2017,29(9)：3146-3152]

sika deer; vitamin A; growth performance; serum biochemical indicators; first antler growth

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.09.016

2017-02-15

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程;吉林省重大科技攻關(guān)專項(xiàng)(20140203018NY)

張 婷(1988—),女，吉林長春人，碩士研究生，研究方向?yàn)樘胤N動(dòng)物營養(yǎng)與代謝。E-mail： zhangting542118@163.com

*通信作者：李光玉，研究員，博士生導(dǎo)師，E-mail： tcslgy@126.com

S816.72

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：1006-267X(2017)09-3146-07