hrHPV檢測、亞型分析與TCT篩查結果聯(lián)合在宮頸癌篩查中的應用研究

吳 濤，張俊華，何瑞芬，王 婧，馬 雯，李永紅，納文霞，樸文花

·實驗研究·

hrHPV檢測、亞型分析與TCT篩查結果聯(lián)合在宮頸癌篩查中的應用研究

吳 濤1,2，張俊華1,2，何瑞芬1,2，王 婧1,2，馬 雯1,2，李永紅1,2，納文霞1,2，樸文花1,2

目的初篩不同年齡組 hrHPV陽性標本，同時行HPV亞型分析及液基細胞學檢查，了解銀川地區(qū)HPV感染基因型分布情況，探討不同衛(wèi)生資源條件下的宮頸癌篩查策略。方法選取婦科就診16～70歲女性1 874名，采用新柏氏液基細胞學技術、HC2及HPV導流雜交分型等方法對宮頸刷出物進行檢驗，對細胞學異常者召回行陰道鏡檢查。結果HC2初篩陽性率為16.21%，液基細胞學異常率為6.1%，HPV 16型為最常見的HPV感染型別，感染率為 7.8%，HPV陽性率和HPV 16型陽性率均與細胞學病變級別呈正相關性(r為0.253、0.226，P<0.05)。結論HPV核酸檢測對宮頸癌的篩查效率高于液基細胞學。HPV亞型分析與HC2在宮頸癌篩查敏感性方面差異無統(tǒng)計學意義，但HC2具備操作簡便、篩查成本低等優(yōu)點，不失為為宮頸癌篩查的首選方法，特別是在衛(wèi)生資源相對欠缺地區(qū)。

HC2；HPV亞型；液基薄層細胞學；宮頸癌篩查

宮頸癌作為女性第三高發(fā)癌癥，占所有癌癥的13%。全球范圍內每年有約52.8萬婦女被確診罹患宮頸癌，85%的病例出現(xiàn)在發(fā)展中國家，最終導致26.6萬因此而喪生[1]。高危型人乳頭狀瘤病毒(hrHPV)持續(xù)感染被認為是浸潤性宮頸癌發(fā)展的必要條件[2]。宮頸癌篩查已成功幫助降低了宮頸癌的發(fā)病率和死亡率，然而，傳統(tǒng)宮頸癌篩查方案的幾個方面在低資源國家或地區(qū)尚未實現(xiàn)[3]。本文以宮頸癌篩查資料為對象進行分類統(tǒng)計分析，并對篩查方法及策略、地區(qū)HPV基因型分布進行了討論和評價，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 宮頸癌篩查資料:收集2015年3月-2017年3月寧夏人民醫(yī)院婦科的宮頸癌篩查資料，包括hrHPV檢測、新柏氏液基薄層細胞學、HPV基因分型檢驗?；颊吣挲g16～70歲，按照16～20歲、21～30歲、31～40歲、41～50歲及≥51歲年齡劃分5組進行統(tǒng)計。

1.2 儀器與方法:德國QIAGEN公司 Rotor Gene Q熒光定量PCR分析儀，德國QIAGEN公司 HPV檢測系統(tǒng)，凱普核酸導流雜交儀，凱普KP-TC48擴增儀，美國BD公司 PREPSTAIN自動制片染色儀，所有儀器的操作均按照標準操作程序進行。

1.3 試劑:QIAGEN高危型人乳頭瘤病毒檢測試劑盒，BD PREPSTAIN自動制片染色儀配套試劑及染液，凱普12+2 HPV多重PCR試劑，凱普HPV導流雜交分型檢驗試劑，中山達安基因HPV斑點雜交分型試劑，所有試劑的使用均按試劑盒配套說明書制定標準操作程序指導操作。

1.4 統(tǒng)計學方法:計數(shù)資料以構成比、百分率表示，組間比較用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各年齡組hrHPV亞型分布情況:對婦科門診1 874例hrHPV基因型按5個年齡組進行統(tǒng)計分析，結果見表1。

2.2 各年齡組hrHPV亞型檢情況:對1874例hrHPV亞型在各年齡組的檢出情況進行統(tǒng)計分析，結果見表2。

表1 各年齡組hrHPV亞型構成比

表2 各年齡組hrHPV亞型檢出率分析

結果顯示，16～20歲組的hrHPV檢出率高達69.80%，與總檢出率22.80%差異有統(tǒng)計學意義。

2.3 液基薄層細胞學對宮頸上皮細胞病變檢出情況:收集5 744例患者采用TCT進行宮頸癌篩查資料進行分析，其中高度鱗狀上皮內瘤變(HSIL)8例(0.14%)、低級別上皮內瘤變(LSIL)47例(0.8%)和不典型鱗狀細胞(ASC)90例(1.57%)。

2.4 各年齡組上皮病變分布分析:對145例上皮細胞病變的患者按HSIL、LSIL、ASC分組，分析三種類型上皮細胞病變在各年齡分組的分布情況，見表3。

表3 各年齡組宮頸上皮細胞病變145例的類型分布

結果顯示，HSIL與LSIL的陽性率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，與ASC的陽性率比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

3 討論

根據(jù)各年齡組檢出hrHPV亞型的構成比進行統(tǒng)計分析，HPV各亞型構成比從高至低，依次為52、16、58、53、39、18、51、33、66、68、31、59、56、45、35型。根據(jù)年齡組感染hrHPV亞型分布來看，16～20歲組感染hrHPV亞型前3位的是16、39、52型，21～30歲組則是52、16、58型，30歲以上各組均是52、16、53型，58型則排在第3位。hrHPV感染亞型分布及構成比與以往的一些報道存在差異[4-5]。除16～20歲組以外，其余4個組的52型與58型的構成比無顯著性差異。而16～20歲組構成比與其他組不同，是否與標本量、患者就診構成有關，有待進一步驗證。

本研究中，hrHPV陽性的患者年齡最小為16歲，最大為70歲。各年齡組hrHPV的檢出率平均為22.80%，16～20歲組的hrHPV檢出率高達69.80%，與總的檢出率22.80%有顯著性差異。由于本地區(qū)為回族聚居區(qū)，孕育年齡提前現(xiàn)象較為普遍，該年齡段就診患者多處于性生活活躍期，這一現(xiàn)象究竟是與年齡組相關，還是與樣本量和患者就診構成比相關，或者是一過性感染的檢出，仍有待更深入的研究，這將對于青少年女性的性教育、降低HPV感染率有著重要意義。另外，除16～20歲組外，其余4組的hrHPV檢出率均接近22%，無顯著性差異。

采用TCT進行宮頸癌篩查，其HSIL、LSIL、ASC的檢出率依次增高，HSIL、LSIL的檢出率無顯著性差異，與ASC的檢出率有顯著性差異。在324例上皮細胞病變中，hrHPV亞型檢出率依次為52、16、58、39、33、51、18型，且在HSIL、LSIL、ASC三種類型上皮細胞病變中沒有顯著性的變化。

對5 222例患者行TCT篩查，其陽性率僅為2.53%。對8 208例標本采用分子生物學方法進行HPV核酸檢測，其陽性率達22.80%，與文獻報道相近[6-7]。對1 882例HPV陽性的患者進行液基細胞學檢查，檢出上皮細胞病變294例，檢出率15.62%。由此可見，單獨使用hrHPV核酸檢測對宮頸癌的篩查效率高于TCT，而且存在試驗周期短、費用低等明顯優(yōu)勢。但hrHPV檢測及基因分型檢測由于同時存在臨床閾值設定、臨床靈敏度過高等明顯不足，容易檢出hrHPV一過性感染。因此，合理選用適合本地區(qū)的宮頸癌篩查策略就顯得尤為重要，特別是在寧夏作為低資源地區(qū)，醫(yī)療資源分配不足等問題更為突顯。在醫(yī)療資源匱乏的地區(qū)，可以采用HC2行宮頸癌篩查，因為其具有費用低、檢測周期短等優(yōu)點[8-10]，同時由于設定了很好的臨床閾值，一過性感染檢出幾率很低。經(jīng)HC2檢出的hrHPV陽性患者再進一步采用TCT分流，同時進行HPV亞型檢測，分析患者所感染hrHPV基因型，為臨床做進一步診療提供可靠依據(jù)。

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ThecombinationofhrHPVsubtypeanalysisandtheresultsofTCTincervicalcancerscreening

WUTao1,2,ZHANGJunhua1,2,HeRuifen1,2,WANGJing1,2,MAWen1,2,LIYonghong1,2,NAWenxia1,2,PIAOWenhua1,2.

1.DepartmentofMedicalLaboratory,NingxiaPeople’sHospital,Yinchuan,750002,China; 2.TheFirstAffiliatedHospitalofNorthwestUniversityforNationalities,Yinchuan,750002,China

Correspondingauthor:PIAOWenhua,Email:wenhuapiao@163.com

ObjectiveTo screen the hrHPV positive specimen from different age groups,then analyze the subtypes and TCT screening,in order to unveil the HPV distribution of Yinchuan,and search the optimization strategy for cervical cancer screening under the imbalanced medical resource.MethodsA prospective clinical study was made and a total of 1874 women aged 16～70 were selected.Cervical brushes were retrospectively analyzed by thinprep cytologic test (TCT),HC2 and HPV hybridization methods.Those women with abnormal cytological results were referred to colposcopy.ResultsThe positivity of HC2 and cytology was 16.21% and 6.1% respectively.Subtype16 was the most common infective HPV types with a positive rate of 7.8%.Both the total HPV infection rate and subtype16 infection rate were positively associated with the grade of cytological abnormity with a correlation coefficient of 0.253 and 0.226 respectively (P<0.05).ConclusionThis study shows that HPV nucleic acid detection is an effective method than TCT.HPV subtypes analysis and HC2 have approximate sensitivity,but HC2 is easy to manipulate and has the lower cost.For primary screening cervical cancer,it may be the best choice,especially on the worse medical region.

HC2;HPVsubtype;Thinprepcytologictest;Cervicalcancerscreening

1.寧夏人民醫(yī)院，寧夏 銀川 750002 2.西北民族大學第一附屬醫(yī)院，寧夏 銀川 750002

樸文花，Email:wenhuapiao@163.com

http://kns.cnki.net/kcms/detail/64.1008.R.20170814.1453.020.html

10.13621/j.1001-5949.2017.08.0722

R37

A

2017-02-16 [責任編輯]王凱榮