丙型肝炎患者血清自身抗體的分析

武杰

【摘要】 目的 觀察丙型肝炎病毒（HCV）感染者血清中自身抗體情況， 分析自身免疫反應(yīng)在丙型肝炎中的作用。方法 100例丙型肝炎患者作為研究組， 選取同時(shí)期體檢中心進(jìn)行體檢的50例健康者作為對(duì)照組。以間接免疫熒光法（IIF）檢測(cè)兩組受檢者血清中抗核抗體（ANA）、抗可提取性核抗原抗體（ENA）、免疫印跡法檢測(cè)抗線粒體抗體（AMA）、抗肝抗原抗體（LMA）；以實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）法檢測(cè)兩組受檢者血清丙型肝炎病毒核酸（HCV-RNA）含量。結(jié)果 研究組中檢測(cè)出1項(xiàng)或以上自身抗體陽(yáng)性者48例， 自身抗體陽(yáng)性率為48.0%（48/100）；對(duì)照組中檢測(cè)出1項(xiàng)或以上自身抗體陽(yáng)性者2例， 自身抗體陽(yáng)性率為4.0%（2/50）。研究組自身抗體陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組HCV-RNA陽(yáng)性38例， 自身抗體陽(yáng)性23例（60.53%）， 研究組HCV-RNA陰性62例， 自身抗體陽(yáng)性25例（40.32%）， 對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 HCV感染后會(huì)出現(xiàn)自身免疫反應(yīng)， 且HCV-RNA陽(yáng)性患者反應(yīng)更明顯， HCV感染者須進(jìn)行血清自身抗體檢測(cè)， 以便更好接受治療。

【關(guān)鍵詞】 丙型肝炎；血清自身抗體；感染

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.25.040

丙型病毒性肝炎（viral hepatitis type C）簡(jiǎn)稱為丙型肝炎、丙肝， 是一種由HCV感染引起的病毒性肝炎， 主要經(jīng)輸血、針刺、吸毒等傳播， 據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)， 全球HCV的感染率約為3%， 估計(jì)約1.8億人感染了HCV， 每年新發(fā)丙型肝炎病例約3.5萬(wàn)例[1]。丙型肝炎呈全球性流行， 可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化， 部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝細(xì)胞癌（HCC）， 嚴(yán)重危害患者的健康及生命安全， 已成為嚴(yán)重的社會(huì)和公共衛(wèi)生問(wèn)題[2， 3]。近年來(lái)， 隨著臨床醫(yī)學(xué)的不斷研究發(fā)現(xiàn)， HCV 感染者血清中多可檢測(cè)出導(dǎo)致多種組織器官功能紊亂的自身抗體， 進(jìn)而加重丙型肝炎癥狀[4]。本文通過(guò)對(duì)100例丙型肝炎患者血清自身抗體的檢測(cè)， 總結(jié)HCV感染患者與自身抗體的關(guān)系， 以供臨床參考?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2015年5月～2016年4月收治的100例丙型肝炎患者作為研究組， 所有患者經(jīng)臨床檢查均確診為丙型肝炎， 其中男58例， 女42例， 年齡22～78歲， 平均年齡（52.45±12.20）歲， HCV-RNA陰性62例， HCV-RNA陽(yáng)性38例。同時(shí)， 選取同時(shí)期于本院體檢中心進(jìn)行體檢的健康者50例作為對(duì)照組， 所有受檢者經(jīng)檢查排除病毒感染、自身免疫疾病及其他引起免疫功能改變的疾病患者， 且3個(gè)月

內(nèi)未使用任何免疫制劑。其中男29例， 女21例， 年齡20～72歲，

平均年齡（48.81±11.52）歲。兩組一般資料對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 ①采用間接免疫熒光法（indirect immunofluore-scence， IIF）檢測(cè)血清中抗核抗體（anti-nuclear antibody， ANA）、抗線粒體抗體（anti-mitochondrial antibody， AMA）。間接免疫熒光樣本前處理儀IF Sprinter及所有試劑均購(gòu)自德國(guó)歐蒙實(shí)驗(yàn)免疫制品有限公司。所有檢測(cè)步驟均按照說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格進(jìn)行。ANA、AMA的靶抗原分別為HEP-2細(xì)胞和猴肝組織的冰凍切片、鼠腎組織的冰凍切片， 將稀釋至1∶100的血清與生物載片一起溫育30 min， 放入異硫氰酸熒光素標(biāo)記的抗體， 進(jìn)行再次溫育30 min， 之后洗片， 甘油封片， 于熒光顯微鏡下觀測(cè)結(jié)果[2]。②采用免疫印跡法檢測(cè)抗可提取性核抗原（anti-extractable nuclear anti-gen， ENA）、抗肝抗原抗體譜。所有試劑均購(gòu)自德國(guó)歐蒙實(shí)驗(yàn)免疫制品有限公司。所有檢測(cè)步驟均按照說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格進(jìn)行。將檢測(cè)膜條置于溫育槽內(nèi)， 放入1.5 ml樣本緩沖液， 孵育5 min， 去除槽內(nèi)液體；放入1.5 ml

已稀釋至1∶100的血清樣本， 孵育30 min， 去除槽內(nèi)液體， 以

1.5 ml緩沖液清洗膜條3次， 1次清洗時(shí)間為5 min；放入1.5 ml

底物液， 溫育10 min， 用蒸餾水清洗膜條3次， 1次清洗時(shí)間為1 min。晾干后觀察膜條結(jié)果[3， 4]。

1. 3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn)[5] 觀察患者的陽(yáng)性率。陽(yáng)性：組織或細(xì)胞內(nèi)有特征性綠色熒光出現(xiàn)或滴度≥1∶100。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組受檢者自身抗體陽(yáng)性情況對(duì)比 研究組中檢測(cè)出1項(xiàng)或以上自身抗體陽(yáng)性者48例， 其中AMA 6例， ANA 32例， SMA 1例， ENA 8例， LMA 1例， 自身抗體陽(yáng)性率為48.0%（48/100）；對(duì)照組中檢測(cè)出1項(xiàng)或以上自身抗體陽(yáng)性者2例， 其中AMA 1例， ANA 1例， 自身抗體陽(yáng)性率為4.0%（2/50）。研究組自身抗體陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2. 2 研究組患者HCV-RNA與自身抗體陽(yáng)性關(guān)系對(duì)比 研究組HCV-RNA陽(yáng)性38例， 自身抗體陽(yáng)性23例（60.53%）；研究組HCV-RNA陰性62例， 自身抗體陽(yáng)性25例（40.32%）。對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論endprint

丙型肝炎是由丙肝病毒引起的一種肝臟疾病， 是一種通過(guò)血液傳播病毒的疾病， 最常見(jiàn)的感染方式[6-8]：不安全注射做法；對(duì)醫(yī)療器械的消毒不夠徹底；輸入未經(jīng)篩查的血液和血液制品。該病毒可造成急性或慢性肝炎感染， 其嚴(yán)重程度從持續(xù)幾周的輕微病癥到終身嚴(yán)重疾病不等。大量慢性感染者會(huì)出現(xiàn)肝硬化或肝癌。每年大約有70萬(wàn)人死于與丙型肝炎相關(guān)的肝臟疾病[4]。

近年來(lái)， 臨床醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)肝炎病毒與自身免疫有一定關(guān)系， 病毒感染能夠誘發(fā)自身免疫性疾病， 而自身免疫則由靶細(xì)胞的抗原成分改變或病毒蛋白與正常組織細(xì)胞的同源性而導(dǎo)致， 進(jìn)而使患者出現(xiàn)自身免疫反應(yīng)[9， 10]。有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)， 在眾多自身免疫性疾病中檢測(cè)到AMA具有一定的診斷價(jià)值， 而約有1/3的慢性肝病患者血清中可檢測(cè)出以ANA、AMA、SMA為主的自身抗體， 其可加重?fù)p傷肝細(xì)胞， 誘發(fā)自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化等自身免疫性疾病， 這也使自身免疫成為HCV損傷機(jī)體的重要因素之一[5]。本文通過(guò)對(duì)自身抗體與丙型肝炎的研究， 也證實(shí)了這一點(diǎn)。

綜上所述， HCV感染后可損害免疫系統(tǒng)， 進(jìn)而誘發(fā)自身免疫反應(yīng)， 并進(jìn)一步加重?fù)p害肝臟， 使病情加劇甚至威脅患者生命安全。因此， HCV感染者有必要檢測(cè)自身抗體， 一旦抗體呈陽(yáng)性， 就表明自身抗體已導(dǎo)致體內(nèi)免疫功能出現(xiàn)紊亂， 這時(shí)HCV感染者應(yīng)立即就醫(yī)， 并積極配合醫(yī)生進(jìn)行治療， 以便早發(fā)現(xiàn)、早治療。所以自身抗體檢測(cè)與研究對(duì)臨床醫(yī)學(xué)治療丙型肝炎具有重要意義， 值得臨床大力推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

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[收稿日期：2017-05-16]endprint