IgG、Integrinβ6、P16在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其臨床意義

張緒美　徐政秀　張燕

【摘要】目的 探討IgG、Integrinβ6（整合素β6）、P16在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其與患者預(yù)后的關(guān)系。方法 采用免疫組化SP二步法檢測(cè)IgG、Integrinβ6、P16在55例膠質(zhì)瘤和20例正常腦組織中的表達(dá)，原位雜交檢測(cè)IgG mRNA在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)。結(jié)果 IgG、Integrinβ6、P16的表達(dá)陽(yáng)性率在正常腦組織與膠質(zhì)瘤組均有顯著性差異（P均<0.05），膠質(zhì)瘤中IgG 與Integrinβ6的表達(dá)呈正相關(guān)（P<0.05），IgG與P16表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論 膠質(zhì)瘤中P16低表達(dá)，IgG、Integrinβ6高表達(dá)可能在膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展中起一定作用。

【關(guān)鍵詞】膠質(zhì)瘤；IgG；Integrinβ6；P16；免疫組化；原位雜交

【中圖分類號(hào)】R739.41 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】ISSN.2095-6681.2017.02..02

【Abstract】Objective To investigate the expression of IgG、Integrinβ6 and P16 in human glioma.Methods The expression of IgG、Integrinβ6 and P16 in tissue samples from 55 cases with glioma and 20 cases with normal brain tissue was detected by “SP two steps” of immunohistochemistry.Results Integrinβ6 and P16 between glioma tissue and normal brain tissue（P<0.05）.There was a positive correlation between IgG and Integrinβ6 expression （P<0.05），and negative correlation between IgG and P16 expression （P<0.05）.Conclusion Low expression of P16，over Expression of IgG and Integrinβ6 in glioma might correlate to carcinogenesis.

【Key words】gliomas；IgG；Integrinβ6；P16；immunohistochemistry；FISH

腦膠質(zhì)瘤起源于腦部神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，是最常見的顱內(nèi)腫瘤，約占所有顱內(nèi)腫瘤的45%左右，至今仍是全身腫瘤中預(yù)后最差的腫瘤之一。隨著研究的深入，免疫分子在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用成為研究的熱點(diǎn)。本研究應(yīng)用原位雜交、免疫組化方法檢測(cè)正常腦組織、不同級(jí)別的人腦膠質(zhì)瘤中IgG蛋白的表達(dá)水平，并探討其與膠質(zhì)瘤發(fā)展的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2012年1月～2014年12月手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的膠質(zhì)瘤標(biāo)本55例。男性30例，女性25例，年齡11～74歲。按2007年WHO中樞神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)瘤分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)，并將Ⅰ～Ⅱ級(jí)歸為低級(jí)別組，Ⅲ～Ⅳ級(jí)為高級(jí)別組，低級(jí)別組25例，高級(jí)別組30例。另取20例正常腦組織（腦外傷內(nèi)減壓獲得）作為對(duì)照。

1.2 檢測(cè)方法

免疫組化SP二步法檢測(cè)IgG、Integrinβ6、P16蛋白表達(dá)，石蠟標(biāo)本5μm切片，常規(guī)脫蠟入水，熱抗原修復(fù)，SP法免疫組化染色，Integrinβ6、P16兩種抗體DAB鏡下控制顯色，IgG抗體AEC鏡下控制顯色。PBS 液代替一抗作陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定

顯微鏡下隨機(jī)觀察10個(gè)高倍視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞。IgG以腫瘤細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)紅色顆粒為陽(yáng)性。Integrinβ6陽(yáng)性染色為棕黃色顆粒， 分布于膠質(zhì)瘤細(xì)胞膜和細(xì)胞漿。P16陽(yáng)性表達(dá)位于細(xì)胞核，胞質(zhì)部位出現(xiàn)著色視為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

2 結(jié) 果

2.1 IgG、Integrinβ6、P16 在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)

IgG在膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)陽(yáng)性率為74.5%（41/55），在正常腦組織中表達(dá)率0%（0/20），差異有顯著性（P<0.05）；IgG在低級(jí)別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)率為48%（12/25）， 在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中表達(dá)率為96.7（29/30）（P<0.05）。Integrinβ6 在正常腦組織中無(wú)表達(dá)，在膠質(zhì)瘤中表達(dá)陽(yáng)性率為76.4%（42/55），差異有顯著性（P<0.05）；Integrinβ6 在低級(jí)別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)率為64.0%（16/25），在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)率為86.7%（26/30）（P>0.05）。膠質(zhì)瘤組織中P16 陽(yáng)性率為36.4%（20/55），在正常腦組織中表達(dá)率為95%（19/20）（P<0.05）；P16在低級(jí)別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)率為56%（14/25），在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)率為20%（6/30）（P<0.05）。

2.2 膠質(zhì)瘤中IgG 表達(dá)與Integrinβ6、P16表達(dá)的相關(guān)性（見表1）

膠質(zhì)瘤中IgG與P16表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（P<0.05﹚，與Integrinβ6表達(dá)呈正相關(guān)（P<0.05﹚。

3 討 論

膠質(zhì)瘤系浸潤(rùn)性生長(zhǎng)物，手術(shù)難以切除或根本不能手術(shù)，膠質(zhì)瘤的浸潤(rùn)和復(fù)發(fā)是導(dǎo)致患者死亡的主要原因。近年來(lái)，隨著研究的深入，免疫靶向治療成為膠質(zhì)瘤臨床研究的重點(diǎn)，對(duì)腫瘤免疫分子的研究也是腫瘤研究的熱點(diǎn)。

免疫球蛋白是一種在機(jī)體內(nèi)含量很高且具有重要功能的蛋白。根據(jù)重鏈的不同，免疫球蛋白可分為IgM、IgG、IgA、IgD和IgE五類[1]。IgG通過(guò)Fc段和Fc受體結(jié)合，介導(dǎo)多種免疫反應(yīng)，如噬菌作用、細(xì)胞內(nèi)吞作用、抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用、炎性介質(zhì)的釋放以及對(duì)B細(xì)胞活化和抗體產(chǎn)生的調(diào)控作用[2]。經(jīng)典的免疫學(xué)理論認(rèn)為，免疫球蛋白是B淋巴細(xì)胞的特征性產(chǎn)物，其它的體細(xì)胞不會(huì)表達(dá)免疫球蛋白。

IgG主要表達(dá)于惡性腫瘤細(xì)胞，在正常上皮及良性腫瘤中則處于低表達(dá)或無(wú)表達(dá)的狀態(tài)。IgG在上皮性腫瘤細(xì)胞的功能，文獻(xiàn)報(bào)道[3]，IgG類似生長(zhǎng)因子，具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、抑制凋亡的作用。

對(duì)膠質(zhì)瘤中IgG表達(dá)與Integrinβ6、P16表達(dá)的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，膠質(zhì)瘤中IgG與Integrinβ6高表達(dá)，二者表達(dá)呈正相關(guān)，P16低表達(dá)，與IgG表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，提示三者相互作用，可能在膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展中起一定作用。

綜上所述，IgG在膠質(zhì)瘤腫瘤細(xì)胞中的異位表達(dá)具有重要的功能和病理學(xué)意義，IgG和腦膠質(zhì)瘤的惡性轉(zhuǎn)化具有相關(guān)性。對(duì)這一現(xiàn)象的深入研究，將可能揭示免疫球蛋白新的生理和病理功能，對(duì)腫瘤的診斷、預(yù)后判斷以及靶向治療提供新的思路。

參考文獻(xiàn)

[1] Amzel，L.M.& Poljak，R.J.Three-dimensional structure of immunoglobulins.Annu Rev Biochem，1979， 48， 961-97.

[2] 薛雨健，張 杰，汪明玉，等.IgG在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其與OPN、MMP-2、MMP-9、P16的關(guān)系.解剖科學(xué)進(jìn)展，2013， Nov，19（6）：513～515，519.

[3] 張朝陽(yáng)，徐克森，楊廣運(yùn)，等.反義整合素β6基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞作用的研究.中華醫(yī)學(xué)雜志.2007，October，87（37）：2645-2647.

本文編輯：李 豆endprint