干擾素刺激基因、巨噬細胞移動抑制因子在腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞的表達水平

高 巖, 姚擁軍

(1. 山東省蘭陵縣中醫(yī)院 病理科, 山東 蘭陵, 277700;2. 山東省蘭陵縣人民醫(yī)院 病理科, 山東 蘭陵, 277700)

干擾素刺激基因、巨噬細胞移動抑制因子在腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞的表達水平

高 巖1, 姚擁軍2

(1. 山東省蘭陵縣中醫(yī)院 病理科, 山東 蘭陵, 277700;2. 山東省蘭陵縣人民醫(yī)院 病理科, 山東 蘭陵, 277700)

目的 探討干擾素刺激基因(STING)、巨噬細胞移動抑制因子(MIF)在腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞的表達水平。方法 回顧性分析80例乳腺癌患者臨床資料，酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測STING、MIF在腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞的表達水平。結(jié)果 腫瘤微環(huán)境淋巴細胞Th1、Th2、Th17及CD8中STING、TBK1和IRF3、MIF及TNF-α的表達均顯著高于腫瘤細胞中的表達，而IL-2和IL-6的表達顯著低于腫瘤細胞表達(P<0.05)。結(jié)論 STING、MIF在腫瘤細胞中表達顯著高于腫瘤微環(huán)境淋巴細胞中的表達。

干擾素刺激基因; 巨噬細胞移動抑制因子; 淋巴細胞; 腫瘤微環(huán)境

腫瘤微環(huán)境是腫瘤細胞發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的重要環(huán)境，與腫瘤的大小、復發(fā)、轉(zhuǎn)移及患者的預后密切相關(guān)[1]。淋巴細胞是腫瘤微環(huán)境的重要組分，發(fā)生腫瘤浸潤的淋巴細胞免疫功能明顯異常，且可能與腫瘤細胞的生長及免疫逃逸有關(guān)[2]。干擾素刺激基因(STING)是DNA感受通路下游關(guān)鍵的接頭分子，與多種惡性腫瘤的病理過程密切相關(guān)[3]。巨噬細胞移動抑制因子(MIF)也參與了腫瘤細胞的增殖、分化、轉(zhuǎn)移及凋亡的調(diào)節(jié)過程[4]。本研究對STING、MIF在腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞的表達水平進行研究，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析本院2011年5月—2016年5月診治的80例乳腺癌患者的臨床資料，年齡38～56歲，平均45.7±10.4歲。納入標準: 所有研究對象均進行乳腺鉬靶及B超檢查，并經(jīng)病理學診斷確認; 所有研究對象具有完整的臨床病理資料。排除標準: 術(shù)后非腫瘤原因死亡患者; 并發(fā)其他惡性腫瘤患者。本研究中所有對象均知情并簽署知情同意書，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2 觀察指標

本研究分析腫瘤細胞及腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞Th1、Th2、Th17及CD8中干擾素刺激基因(STING)、巨噬細胞移動抑制因子(MIF)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素2(IL-2)、白介素6(IL-6)、TANK結(jié)合激酶1(TBK1)及干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)水平變化。

1.3 試劑及方法

本研究采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測相關(guān)因子的表達。STING蛋白檢測試劑盒購自Zymed公司; TBK1檢測試劑盒購自Newmark公司; IRF3蛋白檢測試劑盒購自R&D公司; MIF蛋白檢測試劑盒購自R&D公司; TNF-α蛋白檢測試劑盒購自Sigma公司。所有檢測過程均按照試劑盒說明書進行。

1.4 統(tǒng)計分析

采用SPSS 20.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料采用平均數(shù)±標準差表示，比較采用χ2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 STING在腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞的表達水平分析

研究發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境淋巴細胞Th1、Th2、Th17及CD8中STING、TBK1和IRF3的表達均顯著高于腫瘤細胞中的表達(P<0.05), 見表1。

表1 STING在腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞的表達水平分析

與腫瘤細胞比較, *P<0.05。

2.2 MIF在腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞的表達水平分析

研究發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境淋巴細胞Th1、Th2、Th17及CD8中MIF及TNF-α的表達均顯著高于腫瘤細胞中的表達，而IL-2和IL-6的表達顯著低于腫瘤細胞表達(P<0.05)，見表2。

表2 MIF在腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞的表達水平分析 U/mL

與腫瘤細胞比較, *P<0.05。

3 討 論

腫瘤微環(huán)境中的淋巴細胞對腫瘤的作用依其種類、數(shù)量和功能不同而不同。同一種淋巴細胞可能通過不同的機制對一種腫瘤細胞的生長有促進作用，而對另一種腫瘤細胞的生長發(fā)揮抑制作用。本研究在對STING、MIF在腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中淋巴細胞的表達水平進行研究時發(fā)現(xiàn)，腫瘤微環(huán)境淋巴細胞Th1、Th2、Th17及CD8中STING、TBK1和IRF3、MIF及TNF-α的表達均顯著高于腫瘤細胞中的表達，而IL-2和IL-6的表達顯著低于腫瘤細胞表達。因此，STING、MIF在腫瘤細胞中表達明顯高于腫瘤微環(huán)境淋巴細胞中的表達。

STING-TBK1-IRF信號通路蛋白是腫瘤分化、增殖、轉(zhuǎn)移及凋亡的重要調(diào)控通路，也是腫瘤微環(huán)境調(diào)控的重要蛋白[5-7]。在分析口腔鱗狀細胞癌中STING的表達及意義時，證實STING及其下游基因在OSCC癌灶組織內(nèi)低表達，下調(diào)的STING-TBK-1-IRF-3通路可能與癌癥進程有關(guān)[8]。在分析TBK1在胰腺癌中的表達及其與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系時發(fā)現(xiàn), TBK1是反映胰腺癌惡性程度的腫瘤標記物，與胰腺癌侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可能源于TBK1參與了胰腺癌的EMT現(xiàn)象[9]。李繼佳[10]發(fā)現(xiàn)TBK1在舌癌細胞中表達并活化，IKKi的磷酸化水平高于TBK1, 同時抑制它們可有效抑制舌癌細胞的增殖，表明TBK1和IKKi可成為新型抗舌癌藥物的分子靶點。以往的研究[11-12]也發(fā)現(xiàn)體外構(gòu)建的HSV-2DNA疫苗pc-P6-g BCTL-TBK-1具有一定的免疫原性，且能誘導產(chǎn)生一定強度的細胞免疫和體液免疫, TBK-1具有良好的分子伴侶作用。在分析IRF變化對惡性腫瘤化療的意義時也證實IRF在反映骨髓造血功能時比白細胞更靈敏，可作為惡性腫瘤患者療效監(jiān)測的有效手段之一[13-15]。以往的研究[16-18]發(fā)現(xiàn)TBK-1能夠增強HBcAg核酸疫苗誘導的特異性體液免疫及細胞免疫應答，且IRF1和IFN-β相互調(diào)節(jié)，且二者可能共同調(diào)節(jié)IRF5的表達，進一步促進M1巨噬細胞極化及其抗腫瘤效應[19-22]。本研究也發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境淋巴細胞Th1、Th2、Th17及CD8中STING、TBK1和IRF3、MIF及TNF-α的表達均顯著高于腫瘤細胞中的表達，而IL-2和IL-6的表達顯著低于腫瘤細胞表達。因此，STING、MIF在腫瘤細胞中表達顯著高于腫瘤微環(huán)境淋巴細胞中的表達。

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The expression of interferon-stimulated genes and macrophage migration inhibition factor in tumor cells and lymphocytes in tumor microenvironment

GAO Yan1, YAO Yongjun2

(1. Department of Pathology, Lanling County Hospital of Traditional Chinese Medicine in Shandong Province, Lanling, Shandong, 277700; 2. Department of Pathology, Lanling People′s Hospital in Shandong Province, Lanling, Shandong, 277700)

Objective To explore the expression of interferon-stimulated genes (STING) and macrophage migration inhibition factor (MIF) in tumor cells and lymphocytes in tumor microenvironment. Methods The date of 80 breast cancer patients in our department were retrospectively analyzed. The expression levels of STING and MIF were determined in tumor cells and lymphocytes in tumor microenvironment by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA). Results The expression levels of STING, BK1, IRF3, MIF and TNF-α were higher, while IL2 and IL6 were lower in lymphocytes such as Th1, Th2, Th17, and CD8than that in tumor cells(P<0.05). Conclusion STING and MIF have higher expression in tumor cells than lymphocytes in tumor microenvironment.

interferon-stimulated genes; macrophage migration inhibition factor; lymphocytes; tumor microenvironment

2017-02-11

山東省中醫(yī)藥科技發(fā)展計劃項目(2015-464)

R 730.5

A

1672-2353(2017)15-068-03

10.7619/jcmp.201715018