HE4在卵巢癌癌組織中表達研究

李文見, 丁凱利， 王 喆， 彭盼盼

(商丘市中心醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河南 商丘 476000)

HE4在卵巢癌癌組織中表達研究

李文見, 丁凱利， 王 喆， 彭盼盼

(商丘市中心醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河南 商丘 476000)

目的 分析人附睪蛋白4(HE4)在卵巢癌組織中表達的臨床意義。方法 45例卵巢癌(卵巢癌組)和30例卵巢上皮性良性腫瘤患者(卵巢良性腫瘤組)及30名同期體檢的健康志愿者(對照組)為研究對象，檢測不同卵巢組織中HE4蛋白表達水平，比較卵巢癌、卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織中HE4 表達情況，分析卵巢癌不同臨床分期與HE4表達的關系。結果 卵巢癌組織中HE4表達陽性率(77.78%)顯著高于卵巢良性腫瘤(10.00%)(χ2=33.081,P=0.000)、正常卵巢組織(0.00%)(χ2=43.750,P=0.000)，差異均有統(tǒng)計學意義，卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織HE4表達陽性率比較,無統(tǒng)計學意義(χ2=1.404,P=0.236)。卵巢癌Ⅲ-Ⅳ期組織中HE4表達陽性率88.46%顯著高于Ⅰ-Ⅱ期組織中HE4表達陽性率63.16%(χ2=4.07,P=0.044)。結論 卵巢癌癌組織中HE4表達陽性率較高，且HE4表達與卵巢癌臨床分期密切相關，HE4在卵巢組織中表達可作為卵巢癌的診斷與預后預測指標之一。

卵巢癌；卵巢良性腫瘤；HE4

有學者[1]于1991年在人附睪遠端上皮細胞中成功克隆到人附睪蛋白4(HE4)，HE4定位于染色體20q12-13.1上，長約12Kb，其編碼蛋白質(zhì)被認為附睪特有的、與精子成熟有關。HE4在卵巢漿液性癌、卵巢子宮內(nèi)膜樣癌組織中的表達超過90%，在卵巢透明細胞癌組織中的表達超過50%，而在卵巢黏液性癌及正常卵巢組織中幾乎不表達，認為HE4在卵巢癌的臨床診斷中具有重要價值[2]。近年來有研究[3]認為HE4在鑒別良惡性卵巢腫瘤方面優(yōu)于CA125，是早期診斷卵巢癌的首要標記物。本研究以商丘市中心醫(yī)院近兩年收治的45例卵巢癌和30例卵巢上皮性良性腫瘤患者為研究對象，探討HE4在卵巢癌組織中表達的臨床意義,報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2014年1月—2016年8月該院診治的45例卵巢癌和30例卵巢上皮性良性腫瘤患者為觀察對象，均屬于首次發(fā)病，并經(jīng)影像學檢查或手術病理組織確診。排除標準：①近3個月內(nèi)接受激素和放、化療或其他生物治療的患者。②同時存在兩種及以上病理類型腫瘤及轉移癌患者。③病歷資料不全者。另選30例同期體檢的健康志愿者。45例卵巢癌患者年齡28～65(48.06±5.33)歲，其中漿液性癌18例、黏液性癌15例、子宮內(nèi)膜樣腺癌9例、顆粒細胞癌2例、透明細胞癌1例，F(xiàn)IGO臨床分期Ⅰ～Ⅱ期19例、Ⅲ～Ⅳ期26例，其中11例出現(xiàn)淋巴結轉移；良性組26～56(43.98±7.90)歲，其中卵巢肌瘤21例、卵巢囊腫9例；健康志愿者27～65(45.55±8.04)歲。所有入選對象均簽署知情同意書，本研究取得該院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 試劑 試劑鼠抗人HE4多克隆抗體(北京福瑞天成生物有限公司)；S-P免疫組化試劑盒(上海研卉生物科技有限公司)。

1.2.2 檢測方法 以體積分數(shù)10%甲醛液固定采集的組織標本，常規(guī)石蠟包埋，將蠟塊連續(xù)切片3張(厚度4-5 μm)，無水乙醇脫水處理，放入60 ℃烤箱中(放置時間>2 h)；同一個標本1張HE染色，2張備用，嚴格按S-P免疫組化試劑盒操作說明進行，顯微鏡下標本為棕黃色則提示染色呈陽性，由我院病理科資深醫(yī)師在相同條件下統(tǒng)一觀察每張切片后作出評估。

1.2.3 觀察指標 ①判斷和評估方法：以二次計分法為原則，首先按染色強度計分：無色計0分，淡黃色計1分，棕黃色計2分，棕褐色計3分；然后按陽性細胞百分比計分，陰性計0分，陽性細胞數(shù)<10%計1分，11%～50%計2分，51%～75%計3分，>75%計4分；染色強度計分與陽性細胞百分比計分的乘積作為最終結果，乘積≤2為陰性表達，>2為陽性表達[4]。②比較卵巢癌、卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織中HE4 表達情況。③卵巢癌不同臨床分期與HE4表達的關系。

1.3 統(tǒng)計學處理 應用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 比較卵巢癌、卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織中HE4 表達情況 卵巢癌組織中HE4表達陽性率77.78%顯著高于卵巢良性腫瘤10.00%(χ2=33.081,P=0.000)、正常卵巢組織0.00%(χ2=43.750,P=0.000)，差異均有統(tǒng)計學意義；卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織HE4表達陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.404,P=0.236)。見表1。

表1 卵巢癌、卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織中HE4 表達情況比較[n(%)]

注：與卵巢良性腫瘤比較，1)P=0.000;與正常卵巢組織比較，2)P=0.000。

2.2 卵巢癌不同臨床分期與HE4表達的關系 卵巢癌Ⅲ-Ⅳ期組織中HE4表達陽性率88.46%顯著高于Ⅰ-Ⅱ期組織中HE4表達陽性率63.16%，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.07,P=0.044)。見表2。

表2 卵巢癌不同臨床分期與HE4表達的關系[n(%)]

注：不同分期組織中HE4表達陽性率比較，χ2=4.07,P=0.044。

3 討論

卵巢癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，其致死率在婦科腫瘤中居首位，發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌，近年來其臨床發(fā)病率逐年上升，且有低齡化趨勢，卵巢癌患者的5 a存活率較低，而及早診斷與治療對改善患者生存質(zhì)量及延長生存期至關重要。CA125作為目前臨床常用的主要腫瘤標志物，在婦科腫瘤的臨床診斷中具有一定的價值，但其仍缺乏對卵巢癌早期診斷的特異性和靈敏度，因而易造成誤診和漏診，甚至有臨床研究[5]認為僅25%的患者可通過CA125檢測而被早期發(fā)現(xiàn)并診斷。HE4基因?qū)儆赪AP基因家族，是乳清酸型四個二硫鍵核心域的蛋白質(zhì)，其蛋白基因編碼相對分子質(zhì)量為3kD，雖然其生物學功能尚不十分明確，但越來越多的臨床報道[6]證實其屬于一種具有高靈敏度和特異性的卵巢癌標志物。

本文通過檢測和對比卵巢癌、卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織中HE4的表達，結果發(fā)現(xiàn)卵巢癌組織中HE4表達陽性率77.78%顯著高于卵巢良性腫瘤10.00%、正常卵巢組織0.00%,差異均有統(tǒng)計學意義；卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織HE4表達陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義。提示HE4在卵巢癌癌組織中的表達與卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織具有顯著性差異，且陽性表達率較高。於永愛等[7]的相關臨床分析結果顯示HE4 在卵巢癌中的陽性表達率為80.00%明顯高于良性上皮性腫瘤，與本研究結果接近。此外，該研究還指出HE4在各種病理類型卵巢癌中均有表達，且存在一定的差異，如在漿液性卵巢癌中表達率最高可達90%以上，其次為子宮內(nèi)膜樣癌。本研究則進一步分析卵巢癌不同臨床分期患者HE4表達情況，其中卵巢癌Ⅲ-Ⅳ期(一般為臨床晚期)組織中HE4表達陽性率88.46%顯著高于Ⅰ～Ⅱ期(一般為臨床早期)組織中HE4表達陽性率63.16%，提示在癌組織中HE4表達情況可進一步幫助判斷卵巢癌的臨床分期。陸冬梅等[8]的臨床研究也證實HE4的高表達與卵巢癌的臨床病理分期、組織分化程度、絕經(jīng)狀態(tài)和淋巴結轉移等有顯著相關性，可作為預后評估指標。與本研究結論一致。本研究例數(shù)有限，相關結論仍須進一步論證。

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[2] Galqano MT,Hampton GM,Frierson HF Jr.Comprehensive analysis of HE4 expression in normal and malignant human tissues[J].Mod Pathol,2006,19(6):847-853

[3] 葉敏,唐均英.血清CA125及HE4診斷卵巢癌的研究進展[J/OL].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展,2013,22(6):497-498.

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[5] 蘇漢文,向梅先.HE4 和 CA125 在卵巢腫瘤患者血清中的表達[J].醫(yī)學研究雜志,2014,43(10):71-74.

[6] 李瑞芹.卵巢癌患者組織中HE4的表達與臨床病理因素相關性分析[J].中國醫(yī)學工程,2015,23(10):47-48.

[7] 於永愛,金仙玉.HE4、Sp1在上皮性卵巢癌中的表達及其臨床意義[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志,2016,17(5):391-394.

[8] 陸冬梅,楊俊紅.上皮性卵巢癌組織中HE4和CD133的表達及臨床意義[J].河北醫(yī)藥,2015,37(23):3538-3540.

[責任編輯：馬香芹]

2016-11-09

李文見(1973-)，男，河南省夏邑縣人，碩士，主治醫(yī)師，從事腫瘤基礎與臨床工作。

R 737.31

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1008-9276(2017)03-0211-03