革蘭染色法與生理鹽水法在婦女陰道炎性反應(yīng)分泌物中的應(yīng)用對比探討

范源源

（阜新市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心，遼寧 阜新 123000）

革蘭染色法與生理鹽水法在婦女陰道炎性反應(yīng)分泌物中的應(yīng)用對比探討

范源源

（阜新市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心，遼寧 阜新 123000）

目的對比革蘭染色法與生理鹽水法在婦女陰道分泌物中陽性檢出率。方法隨機(jī)納入2015年8月至2015年12月期間，在我院婦科門診行陰道分泌物檢查的328例患者為研究對象，陰道分泌物標(biāo)本均采用革蘭染色法與生理鹽水法進(jìn)行檢測，觀察比較兩種檢測方法的檢測結(jié)果。結(jié)果革蘭染色法檢驗(yàn)的總陽性率為81.40%，其中檢出毛滴蟲63例，念珠菌91例，線索細(xì)胞69例，淋球菌27例。生理鹽水法檢驗(yàn)的總陽性率為55.18%，其中檢出滴蟲68例，念珠菌54例，線索細(xì)胞36例，淋球菌11例；兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論在婦女陰道分泌物標(biāo)本炎性反應(yīng)檢查中革蘭染色法的檢出率顯著高于生理鹽水法，但在毛滴蟲感染檢出率上革蘭染色法略遜于生理鹽水法。所以采取革蘭染色法檢查為主，特殊情況是輔以生理鹽水法重新檢測標(biāo)本為目前臨床中最全面、可靠的檢驗(yàn)方法。

陰道炎性反應(yīng)分泌物；革蘭染色法；生理鹽水法

陰道炎癥是婦女的一種常見病，多數(shù)為慢性炎癥，極大影響婦女的日常生活質(zhì)量，或引起不孕等相關(guān)并發(fā)癥。目前，主要的炎癥檢查方法為提取陰道分泌物，然后進(jìn)行革蘭染色法或生理鹽水法，觀察分泌物中是否有細(xì)菌、真菌等病原體感染。目前對兩組方法的檢測率多位專家學(xué)者持不同意見[1-2]。本文對328例陰道分泌物標(biāo)本同時進(jìn)行革蘭染色法與生理鹽水法檢測，全面客觀的記錄分析所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為臨床檢驗(yàn)提供參考意見，現(xiàn)匯報如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：選取2015年8月至12月來我院婦科門診就診，因病情需要選擇進(jìn)行陰道分泌物檢測的患者，共有陰道分泌物328例。所有陰道分泌物取樣操作流程符合相關(guān)規(guī)定，取材后立刻送檢，避免因放置時間過長影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

1.2 檢驗(yàn)方法

1.2.1 肉眼觀察：檢測前需觀察分泌物的性狀和顏色。正常的陰道分泌物是白色稀糊狀或者蛋清樣，高度黏稠，無腥臭味。若有炎癥感染，則陰道分泌物的性狀及顏色會有相應(yīng)改變且具有腥臭味。細(xì)菌性陰道炎的分泌物是稀薄、均質(zhì)，有黏附性；滴蟲性陰道炎分泌物為稀薄的泡沫狀；念珠菌陰道炎分泌物為豆腐渣樣；化膿性感染分泌物呈膿性，且顏色為黃色或黃綠色。若白帶內(nèi)混有血液，且具有特殊臭味，應(yīng)高度懷疑惡性腫瘤、宮頸息肉等[3]。

1.2.2 生理鹽水法：將需檢查的標(biāo)本拭子直接涂抹在滴有鹽水的載玻片上，注意需涂抹均勻。然后用低倍顯微鏡觀察有無陰道毛滴蟲、念珠菌菌絲等，再用高倍顯微鏡觀察白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、桿菌、球菌，并尋找有菌體或微生物，并如實(shí)記錄。

1.2.3 革蘭染色法：用燒灼滅菌后的接種環(huán)從培養(yǎng)液中取一環(huán)菌，涂抹在滴有鹽水的載玻片上，注意需涂抹均勻，涂成薄薄一層。使涂片在室溫下自然干燥，或用酒精燈稍微加熱，使之迅速干燥。干燥后手持載玻片一端，使標(biāo)本面朝上，在酒精燈的火焰外側(cè)快速來回移動3～4次，共3～4 s，待放置冷卻后進(jìn)行染色。染色分為初染、媒染、脫色及復(fù)染。待染色成功后進(jìn)行干燥，即可用顯微鏡進(jìn)行觀察[4]。

顯微鏡下革蘭陰性菌呈紅色，革蘭陽性菌呈紫色。觀察到細(xì)胞邊緣不清楚并有大量的革蘭陰性桿菌或染色不深的球桿菌劇集，形成細(xì)胞團(tuán)，則是線索細(xì)胞。當(dāng)看到卵圓形革蘭染色孢子或假菌絲是可判斷為念珠菌性陰道炎感染；發(fā)現(xiàn)分散于白細(xì)胞內(nèi)外，有腎形的革蘭陰性雙球菌存在時考慮淋病奈瑟菌；而陰道毛滴蟲顯微鏡下則是呈梨形、整個胞體紅似粒細(xì)胞核及鞭毛等特征[5]。

革蘭染色的成敗關(guān)鍵在于染色環(huán)節(jié)，需嚴(yán)格掌握酒精脫色的程度。如脫色過度，則革蘭陽性菌可被誤認(rèn)為革蘭陰性菌；而脫色不足時，革蘭陰性菌又可能被誤認(rèn)為革蘭陽性菌。還有菌齡也同樣影響染色的結(jié)果，如革蘭陽性菌培養(yǎng)時間過長，或已死亡及部分菌體自行溶解，都常呈陰性反應(yīng)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：將研究數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)革蘭染色法檢查陽性率要明顯高于生理鹽水法的檢查方法（P＜0.05），但是通過對主要感染種類的檢查數(shù)據(jù)分析，可以看出在毛滴蟲的檢測率上，生理鹽水法略高于革蘭染色法檢查，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在另外3種病原體（念珠菌、線索細(xì)胞、淋球菌）的檢查，革蘭染色法藥顯著優(yōu)于生理鹽水法（P＜0.05）。此外，革蘭染色法檢查報告中有17例感染不在4種主要感染范圍內(nèi)，生理鹽水法檢查報告種有12例不在感染范圍內(nèi)，見表1、表2。

表1 兩組檢驗(yàn)方法總陽性率（%）對比

表2 兩種檢查方法主要感染種類陽性數(shù)對比

3 討 論

在臨床中發(fā)現(xiàn)毛滴蟲、線索細(xì)胞及念珠菌感染為臨床炎癥的主要病原體，而進(jìn)行陰道分泌物涂片的常規(guī)檢查，能直接了解宮頸及陰道是否有炎癥存在、評估其炎癥程度及感染類型。選擇準(zhǔn)確可靠檢測出高的檢驗(yàn)方法，為臨床診斷提供決定性的依據(jù)，是醫(yī)師診查的利器，能讓醫(yī)師科學(xué)合理有效地選擇抗生素，治療及預(yù)防婦科疾病的感染及傳播，維護(hù)社會及家庭穩(wěn)定。

本研究通過革蘭染色法和生理鹽水法檢測相同標(biāo)本發(fā)現(xiàn)，革蘭染色法對念珠菌、線索細(xì)胞、和淋球菌的檢查比生理鹽水法更加的敏感、有效。根據(jù)目前的流行病學(xué)調(diào)差分析，婦科生殖道感染中真菌引起的感染不斷增多，呈急劇上升趨勢。所以如何使真菌感染陽性率檢測提高，已成為臨床醫(yī)師與檢驗(yàn)人員密切關(guān)注的問題[6]。

生理鹽水法在顯微鏡尋找念珠菌時，如果檢測樣品中念珠菌量少，正好上皮細(xì)胞與念珠菌覆蓋、重疊，導(dǎo)致圖片不好辨別確定，從而使檢測效率減低。革蘭染色法檢測由于真菌的芽生孢子和假菌絲，被染上藍(lán)色，在顯微鏡下形態(tài)典型突出，容易尋找辨認(rèn)。這樣就使念珠菌在革蘭染色法中漏診的概率降低，提高標(biāo)本的陽性率。

顯微鏡下找到線索細(xì)胞是確診細(xì)菌性陰道病的關(guān)鍵，檢測標(biāo)本行革蘭染后，顯微鏡下線索細(xì)胞聚集成團(tuán)，特點(diǎn)鮮明，容易尋找，而且找到線索細(xì)胞以后，可以進(jìn)一步進(jìn)行胺試驗(yàn)和pH試驗(yàn)，更加確認(rèn)檢驗(yàn)的正確性。生理鹽水涂片法檢查時，在高倍鏡下尋找線索細(xì)胞，該細(xì)胞邊緣呈現(xiàn)鋸齒狀，細(xì)胞壁已溶解，細(xì)胞核模糊不清，而且線索細(xì)胞上覆蓋大量細(xì)小的顆粒物，嚴(yán)重影響檢驗(yàn)人員觀察視野，降低檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

最近十年來，淋球菌感染的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，有成為社會公共安全問題的趨勢，性傳播是其主要傳播方式。采用革蘭染色法檢驗(yàn)是目前最簡便、快速的輔助診斷手段，從患者陰道分泌物提取標(biāo)本后經(jīng)革蘭染色后會在白細(xì)胞內(nèi)外看到革蘭陰性桿菌雙球菌。是一種有效地篩查手段，可進(jìn)一步進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)進(jìn)行確診。但是革蘭染色法對毛滴蟲的檢出率略低于生理鹽水法，可能是因?yàn)槊蜗x是在25～37 ℃的環(huán)境中活動頻繁，使用革蘭染色法進(jìn)行檢驗(yàn)時，毛滴蟲已經(jīng)死亡，染色后與白細(xì)胞不易區(qū)分，從而減低檢出率。

綜上所述，革蘭染色法能更加全面、有效地對陰道分泌物的感染情況進(jìn)行檢測，但是在毛滴蟲的檢測率上不及生理鹽水法。故我們建議采取革蘭染色法結(jié)合生理鹽水法檢查陰道分泌物的標(biāo)本，以革蘭染色法為主，對高度懷疑毛滴蟲感染的標(biāo)本，但革蘭染色法又呈陰性反應(yīng)，應(yīng)重新進(jìn)行生理鹽水法檢驗(yàn)。這樣能更加完善標(biāo)本的檢查方法，避免漏診的現(xiàn)象，為臨床工作提供可靠保障。

[1] 廖秦平,張岱.中國女性生殖道感染診治現(xiàn)狀及研究進(jìn)展[J].國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志,2011,38(6):469-471.

[2] 蘇阿麗,李榮華,劉菊等.三種婦科陰道分泌物檢測方法的比較與分析[J].中國民康醫(yī)學(xué),2012,24(10):1262-1262.

[3] 劉金芳,宋先鋒.385例女性陰道分泌物常規(guī)檢查和支原體培養(yǎng)結(jié)果聯(lián)合觀察[J].中國民康醫(yī)學(xué),2011,23(3):279-280.

[4] 李曉玉.革蘭染色法在陰道分泌物真菌檢驗(yàn)中的價值觀察[J].中外醫(yī)療,2012,31(34):163-164.

[5] 江立千,陳恒.陰道分泌物涂片革蘭染色的臨床價值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(1):28.

[6] 何彩霞.婦科患者生殖道感染現(xiàn)狀及護(hù)理對策[J].中國藥物經(jīng)濟(jì)學(xué),2014(6):155-156.

R711.73 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1671-8194（2017）24-0036-02