中華枸杞組培快繁技術研究*

李 丹，吳海紅，岳 玲，呂春晶，王麗波

（1.遼寧省農(nóng)業(yè)科學院花卉研究所，遼寧 沈陽 110161； 2.遼寧省農(nóng)業(yè)科學院果樹研究所，遼寧熊岳115009）

中華枸杞組培快繁技術研究*

李 丹1，吳海紅1，岳 玲1，呂春晶2，王麗波1

（1.遼寧省農(nóng)業(yè)科學院花卉研究所，遼寧 沈陽 110161； 2.遼寧省農(nóng)業(yè)科學院果樹研究所，遼寧熊岳115009）

試驗以中華枸杞帶嫩芽的莖段作為外植體開展組培快繁技術研究，通過不同激素濃度配比對外植體芽誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)各個階段最佳培養(yǎng)基組合進行研究。試驗表明：芽誘導培養(yǎng)基以Ms＋6-BA 0.5＋IAA 0.1為最佳；芽增殖以Ms＋6-BA 0.5＋IAA 2.0為最佳；生根培養(yǎng)以1/2Ms＋NAA 0.1-0.5為最佳，栽培基質(zhì)以草炭∶河沙＝1∶1為宜。

中華枸杞；植物激素；組織培養(yǎng)

枸杞（Lycium chinense），落葉小灌木，茄科，枸杞屬，17世紀中葉被引種到法國，其后在歐洲、地中海沿岸國家及美洲國家相繼栽培和發(fā)展。枸杞為名貴的中藥材，又是良好的滋補品。近年來，枸杞又發(fā)展成為保健飲料和食品的加工原料，需求量日益增加。中華枸杞分布在我國東北、河北、山西、陜西等地區(qū)。中華枸杞用種子繁殖，其后代分離嚴重，選出的優(yōu)良植株，靠分蘗繁殖很慢，用常規(guī)扦插方法，存在繁殖材料來源有限，成活率低等問題。本試驗以遼寧省農(nóng)業(yè)科學院引進的中華枸杞的嫩芽作為外植體，采用組培的方法擴繁，具有用材少，繁殖系數(shù)高，速度快等優(yōu)點。

1 材料與方法

1.1 材料選擇

材料于2015年7月采于遼寧省農(nóng)業(yè)科學院院內(nèi)，選生長旺盛、健康的中華枸杞植株，采當年生的嫩枝作為外植體。

1.2 外植體處理

選用優(yōu)良單株當年生嫩枝，剪去葉片，只留有嫩芽，用洗衣粉水洗去表面污垢，用流水沖洗30 min左右。將嫩枝剪成2 cm左右?guī)?個芽的小段，放入75%乙醇溶液中浸泡5～10 s，用無菌水沖洗，用濾紙吸干，再放入0.1%的氯化汞溶液中消毒，芽消毒時間設計3、5、7 min，用無菌水沖洗3～4次，將帶芽的莖段兩端與氯化汞接觸處各切掉0.5 cm，接種到誘導培養(yǎng)上。

1.3 培養(yǎng)基選擇

1.3.1 誘導培養(yǎng)基選擇

以Ms為基本培養(yǎng)基，分別添加6-BA 0.5、1.0、2.0 mg／L和 IAA 0.1、0.5、1.0 mg／L濃度的激素，共計9個組合，pH值調(diào)為5.8，添加3% 濃度的綿白糖。將處理好的外植體接種到以上培養(yǎng)基中，每瓶接種一個芽。

1.3.2 增殖培養(yǎng)基

以Ms為基本培養(yǎng)基，分別添加6-BA 0.5、1.0、2.0 mg／L和 IAA 0.5、1.0、2.0 mg／L濃度的激素，共計9個組合，pH值調(diào)為5.8，添加3% 濃度的綿白糖。將誘導出的愈傷組織切成0.5 cm見方的小塊，接種到增殖培養(yǎng)基中，每瓶接種1塊。

1.3.3 生根培養(yǎng)基

以1／2 Ms為基本培養(yǎng)基，分別添加 NAA0、0.1、0.5、1.0 mg／L，共計 4個組合，添加 2%濃度的綿白糖。待不定芽長到2 cm左右時切下接種到生根培養(yǎng)基中，每瓶接種4個芽，接種20瓶，14 d后統(tǒng)計生根情況。

1.3.4 生根苗移栽

待瓶苗生有2～3條以上根時即可進行移栽，移栽基質(zhì)分別設定草炭、草炭∶河沙1∶1、草炭∶蛭石1∶1、河沙四種組合，14 d后觀察成活率。

2 結(jié)果與分析

2.1 外植體滅菌時間選擇

如表1所示，枸杞芽的最佳滅菌時間是5 min，時間過短芽表面的菌不能完全殺死，時間過長由于芽的組織比較嫩，氯化汞會把芽的生長點破壞掉，使芽不能萌發(fā)，也不能產(chǎn)生愈傷組織。

表1 外植體滅菌時間的選擇

2.2 誘導培養(yǎng)基的選擇

將滅完菌的芽接種到6-BA與IAA的9個組合中（見表2），每個組合中均有愈傷組織長出，但數(shù)量和質(zhì)地有很大差別，高濃度的6-BA的組合中長出的愈傷組織大都產(chǎn)生了玻璃化的現(xiàn)象，只有少量的芽長出，6-BA 0.5與IAA 0.1的組合長出的愈傷組織呈綠色，質(zhì)地緊密有多量的芽長出，由此可見，這配比組合有利于枸杞的愈傷組織的誘導。

2.3 芽增殖培養(yǎng)基的選擇

將帶有芽的愈傷組織切成帶芽小塊，每瓶接種1塊愈傷組織，每個組合接種40瓶，芽數(shù)隨機，15 d后統(tǒng)計增殖芽數(shù)。高濃度的6-BA與低濃度的IAA組合有利于芽的增殖，高濃度的IAA與低濃度的6-BA組合有利于芽的生長，在生產(chǎn)中應選擇既有利于芽分化又有利于生長的激素，以6-BA 0.5＋IAA 2.0的組合效果最佳。

2.4 生根培養(yǎng)基的選擇

將超過2 cm的芽切下接種到生根培養(yǎng)基中，以1／2 MS為基本培養(yǎng)基，不添加任何激素均能生根，但生根率較低，添加NAA 0.1～0.5效果最好，生根率可達98%。

2.5 栽培基質(zhì)的選擇

選擇生有2～3條根，生長健壯的苗進行移栽，移栽前2 d把瓶蓋打開煉苗，移栽時將苗根部的瓊脂清洗干凈，防止滋生霉菌導致根系腐爛。由圖1可以看出，草炭∶河沙＝1∶1的基質(zhì)適合枸杞組培苗的生長，移栽后苗注意遮蔭，待14 d左右苗完全成活后，撤掉遮蔭。

表2 不同6-BA、NAA對芽誘導的影響

表3 不同6-BA、NAA對芽增殖的影響

表4 不同6-BA、NAA對芽增殖的影響

圖1 不同移栽基質(zhì)對生根苗成活率的影響

3 結(jié)論

適合中華枸杞芽的滅菌時間是5 min，芽誘導最佳培養(yǎng)基以Ms基本培養(yǎng)基添加6-BA 0.5與IAA 0.1，芽增殖以Ms基本培養(yǎng)基6-BA 0.5＋IAA 2.0的組合效果最好，1／2 Ms添加NAA 0.1-0.5適合生根，栽培基質(zhì)以草炭∶河沙＝1∶1為宜。

［1］吳建華，王錦秀.枸杞新品系0502組織培養(yǎng)快繁技術研究［J］.寧夏農(nóng)林科技，2010（3）：10～11.

［2］廖思紅.枸杞組織培養(yǎng)工廠化育苗技術研究進展［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學，2014，42（23）：7700～7701，7722.

［3］唐曉杰，孫萍，馬德寶.枸杞組織培養(yǎng)快速繁殖技術［J］.華北大學學報，2011（4）：204～207.

［4］包振華，郭軍戰(zhàn)，周瑋，等.枸杞組織培養(yǎng)再生體系優(yōu)化［J］.西北林學院學報，2010，25（5）：73～76.

S567.103.8

B

1002－1728（2017）04－0086－03

10.3969／j.issn.1002－1728.2017.04.022

2017－06－29

李丹（1984－）女，助理研究員，從事園藝作物組織培養(yǎng)工作。