2，4-二硝基苯肼氣相色譜法測定食品中甲醛的含量

□ 賈 俊 周蘭影 鄭宏儒 劉大鵬 李桂杰 張 旭 吉林省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院

2，4-二硝基苯肼氣相色譜法測定食品中甲醛的含量

□ 賈 俊 周蘭影 鄭宏儒 劉大鵬 李桂杰 張 旭 吉林省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院

建立一種2,4-二硝基苯肼氣相色譜法測定食品中甲醛的方法，優(yōu)化色譜條件，測定分析市售米粉、腐竹和毛肚三種食品中的甲醛含量。食品經(jīng)水浸提，2,4-二硝基苯肼（DNPH）衍生15 min，正己烷萃取，經(jīng)HP-5型色譜柱（15 m×0.25 mm，0.25 μm）分離，N2為載氣，柱流量1.20 mL/min，分流比為10∶1，進樣口溫度為250 ℃，ECD電子捕獲檢測器溫度設(shè)為280 ℃時，色譜條件最佳。

甲醛；2,4-二硝基苯肼；氣相色譜；食品

甲醛（HCHO）是對人體細胞功能損害較大的致癌物，對神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和肝臟等也會產(chǎn)生毒害 。不法商販將其用在食品殺菌、防腐、增白、漂白、凝固和定型等加工過程中，產(chǎn)生極大的食品安全隱患。目前常用方法有分光光度法，但是分光光度法中的乙酰丙酮法中乙酰丙酮見光易分解，準確度及靈敏度低；變色酸法易受酚、胺和其他醛等物質(zhì)的干擾，操作較為繁瑣[1-4]。

本工作采用2,4-二硝基苯肼為衍生劑與甲醛脫水形成2,4-二硝基苯腙（HCHO-DNPH），由于該物質(zhì)的性質(zhì)比較穩(wěn)定，而且不易揮發(fā)，儀器響應(yīng)值較高，用氣相色譜檢測正己烷萃取反應(yīng)產(chǎn)物2,4-二硝基苯腙，間接測得食品中甲醛含量。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

氣相色譜儀（賽默飛世爾，TRAS-1300，配ECD檢測器）；渦旋振蕩器（XW-80型）；電熱恒溫水浴鍋（DK-S24型）；甲醛、2,4-二硝基苯肼、無水乙醇、氫氧化鉀，均為分析純。米粉、腐竹、毛肚，市售。

1.2 色譜條件

HP-5型毛細管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；正己烷萃取物，經(jīng)HP-5型色譜柱（15 m×0.25 mm，0.25 μm）分離，N2為載氣，柱流量1.20 mL/min，分流比為10∶1，進樣口溫度為250 ℃，ECD電子捕獲檢測器溫度設(shè)為280 ℃時，色譜條件最佳。

1.3 繪制標準工作曲線

分別取濃度為100 mg/L甲醛工作液0、25、50、100、200、300 μL放置到25 mL的具塞比色管中，然后分別加入2.8 mL的2,4-二硝基苯肼乙醇溶液，加入50 μL的濃鹽酸后搖勻，置于60 ℃水浴衍生30 min后，取流水快速冷卻并加入5 mL的正己烷搖勻，超聲萃取2 min，離心3 min，移取正己烷層于干凈試管中；再加入5 mL正己烷，重復(fù)萃取一遍，合并正己烷層混勻待測。

2 結(jié)果與討論

2.1 標準曲線、檢出限和測定下限

按照標準曲線繪制要求，在最優(yōu)色譜條件下進行相當于甲醛濃度為0、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 mg/L的標準溶液的檢測，繪制以峰面積與甲醛質(zhì)量濃度關(guān)系曲線。線性回歸方程為y=1.32×104x+21.62，相關(guān)系數(shù)r2=0.999 1，該方法的檢出限小于20 μg/L。甲醛測定下限為0.50 mg/kg。

2.2 選擇樣品前處理條件

甲醛易揮發(fā)性，提取方式對測定結(jié)果重復(fù)性影響大。通過考察浸泡時間和超聲波水浴振蕩時間對提取效果的影響。結(jié)果表明：在浸泡50 min、超聲波水浴中超聲10 min，色譜峰面積基本趨于穩(wěn)定，測試效果最佳。

2.3 色譜條件的選擇

衍生-氣相色譜法測定甲醛時，通常使用的檢測器有電子捕獲檢測器（ECD）與氫火焰離子化檢測器（FID）兩種，本實驗選用響應(yīng)高、雜峰少、干擾少的ECD檢測器測定。分別使用極性、中等極性和弱極性的色譜柱分析測定，實驗結(jié)果表明選用弱極性HP-5柱（聚5%苯基、5%甲基聚硅氧烷，30 m×0.32 mm，0.25 μm）作為實驗用柱效果最好。優(yōu)化儀器條件，最后確定的氣相色譜條件見1.2。甲醛標準溶液的氣相色譜圖見圖1。

2.4 方法的精密度及回收實驗

圖1 經(jīng)衍生的甲醛標準溶液的色譜圖

對米粉、腐竹、毛肚三種不同基質(zhì)樣品的加標回收率研究，在0.5、1.0、2.0 mg/kg三個濃度水平上加標回收實驗，每個樣品平行測定10次，添加水平為0.50 mg/kg，回收率在72%～110%；添加水平為1.00 mg/kg時，回收率范圍在77%～108%；添加水平為2.00 mg/kg時，回收率在88.5%～110%，相對標準偏差（n=10）在6.4%～13%，重現(xiàn)性和穩(wěn)定性好。

2.5 基質(zhì)對回收率影響

通過統(tǒng)計學(xué)t值檢驗分析，米粉、腐竹和毛肚三種不同基質(zhì)樣品的加標回收率無顯著性差異(P>0.05)，即樣品基質(zhì)對衍生色譜檢驗法的準確度基無影響。

3 結(jié)論

建立一種2,4-二硝基苯肼衍生氣相色譜法測定食品中的甲醛含量方法，優(yōu)化色譜條件，考察基質(zhì)效應(yīng)，發(fā)現(xiàn)該方法靈敏、準確、簡單且可行，不受樣品基質(zhì)干擾。該法靈敏度較高，檢出限、回收率和精密度均滿足食品檢驗分析的要求。

[1]朱杰麗,呂愛華,柴振林,等.食品中甲醛檢測方法研究進展[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,41(1):280-282.

[2]張存玲,于劍,翟敏德.居室空氣中甲醛的氣相色譜分析.色譜,1997,16(4):34

[3]任清,郭友嘉.氣相色譜法快速測定空氣中低分子量醛.色譜,1997,15(4):356-357

[4]黃曉蘭,黃芳,林曉珊,等.氣相色譜質(zhì)譜法測定食品中的甲醛[J].分析化學(xué),2004(12):36.

賈?。?985—），男，山東泰安人，碩士，檢驗員，工程師。研究方向：氣相色譜質(zhì)譜檢驗。