麗水地區(qū)健康體檢女性人乳頭狀瘤病毒感染情況分析

饒海英，戴 數(shù)，周 穎，鐘益芳,劉五高

(浙江省麗水市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 溫州醫(yī)學(xué)院第六附屬醫(yī)院，浙江 麗水 323000)

麗水地區(qū)健康體檢女性人乳頭狀瘤病毒感染情況分析

饒海英，戴 數(shù)，周 穎，鐘益芳,劉五高

(浙江省麗水市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 溫州醫(yī)學(xué)院第六附屬醫(yī)院，浙江 麗水 323000)

目的 了解浙江省麗水地區(qū)健康體檢女性生殖道人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染情況和基因分型的分布特征。方法 采用HPV分型基因芯片檢測系統(tǒng)對(duì)2013年1月至2015年12月間在浙江省麗水市人民醫(yī)院體檢的7 895例女性生殖道標(biāo)本進(jìn)行基因分型檢測，分析其總體感染率、重疊感染率、年齡的分布特點(diǎn)。結(jié)果 7 895例女性檢出 HPV感染者1 787例，感染陽性率為22.63%，其中HPV高危亞型1 513例，檢出率為19.16% ，占陽性感染者的84.67%，居前4位的高危亞型分別為HPV52(14.21%) 、HPV58(13.60%) 、HPV53(10.91%)、HPV16(10.30%)；HPV低危亞型274例，檢出率為 3.47%，占陽性感染者的 15.33%，居前2位的低危亞型分別為CP8304(9.79%)和HPV6(2.01%)。所有HPV陽性病例中單一亞型病毒株感染者占84.56%，雙重亞型病毒株感染者占13.15%，三重及三重以上亞型病毒株感染者占2.29%。多重感染時(shí)隨著合并感染的亞型數(shù)增加，所占比例逐漸降低?！?1歲年齡組和51～60歲年齡組的感染率較高，分別達(dá)到30.96%和28.38%。結(jié)論 浙江省麗水地區(qū)健康體檢女性人群HPV感染常見亞型為HPV52型、HPV58型、HPV53型，HPV16型，≥61歲年齡組和51～60歲年齡組人群HPV感染率較高，相關(guān)部門應(yīng)加強(qiáng)此類人群HPV的預(yù)防控制。

健康女性； 感染； 人乳頭狀瘤病毒；基因分型

人乳頭狀瘤病毒(human papillomavirus，HPV) 是一種屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒 A 屬，具有高度的宿主性特異性，可使皮膚和黏膜異常增生，引發(fā)宿主疣狀病變及乳頭瘤[1]。目前已知的HPV基因分型100余種，大量研究表明HPV感染與宮頸病變及宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)[2-3],而高危型HPV檢測對(duì)于有效預(yù)防宮頸癌疾病具有重要意義。本研究旨在通過對(duì)麗水地區(qū) 7 895名健康體檢女性生殖道HPV感染狀況及其亞型分布情況進(jìn)行調(diào)查分析，從而為本地區(qū)女性宮頸癌篩查和防治工作提供參考。

1資料與方法

1.1 研究對(duì)象

收集2013年1月至2015年12月間在浙江省麗水市人民醫(yī)院就診的健康體檢女性患者7 895例，年齡為17～72歲，中位年齡為38歲。根據(jù)年齡分為≤20歲組、21～30歲組、31～40歲組、41～50歲組、51～60歲組和≥61歲組。研究對(duì)象中排除已知確診的宮頸癌及宮頸癌治療后患者，所有送檢標(biāo)本均進(jìn)行HPV DNA分型檢測。所有研究對(duì)象均知情同意。

1.2 主要試劑與儀器

HPV核酸擴(kuò)增分型檢測系統(tǒng)，包括 DNA 提取試劑盒、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)擴(kuò)增試劑盒及雜交試劑盒和醫(yī)用核酸分子快速雜交儀由凱普生物科技有限公司生產(chǎn)；ABI2720 普通擴(kuò)增儀由美國 ABI公司生產(chǎn)。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本取樣步驟和要求

取宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本，先用棉拭子將陰道或?qū)m頸口過多的分泌物輕輕擦拭干凈，再用宮頸刷緊貼宮頸口稍用力順時(shí)針旋轉(zhuǎn)4～5圈，然后放入有專用細(xì)胞保存液的試管中；于-20℃冰箱保存，隔天測定。

1.3.2 HPV DNA 分型檢測 HPV 的分型檢測

嚴(yán)格按照凱普 HPV 分型檢測試劑盒要求進(jìn)行操作，共檢測以下 21 型，包括 13 種高危亞型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68；5 種低危亞型: HPV6、11、42、43、44；3 種中國人群常見亞型： HPV53、66、CP8304。

2結(jié)果

2.1HPV總體感染狀況

在7 895例健康體檢女性中共檢出HPV感染者1 787例，感染陽性率為22.63%。在所有陽性感染標(biāo)本中，其中單一基因亞型病毒感染者有1 511例，占84.56%；雙重基因亞型病毒感染者有235例，占13.15%；三重及三重以上基因亞型病毒感染者有41例，占2.29%，其中有1例樣本感染最多達(dá)5種HPV基因亞型，見表1。

表1 HPV感染結(jié)果分布狀況

Table 1 Overall distribution of HPV infection

HPV情況陽性數(shù)(n)檢出率(%)陽性構(gòu)成比(%)單個(gè)HPV感染151119.1484.56雙重HPV感染2352.9813.15三重HPV感染330.421.85四重HPV感染70.090.39五重及以上HPV感染10.010.06合計(jì)178722.63100.00

2.2高危HPV不同基因亞型感染結(jié)果檢出率和構(gòu)成比

在7 895例受檢標(biāo)本中共檢出HPV高危型感染1 513例，檢出率為19.16%，占全部陽性感染者的84.67%，其中感染率最高的HPV亞型是HPV52(3.22%)，占全部HPV感染的14.21%和高危HPV感染的16.79%，其他常見的高危亞型分別為HPV58(3.08%)、HPV53(2.47%)、HPV16(2.33%) 、HPV 39(1.53%) 、HPV 51(1.14%)和 HPV 33(1.14%)，其他一些較少的高危亞型依次為HPV31(0.91%)、HPV18(0.87%)、HPV68(0.81%) 、HPV 66(0.62%) 、HPV 56(0.46%)、 HPV 59(0.24%)、 HPV 45(0.23%)和 HPV 35(0.11%)，陽性檢出率均在1.00%以下，見表2。

2.3低危HPV不同基因亞型感染結(jié)果檢出率和構(gòu)成比

本次受檢標(biāo)本中共檢出低危型HPV感染者274例，檢出率為3.47%，占陽性感染者的15.33%。其中以CP8304(2.22%)最為常見，占全部HPV感染的9.79%和低危型HPV感染的63.84%；其余的低危亞型HPV6(0.46%)、HPV11(0.34%)、HPV44(0.32%)、HPV43(0.08%)和HPV42(0.06%)，陽性檢出率均低于1.00%，見表3。

表2 高危型HPV不同亞型檢測結(jié)果及分布狀況

Table 2 Results and distribution of high-risk HPV subtypes

HPV高危亞型陽性數(shù)(n)檢出率(%)陽性構(gòu)成比(%)高危構(gòu)成比(%)HPV522543.2214.2116.79HPV582433.0813.6016.06HPV531952.4710.9112.89HPV161842.3310.3012.16HPV391211.536.777.98HPV51901.145.045.95HPV33901.145.045.95HPV31720.914.034.76HPV18690.873.864.56HPV68640.813.584.23HPV66490.622.743.24HPV56360.462.012.38HPV59190.241.061.26HPV45180.231.011.19HPV3590.110.500.59合計(jì)151319.1684.67100.00

表3 低危型HPV不同亞型檢測結(jié)果及分布狀況

Table 3 Results and distribution of low-risk HPV subtypes

2.4不同年齡組女性HPV感染結(jié)果

所有7 895例受檢標(biāo)本按不同年齡分為6個(gè)組(≤20歲、21～30歲、31～40歲、41～50歲、51～60歲、≥61歲)。受檢人群感染高峰年齡分別為41～50歲組，HPV感染率為28.38%(檢測占比37.90%、陽性占比35.14%)，其次為31～40歲組，HPV感染率為20.25%(檢測占比28.89%、陽性占比25.85%)；受檢人群HPV感染率最高的為≥61歲組(30.96%)和51～60歲組(28.38%)，除了≤20 歲組因檢查例數(shù)較少無人感染外，其余各年齡組感染情況都較為接近，分別為41～50歲組(20.99%)、21～30歲組(20.32%)和31～40歲組(20.25%)，見表4。

表4 不同年齡組HPV感染分布狀況[n(%)]

Table 4 Distribution of HPV infection among different age groups[n(%)]

3討論

3.1HPV DNA基因分型檢測的臨床意義

HPV是一種雙鏈閉合環(huán)狀的小DNA病毒，主要感染人體皮膚或黏膜上皮細(xì)胞，引發(fā)感染部位的良性、惡性病變。研究證實(shí)HPV感染是宮頸上皮瘤變和浸潤性宮頸癌發(fā)生的重要原因。臨床HPV檢測對(duì)于宮頸癌高?；颊咴缙诜乐斡兄匾饬x，然而不同地區(qū)HPV的感染率和型別存在一定的地域和人群種族差異。

3.2HPV DNA基因分型檢測情況及分析

本研究旨在對(duì)浙江省麗水地區(qū)7 895例健康體檢女性宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行HPV基因分型檢測特點(diǎn)進(jìn)行分析。其中HPV感染者1 787例，陽性率為 22.63%。高于周平等[4]報(bào)道的溫州地區(qū)健康女性人乳頭狀瘤病毒17.12%的感染率，與王媛等[5]于2015年研究結(jié)果22.89%的HPV感染率較為接近。在所檢測的 21種亞型中，共檢出HPV高危亞型1 513例，檢出率為19.16%，在陽性病例中占比為84.67%，其中最常見的3種高危亞型分別是HPV52(3.22%)、HPV58(3.08%)、HPV53(2.47%)，分別占全部HPV感染的14.21%、13.60%、10.91%和高危HPV感染的16.79%、16.06%、12.89%；低危亞型檢出274例，檢出率為3.47%，所占比例相對(duì)較低(占比為15.33%)，其中以CP8304最為常見。與周平等[4]報(bào)道的HPV基因型分布以高危型HPV52為主，低危型中以HPV61最為普遍的結(jié)果有所不同。世界范圍最常見HPV基因亞型是HPV16，其他基因亞型因不同地區(qū)而存在分布差異。本次研究發(fā)現(xiàn)HPV16在本次研究中僅位列第四位，其檢出率為2.33%，占全部HPV感染的10.30%和高危HPV感染的12.16%，同時(shí)與多數(shù)亞洲國家以HPV52、HPV58感染為首的基因亞型相符[5]。研究結(jié)果的差異，可能跟不同地域及選擇的不同種族人群和年齡結(jié)構(gòu)分布情況有關(guān)[6]。一方面說明不同地區(qū)HPV基因型分布不同，各自所占比例也有所區(qū)別，有可能是環(huán)境、生活習(xí)慣尤其是性行為習(xí)慣及女性自我衛(wèi)生意識(shí)的不同狀況造成的；另一方面由于本次所有入選的受檢者都是健康體檢女性，其HPV感染情況可能跟門診就診患者會(huì)有所不同，不同基因亞型的分布情況也跟宮頸及宮頸病變本身密切相關(guān)。本研究還發(fā)現(xiàn)，多重亞型感染占陽性人群的15.44%感染中，伴隨著合并感染的亞型數(shù)增加，所占比例逐漸降低。在多重感染中，發(fā)現(xiàn)有高危亞型與高危亞型的混合，低危亞型與低危亞型的混合，也有高危亞型與低危亞型的混合，各種亞型混合其分布無一定的規(guī)律性。

3.3HPV DNA基因型分布與年齡相關(guān)性

對(duì)于年齡和HPV感染的相關(guān)性，不同的學(xué)者有不同的觀點(diǎn)。Steinau等[7]認(rèn)為21～24歲為 HPV感染的高峰年齡，而李愛敏等[8]研究認(rèn)為HPV感染的高峰年齡集中在≤19 歲及≥50歲年齡組。本次研究顯示，受檢人群感染高峰年齡分布在31～50歲，受檢人數(shù)占比達(dá)66.79%，HPV感染率為20.67%；HPV感染率較高的主要集中在≥61歲年齡組和51～60歲年齡組。原因一方面是由于該年齡段女性絕經(jīng)期、圍絕經(jīng)期出現(xiàn)的生理和免疫功能紊亂，機(jī)體抵抗能力下降，另一方面是由于高危型有持續(xù)感染的趨勢，潛在感染的持續(xù)和再活躍導(dǎo)致了第二高峰。研究結(jié)果中還發(fā)現(xiàn)≤20歲年齡組中6例女性無HPV陽性病例，這可能跟該年齡組體檢女性基數(shù)較小有關(guān)。

綜上所述，本次研究顯示HPV52、HPV58、HPV53、HPV16為本地區(qū)健康女性易感的HPV高危亞型，CP8304為本地區(qū)女性易感的 HPV低危亞型。此次研究明確了該地區(qū)健康女性 HPV基因亞型的分布情況，為該地區(qū)宮頸病變及宮頸癌的有效防治提供個(gè)性化的參考依據(jù)。

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[2]Ault K A,Joura E A,kjaer S K,etal.Adenocarcinoma in situ and associated human papillomavirus type distribution observed in two clinical trials of a quadrivalent human papillomavirus vaccine[J].Int J cancer,2011,128(6):1344-1353.

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[專業(yè)責(zé)任編輯：張忠明]

Human papilloma virus infection in females receiving physical examination in Lishui area in Zhejiang Province

RAO Hai-ying, DAI Shu, ZHOU Ying, ZHONG Yi-fang,LIU Wu-gao

(Department of Laboratory, Lishui People’s Hospital of Zhejiang Province, Sixth Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Zhejiang Lishui 323000, China)

Objective To understand genital human papilloma virus (HPV) infection in females taking physical examination in Lishui of Zhejiang Province and its genotype distribution characteristics. Methods Genitourinary specimens of 7 895 women receiving physical examination in Lishui People’s Hospital of Zhejiang Province from January 2013 to December 2015 were detected using HPV genotyping gene chip analysis system. Overall infection rate, superinfection rate and age distribution were analyzed. Results Altogether 1 787 women were detected with HPV infection in 7 895 women, with positive infection rate of 22.63%. Among them 1 513 cases were high-risk subtypes, and its detection rate was 19.16%, accounting for 84.67% of HPV positive patients. Top 4 high-risk subtypes were HPV52 (14.21%), HPV58 (13.60%), HPV53 (10.91%) and HPV16 (10.30%). Meanwhile 274 cases were low-risk HPV subtypes, and its detection rate was 3.47%, accounting for 15.33% of HPV positive patients. Top 2 low-risk subtypes were CP8304 (9.79%) and HPV6 (2.01%). Among all HPV positive cases, 84.56% cases were infected with single subtype virus strain, 13.15% infected with double subtype virus strain and 2.29% with triple and multiple subtypes virus strain. In multiple infection cases, with increase of number of subtypes, proportion reduced gradually. Infection rates of women over 61 and aged 51-60 were high, accounting for 30.96% and 28.38% respectively. Conclusion Common subtypes of HPV infection in women taking physical examination in Lishui of Zhejiang Province are HPV 52, HPV58, HPV53 and HPV16. HPV infection rates in women over 61 and aged 51-60 are high, and relevant departments should strengthen HPV prevention among these people.

healthy women; infection; human papilloma virus (HPV); genotyping

2017-01-06

饒海英(1980-)，女，主管檢驗(yàn)師，主要從事臨床基因檢測工作。

劉五高，副主任檢驗(yàn)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.07.045

R711.7

A

1673-5293(2017)07-0890-03