花毛茛育種及繁殖栽培技術(shù)研究進(jìn)展

李丕?！☆櫽廊A　陳玉林

摘 要：花毛茛為毛茛科毛茛屬觀賞價值很高的宿根草本花卉，市場應(yīng)用多為盆花和鮮切花。該文對國內(nèi)外花毛茛育種技術(shù)及繁育栽培技術(shù)等方面的研究進(jìn)行了綜述，并提出了未來花毛茛育種的目標(biāo)及繁育栽培的發(fā)展方向。

關(guān)鍵詞：花毛茛；育種；繁殖；栽培技術(shù)

中圖分類號 S682.19 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2017）15-0104-5

Abstract： Ranunculus asiaticus L. is an ornamental geophyte produced commercially as a cut flower and flowering potted plant. This article summarized the research progress on breeding techniques，propagation techniques and cultivation techniques. Furthermore，the breeding goals and the direction of Ranunculus asiaticus L. development in the future were proposed.

Key words： Ranunculus asiaticus L.；Breeding；Propagation；Cultivation

花毛茛（Ranunculus asiaticus L.），又稱草牡丹、波斯毛茛、洋牡丹，為毛茛科毛茛屬宿根草本花卉，原產(chǎn)于土耳其、敘利亞、伊朗、以色列及歐洲東南部?；⒒ǘ浯T大，花色鮮艷豐富，有紅、白、橙、粉等色，觀賞價值很高，在歐美已廣泛種植，現(xiàn)世界各國均有栽培，我國自20世紀(jì)80年代開始引進(jìn)栽培。本文對國內(nèi)外花毛茛育種技術(shù)及繁育栽培技術(shù)等方面研究進(jìn)行了綜述，并提出了未來花毛茛育種的目標(biāo)及繁育栽培的發(fā)展趨勢。

1 育種技術(shù)

1.1 選擇育種 花毛茛在種子繁育過程中會產(chǎn)生部分性狀的變異，如開花時間、株高、花徑、瓣性等，花色、花形、葉色及葉形等方面也會產(chǎn)生差異?；ㄉ蠒霈F(xiàn)從橙黃到淺黃、從深玫紅到粉紅等連續(xù)漸變的多種不同顏色，還會出現(xiàn)一些復(fù)色花?；⒌幕ㄐ头N類也很豐富，花瓣的多少、花瓣邊緣平滑與皺折、折疊與卷曲、花瓣的長寬比例和排列方式等都有差異，形成虞美人形、荷花形、裝飾形、月季形、茶梅形、芍藥形、繡球形、輻射形等各種花型[1]。通過選擇育種方法，抓住一個或幾個主要的目標(biāo)性狀，在群體中選擇符合要求的單株或進(jìn)行混合選擇，選優(yōu)去劣而育成擁有新性狀的新品種。除了在后代中繼續(xù)按照既定目標(biāo)性狀逐步選種，通常還要結(jié)合雜交育種方法來加快育種進(jìn)程。2001年大豐花卉所在花毛茛‘新樂園種子繁育的后代中發(fā)現(xiàn)一些花瓣邊緣呈鋸齒狀、花形呈繡球狀的變異單株，然后在各花色中都選出花瓣邊緣呈皺邊、波浪狀的單株進(jìn)行混合授粉，在其后代中繼續(xù)選擇最具有皺邊性狀的各花色單株留種，經(jīng)過4代的選育，確定其性狀一致穩(wěn)定后，于2005年育成了花毛茛皺邊新品系‘新貴并推向市場[2]。

1.2 雜交育種 花毛茛雜交育種一直伴隨著花毛茛產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，花毛茛花朵較大，去雄容易且單花結(jié)種數(shù)多，因此可以采用人工去雄的方法進(jìn)行雜交育種。目前，通過雜交育種已獲得多個系列的花毛茛新品系。顧永華等[3]將‘樂園系列中紅色系單株與黃色大花系單株雜交，選育出一種矮生、大花徑、黃橙雙色的新品種，命名為‘妖姬，其開花質(zhì)量好，適應(yīng)能力強(qiáng)，較耐寒，適合長三角地區(qū)的保護(hù)地栽培，作盆花觀賞價值很高。劉科偉等[4]也以‘樂園系列花毛茛品種為親本，經(jīng)混交、自交和兩次雜交選育出一種矮生、重瓣、大花徑的橙紅色新品種，命名為‘橙色年代。大豐花卉所選擇株高僅為12cm、花徑8～9cm且重瓣率非常高的自交系‘樂園矮與株高30cm、花徑10cm的大花寬瓣自交系進(jìn)行雜交，以期培育出一種重瓣率高的矮生大花雜交新品系[2]。

國外在花毛茛育種方面更多的是關(guān)注花色和花型，由于花毛茛缺少藍(lán)色品種，國外科學(xué)家想到將同科不同屬的開藍(lán)紫色花的銀蓮花（Anemone coronaria L.）與花毛茛進(jìn)行屬間雜交。Dhooghe等[5]研究發(fā)現(xiàn)這兩個物種的花粉形態(tài)很相似，且花毛茛品種‘Alfa花粉自交不親和。隨后Dhooghe等[6]進(jìn)行了屬間雜交，發(fā)現(xiàn)兩者雜交過程中既存在部分受精前生殖障礙也存在受精后敗育現(xiàn)象，通過對未成熟的瘦果進(jìn)行體外胚拯救獲得了F1代，觀察發(fā)現(xiàn)F1植株的形態(tài)特征與母本銀蓮花很相似，通過AFLP技術(shù)證實F1代確實為屬間雜種，對染色體觀察分析顯示該F1代發(fā)生了大量的染色體重排事件。

目前花毛茛育種目標(biāo)的發(fā)展趨勢主要有3個：選育大花、矮生抗倒伏且抗逆性強(qiáng)的盆栽品種；選育耐寒，適合園林應(yīng)用的品種；選育高桿、瓶插期長的切花品種。花毛茛的育種技術(shù)還相對傳統(tǒng)，未來可結(jié)合開發(fā)誘變育種、多倍育種及分子育種等更多育種手段，培育出更多優(yōu)異性狀的新品種。

2 繁殖技術(shù)

2.1 播種繁殖 花毛茛種子發(fā)芽適溫為10～15℃，超過20℃或低于5℃不能發(fā)芽[7]?；⒌恼２シN期為10月，但市場上為了延長其營養(yǎng)生長期，提早上市，培育優(yōu)質(zhì)盆花，一般會提前到8月中下旬播種。此時氣溫高，不利于種子發(fā)芽，需要進(jìn)行低溫催芽處理[8]?；⒎N子經(jīng)2.5℃低溫貯藏30d，其田間出苗率比常溫貯藏種子有很大的提高，但存在萌芽不一致的問題，達(dá)不到快速育苗并整體栽植的高效生產(chǎn)模式的要求[9]。王其剛等[10]研究了不同溫度及不同冷藏時間對種子萌發(fā)的影響，結(jié)果表明低溫預(yù)處理對花毛茛種子萌發(fā)有顯著的促進(jìn)作用，與對照相比，（-1±0.2）℃預(yù)處理30d的種子萌發(fā)效果最好，萌芽勢提高了37.7%，萌芽率提高了21.60%，種子活力指數(shù)增強(qiáng)了0.36。低溫預(yù)處理后進(jìn)行浸種催芽處理，黃建明[11]認(rèn)為變溫浸種催芽處理效果更好，即將種子用紗布包好后先在6～8℃左右的水中催芽7d，再在15～18℃條件下催芽7d，期間每天早晚各淘洗1次。催芽15d后開始種子萌動，當(dāng)少數(shù)種子發(fā)芽后即可播種。

2.2 分株繁殖 目前盆栽花毛茛和切花花毛茛的生產(chǎn)多采用分株繁殖，即以上一年播種培育的小塊根為繁殖材料進(jìn)行栽培，通常于秋季9—10月進(jìn)行。這種方式生產(chǎn)的切花產(chǎn)量較高[12]，且生產(chǎn)周期短，開花早，花莖粗短，重瓣率高，盆花質(zhì)量也更好[7]。花毛茛的塊根在休眠度夏的貯藏過程中，要進(jìn)行干燥處理，因此在栽培時首先要進(jìn)行吸水處理。如果讓塊根快速吸水，大部分塊根將腐爛，如果塊根吸水時的溫度過高，同樣也會腐爛，只有讓其在5℃以下緩慢吸水才最安全有效[12]。胡平[7]推測其原因可能是一方面塊根從極干燥狀態(tài)快速吸水，細(xì)胞的強(qiáng)烈膨脹會造成機(jī)械性損傷和生理障礙，另一方面塊根表面潛伏的菌絲在快速吸水時更容易侵入，且剛剛吸水的塊根的病菌抵御能力也非常弱。吸水處理一般是將塊根埋在比較粗大的珍珠巖或清潔的粗沙內(nèi)，充分噴水，多余的水分從容器下面漏出，不可積水，然后放在1～3℃的冷藏庫中讓其緩慢吸水。

2.3 扦插繁殖 日本研究者Nakamura等[13]通過實驗證明扦插繁殖花毛茛是可行的，且比較了20℃、15℃及10℃下的生根情況后發(fā)現(xiàn)20℃的根長最大，但花期較晚，不同溫度條件對塊根的干重沒有影響。

2.4 組織培養(yǎng) 花毛茛以分株繁殖和播種繁殖為主，但這2種方法存在著高成本、低效率、易退化雜化、質(zhì)量不穩(wěn)定等缺陷，難以滿足工廠化、標(biāo)準(zhǔn)化、高品質(zhì)的現(xiàn)代花卉發(fā)展要求，一定程度上制約了花毛茛的商業(yè)開發(fā)和應(yīng)用。組織培養(yǎng)方法具有繁殖系數(shù)高、速度快、且能夠較好地保持優(yōu)良品種特性等優(yōu)點(diǎn)，已在很多種花卉的規(guī)?；a(chǎn)上成功運(yùn)用。目前國外花毛茛組培技術(shù)已逐步成熟，主要利用花毛茛的花托和腋芽作外植體進(jìn)行組培[14-16]，但國內(nèi)還處于起步階段。有研究表明細(xì)胞分裂素（Cytokinins）不是啟動愈傷產(chǎn)生的必要激素，但其可以促進(jìn)愈傷組織的生長；如果培養(yǎng)基缺少細(xì)胞分裂素或只含有激動素（kinetin，KT）將不能使愈傷組織向體細(xì)胞胚發(fā)展，培養(yǎng)基只加入6-芐基腺嘌呤（6-benzyladenine，6-BA）或6-BA 與KT配合使用可以啟動愈傷組織的體細(xì)胞胚發(fā)展途徑。與分化的愈傷組織相比，未分化的愈傷組織中含有更多的酚類聚合物，且過氧化物酶和多酚氧化酶的活性更高，苯酚濃度在兩者中也有差別[17]。

李洪忠等[18]以花毛茛葉片為外植體，對花毛茛的組培條件進(jìn)行了初步探索，實驗結(jié)果表明：適合愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS+KT2.0mg/L+2，4-D0.5mg/L；適合芽分化的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。劉賓照等[19]用花毛茛雜交一代種子無菌催芽得到的無菌苗進(jìn)行不同濃度激素對花毛茛組培增殖率影響的研究，結(jié)果表明花毛茛組培增殖對萘乙酸（NAA）和KT比較敏感，對6-BA不敏感，3種激素及其濃度的最佳組合是MS+NAA0.03mg/L+6-BA0.20mg/L+KT2.50mg/L，增殖率可達(dá)到2.93。王其剛等[20]在花毛茛組培苗移栽試驗中發(fā)現(xiàn)腐殖土對有根苗移栽成苗率達(dá)82%，植株長勢較好；珍珠巖與腐殖土以1[∶]3的基質(zhì)配比更適宜花毛茛組培苗移栽，有根苗成活率可達(dá)90%，無根苗成活率達(dá)88%，且長勢好，病害少；生根粉處理無根苗后，在珍珠巖中栽培成活率有明顯提高，但植株長勢較差，在腐殖土中栽培成活率及植株長勢沒有明顯變化。

3 栽培技術(shù)

3.1 塊根催芽及種植 花毛茛塊根在高溫高濕的條件下容易腐爛，特別是進(jìn)行盆栽春節(jié)促成時需要于8月進(jìn)行種植，此時環(huán)境溫度較高，往往不易出苗。劉安成等[21]為了尋找簡單而有效的催芽方法，進(jìn)行了不同基質(zhì)包埋和不同溫度的催芽試驗，結(jié)果表明用蛭石包埋在12～20℃范圍內(nèi)催芽，其發(fā)芽生根整齊、迅速，塊根腐爛率很低。Cerveny等[22]研究比較了干塊根在不同溫度條件下吸水后的發(fā)芽生長情況，發(fā)現(xiàn)塊根在20℃吸水的成活率最高，15～25℃最適合干塊根的種植。王建強(qiáng)等[23]利用武漢和長陽基地的氣候差異，結(jié)合花毛茛的生長特性，將播種法與球根催芽法相結(jié)合，采用武漢育球→高山催芽育大苗→武漢催花的栽培方法，在生長過程無需加熱、補(bǔ)光即可在元旦、春節(jié)前培育出優(yōu)質(zhì)的花毛茛盆花。Cerveny[24]通過研究也得出了用干塊根生產(chǎn)盆花花毛茛過程中各個環(huán)節(jié)的最適生產(chǎn)條件。

3.2 肥料施用 Bernstein N等[25]研究了不同氮肥形態(tài)和施量對花毛茛的生長及采后質(zhì)量的影響，結(jié)果表明50mg/L濃度的氮最有利于花毛茛生長和開花品質(zhì)，且瓶插壽命是100mg/L氮肥濃度處理組的兩倍；開花數(shù)量和品質(zhì)受NH4+水平的影響不大。其后Bernstein N 等[26]在以色列花毛茛地栽種植區(qū)栽培花毛茛時，比較了原常規(guī)使用的氮肥濃度100mgL-1、鉀肥濃度120mgL-1和氮肥濃度減少到50mgL-1、鉀肥濃度減少到60mg L-1時花毛茛的生長和開花情況，結(jié)果表明新施肥濃度可以滿足花毛茛的生產(chǎn)要求，獲得的切花花莖長，瓶插壽命長，由于減少了施肥投入且獲得了質(zhì)量更好的花朵，農(nóng)民的收益將增加。Bernstein等[27，28]還研究了氮、鉀營養(yǎng)對花毛茛開花數(shù)量和質(zhì)量的影響，實驗發(fā)現(xiàn)花毛茛對氮、鉀營養(yǎng)的需求不高，氮、鉀營養(yǎng)過高會使花的質(zhì)量下降，并且會導(dǎo)致鈣在莖尖生長點(diǎn)的利用率降低從而導(dǎo)致莖倒伏。

3.3 灌溉 Valdez-Aguilar等[29]利用沙質(zhì)土壤栽培花毛茛時發(fā)現(xiàn)，花毛茛對灌溉水的pH值和鹽含量非常敏感。

3.4 病害防治 病毒病是花毛茛栽培過程中容易發(fā)生的一類主要病害，不同病毒引起的癥狀略有差異，但植株常受到幾種病毒的復(fù)合侵染，使癥狀復(fù)雜化，如葉片褪綠黃化、變厚、縮小、卷曲，植株矮化畸形，不能正常開花等[30]。侵染花毛茛的病毒主要有毛茛輕花葉病毒（RMMV）[31]、蠶豆萎蔫病毒（BBWV）[32]、黃瓜花葉病毒（CMV）[33]、番茄斑萎病毒（TSWV）[34]、毛茛白斑病毒（RWMV）及毛茛葉變形病毒（RLDV）[35]。目前對于花毛茛病毒病發(fā)病仍無很好的治療方法，控制病毒病還是以預(yù)防為主，主要的措施包括及時發(fā)現(xiàn)并消滅病源、注意生產(chǎn)材料的消毒、加強(qiáng)栽培管理水平等[30]。在花毛茛的生產(chǎn)過程中，灰霉病是另一種頻繁發(fā)生的病害，其發(fā)病后病情蔓延較快，可造成病株倒伏、變色腐爛直至枯萎死亡[36，37]。灰霉病是一種真菌性病害，當(dāng)溫度在18～21℃，相對濕度在90%以上且光照較弱時，容易發(fā)病。因此在栽培管理過程中要注意通風(fēng)，避免澆水過多和濕度過大，同時注意不可種植過密導(dǎo)致光照不足[37]。

3.5 塊根儲藏 花毛茛夏季休眠期氣候炎熱、多雨高濕，塊根若儲藏不當(dāng)容易發(fā)生易霉?fàn)€，常用的儲藏方法有干藏法、砂藏法和土藏法[38]。研究者們通過實驗研究來探索適宜的塊根儲藏條件，Beruto M等[39]研究了溫度和氧含量對儲藏期花毛茛塊根的影響，發(fā)現(xiàn)低溫處理塊根會促進(jìn)其提早開花，塊根在2℃儲藏一年仍具有約90%的出芽能力，且氧氣濃度對塊根沒有顯著影響。Cerveny等[40]研究了儲藏期間的溫度和濕度對花毛茛塊根呼吸率及存活率的影響，發(fā)現(xiàn)塊根的呼吸速率隨溫度和濕度的增加而增加，因此低溫干燥的條件更有利于花毛茛干塊根的貯藏。該團(tuán)隊還研究表明儲藏期間乙烯對花毛茛干塊根或浸水濕塊根均沒有影響[41]。

3.6 切花采收保鮮 隨著花卉市場的快速發(fā)展，目前花毛茛已開始走進(jìn)花店，作為鮮切花銷售，其花朵大且花色鮮艷，深受消費(fèi)者喜愛。但其同時存在著不耐貯運(yùn)、花梗較軟而容易彎曲折斷及水養(yǎng)時間較短等問題，因此，如何延緩切花花毛茛的衰老，延長其保鮮期（即瓶插壽命）就顯得極為重要。陸琳等[42]研究了不同預(yù)處液處理對花毛茛切花瓶插壽命的影響，發(fā)現(xiàn)在預(yù)處液中加入一定量的鈣和鉀，可增強(qiáng)花枝硬度，改善插花品質(zhì)，同時對延長切花的瓶插壽命效果顯著；但濃度大于1.5%的蔗糖會引起葉片發(fā)生黃化；8-HQ雖然具有殺死各類真菌和細(xì)菌的作用，可減少花莖維管束組織生理堵塞，但在對花毛茛切花進(jìn)行預(yù)處理時效果并不明顯。Scariot等[43]研究了乙烯和乙烯抑制物對10個花毛茛品種的切花保鮮期的影響，結(jié)果表明品種基因型及處理方式均對切花保鮮期長有影響，氨基乙醇酸 （AOA）及硫代硫酸鈉銀（STS）可抑制乙烯的形成，且有殺菌的效果，對部分品種還具有延長觀賞期的效果；外源乙烯對所有品種均沒有不良影響，因此推斷花毛茛對乙烯不敏感。Shahri等[44]研究了不同儲存溫度對花毛茛花朵采收后的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)將未開放的花朵在5°C條件下放置72h后再將其放在水中可以延長花朵觀賞期，可作為花毛茛采后儲存的一種有效方法。Shahri和Tahir[45]研究了花朵從蕾期到衰敗期萼片的膜滲透性、花瓣中糖、可溶性蛋白質(zhì)、氨基酸及酚類物質(zhì)的變化情況，為花毛茛花朵觀賞期延長調(diào)控等研究奠定了基礎(chǔ)。[Doɡan]等[46]研究了不同濃度蔗糖（2%和6%）及硝酸銀（10mg/L和30mg/L）對切花花毛茛瓶插壽命、溶液吸收、鮮重及花朵顏色的影響，結(jié)果顯示相比于蔗糖處理組和對照組，硝酸銀延長瓶插壽命的效果更加明顯。Zhang等[47]探討了9種不同保鮮劑對切花花毛茛保鮮效果和觀賞品質(zhì)的影響，結(jié)果表明用保鮮劑200mg/L 8-HQC+1%蔗糖+75mg/L AgNO3進(jìn)行瓶插處理，對延緩切花失重率上升、促進(jìn)花徑增大、延長壽命、維持葉綠素和花青素水平等方面有顯著的作用，保鮮效果好。黃海泉等[48]同樣研究了不同保鮮劑對切花花毛茛生理效應(yīng)的影響，比較發(fā)現(xiàn)3%蔗糖+200mg/L 8-HQS+40mg/L AgNO3+25mg/L SA+100mg/L Al2（SO4）3）能延長花毛茛的瓶插期至12d，還能較好地保持花瓣形態(tài)及色澤，保鮮效果最佳。

4 問題與展望

我國花毛茛的研究工作尚在起步階段，國內(nèi)栽培技術(shù)主要建立在經(jīng)驗的基礎(chǔ)上，缺乏很多量化指標(biāo)，如栽培基質(zhì)配方、營養(yǎng)液配方、光照控制、水分控制、繁育技術(shù)、采收方法等?，F(xiàn)有技術(shù)還無法很好地適應(yīng)規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化的生產(chǎn)，在一定程度上限制了花毛茛的推廣和應(yīng)用。我國現(xiàn)有花毛茛品種主要是從國外引入的‘樂園、‘花谷系列，存在花葶過高，花朵偏小，開花后遇風(fēng)雨易倒伏等問題，嚴(yán)重影響了其觀賞效果和觀賞期的長度，且其耐寒性較差，不能在長江流域地區(qū)露地越冬，導(dǎo)致生產(chǎn)成本較高，也限制了其在長江流域及以北地區(qū)園林綠化中的應(yīng)用。

因此，為進(jìn)一步擴(kuò)大花毛茛在我國花卉市場的推廣應(yīng)用，其育種目標(biāo)應(yīng)主要關(guān)注耐寒性、抗病性、早花或晚花、豐花及花型花色，培育具更好觀賞價值的品種及矮生盆栽品種以促進(jìn)其園林綠化的應(yīng)用，同時開展新品種商品化制種繁育及規(guī)模化栽培生產(chǎn)的研究。

參考文獻(xiàn)

[1]NY/T 2579-2014，植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南 花毛茛[S]. 北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2014.

[2]李學(xué)磊，李娟，潘春屏. 花毛茛育種技術(shù)[J].中國花卉園藝，2008，（6）：32-35.

[3]顧永華，高福洪，胡乾軍，等. 花毛茛新品種‘妖姬[J].園藝學(xué)報，2015，42（7）：1423-1424.

[4]劉科偉，高福洪，胡乾軍，等. 花毛茛新品種“橙色年代”的選育[J].北方園藝，2015（7）：151-152.

[5]Dhooghe E，Grunewald W，Reheul D，et al. Floral characteristics and gametophyte development of Anemone coronaria L. and Ranunculus asiaticus L. （Ranunculaceae）[J].Scientia Horticulturae，2012，138（2）：73-80.

[6]Dhooghe E，Reheul D，Labeke M C V. Intergeneric hybrids between Anemone coronaria L. and Ranunculus asiaticus L.[J].Acta Hortic，2012，937（937）：171-176.

[7]胡平. 花毛茛栽培技術(shù)[J].中國花卉園藝，2005（4）：29-31.

[8]陳進(jìn)友，易朝暉，陳鳳曾，等. 花毛茛的繁殖及盆花生產(chǎn)栽培技術(shù)[J].北方園藝，2007（1）：115-117.

[9]王其剛，陳賢，趙培飛，等. 花毛茛塊根規(guī)模化繁殖生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008（5）：148-150.

[10]王其剛，柴衛(wèi)淑，王繼華，等. 低溫預(yù)處理對花毛茛種子萌發(fā)的影響[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2010，36（1）：50-52.

[11]黃建明.花毛茛栽培技術(shù)[J].河北林業(yè)科技，2008（3）：63-63.

[12]肖林. 花毛茛品種及切花生產(chǎn)技術(shù)[J].農(nóng)業(yè)工程技術(shù)： 農(nóng)產(chǎn)品加工，2005（1）：42-43.

[13]Nakamura K，Nagatomo Y，Gunji S. Effects of propagation temperature on root formation of cuttings and acceleration of subsequent growth and tuberization of Ranunculus asiaticus L.[J].Hortic Res.，2014，13（2）：113-117.

[14]Beruto M，Debergh P. Micropropagation of Ranunculus asiaticus：a review and perspectives[J].Plant Cell，Tissue and Organ Culture （PCTOC），2004，77（3）：221-230.

[15]Beruto M. In vitro propagation through axillary shoot culture of Ranunculus asiaticus L.[J].Methods Mol Biol.，2010，589（589）：29-37.

[16]Beruto M，Portogallo C. Factors affecting the growth of Ranunculus in vitro[J]. Acta Hortic，2000，520：163-170.

[17]Beruto M，Curir P，Debergh P. Callus growth and somatic embryogenesis in thalamus tissue of Ranunculus asiaticus L. Cultivated In vitro： Cytokin in effect and phenol metabolism[J].In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant，1996，32（3）：154-160.

[18]李洪忠，彭世勇，于艷，等. 花毛茛葉片組織培養(yǎng)的初步探索[J].遼寧農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報，2004，6（3）：4-5.

[19]劉賓照，高紅梅，陶艷. 不同濃度3種激素對花毛茛組培增殖率的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（8）：3350-3351，3417.

[20]其剛，張素芳，陳敏. 花毛茛組培苗移栽試驗初探[J].天津農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，12（1）：18-19.

[21]劉安成，龐長民，楊玉秀，等. 花毛茛夏季塊根催芽技術(shù)研究[J].陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，54（1）：44-45，55.

[22]Cerveny C B，Miller W B，Bj?rkman T，et al. Soaking temperature of dried tuberous roots influences hydration kinetics and growth of Ranunculus asiaticus L.[J].Hortscience，2012，47（2）：212-216.

[23]王建強(qiáng)，徐慧，鐘漢冬，等. 兩步法生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)冬季花卉花毛茛栽培方法[J].北方園藝，2011（17）：106-107.

[24]Cerveny C，Miller W B. An updated production protocol for growing containerized Ranunculus asiaticus from its dried tuberous roots[C].Ashs Conference，2010.

[25]Bernstein N，Ioffe M，Bruner M，et al. Effects of supplied nitrogen form and quantity on growth and postharvest quality of Ranunculus asiaticus flowers[J].Hortscience，2005，40（6）：1879-1886.

[26]Bernstein N，Ioffe M，Luria G，et al. Evaluation of a newly developed potassium and nitrogen fertilization regime for soil cultivation of Ranunculus asiaticus[J].Isr J Plant Sci.，2009，57（4）：411-420.

[27]Bernstein N，Ioffe M，Luria G，et al. Effects of K and N nutrition on function and production of Ranunculus asiaticus[J].Pedosphere，2011，21（3）：288-301.

[28]Bernstein N，Luria G，Bruner M，et al. Development of “stem-topple” disorder in Ranunculus asiaticus is related to localised disturbances in tissue calcium levels[J].J Hortic Sci Biotech，2008，83（4）：525-531.

[29]Valdez-Aguilar L A，Grieve C M，Poss J，et al. Hypersensitivity of Ranunculus asiaticus to salinity and alkaline pH in irrigation water in sand cultures.[J].Hortscience，2009，44（1）：138-144.

[30]陳進(jìn)友，王列富. 花毛茛病毒病的防治[J].中國花卉園藝，2009（14）：46-47.

[31]Wang J H，Zhao S，Yang X M. First report of Ranunculus mild mosaic virus on Ranunculus asiaticus in Yunnan Province，China[J].Plant Dis.，2008，92（11）：1585-1585.

[32]Minutolo M，Sorrentino R，Masenga V，et al. First report of Broad bean wilt virus 2 and Ranunculus mild mosaic virus in Ranunculus asiaticus in southern Italy[J].Plant Dis.，2016，100（1）：235.

[33]Restuccia P，Mancini G，Bertaccini A，et al. Recent findings of viruses infecting ranunculus hybrids in Liguria （Italy）[J].Acta Hortic.，2011，901（901）：113-117.

[34]Whitefield A E，Campbell L R，Sherwood J L，et al. Tissue blot immunoassay for detection of tomato spotted wilt virus in Ranunculus asiaticus and other ornamentals[J].Plant Dis.，2003，87（6）：618-622.

[35]Sacco E，Borghi C，Laura M，et al. Molecular evaluation of the principal Ranunculus asiaticus L. viruses[J].Acta Hortic.，2015，1072（1072）：165-172.

[36]Garibaldi A，Minuto A，Gullino M L. First report of white mold caused by Sclerotinia sclerotiorum on persian buttercup （Ranunculus asiaticus） in Italy[J].Plant Dis.，2003，87（9）：1151-1151.

[37]陳進(jìn)友，王列富. 花毛茛灰霉病的防治[J].中國花卉園藝，2009（22）：41-42.

[38]陳進(jìn)友，陳鳳曾，吳元超. 花毛茛塊根貯藏及栽培技術(shù)[J].北方園藝，2007（6）：198-199.

[39]Beruto M，F(xiàn)ibiani M，Rinino S，et al. Plant development of Ranunculus asiaticus L. tuberous roots is affected by different temperature and oxygen conditions during storage period[J].Isr J Plant Sci.，2009，57（4）：377-388.

[40]Cerveny C B，Miller W B，Taylor A G. Storage temperature and moisture content affect respiration and survival of Ranunculus asiaticus dry tuberous roots[J].Hortscience，2011，46（11）：1523-1527.

[41]Cerveny C B，Miller W B，Kamenetsky R. Ethylene exposure is not harmful to Ranunculus asiaticus tuberous roots[J].Isr J Plant Sci.，2009，57（4）：397-400.

[42]陸琳，張顥，王繼華，等. 不同預(yù)處液處理對花毛茛切花瓶插壽命的影響[J].云南農(nóng)業(yè)科技，2004（5）：13-15.

[43]Scariot V，Larcher F，Caser M，et al. Flower longevity in ten cultivars of cut Ranunculus asiaticus L. as affected by ethylene and ethylene inhibitors[J].Eur J Hortic Sci.，2009，74（3）：137-142.

[44]Shahri W，Tahir I，Islam S T，et al. Effect of dry and wet storage at cool temperatures on the postharvest performance of Ranunculus asiaticus L. flowers[J].Front Agr China，2011，5（3）：382-387.

[45]Shahri W，Tahir I. Flower development and senescence in Ranunculus asiaticus L.[J].J Fruit Ornam Plant Res.2011（2）：123-131.

[46][Dogan]，A，Y?lmaz，G，Erkan，M，et al. Effects of sucrose and silver nitrate on the vase life of cut Ranunculus asiaticus L.[C]// XI International Symposium on Flower Bulbs and Herbaceous Perennials，2013：341-348.

[47]Zhang Z，Zhu F，Sun T，et al. Effects of preservatives on the quality of Ranunculus cut flowers[J].Agr Sci Technol.，2014（8）：1328-1330.

[48]黃海泉，費(fèi)晶晶，鄧新禹，等.不同保鮮劑對花毛茛切花生理效應(yīng)的影響[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2014，29（3）：526-530.

（責(zé)編：張宏民）