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    膠體金免疫層析法檢測血清隱球菌抗原在肺隱球菌病診斷中的應(yīng)用價值

    2017-08-17 10:04:19黃佳斯石磊唐愛國胡敏唐玲麗梁好李影
    臨床檢驗(yàn)雜志 2017年7期
    關(guān)鍵詞:膠體金層析球菌

    黃佳斯,石磊,唐愛國,胡敏,唐玲麗,梁好,李影

    (中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院a.檢驗(yàn)科,b.病理科,長沙 410011)

    ·臨床實(shí)驗(yàn)研究·

    膠體金免疫層析法檢測血清隱球菌抗原在肺隱球菌病診斷中的應(yīng)用價值

    黃佳斯a,石磊b,唐愛國a,胡敏a,唐玲麗a,梁好a,李影a

    (中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院a.檢驗(yàn)科,b.病理科,長沙 410011)

    目的 探討血清隱球菌抗原-膠體金免疫層析法(CrAg-LFA)在肺隱球菌病診斷中的應(yīng)用價值。方法 回顧性研究2016年1至11月中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院收治的肺隱球菌病及非肺隱球菌病患者共547例,采用CrAg-LFA篩查血清中隱球菌抗原,分析血清CrAg-LFA對肺隱球菌病診斷的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值。結(jié)果 10例肺隱球菌病組患者采用CrAg-LFA測定陽性8例,敏感性為80.0%(8/10);非肺隱球菌病組患者537例,CrAg-LFA測定陰性534例,特異性為99.4%(534/537),陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為72.7%和99.6%。結(jié)論 CrAg-LFA是一種簡單快速的肺隱球菌病篩查試驗(yàn),可用于肺隱球菌病的輔助診斷。

    肺隱球菌??;隱球菌抗原;膠體金法

    隨著免疫功能低下患者增多,肺隱球菌病(pulmonary cryptococcosis,PC)發(fā)生率呈增加趨勢[1]。隱球菌在肺組織內(nèi)呈局限性浸潤感染,傳統(tǒng)的痰墨汁染色和培養(yǎng)陽性率很低[2]。血清學(xué)隱球菌莢膜抗原檢測對隱球菌感染具有較好的輔助診斷價值。文獻(xiàn)報道,隱球菌抗原-膠體金免疫層析法(cryptococcal antigen lateral flow immunochromatographic assay,CrAg-LFA)測定腦脊液樣本對隱球菌性腦膜炎的診斷敏感性和特異性達(dá)到95%左右[3],而血清樣本CrAg-LFA對PC的診斷效能國內(nèi)未見報道。本研究應(yīng)用CrAg-LFA法結(jié)合臨床病理穿刺結(jié)果,探討血清CrAg-LFA在PC診斷中的應(yīng)用價值。

    1 材料與方法

    1.1 研究對象 回顧性研究中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院呼吸科2016年1月至11月確診PC組10例,男7例,女3例,年齡(47.1±11.6)歲,肺組織病理組織學(xué)染色均發(fā)現(xiàn)隱球菌橢圓形孢子樣結(jié)構(gòu),孢子周邊可見厚莢膜;非PC組537例,其中男335例,女202例,年齡(42.5±13.1)歲,組織病理或臨床診斷排除PC,包括肺炎223例,慢性阻塞性肺病62例,肺癌43例,肺結(jié)核33例和支氣管炎35例,其余肺病99例,非肺部疾病42例。根據(jù)2010年《隱球菌感染診治專家共識》中PC診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]進(jìn)行診斷。

    1.2 標(biāo)本采集 采集患者空腹靜脈血約4 mL于無菌干燥采血管中,3 000×g離心10 min取血清。

    1.3 血清隱球菌抗原檢測 隱球菌抗原檢測(膠體金法)檢測試劑盒購自美國Immuno-Mycologics公司。按照試劑盒說明書進(jìn)行:將1滴樣本稀釋液加入到無菌試管中,加入40 μL血清樣本進(jìn)行混合,將隱球菌抗原檢測試紙條檢測端沒入混合樣本液中,10 min后讀取結(jié)果。結(jié)果判讀:檢測條帶和對照條帶均出現(xiàn)為陽性;僅出現(xiàn)對照條帶為陰性;若對照條帶未出現(xiàn),說明檢測無效,應(yīng)重新檢測。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。根據(jù)四格表資料計(jì)算血清CrAg-LFA診斷PC的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值。

    2 結(jié)果

    10例PC組患者中8例血清CrAg-LFA法檢測呈陽性(強(qiáng)陽性),2例為陰性;537例非PC組患者中3例血清CrAg-LFA法檢測弱陽性,其余534例均為陰性。見表1。血清CrAg-LFA診斷PC的敏感性為80.0%,特異性為99.4%,陽性預(yù)測值為72.7%,陰性預(yù)測值為99.6%。

    表1 血清CrAg-LFA對肺隱球菌病檢測結(jié)果

    3 討論

    目前血清學(xué)隱球菌莢膜抗原檢測方法主要包括乳膠凝集法(LA)、酶聯(lián)免疫法(EIA)和側(cè)向?qū)游龇?CrAg-LFA)[5]。研究表明,CrAg-LFA比LA法和EIA具有更高的準(zhǔn)確性,其在室溫下穩(wěn)定,10 min即可出結(jié)果,對實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的要求不高,易于操作[6]。本研究10例PC患者中8例血清CrAg-LFA測定為強(qiáng)陽性,2例為陰性。陰性結(jié)果可能與隱球菌在肺部局限性浸潤生長,隱球菌抗原較難釋放入血有關(guān)。因此,CrAg-LFA測定陰性,臨床高度懷疑PC時,仍需結(jié)合患者宿主因素及其他指標(biāo)綜合判斷。537例非PC組患者中3例血清CrAg-LFA測定均為弱陽性,提示隱球菌抗原滴度較低或某些因素導(dǎo)致的交叉反應(yīng)。以上3例患者最終診斷為耶氏肺孢子蟲病、社區(qū)獲得性肺炎伴類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和肺占位性病變,病理組織學(xué)均提示非隱球菌感染,提示耶氏肺孢子蟲或類風(fēng)濕因子可能在一定程度上與隱球菌抗原存在交叉反應(yīng),但尚需大樣本數(shù)據(jù)進(jìn)行進(jìn)一步論證。本研究結(jié)果顯示血清CrAg-LFA法診斷PC的敏感性和特異性分別為80.0%和99.6%,陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為72.7%和99.6%,提示該方法對PC有較好的輔助診斷價值,可應(yīng)用于PC的快速篩查。

    [1]Park BJ, Wannemuehler KA, Marston BJ,etal. Estimation of the current global burden of cryptococcal meningitis among persons living with HIV/AIDS[J].AIDS,2009, 23(4):525-530.

    [2]于洪志,吳琦.國內(nèi)肺隱球菌病臨床資料匯總分析[J].西南軍醫(yī), 2009,11(4):606-608.

    [3]Boulware DR, Rolfes MA, Rajasingham R,etal. Multisite validation of cryptococcal antigen lateral flow assay and quantification by laser thermal contrast[J]. Emerg Infect Dis, 2014, 20(1):45-53.

    [4]《中國真菌學(xué)雜志》編輯委員會.隱球菌感染與診治專家共識[J].中國真菌學(xué)雜志, 2010,5(2):65-68.

    [5]Saha DC, Xess I, Biswas A,etal. Detection ofCryptococcusby conventional, serological and molecular methods[J].J Med Microbiol, 2009,58(Pt8):1098-1105.

    [6]Lindsley MD, Nanthawan M, Baggett HC,etal. Evaluation of a newly developed lateral flow immunoassay for the diagnosis of cryptococcosis[J]. Clin Infect Dis, 2011, 53(4): 321-325.

    (本文編輯:周萬青,劉群)

    10.13602/j.cnki.jcls.2017.07.10

    黃佳斯,1986年生,女,技師,碩士研究生,從事凝血機(jī)制研究。

    李影,主管技師,碩士,E-mail:liying.xiangya@163.com。

    R446.5

    A

    2017-03-13)

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