聚色氨酸修飾玻碳電極測(cè)定動(dòng)物性食品中己烯雌酚

馬心英,呂惠萍,王宜磊(.菏澤學(xué)院化學(xué)化工系,山東菏澤 27405; 2.菏澤學(xué)院生命科學(xué)系,山東菏澤 27405)

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聚色氨酸修飾玻碳電極測(cè)定動(dòng)物性食品中己烯雌酚

馬心英1,呂惠萍1,王宜磊2,*
(1.菏澤學(xué)院化學(xué)化工系,山東菏澤 274015; 2.菏澤學(xué)院生命科學(xué)系,山東菏澤 274015)

用循環(huán)伏安法制備了聚色氨酸修飾玻碳電極。研究了己烯雌酚在聚色氨酸修飾電極上的電化學(xué)行為，建立了一種直接測(cè)定動(dòng)物性食品中己烯雌酚含量的新方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:在pH=5.0的磷酸鹽緩沖溶液體系中,己烯雌酚在聚色氨酸修飾玻碳電極上于-0.2～0.8 V范圍內(nèi)出現(xiàn)一對(duì)可逆的氧化還原峰,與裸玻碳電極相比較,聚色氨酸修飾電極對(duì)己烯雌酚的電化學(xué)反應(yīng)具有促進(jìn)作用。己烯雌酚濃度在5.00×10-8～1.00×10-6mol/L范圍內(nèi)與其氧化峰電流成正比,檢出限為2.00×10-9mol/L,對(duì)己烯雌酚溶液平行測(cè)定6次的RSD為2.4%。該修飾電極具有良好的靈敏度、選擇性和穩(wěn)定性,可用于牛肉、魚肉及奶粉中己烯雌酚含量的測(cè)定,回收率為96.0%～102.3%,結(jié)果滿意,方法具有實(shí)用價(jià)值。

聚色氨酸,修飾電極,循環(huán)伏安法,己烯雌酚

己烯雌酚(DES)是人工合成的非甾體雌激素物質(zhì),主要用于治療激素平衡失調(diào)引起的功能性出血、閉經(jīng)雌激素缺乏癥等,由于其價(jià)格便宜,療效明顯,20世紀(jì)40至60年代在醫(yī)學(xué)臨床上廣泛應(yīng)用。此外DES具有降低脂肪合成、加快蛋白質(zhì)代謝合成和增加動(dòng)物體重等作用,因此被作為促生長(zhǎng)劑在畜牧養(yǎng)殖業(yè)廣泛應(yīng)用[1-2]。但后來研究發(fā)現(xiàn),由于DES的使用,可能導(dǎo)致其在生物體內(nèi)殘留,影響細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平和生殖能力[3],并存在誘發(fā)癌癥危險(xiǎn),可導(dǎo)致白血病、子宮癌等疾病[4],增加女性乳腺癌、陰道腺癌發(fā)病率[5]。從20世紀(jì)70年代末,中國(guó)、美國(guó)、歐盟等國(guó)家,先后禁止DES在食品動(dòng)物中使用。然而,由于能給食品動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)帶來經(jīng)濟(jì)利益,己烯雌酚的濫用現(xiàn)象仍然存在。因此,建立準(zhǔn)確、靈敏、簡(jiǎn)便的測(cè)定己烯雌酚的分析方法非常必要。國(guó)內(nèi)報(bào)道用于檢測(cè)DES的方法主要有高效液相色譜法[6-8]、免疫檢測(cè)法[9-11]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[12-14],而電化學(xué)法報(bào)道較少[3,15]。

本實(shí)驗(yàn)研究了聚色氨酸修飾電極的制備及己烯雌酚在修飾電極上的電化學(xué)行為,己烯雌酚分子中的酚羥基具有電化學(xué)活性,可在聚色氨酸電極上發(fā)生電化學(xué)氧化還原反應(yīng),而在同樣條件下,己烯雌酚在裸玻碳電極上的電化學(xué)活性卻低得多,因此建立了測(cè)定己烯雌酚的電化學(xué)新方法。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

色氨酸 分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,用二次蒸餾水配制成1.00×10-3mol/L溶液;己烯雌酚 標(biāo)準(zhǔn)品,成都艾科達(dá)化學(xué)試劑有限公司,用乙醇配制1.00×10-3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液;磷酸氫二鈉 分析純,上海試劑二廠,用二次蒸餾水配制成0.20 mol/L溶液;檸檬酸 分析純,上海譜振生物科技有限公司,用二次蒸餾水配制成0.10 mol/L溶液;磷酸鹽緩沖溶液體系(PBS,pH為2.2～8.0) 由磷酸氫二鈉溶液和檸檬酸溶液按一定比例配制;鯽魚 購(gòu)自某農(nóng)貿(mào)市場(chǎng);牛肉 購(gòu)自某農(nóng)貿(mào)市場(chǎng);奶粉 購(gòu)自某超市；其他試劑 分析純；實(shí)驗(yàn)用水 二次石英重蒸水。

CHI660E型電化學(xué)分析系統(tǒng) 上海辰華公司;KQ-100型超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司;ESJ180-4電子分析天平 成都市宜邦科析儀器有限公司;Sirion 200電子掃描顯微鏡 美國(guó)FEI公司;KH-100DB型超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司;SYZ-550型石英亞沸高純水蒸餾器 江蘇金壇有限公司;電化學(xué)實(shí)驗(yàn)用三電極系統(tǒng) 上海仙仁有限公司;玻碳電極 上海辰華公司;Ag/AgCl電極 上海辰華公司;鉑絲電極 上海辰華公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 修飾電極最佳聚合條件優(yōu)化方法 將玻碳電極(Φ=3.8 mm)用二次蒸餾水沖洗后在金相砂紙上打磨,接著用三氧化二鋁粉在麂皮上拋光成鏡面,再次用二次水沖洗;然后分別在硝酸∶蒸餾水(1∶1)、無水乙醇、二次蒸餾水中各超聲1 min。以預(yù)處理好的玻碳電極為工作電極,Ag/AgCl電極為參比電極,鉑電極為對(duì)電極,在3.00×10-4mol/L色氨酸溶液中,對(duì)制備修飾電極的聚合底液pH、聚合電位、掃描速度、聚合周數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。

聚合底液pH的選擇:固定電位范圍為-1.6～2.2 V,掃描速度為80 mV/s,聚合周數(shù)為6,改變聚合底液pH分別為2.2、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0進(jìn)行電化學(xué)聚合,利用所制備的修飾電極測(cè)定1.00×10-6mol/L己烯雌酚溶液,當(dāng)所測(cè)得的氧化峰電流最大時(shí),所對(duì)應(yīng)的聚合底液的pH7.0即為最佳聚合pH。

聚合電位:固定聚合底液pH為7.0,掃描速度為80 mV/s,聚合周數(shù)為6周,低電位為-1.4 V,分別改變高電位為1.8、2.0、2.2、2.4、2.6 V進(jìn)行實(shí)驗(yàn),利用所制備的修飾電極測(cè)定己烯雌酚溶液,當(dāng)所測(cè)得的氧化峰電流最大時(shí),所對(duì)應(yīng)的電位即為最佳高電位;按同樣的方法固定聚合高電位為2.4 V,改變低電位分別為-1.2、-1.4、-1.6、-1.8、-2.0 V進(jìn)行實(shí)驗(yàn),當(dāng)所測(cè)得的氧化峰電流最大時(shí),測(cè)得聚合低電位為最佳。

聚合掃描速度:固定聚合底液pH為7.0,聚合周數(shù)為6周,電位范圍為-1.6～2.4 V,分別改變掃描速度為20、40、60、80、100、120、140 mV/s進(jìn)行實(shí)驗(yàn),當(dāng)所測(cè)得的氧化峰電流最大時(shí),測(cè)得聚合掃描速度為最佳。

聚合周數(shù):固定聚合底液pH為7.0,電位范圍為-1.6～2.4 V,掃描速度為100 mV/s,分別改變掃描周數(shù)為2、4、6、8、10、12進(jìn)行實(shí)驗(yàn),當(dāng)所測(cè)得的氧化峰電流最大時(shí),測(cè)得聚合周數(shù)為最佳。

1.2.2 修飾電極的制備 將預(yù)處理好的玻碳電極浸入色氨酸的PBS(pH=7.0)中,采用三電極體系,在-1.6～2.4 V電位范圍內(nèi)以100 mV/s的掃速循環(huán)掃描,循環(huán)8周后取出,用二次水淋洗,即制得聚色氨酸修飾電極,在室溫下保存。

1.2.3 己烯雌酚最佳測(cè)定條件優(yōu)化方法 用修飾電極為工作電極,Ag/AgCl電極為參比電極,鉑電極為對(duì)電極,對(duì)己烯雌酚測(cè)定的pH、高低電位、掃描速度和攪拌富集時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化,當(dāng)所測(cè)得己烯雌酚氧化峰電流最大時(shí)所對(duì)應(yīng)的條件,即為最佳條件。

測(cè)定底液pH實(shí)驗(yàn)條件:在1.00×10-6mol/L己烯雌酚溶液中,固定電位范圍為-0.2～0.8 V,掃描速度為100 mV/s,攪拌富集時(shí)間60 s,改變?nèi)芤旱膒H分別為2.2、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

測(cè)定高低電位范圍條件:在pH5.0 PBS中,己烯雌酚濃度為1.00×10-6mol/L,掃描速度為100 mV/s,攪拌富集時(shí)間40 s,固定低電位為-0.1 V,改變高電位分別為0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1 V進(jìn)行實(shí)驗(yàn),當(dāng)所測(cè)己烯雌酚氧化峰電流最大時(shí),所對(duì)應(yīng)的電位即為高電位;固定高電位為0.8 V,改變低電位分別為-0.4、-0.3、-0.2、-0.1、0.0、0.1、0.2 V進(jìn)行實(shí)驗(yàn),當(dāng)己烯雌酚氧化峰電流最大時(shí),對(duì)應(yīng)電位即為最佳低電位。

測(cè)定掃描速度條件:在1.00×10-6mol/L己烯雌酚pH5.0 PBS中,固定電位范圍為-0.2～0.8 V,攪拌富集時(shí)間40 s,改變掃描速度從20 mV/s開始,每隔20 mV/s進(jìn)行實(shí)驗(yàn),直至400 mV/s,選擇峰形較好、檢測(cè)靈敏度較高的掃描速度。

攪拌富集時(shí)間條件:在1.00×10-6mol/L己烯雌酚pH5.0 PBS中,固定電位范圍為-0.2～0.8 V,掃描速度為100 mV/s,改變攪拌富集時(shí)間分別為10、20、30、40、50、60、70、80、90 s進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

根據(jù)掃描速度實(shí)驗(yàn)結(jié)果及描述準(zhǔn)可逆薄層電化學(xué)的Laviron理論[16]，計(jì)算電子轉(zhuǎn)移數(shù)nα及電子傳遞系數(shù)α。

Epa=a+(2.303RT/(1-α)nαF)lgv

式(1)

Epc=b-(2.303RT/αnαF)lgv

式(2)

式中,a、b為常數(shù)。

1.2.4 己烯雌酚測(cè)定方法 在電解池中加入一定量己烯雌酚、pH5.0 PBS,以修飾電極為工作電極,Ag/AgCl電極為參比電極,鉑電極為對(duì)電極,攪拌60 s,在-0.2～0.8 V電位范圍內(nèi),以100 mV·s-1掃描速度進(jìn)行循環(huán)掃描,記錄峰電位和峰電流。每次掃描結(jié)束后,將電極置于空白底液中循環(huán)掃描至峰消失,用二次蒸餾水沖洗,濾紙吸干后,即可進(jìn)行下一次測(cè)定。實(shí)驗(yàn)所得循環(huán)伏安曲線研究己烯雌酚在修飾電極上的電化學(xué)行為。

1.2.5 樣品處理方法 牛肉樣品前處理:取一定量新鮮牛肉用絞肉機(jī)攪碎,然后稱取4份牛肉各5.000 g分別于4支樣品管中,分別標(biāo)號(hào)1、2、3、4,然后分別向1樣品管中加入3 mL乙腈-丙酮(4∶1)混合溶液,2、3、4樣品管中分別加入7.5、12.5、15 μL己烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)溶液和3 mL乙腈-丙酮混合溶液(4∶1),將各樣品管置于超聲清洗器超聲分散30 min，再用離心機(jī)于2000 r/min下離心10 min,取上清液移至A、B、C、D四個(gè)小燒杯中;再分別向4支樣品管中加入3 mL乙腈-丙酮(4∶1)混合溶液,按照同樣的方法處理,分別合并上清液。將燒杯內(nèi)所合并的上清液吹干后,分別加入4 mL pH=5.0的磷酸鹽緩沖溶液和1 mL乙醇,溶解濃縮物后用于實(shí)驗(yàn)測(cè)定。

魚肉樣品前處理:取5條新鮮鯽魚,去鱗后用絞肉機(jī)攪碎,稱取4份魚肉各5.000 g于1、2、3、4樣品管中,與牛肉處理方法相同。

奶粉樣品前處理:稱取4份奶粉各0.3000 g于1、2、3、4樣品管中,其他步驟與牛肉處理方法相同。

2 結(jié)果與討論

2.1 最佳聚合條件

通過實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了制備聚色氨酸修飾電極的最佳聚合條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,聚合底液的pH、聚合電位、掃描速度、聚合圈數(shù)會(huì)對(duì)修飾電極的性能有一定的影響,當(dāng)聚合底液pH7.0、色氨酸濃度為3.00×10-4mol/L、聚合的電位范圍為-1.6～2.4 V,掃描速度為160 mV·s-1,聚合圈數(shù)為8周時(shí),所制備的修飾電極對(duì)己烯雌酚的電催化效果最好,己烯雌酚在修飾電極上的響應(yīng)電流最大。

隨著實(shí)踐進(jìn)程的推進(jìn)，大學(xué)生自行尋找解決問題的途徑和方法就變得異常重要。作為導(dǎo)師，要根據(jù)自己的實(shí)踐經(jīng)歷和人生經(jīng)驗(yàn)，特別是通過自己的學(xué)習(xí)和積累，及時(shí)、準(zhǔn)確、高效地引導(dǎo)低年級(jí)學(xué)生及時(shí)提升實(shí)踐項(xiàng)目所需的實(shí)戰(zhàn)型技能，強(qiáng)化自學(xué)能力，以便不斷解決實(shí)踐過程中存在的問題。

2.2 色氨酸修飾電極的聚合循環(huán)伏安曲線

在最佳聚合條件下得到的色氨酸在玻碳電極上聚合循環(huán)伏安曲線(圖1),在掃描的第一周,在-0.50 V和1.75 V處分別出現(xiàn)一還原峰和氧化峰,隨著掃描周數(shù)的增加,氧化還原峰電位均發(fā)生負(fù)移,峰電流逐漸增大,但增加的幅度逐漸減小,表明色氨酸在電極表面發(fā)生了聚合反應(yīng)。聚合結(jié)束后可觀察到玻碳電極表面有一層深藍(lán)色膜存在。圖2(B)為聚色氨酸修飾電極掃描電鏡圖,與裸電極(圖2A)相比,可觀察到電極表面形成了具有立體空間結(jié)構(gòu)層狀修飾物。

圖1 色氨酸在玻碳電極上聚合循環(huán)伏安曲線Fig.1 Cyclic voltammograms for electropolymerization of tryptophana

圖2 玻碳電極(A)與聚色氨酸修飾電極掃描電鏡圖(B)Fig.2 SEM image of the GCE(A) and the poly tryptophan film on the GCE(B)注:放大倍數(shù)為100000倍。

2.3 己烯雌酚在聚色氨酸修飾電極上的電化學(xué)行為

圖3分別是最佳實(shí)驗(yàn)條件下己烯雌酚在裸電極、聚色氨酸修飾電極上以及聚色氨酸修飾電極在pH=5.0 PBS中的循環(huán)伏安曲線,由圖3可見己烯雌酚在裸電極上電流響應(yīng)微弱,而在聚色氨酸修飾電極上的氧化還原峰電流值分別為ipa=15.44 μA,ipc=7.63 μA,與裸電極相比,己烯雌酚在聚色氨酸修飾電極上氧化峰電流顯著增高,明顯提高了測(cè)定的靈敏度。說明聚色氨酸修飾膜對(duì)己烯雌酚電化學(xué)氧化具有很好的催化作用。己烯雌酚在聚色氨酸修飾電極上的氧化還原峰電位分別為Epa=0.38 V,Epc=0.13 V,ipa/ipc>1,ΔE=0.25 V,故此反應(yīng)為半可逆反應(yīng)。圖3表明聚色氨酸修飾電極在pH=5.0 PBS中沒有測(cè)到氧化還原峰電流,說明測(cè)定底液對(duì)實(shí)驗(yàn)無干擾。

圖3 1.0×10-6 mol/L己烯雌酚循環(huán)伏安曲線Fig.3 Cyclic voltammograms of 1.0×10-6 mol/L diethylstilbestrol注:1為玻碳電極,2為聚色氨酸修飾電極, 3為聚色氨酸修飾電極在磷酸鹽緩沖溶液 (pH=5.0)中,掃描速度:100 mV/s。

2.4 最佳測(cè)定條件

圖4 1.0×10-6 mol/L 己烯雌酚在不同pH磷酸鹽緩沖溶液中在聚色氨酸修飾電極上的循環(huán)伏安曲線Fig.4 Cyclic voltammograms of 1.0×10-6 mol/L diethylstilbestrol at different pH values on the PTRY/GCE注:a～g分別對(duì)應(yīng)pH2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0和 8.0,掃描速度:100 mV/s。

2.4.2 測(cè)定高低電位的影響 己烯雌酚在修飾電極上氧化峰電流的大小與實(shí)驗(yàn)所確定的最高和最低電位有一定的關(guān)系,固定低電位為-0.4 V,改變高電位進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,當(dāng)高電位為0.8 V時(shí),己烯雌酚在修飾電極上的響應(yīng)電流最大,因此本實(shí)驗(yàn)的測(cè)定最佳高電位為0.8 V。

保持其它條件一致,同樣固定高電位0.8 V,改變低電位進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,當(dāng)?shù)碗娢粸?0.2 V時(shí),己烯雌酚在修飾電極上的響應(yīng)電流最大,因此本實(shí)驗(yàn)的測(cè)定最佳低電位為-0.2 V。

綜上所述,本實(shí)驗(yàn)測(cè)定的最佳電位范圍為-0.2～0.8 V。

2.4.3 測(cè)定掃描速度的影響 改變掃描速度進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明:己烯雌酚在修飾電極上氧化還原峰電流與掃描速度呈良好的線性關(guān)系(圖5內(nèi)插圖),其線性回歸方程分別為:ipa=-3.59×10-6-2.31×10-7v(mV/s),r=-0.9997;ipc=1.79×10-5+1.61×10-7v(mV/s),r=0.9953。說明己烯雌酚在聚色氨酸修飾電極上的電極過程為吸附控制過程。隨著掃描速度的增加,峰電流也跟著增大(圖5)。掃速過低,氧化峰不明顯,掃速過高,會(huì)降低檢測(cè)的靈敏度,因此本實(shí)驗(yàn)選用的測(cè)定最佳掃描速度為100 mV/s。

圖5 1.00×10-6 mol/L己烯雌酚在聚色氨酸修飾電極上隨掃描速度變化的循環(huán)伏安曲線Fig.5 Cyclic voltammograms of 1.00×10-6 mol/L diethylstilbestrol at PTRY/GCE with the change of scanning speed注:pH=5.0,a～j對(duì)應(yīng)的掃描速度(mV/s):40,80,120,160,200,240,280,320,360,400;內(nèi)插圖為己烯雌酚氧化還原峰電流與掃描速度關(guān)系曲線,1為還原峰,2為氧化峰。

圖6為己烯雌酚在聚色氨酸修飾電極上的氧化還原峰電位隨lgv變化的關(guān)系曲線。根據(jù)描述準(zhǔn)可逆薄層電化學(xué)的Laviron理論,掃描速度在160～400 mV/s的區(qū)間內(nèi)時(shí),Epa=-0.14+0.19lg v,r=0.9938,Epc=0.48-0.18lg v,r=-0.9942。根據(jù)式(1)、式(2)得出電子轉(zhuǎn)移數(shù)nα=0.64,電子傳遞系數(shù)α=0.51,接近于理論值0.5,符合準(zhǔn)可逆過程特征。

圖6 己烯雌酚在聚色氨酸修飾電極上的氧化還原峰電位隨lgv變化的關(guān)系曲線Fig.6 Plot of 1.00×10-6 mol/L diethylstilbestrol peak potentials versus the logarithms of the scan rates

2.4.4 最佳攪拌時(shí)間的選擇 測(cè)定峰電流的大小與實(shí)驗(yàn)過程中攪拌時(shí)間也有一定的關(guān)系。結(jié)果表明,當(dāng)待測(cè)液的攪拌時(shí)間為60 s時(shí)峰電流達(dá)到最大(圖7)。因此,本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行過程中,待測(cè)液的最佳攪拌時(shí)間為60 s。

圖7 己烯雌酚在聚色氨酸修飾電極上的氧化峰電流隨攪拌時(shí)間變化的關(guān)系曲線Fig.7 Plot of 1.00×10-6 mol/L diethylstilbestrol oxidation peak currents versus the stiring time

圖8 不同濃度的己烯雌酚在聚色氨酸修飾電極上的循環(huán)伏安曲線Fig.8 Cyclic voltammograms of diethylstilbestrol at PTRY/GCE at different concentrations注:曲線a～f分別對(duì)應(yīng)于濃度5.00×10-8、1.00×10-7、2.50×10-7、5.00×10-7、7.50×10-7和1.00×10-6 mol/L。內(nèi)插圖為己烯雌酚氧化峰電流與其濃度關(guān)系曲線。

2.5 工作曲線與重現(xiàn)性

在最佳實(shí)驗(yàn)條件下,用循環(huán)伏安法對(duì)己烯雌酚溶液進(jìn)行測(cè)定。己烯雌酚在5.00×10-8～1.00×10-6mol/L濃度范圍內(nèi)與其氧化峰電流呈良好的線性關(guān)系(圖8),線性方程為ipa=6.78×10-7+4.96c (mol/L),相關(guān)系數(shù)r為0.9987。逐漸降低己烯雌酚濃度,當(dāng)濃度在小于2.00×10-9mol/L時(shí)氧化峰消失,由此得出檢出限為2.00×10-9mol/L。

在最佳聚合條件下,對(duì)濃度為1.00×10-6mol/L的己烯雌酚進(jìn)行平行測(cè)定,重復(fù)6次,得到的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.4%。

2.6 干擾實(shí)驗(yàn)

2.7 回收率的測(cè)定

在最佳實(shí)驗(yàn)條件下,對(duì)牛肉、魚肉和奶粉樣品進(jìn)行回收率測(cè)定。測(cè)定結(jié)果見表1，回收率在96.0%～102.3%之間,并且用高效液相色譜法進(jìn)行了方法對(duì)比,色譜條件見文獻(xiàn)[7]。與色譜法測(cè)定結(jié)果接近一致,說明實(shí)驗(yàn)方法的可靠性與準(zhǔn)確性,結(jié)果滿意。

表1 食品樣品中己烯雌酚回收率測(cè)定結(jié)果(n=6)Table 1 Recovery measurements of the DES in food samples(n=6)

注:a本方法測(cè)定結(jié)果;b高效液相色譜法測(cè)定結(jié)果。

3 結(jié)論

通過優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,制備了聚色氨酸修飾電極,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,修飾電極對(duì)己烯雌酚具有較好的電催化作用,可用于動(dòng)物性食品中己烯雌酚的電化學(xué)測(cè)定。在5.00×10-8～1.00×10-6mol/L范圍內(nèi),己烯雌酚氧化峰電流與其濃度呈線性關(guān)系,檢出限為2.00×10-9mol/L,相關(guān)系數(shù)r=0.9987,RSD=2.4%。聚色氨酸修飾電極可以實(shí)現(xiàn)對(duì)牛肉、魚肉、奶粉樣品中的己烯雌酚檢測(cè),回收率為96.0%～102.3%,克服了多巴胺、抗壞血酸、尿酸、維生素E、雌二醇、雌三醇、雌酮、葉酸等的干擾,因此方法靈敏、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單、快速,且選擇性較高,具有實(shí)用價(jià)值。

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Determination of diethylstilbestrol in animal food by a poly(tryptophan)modified glassy carbon electrode

MA Xin-ying1,LV Hui-ping1,WANG Yi-lei2,*

(1.Department of Chemistry and Chemical Engineering,Heze University,Heze 274015,China; 2.Department of Life Science,Heze University,Heze 274015,China)

A poly(tryptophan)modified glassy carbon electrode(PTRY/GCE)was prepared by cyclic voltammetry. The electrochemical behavior of diethylstilbestrol(DES)at the fabricated electrode was studied. A new method for the determination of DES in animal food was established. The experimental results showed that in pH5.0 phosphate buffer solution(PBS)system,DES appeared a pair of quasi redox peaks in the potential range of-0.2 to 0.8 V on the PTRY/GCE. The modified electrode showed a catalytic effect to the electrochemical reaction of DES. The oxidation peak current was proportional the concentratio of DES with a linear range of 5.00×10-8to 1.00×10-6mol/L and a limit of detection was 2.00×10-9mol/L. The RSD for 6 paralled determinations was 2.4%. The poly(tryptophan)modified glassy carbon electrode had good sensitivity,selectivity,and stability. The method could be applied to the determination of DES in beef,fish and milk powder with recoveries of 96.0%～102.3%. The results were satisfactory,and the method had practical value.

poly tryptophan;modified electrode;cyclic voltammetry;diethylstilbestrol

2016-11-23

馬心英(1971-),女,碩士,副教授,研究方向:電分析化學(xué),E-mail:dhx3699@163.com。

*通訊作者:王宜磊(1964-),男,本科,教授,研究方向:微生物代謝與發(fā)酵,E-mail:wangyilei001@163.com。

山東省自然科學(xué)基金(ZR2014BL020);山東省高校科技計(jì)劃項(xiàng)目(J14LC55);菏澤學(xué)院海外智力為國(guó)服務(wù)行動(dòng)計(jì)劃。

TS207.3

A

1002-0306(2017)14-0011-06

10.13386/j.issn1002-0306.2017.14.003