胸腔積液中葡萄糖轉運蛋白-1和生存蛋白表達在鑒別診斷肺腺癌、惡性間皮瘤和反應性間皮細胞增生中的意義

馬秦榕 鄭錦花 魏亞敏 李美瓊 田 佳 楊飛城

(桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院病理科， 廣西 桂林 541001)

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胸腔積液中葡萄糖轉運蛋白-1和生存蛋白表達在鑒別診斷肺腺癌、惡性間皮瘤和反應性間皮細胞增生中的意義

馬秦榕 鄭錦花 魏亞敏 李美瓊 田 佳 楊飛城

(桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院病理科， 廣西 桂林 541001)

目的 探討葡萄糖轉運蛋白(GLUT)-1和生存蛋白(Survivin)表達在診斷肺腺癌、惡性間皮瘤及反應性間皮細胞增生患者胸腔積液中的臨床意義。方法 用免疫組化法檢測肺腺癌、惡性間皮瘤、反應性間皮細胞增生各30例胸水沉渣組織中GLUT-1 和Survivin的表達。結果 肺腺癌、惡性間皮瘤、反應性間皮細胞增生的樣本中GLUT-1陽性率分別為86.7%、83.3%、6.7%；而Survivin陽性率分別為80.0%、76.7%、30.0%。GLUT-1和Surivin在肺腺癌和惡性間皮瘤中染色彌漫性和染色強度方面無統計學差異(P>0.05)，但其與反應性間皮細胞增生的樣本差異顯著(P<0.01)。結論 GLUT-I和Surivin可以將反應性間皮細胞增生從肺腺癌和惡性間皮瘤中鑒別出來，但是無法鑒別惡性間皮瘤和肺腺癌。

腺癌；間皮瘤；間皮細胞；人葡萄糖轉運蛋白1

惡性間皮瘤是一種來源于漿膜間皮細胞(多數為胸膜)的原發(fā)性惡性腫瘤。由于惡性間皮瘤、肺腺癌、良性間皮細胞增生的細胞形態(tài)學相似，沒有一種特異的方法能將惡性間皮瘤從肺腺癌和良性間皮細胞增生中鑒別〔1〕,尤其是胸腔積液樣本中將會更加困難。本文擬評估葡萄糖轉運蛋白(GLUT)-I和生存蛋白(Survivin)作為診斷標志物在鑒別惡性間皮瘤、肺腺癌和反應性間皮細胞增生的價值。

1 材料與方法

1.1 一般資料 選取2008年1月至2016年12月桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院90例患者的樣本。肺腺癌30例，惡性間皮瘤(上皮型)30例和反應性間皮細胞增生30例，其中肺腺癌患者女11例，男19例，中位年齡66.5歲；惡性間皮瘤患者女13例，男17例，中位年齡65.2歲；反應性間皮細胞增生患者女8例，男22例，中位年齡40.5歲。所有病例在抽取胸腔積液前未經過放、化療；所有的肺腺癌和惡性間皮瘤患者均由活檢確診。

1.2 方法 取胸水100 ml，3 000 r/min離心10 min，棄上清液，加入95%酒精靜置1～2 h，取沉淀物加入4%中性甲醛液固定，常規(guī)脫水、石蠟包埋、4 μm切片，由自動染色裝置(Autostainer Link 48,Denmark)進行GLUT-1和Survivin染色處理。

1.3 結果判定標準 GLUT-1和Survivin染色在光學顯微鏡下評分。GLUT-1的陽性標準是細胞膜呈棕黃色；Survivin陽性標準是胞質或胞核呈棕黃色。所有病例均按照GLUT-1和Survivin 的染色陽性百分率(彌漫程度)和染色強度進行評分。評分標準：胞膜、胞質或胞核陽性細胞數目>50%為；10%～50%為；<10%為+；背景染色計為0。此外，染色強度也進行評分(+～)：弱染色(+)，中度染色()，強染色()。

1.4 統計學方法 應用SPSS19.0進行方差分析、Tukey檢驗和Spearman相關性分析。

2 結 果

2.1 GLUT-1、Survivin的陽性率 肺腺癌GLUT-1陽性率為86.7%(26/30，+6例，4例,16例)；惡性間皮瘤為83.3%(25/30，+6例，9例，10例)；反應性間皮細胞增生為6.7%(2/30，僅+2例)。GLUT-1的敏感性和特異性：肺腺癌分別為86.7%和80.0%；惡性間皮瘤分別為83.3%和83.3%。Survivin陽性率：肺腺癌80.0%(24/30，+2例，7例，15例)；惡性間皮瘤76.7%(23/30，+1例，2例，20例)；反應性間皮細胞增生30.0%(9/30，+4例，3例，2例)。肺腺癌Survivin的靈敏性和特異性分別為80.0%和54.5%；惡性間皮瘤分別為76.7%和58.3%。肺腺癌和惡性間皮瘤GLUT-1和Survivin染色的彌漫性無統計學差異(P=0.360,0.679)，但反應性間皮細胞增生與其相比有統計學差異(均P=0.000)。

2.2 GLUT-1和Survivin在惡性間皮瘤、肺腺癌及反應性間皮細胞增生中染色強度 惡性間皮瘤中GLUT-1染色強度：7例(23.3%)，18例(60.0%)，未染色5例(16.7%)；Survivin 染色強度：+9例(30.0%)，10例(33.3%)，4例(13.3%)，未染色7例(23.3%)。肺腺癌中GLUT-1染色強度：+2例(6.6%)，7例(23.3%)，17例(56.6%)，未染色4例(13.3%)；Survivin染色強度：+6例(20.0%)，14例(46.6%)，4例(13.3%)，未染色6例(20.0%)。反應性間皮細胞增生中，GLUT-1染色強度僅+2例(6.6%)；Survivin染色強度，+4例(13.3%)，4例(13.3%)，1例(3.3%)。見圖1，圖2。

圖1 GLUT-1免疫組化表達(×400)

2.2 GLUT-1和Survivin在惡性間皮瘤、肺腺癌和反應性間皮細胞增生中陽性彌漫程度和染色強度的相關性 GLUT-1和Survivin在染色彌漫性和染色強度均有明顯的相關性(r=0.929,0.922；均P<0.01)。

圖2 Survivin免疫組化表達(×400)

3 討 論

肺腺癌患者的早期臨床癥狀是胸腔積液，這些患者往往已經失去了手術和活檢的機會。惡性間皮瘤是一種罕見的腫瘤，它來源于漿膜表面，尤其是胸膜、腹膜和心包膜，并且與石棉接觸相關〔2〕,惡性間皮瘤具有多種細胞形態(tài)學特點。反應性間皮細胞增生可由感染、肺栓塞、氣胸、膠原血管病、外傷、手術、非特異性炎癥反應或靠近胸膜的肺部腫瘤引起。因其具有細胞豐富，細胞形態(tài)異型，可見核分裂，細胞壞死等類似腫瘤性病變特點〔3〕，所以很難通過小樣本活檢特別是胸腔積液鑒別良性間皮細胞增生和惡性間皮瘤。

腫瘤細胞的增殖與葡萄糖的新陳代謝和能量利用率有關〔4〕。葡萄糖的攝取由GLUT調節(jié)。GLUT-1是GLUT家族中的一個成員，主要功能是轉運葡萄糖進入上皮細胞。GLUT-1在紅細胞膜、血腦屏障以及周圍神經的神經鞘膜中明顯的高表達，而在大多數上皮組織中則不表達或者表達極低〔5〕。

GLUT-1在許多不同來源的腫瘤中高度表達，例如乳腺、膀胱、腎臟和頭頸部腫瘤。本研究結果證實GLUT-1可能成為鑒別反應性間皮細胞增生和惡性間皮瘤的有效生物標志物。

Survivin作為細胞凋亡抑制基因家族中的一個成員，在抑制細胞凋亡和調節(jié)細胞增殖方面發(fā)揮重要作用。Survivin位于腫瘤細胞的細胞核和細胞質，這可能與它調節(jié)有絲分裂前期〔6～8〕和抗凋亡〔9〕的功能有關。Survivin參與抑制胚胎性組織和腫瘤細胞的凋亡，但是它在正常已分化組織中并不表達〔10〕。這種表達的傾向性和雙向調節(jié)功能使其有可能成為抗腫瘤治療的潛在靶點。而且，Survivin的表達與幾種人類惡性腫瘤的疾病進展和預后差相關，因此其可能成為判斷疾病預后的因子〔11〕。

有學者研究101例惡性乳頭狀間皮瘤患者，分析Survivin 的核表達與細胞增殖、治療后腫瘤細胞凋亡以及患者生存期的相關性〔12〕，結果顯示Survivin 的表達與總生存期無關，但是Survivin 的高表達與腫瘤治療相關，表明Survivin 有可能成為惡性間皮瘤的預后判斷因子。Sun等〔13〕研究了經外科手術切除的373例非小細胞肺癌(NSCLC)患者的Survivin 表達情況，評

估了Survivin的表達與NSCLC的臨床病理特征、分子特征及其預后的相關性。結果顯示Survivin的表達與肺腺癌的血道侵犯、淋巴結轉移及腫瘤復發(fā)有關。但是本研究結果提示，Survivin和GLUT-1無法鑒別惡性間皮瘤和肺腺癌。

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13 Sun PL,Jin Y,Kim K,etal.Survivin expression is an independent poor prognostic marker in lung adenocarcinoma but not in squamous cell carcinoma〔J〕.Virchows Arch,2013;463(3):427-36.

〔2017-05-22修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)

廣西醫(yī)療衛(wèi)生適宜技術開發(fā)與推廣應用項目(No.S201601)；桂林市科學研究與技術開發(fā)計劃項目(No.2016012706-8)；廣西區(qū)衛(wèi)計委自籌經費科研課題(No.Z2015414)

鄭錦花(1970-)，女，博士，主任醫(yī)師，主要從事胸部腫瘤鑒別診斷及綜合治療研究。

馬秦榕(1991-)，女，在讀碩士,主要從事肺腺癌鑒別診斷及預后評估方面研究。

R734.2

A

1005-9202(2017)14-3415-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.14.015