中藥調(diào)控DNA甲基化修飾的研究進(jìn)展

湯琛琛++++++劉亞敏++++++石玉琳++++++陳啟龍

[摘要] 表觀遺傳學(xué)是生物體表型或基因表達(dá)的遺傳改變，但是它的改變沒有影響DNA序列的變化，它強(qiáng)調(diào)了基因和環(huán)境的相互作用，已逐漸變?yōu)闊狳c(diǎn)內(nèi)容在生命科學(xué)前沿研究中。作為表觀遺傳研究進(jìn)展內(nèi)容中的一部分和應(yīng)答機(jī)體內(nèi)外環(huán)境變化的一種可逆修飾方式，DNA甲基化模式的異常與很多疾病有關(guān)。有研究表明，中藥可以通過干預(yù)DNA甲基化修飾過程來發(fā)揮其療效。本文分別從不同藥性中藥、中藥單體及中藥復(fù)方等方面對中藥在調(diào)控DNA甲基化修飾過程的研究進(jìn)行綜述，以期為進(jìn)一步研究中藥在疾病治療過程中的作用靶點(diǎn)及其機(jī)制提供理論依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 中藥；DNA甲基化；研究進(jìn)展

[中圖分類號(hào)] Q523 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2017）06（c）-0030-04

[Abstract] Epigenetics is a genetic change of the organism phenotype or gene expression， but its alterations do not involve the changes of DNA sequences， which emphasizes the interaction between genes and environment， and it has been becoming a hot content in the frontier research of life sciences. As one content of the research progress of epigenetics and a kind of reversible modification in response to internal and external environmental changes， the abnormal of DNA methylation pattern is associated with many diseases. Previous studies show that the traditional Chinese medicine plays a role for disease treatment by DNA methylation modification. This paper summarizes the recent studies of traditional Chinese medicine in regulating the DNA methylation from the aspects of different drug properties of traditional Chinese medicine， traditional Chinese medicine monomer and Chinese compound formula， so as to provide theoretical basis for further studying the targets and mechanism of traditional Chinese medicine in the process of treatment.

[Key words] Traditional Chinese medicine； DNA methylation； Research progress

表觀遺傳學(xué)是將遺傳因素和環(huán)境因素的系統(tǒng)整合，使得生物系統(tǒng)不僅具有像基因組一樣復(fù)雜系統(tǒng)的穩(wěn)定性，同時(shí)還具有很好的適應(yīng)性和精準(zhǔn)的反應(yīng)性[1]。因此，現(xiàn)代表觀遺傳學(xué)原理與中醫(yī)的整體觀念、天人相應(yīng)等理論不謀而合。DNA甲基化是表觀遺傳學(xué)重要的研究內(nèi)容之一，通常是指由DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的催化的DNA序列中腺嘌呤（A）或胞嘧啶（C）中的堿基與甲基（-CH3）發(fā)生共價(jià)結(jié)合，DNA甲基化可以通過細(xì)胞分裂傳遞給子細(xì)胞?，F(xiàn)代研究表明，中藥具有很強(qiáng)的調(diào)節(jié)DNA甲基化水平的能力。本文綜述了中藥在對DNA發(fā)生甲基化修飾所產(chǎn)生的影響，進(jìn)而進(jìn)一步探索了中藥與DNA甲基化修飾之間所具有的關(guān)系。

1 DNA甲基化的概述

DNA甲基化是表觀遺傳機(jī)制中最早被發(fā)現(xiàn)與基因沉默相關(guān)的內(nèi)容[2]，一般是在基因調(diào)控元件（如啟動(dòng)子）的CpG區(qū)域發(fā)生-5mC的修飾，即在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶（DNA-methyl transferase，DNMT）作用下，甲基基團(tuán)合成到CpG中胞嘧啶第5位碳原子上[3]的過程。因此，DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶在對調(diào)控DNA甲基化、遺傳印記、胚胎發(fā)育、正常細(xì)胞功能的維持以及人類疾病的發(fā)生均起著重要作用。DNMT在哺乳動(dòng)物家族中包含5個(gè)成員，分別為DNMT1、DNMT2、DNMT3A、DNMT3B和DNMT3L，但具有甲基轉(zhuǎn)移活性只有DNMT1、DNMT3A和DNMT3B[4]。當(dāng)細(xì)胞中非甲基化CpG被甲基化后，甲基結(jié)合蛋白便與之結(jié)合，染色質(zhì)構(gòu)象發(fā)生改變并導(dǎo)致基因表達(dá)沉默。如果在啟動(dòng)子區(qū)域發(fā)生DNA甲基化，轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子結(jié)合將直接受到阻礙，導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄水平降低或不能轉(zhuǎn)錄[5-6]。研究表明，DNA甲基化修飾可通過多種途徑調(diào)控特定基因的表達(dá)，影響細(xì)胞發(fā)展進(jìn)程，維持細(xì)胞穩(wěn)定，一旦甲基化修飾出現(xiàn)異常，就會(huì)引起相應(yīng)疾病的發(fā)生[7]。DNMT家族在DNA甲基化修飾過程中起到了非常重要的調(diào)控作用，而中藥對DNA甲基化調(diào)控作用正是通過調(diào)節(jié)DNMT家族表達(dá)水平來實(shí)現(xiàn)的。

2 中藥對DNA甲基化的調(diào)控

2.1 不同藥性中藥對DNA甲基化的影響

中藥的藥性分為寒、熱、溫、涼，而不同藥性的中藥對DNMT家族的調(diào)控作用也不同。一般來說，寒、涼藥具有清熱、瀉火、利尿、化痰、涼血、滋陰、通便、開竅、熄風(fēng)等作用。例如綠茶對DNMT表達(dá)起到抑制作用的是它的主要成分茶多酚和生物黃酮，進(jìn)而調(diào)控DNA甲基化水平[8]。中藥野生甘菊的主要成分是小白菊內(nèi)酯，小白菊內(nèi)酯可利用其自身攜帶的γ-亞甲基內(nèi)酯環(huán)與Cys1226 巰基發(fā)生烷基化反應(yīng)[9]，通過催化結(jié)構(gòu)域硫醇鹽來干擾轉(zhuǎn)錄因子Sp1與DNMT1啟動(dòng)區(qū)結(jié)合，抑制DNMT1表達(dá)，從而導(dǎo)致細(xì)胞在G1期出現(xiàn)靜息[10]。研究發(fā)現(xiàn)，雷公藤根提取物雷公藤甲素可有效抑制乳腺癌細(xì)胞MCF-7中DNMT1、DNMT3A和DNMT3B基因的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控p53和p73基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化水平，抑制MCF-7細(xì)胞增殖[11]。雷公藤甲素還可通過抑制人髓系白血病細(xì)胞系HL-60細(xì)胞DNMT1和DNMT3B基因表達(dá)來調(diào)控DAPK-1基因的甲基化水平，并促使DAPK-1基因表達(dá)水平上升來抑制HL-60細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[12]。與寒涼藥不同，溫?zé)崴幰话憔哂袦仃枴⑸⒑?、利水、通絡(luò)以及暖肝散結(jié)、回陽救逆等作用。例如有一種很好的DNA甲基化抑制劑姜黃素，它主要從我國傳統(tǒng)中藥姜黃根莖中提取，能通過抑制DNMT1活性來調(diào)控整個(gè)基因組的DNA甲基化水平。在中藥丹參提取物丹參酮ⅡA處理后的肝癌HepG2細(xì)胞中，發(fā)現(xiàn)DNMT1的mRNA表達(dá)水平明顯下降，提示丹參酮可通過調(diào)控DNA甲基化水平來抑制HepG2細(xì)胞的增殖[13]。

2.2 中藥單體成分對DNA甲基化的調(diào)控作用

在惡性腫瘤中DNA甲基化水平的異常是很常見的現(xiàn)象，可呈現(xiàn)出局部CpG島甲基化不同程度增高以及整體甲基化水平低下[14]。系統(tǒng)性紅斑狼瘡的基因組DNA甲基化水平普遍較低，而中藥砒霜中的主要成分三氧化二砷則可以通過提高自發(fā)性狼瘡小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞DNMT1基因表達(dá)水平來提升DNA甲基化水平[15]。研究發(fā)現(xiàn)，對乳腺癌細(xì)胞系T47D的p16基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島，中藥成分CDP有去甲基化作用[16]。同時(shí)，CDP對抑癌基因GSTPl啟動(dòng)子區(qū)的高甲基化狀態(tài)逆轉(zhuǎn)也具有一定的作用，從而提高其轉(zhuǎn)錄活性[17]。從中藥栝樓根提取的有效成分天花粉蛋白（trichosanthin，TCS）可有效抑制人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其主要作用機(jī)制就是通過TCS抑制DNMT家族的活性，進(jìn)而調(diào)控SYK基因甲基化水平來實(shí)現(xiàn)的[18]。利用苦參堿處理白血病K562細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，DNA甲基化平均水平在整體細(xì)胞中出現(xiàn)明顯下降，并由此誘導(dǎo)了K562細(xì)胞的凋亡[19]。在不同濃度姜黃素處理的不同癌細(xì)胞中，均發(fā)現(xiàn)MGMT基因和p16基因的啟動(dòng)子區(qū)CpG甲基化水平出現(xiàn)下降趨勢[20]。姜黃素還可降低鼻咽癌細(xì)胞中RECK基因的甲基化水平，通過調(diào)控MMP9的活性來抑制癌細(xì)胞生長，表明姜黃素在很多腫瘤細(xì)胞中均具有較好的去甲基化作用[21]。除此之外，在DU145前列腺癌細(xì)胞系中柚皮苷，香葉木苷和橙皮苷均具有去甲基化作用[22]。

中藥對DNA甲基化誘導(dǎo)的心血管疾病有逆轉(zhuǎn)作用，研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)脈粥樣硬化和高血壓與11β-HSD2 基因有很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性，導(dǎo)致該基因轉(zhuǎn)錄活性及表達(dá)水平有所下降主要由該基因啟動(dòng)子及第一外顯子區(qū)的CpG島發(fā)生甲基化引起，進(jìn)而導(dǎo)致了血壓升高[23]。Liu等[24]通過將姜黃素和DNMT1的相互作用的分子對接發(fā)現(xiàn)，姜黃素發(fā)揮抑制DNMT的作用主要通過與DNMT1發(fā)生共價(jià)結(jié)合。賈鐳[25]發(fā)現(xiàn)影響DNMT3的表達(dá)是由可可及其產(chǎn)物來實(shí)現(xiàn)，DNMT3的表達(dá)可以改變動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程。而在眼科疾病研究中，F(xiàn)arinelli等[26]發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜色素變性會(huì)導(dǎo)致DNMT3a的表達(dá)增加，而DNA發(fā)生甲基化的水平增加則會(huì)引起相對應(yīng)的位點(diǎn)基因的轉(zhuǎn)錄下降。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤及葡萄膜黑色素瘤甲基化的高發(fā)生率也已被證實(shí)，其中抑癌基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化是導(dǎo)致癌癥發(fā)生的重要因素之一[27-28]。吳文婷等[29]通過對具有調(diào)節(jié)甲基化作用的中藥進(jìn)行總結(jié)后認(rèn)為，依據(jù)中醫(yī)的“同病異治、異病同治”的經(jīng)典理論，具有補(bǔ)腎填精、益氣健脾活血、化痰散結(jié)等作用的中藥同樣也可作為眼科疾病的治療。

2.3 中藥復(fù)方成分對DNA甲基化的調(diào)控作用

中藥相對于西藥能夠作用多靶點(diǎn)，具有不容易產(chǎn)生耐藥性和副作用小等特點(diǎn)[30]。由茵陳、黨參、梔子等13味中藥組成的復(fù)方愈肝顆粒則可以同時(shí)調(diào)控DNMT1、DNMT3A和DNMT3B等3個(gè)DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的表達(dá)水平，進(jìn)而從多個(gè)維度調(diào)節(jié)肝細(xì)胞DNA甲基化水平以達(dá)到保肝防癌的作用[31]。由半夏、天南星、茯苓、白芥子、陳皮、全蝎、雞內(nèi)金、炙甘草等組成消痰散結(jié)方，郭維[32]運(yùn)用消痰散結(jié)方對胃癌細(xì)胞系的抗癌作用機(jī)制進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其可以逆轉(zhuǎn)p16基因甲化，提高了p16mRNA的表達(dá)量，這個(gè)研究目前僅限于對單個(gè)癌細(xì)胞甲基化p16基因的逆轉(zhuǎn)，消痰散結(jié)方對于癌癥的別的基因的甲基化是否有逆轉(zhuǎn)作用，目前具體作用機(jī)制尚不明確，DNA去甲基化對癌基因抑制功能恢復(fù)的研究以及對新的去甲基化藥物篩選的研究均將成為新型腫瘤基因的治療手段。

在骨髓增生異常綜合征的治療中，由不同比例青黛和雄黃組成的青黃散對患者的治療效果不同，藥物中雄黃的比例越大，作用效果越明顯。高飛[33]研究發(fā)現(xiàn)，含雄黃比例高的青黃散通過抑制DNMT1 mRNA的表達(dá)，減少了SAM向DNA甲基化，降低了DNA的甲基，從而改變了患者的高基化狀態(tài)，使得患者的外周血象發(fā)生改變，達(dá)到治療的目的。雄黃為含砷劑的化合物，砷可以在機(jī)體中競爭甲基體進(jìn)一步影響SAM及其代謝產(chǎn)物的變化，達(dá)到競爭甲基基團(tuán)的作用。汪琛穎等[34]研究發(fā)現(xiàn)，由太子參、黃芪、玄參、丹參、僵蠶、水蛭等組成的中藥復(fù)方糖維康在治療糖尿病的過程中能通過脫去CpG島甲基來活化一些基因，從而對疾病的治療起到了作用。王蕾等[35]研究表明，由人參、鹿茸、杜仲、巴戟天等藥組成的參茸補(bǔ)血丸通過抑制DNA甲基化酶的活力來降低DNA甲基化水平，進(jìn)而使肝腎組織中的RNA聚合酶活力提高，促進(jìn)了相關(guān)功能基因的表達(dá)，促進(jìn)生殖器官發(fā)育或提高組織修復(fù)。

由此可見，中藥既可以通過提高DNA甲基化水平來抑制基因的過表達(dá)，也可以通過降低DNA甲基化水平來促進(jìn)低表達(dá)水平基因的表達(dá)。人體達(dá)到“陰陽”平衡的狀態(tài)并實(shí)現(xiàn)對疾病調(diào)控作用在多基因、多靶點(diǎn)、多成分方面，可以通過中藥不同組合。

3 小結(jié)與展望

目前，研究發(fā)現(xiàn)的對某些抑癌基因高甲基化具有作用的特異性抑制DNA甲基轉(zhuǎn)移酶，這些具有特異性抑制的酶尚未發(fā)現(xiàn)對基因組和原癌基因的低甲基化表現(xiàn)出治療作用，雖然已經(jīng)開發(fā)出一些針對DNA甲基轉(zhuǎn)移酶調(diào)控基因的表觀遺傳學(xué)機(jī)制的藥物，但這些藥物作用位點(diǎn)多體現(xiàn)在某一特定的位置，臨床應(yīng)用發(fā)現(xiàn)這些藥物毒副作用相對較強(qiáng)，另外，相比這些單味中藥復(fù)方的優(yōu)勢可能更為顯著，對于疾病而言，不同藥物的組合從多種途徑共同作用卻是中藥研究的重點(diǎn)難點(diǎn)[36]。陰陽平衡狀態(tài)多依據(jù)中醫(yī)所遵循的整體觀念，從整體調(diào)節(jié)，通過中醫(yī)的五行相生相克關(guān)系，中醫(yī)藥通過調(diào)節(jié)各個(gè)臟腑的功能實(shí)現(xiàn)對疾病或不同疾病證候的治療，從微觀角度看，達(dá)到治療的目的主要通過調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄及其表達(dá)，使之重新恢復(fù)平衡狀態(tài)。相信隨著DNA甲基化在中藥干預(yù)下的研究不斷延伸和擴(kuò)展，以及對中藥及其復(fù)方與DNA甲基化系統(tǒng)性研究的力度的變大，DNA甲基化和DNA去甲基化未來在中藥及其復(fù)方干預(yù)下它們的具體靶點(diǎn)和機(jī)制也會(huì)逐漸被明確，這些都將會(huì)促進(jìn)對中藥的性質(zhì)闡述及其客觀化判別進(jìn)程。通過藥物或基因療法等手段有目的地改變基因的甲基化狀態(tài)進(jìn)而影響疾病發(fā)展進(jìn)程是一項(xiàng)很有吸引力的研究工作，具有廣闊的應(yīng)用前景。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 薛京倫.表觀遺傳學(xué)：原理、技術(shù)與實(shí)踐[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出社，2011.

[2] 嵇琴，彭淑紅，張敏，等.基于四性角度探討中藥對DNA甲基化的干預(yù)作用[J].江西中醫(yī)藥，2014，45（11）：69-73.

[3] Bird AP. Cp G islands as gene markers in the vertebrate nucleus [J]. Trends Genet，1987，3（12）：342-347.

[4] 楊曉丹，韓威，劉峰，等.DNA甲基化與脊椎動(dòng)物胚胎發(fā)育[J].遺傳，2012，34（9）：1108-1113.

[5] He XJ，Chen T，Zhu JK. Regulation and function of DNA methylation in plants and animals [J]. Cell Res，2011，21（3）：442-465.

[6] Moore LD，Le T，F(xiàn)an G. DNA methylation and its basic function [J]. Neuropsychopharmacology，2013，38（1）：23-38.

[7] Tang CM，Yau TO，Yu J. Management of chronic hepatitis B infection：current treatment guidelines，challenges，and new developments [J]. World J Gastroenterol，2014，20（20）：6262-6282.

[8] Lee WJ，Shim JY，Zhu BT. Mechanisms for the inhibition of DNA methyltransferases by tea catechins and biofla？鄄vonoids [J]. Mol Pharmacol，2015，68（4）：1018-1035.

[9] Shanmugam R，Kusumanchi P，Cheng L，et al. A water-soluble parthenolide analogue suppresses in vivo prostate cancer growth by targeting NFkappa B and generating reactive oxygen species [J]. Prostate，2012，70（10）：1074-1086.

[10] Liu Z，Liu S，Xie Z，et al. Modulation of DNA methylation by asesquiterpene lactone parthenolide [J]. Pharmacol Exp Ther，2013，329（2）：505-514.

[11] 梅怡，史永照，馮雯，等.雷公藤甲素對乳腺癌細(xì)胞P53、P73基因甲基化的影響以及對細(xì)胞增殖的抑制作用[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，33（4）：380-384.

[12] 張瑞珺.雷公藤甲素對HL-60細(xì)胞甲基化狀態(tài)的影響[D].太原：山西醫(yī)科大學(xué)，2014.

[13] 田雪飛，陶一明，方圓，等.丹參提取物對肝癌HepG2細(xì)胞DNA去甲基化作用研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，29（1）：13-15.

[14] 張敏，朱衛(wèi)豐，嵇琴，等.抗腫瘤中藥對DNA去甲基化作用的研究進(jìn)展[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2015，21（23）：224-229.

[15] 王紅，孫莉，陳培榮，等.三氧化二砷對MRL/lpr自發(fā)性狼瘡小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)DNMT1及CD（11a）表達(dá)的影響[J].浙江醫(yī)學(xué)，2008，30（11）：1191-1192.

[16] 柴新娟，欒菊，楊文理，等.中藥成分CDP對乳腺癌細(xì)胞P16，E-CADHERIN去甲基化作用的研究[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2014，40（5）：798-802.

[17] 張軍哲，王錦紅，覃揚(yáng)，等.中藥成分CDP逆轉(zhuǎn)高甲基化狀態(tài)的GSTPl基因啟動(dòng)子低轉(zhuǎn)錄活性的研究[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2016，38（5）：761-765.

[18] 華芳，單保恩，趙連梅，等.天花粉蛋白抑制人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞生長及逆轉(zhuǎn)syk基因甲基化的研究[J].腫瘤，2009，29（10）：944-949.

[19] 劉小珊，蔣紀(jì)愷，張彥，等.苦參堿誘導(dǎo)K562細(xì)胞分化的基因組DNA甲基化模式變化[J].中華實(shí)用中西醫(yī)雜志，2004，4（17）：1059-1060.

[20] 鄧鈺雙.姜黃素通過DNA甲基化調(diào)控NEP表達(dá)減輕阿爾茲海默病細(xì)胞模型中炎癥反應(yīng)的機(jī)制研究[D].重慶：重慶醫(yī)科大學(xué)，2015.

[21] 王柏琦，陳艷華，蔣麗琴，等.姜黃素對鼻咽癌細(xì)胞RECK基因甲基化以及MMP-9表達(dá)與活性的影響[J].中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志，2014，42（2）：116-119，138.

[22] 尤程程，黃利鳴，韓鈺，等.重組天花粉蛋白體外誘導(dǎo)宮頸癌HeLa細(xì)胞p27基因去甲基化的研究[J].中草藥，2010，41（2）：245-249.

[23] 王淼，楊小虎，朱彥，等.以表觀遺傳修飾為靶標(biāo)的中藥治療心血管疾病的相關(guān)研究進(jìn)展[J].中國新藥雜志，2014， 23（3）：289-297.

[24] Liu Z，Xie Z，Jones W，et al. Curcumin is a potent DNA hypomethylation agent [J]. Bioorg Med Chem Lett，2009， 19（3）：706-709.

[25] 賈鐳.可可影響血脂譜的薈萃分析及FOXP3基因甲基化修飾與動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性研究[D].北京：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，2012.

[26] Farinelli P，Perera A，Arango-Gonzalez B，et al. DNA methylation and differential gene regulation in photoreceptor cell death [J]. Cell Death Dis，2014，5（12）：e1558.

[27] Cohen Y，Merhavi-Shoharn E，Avraharn RB，et al. Hypermethylation of Cp G island loci of multiple tumor suppressorgenes in retinoblastoma [J]. Exp Eye Res，2008， 86（2）：201-206.

[28] Erhavi E，Cohen Y，Avraham BC，et al. Promoter methylation status of multiple genes in uveal melanoma [J]. Invest Ophthalmol Vis Sci，2007，48（10）：4403-4406.

[29] 吳文婷，金明.DNA甲基化在眼科疾病中的應(yīng)用以及中藥調(diào)節(jié)甲基化的研究進(jìn)展[J].中國中醫(yī)眼科雜志，2014， 24（2）：149-152.

[30] Ptak C，Peronis A. Epigenetics and complex disease：from etiology to new therapeutics [J]. Annu Rev Pharmacol Toxicol，2008，48：257-276.

[31] 呂鋒，邵澤勇，謝朝良，等.愈肝顆粒對大鼠肝癌的抵制作用及其表觀遺傳學(xué)機(jī)制[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2008，4（10）：26-28.

[32] 郭維.消痰散結(jié)方對胃癌P16基因甲基化的影響[D].上海：第二軍醫(yī)大學(xué)，2010.

[33] 高飛.青黃散治療骨髓增生異常綜合征去甲基化作用效應(yīng)機(jī)制研究[D].北京：北京中醫(yī)藥大學(xué)，2013.

[34] 汪琛穎，司馬義·薩依木，馬晴，等.糖尿病腎病大鼠胰基因組DNA甲基化狀態(tài)的變化[J].北京師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2002，38（3）：395-398.

[35] 王蕾，胡元會(huì)，王萍，等.參茸補(bǔ)血丸對去勢大鼠生殖器官和DNA甲基化水平的影響[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2003，9（10）：768-770.

[36] 徐莉，謝冠群，溫成平，等.中藥及中藥有效成分對表觀遺傳作用的研究進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥雜志，2011，26（7）：1561-1564.