冷藏鰱魚優(yōu)勢(shì)腐敗菌致腐能力的初步分析

李婷婷，陳思，李歡，趙前程，馬堃，勵(lì)建榮*

1(大連民族大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，遼寧 大連，116600)2(西南大學(xué) 食品學(xué)院，重慶，400715)3(渤海大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，生鮮農(nóng)產(chǎn)品貯藏加工及安全控制技術(shù)國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心，遼寧 錦州，121013)4(大連海洋大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院)，遼寧 大連，116600)

冷藏鰱魚優(yōu)勢(shì)腐敗菌致腐能力的初步分析

李婷婷1, 2，陳思3，李歡3，趙前程4，馬堃1，勵(lì)建榮3*

1(大連民族大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，遼寧 大連，116600)2(西南大學(xué) 食品學(xué)院，重慶，400715)3(渤海大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，生鮮農(nóng)產(chǎn)品貯藏加工及安全控制技術(shù)國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心，遼寧 錦州，121013)4(大連海洋大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院)，遼寧 大連，116600)

為探究鰱魚腐敗菌(熒光假單胞菌、腐敗希瓦氏菌和溫和氣單胞菌)對(duì)冷藏鰱魚的致腐能力，以接種鰱魚腐敗菌(熒光假單胞菌、腐敗希瓦氏菌和溫和氣單胞菌)的無(wú)菌鰱魚塊為研究對(duì)象，通過定期測(cè)定其在4 ℃貯藏過程中的感官、TVB-N值、TMA值、電導(dǎo)率等新鮮度指標(biāo)以及腐敗菌的變化情況，并以腐敗菌生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)參數(shù)和腐敗代謝產(chǎn)物產(chǎn)量因子(YTVB-N/CFU和YTMA/CFU)為指標(biāo)，探討冷藏過程中鰱魚腐敗菌的腐敗能力。研究表明，接種3種腐敗菌的無(wú)菌魚塊腐敗速度明顯優(yōu)于無(wú)菌對(duì)照組；腐敗希瓦氏菌的腐敗能力最強(qiáng)，熒光假單胞菌的YTMA/CFU較低。3種腐敗菌都有一定的腐敗能力，但在較高數(shù)量時(shí)才會(huì)出現(xiàn)明顯的致腐作用。

鰱魚；腐敗菌；產(chǎn)量因子；腐敗能力

鰱魚(Hypophthalmichtysmolitrix)作為中國(guó)著名的四大家魚之一，養(yǎng)殖產(chǎn)量常年位于淡水魚類前三位。鰱魚肉質(zhì)鮮嫩，含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪等營(yíng)養(yǎng)物，其中粗蛋白含量約為16.5%，有人體必需的8種氨基酸及嬰幼兒所必需的組氨酸[1-2]。近年來，鰱魚加工業(yè)發(fā)展十分迅速，鰱魚肉色白、價(jià)格低廉、凝膠性能好，是非常適合用于工業(yè)化加工的淡水魚種。然而，由于鰱魚水分含量高，富含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在冷鏈物流和銷售過程非常容易產(chǎn)生品質(zhì)劣變。參與魚類腐敗的只有部分優(yōu)勢(shì)細(xì)菌能大量增殖。占據(jù)主導(dǎo)地位并最終導(dǎo)致魚類腐敗變質(zhì)，這些產(chǎn)生腐敗代謝產(chǎn)物(臭味、異味、顏色)的優(yōu)勢(shì)微生物被稱為特定腐敗菌(Specific Spoilage Organism, SSO)[3]。研究表明，在有氧冷藏條件下，腐敗希瓦氏菌(Shewanellaputrefaciens)多為海洋魚類的SSO，假單胞菌多為淡水魚的SSO[3-5]。

希瓦氏菌是嗜冷的革蘭氏陰性菌，腐敗活性強(qiáng)，在低溫環(huán)境下能夠生長(zhǎng)繁殖，并逐漸占主導(dǎo)地位，能把氧化三甲胺(trimethylamine oxide，TMAO)還原為三甲胺(trimethylamine，TMA)，產(chǎn)生硫化氫[6]。假單胞菌屬同樣是典型的低溫腐敗菌，具有很強(qiáng)的蛋白質(zhì)和脂肪分解能力，腐敗特征表現(xiàn)為硫化氫味、水果或酸臭味等異味[7]。氣單胞菌在自然界中廣泛存在，在魚類等水產(chǎn)品常有檢出。目前，關(guān)于這3種菌致腐能力差異的研究鮮有報(bào)道，為此本研究將從冷藏鰱魚中分離得到的3種菌接種到無(wú)菌魚塊中，對(duì)其致腐能力進(jìn)行測(cè)定和分析，研究結(jié)果將為進(jìn)一步探究水產(chǎn)品致腐機(jī)制、豐富水產(chǎn)加工理論提供基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

養(yǎng)殖鮮活鰱魚，購(gòu)自錦州林西水產(chǎn)市場(chǎng)，平均重量 1.5～1.8 kg。假單胞菌CFC選擇性培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、鐵瓊脂、氣單胞菌培養(yǎng)基、假單胞菌CFC選擇性培養(yǎng)基添加劑、氣單胞菌選擇性培養(yǎng)基，青島海博生物科技有限公司；超微量ATP(Ca2+)試劑盒，南京建成生物工程研究所；三甲胺、磷酸鹽、8-苯胺基-1-萘磺酸銨(ANS)試劑等，均為分析純，購(gòu)于天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

PL602-L電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；FOSS凱氏定氮，丹麥福斯公司；冷凍離心機(jī)，德國(guó)Beckman制造公司；LDZX-50FBS立式壓力蒸汽滅菌器，上海申安醫(yī)療器械廠；LRH-150生化培養(yǎng)箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；JHG-Q60-P100實(shí)驗(yàn)室均質(zhì)機(jī)，上海融合機(jī)械設(shè)備有限公司。

1.3 方法

1.3.1 鰱魚無(wú)菌魚片的制備

參照HERBERT[8]的方法制備無(wú)菌魚塊。鮮活鰱魚，冰水致死，清洗后，無(wú)菌操作切取鰱魚背部魚肉，去皮，再用滅菌剪刀修剪魚塊至大小形狀一致(25～35 g/塊)后，將鰱魚魚塊使用無(wú)菌水清洗，用無(wú)菌濾紙擦拭魚塊上水分，再用75%的酒精擦拭魚塊，將制備好的魚塊放在酒精燈火焰周圍灼燒1～2 s。上述所有無(wú)菌操作均在無(wú)菌操作臺(tái)中進(jìn)行。對(duì)制備好的無(wú)菌魚塊進(jìn)行菌落總數(shù)測(cè)定(<102CFU/g)，符合實(shí)驗(yàn)要求。

1.3.2 細(xì)菌菌懸液的制備

參考李學(xué)英等[5]的方法。菌種均保藏于-80 ℃超低溫冰箱中，將從腐敗鰱魚中分離鑒定的優(yōu)勢(shì)腐敗菌腐敗希瓦氏菌、熒光假單胞菌、溫和氣單胞菌活化后，接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基表面劃線接種，25 ℃培養(yǎng)，挑取典型菌落用營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基25 ℃過夜培養(yǎng)。用麥?zhǔn)媳葷岱ㄖ苽?08CFU/mL菌液，無(wú)菌生理鹽水稀釋100倍后備用。

1.3.3 接種及貯藏

無(wú)菌操作臺(tái)中，將無(wú)菌鰱魚魚塊分為4組，其中試驗(yàn)的3組放入制好的3種菌懸液中，對(duì)照組放入無(wú)菌生理鹽水中，浸泡10 s，拿出瀝干，裝入滅菌的食品袋中，封口后置于4 ℃冰箱中貯藏。

1.3.4 TVB-N測(cè)定

TVB-N值測(cè)定依照SC/T 3032—2007《水產(chǎn)品中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》中的微量擴(kuò)散法測(cè)定。

1.3.5 TMA測(cè)定

參照GB/T 5009.179—2003《火腿中三甲胺氮的測(cè)定》和許龍福等[9]的修訂方法，采用苦味酸法測(cè)定。

1.3.6 電導(dǎo)率測(cè)定

取鰱魚魚肉10 g，加蒸餾水90 mL至燒杯中，用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)，攪拌30 min后過濾，所得濾液用電導(dǎo)率儀進(jìn)行測(cè)定。

1.3.7 Ca2+-ATPase測(cè)定

參照超微量ATP(Ca2+)測(cè)試盒的操作說明進(jìn)行測(cè)定。

1.3.8 表面疏水性

采用ANS熒光探針法[10]測(cè)定表面疏水性，將樣品用20 mmol/L含0.6 mol/L KCl的磷酸鹽緩沖溶液(pH 7.0)稀釋至0～1 mg/mL，加入20 μL 8 mmol/L ANS后混合均勻，避光靜置10 min，熒光分光光度計(jì)測(cè)定條件為：激發(fā)波長(zhǎng)374 nm，發(fā)射波長(zhǎng)250～500 nm，狹縫10 nm。以熒光強(qiáng)度對(duì)蛋白濃度作圖，曲線初始斜率即為蛋白質(zhì)分子的表面疏水性指數(shù)。

1.3.9 微生物動(dòng)力學(xué)模型

用修正的Gompertz描述微生物的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)：

(1)

式中：t為時(shí)間，h；N(t)為時(shí)間t時(shí)的菌數(shù)；Nmax，N0為最大和初始菌數(shù)，CFU/g；μmax為最大生長(zhǎng)速率，h-1；λ為生長(zhǎng)延滯時(shí)間。

1.3.10 腐敗能力的定量分析

以單位腐敗菌產(chǎn)生的腐敗代謝產(chǎn)物，作為腐敗能力的定量指標(biāo)，腐敗代謝產(chǎn)物因子(YTVB-N/CFU和YTMA/CFU)如下所示[4]：

(2)

(3)

式中：產(chǎn)量因子YTVB-N/CFU/(mg TVB-N/CFU)；YTMA/CFU/(mgTMA/CFU)；N0為初始菌落數(shù)，CFU/g；NS為貨架期終點(diǎn)時(shí)的腐敗菌菌落數(shù)即最小腐敗菌落數(shù)，CFU/g；(TVB-N)0、(TVB-N)S為初始點(diǎn)和貨架期終點(diǎn)時(shí)的TVB-N量，mg/100g；(TMA)0、(TMA)S為初始點(diǎn)和貨架期終點(diǎn)時(shí)的TMA量，mg/100g。

2 結(jié)果與分析

2.1 TVB-N值分析

圖1為接種不同菌種的鰱魚無(wú)菌魚塊在4 ℃貯藏過程中的TVB-N值變化圖。

圖1 接種不同菌種的無(wú)菌魚塊TVB-N值變化趨勢(shì)圖Fig.1 Changes of TVB-N of different bacterial strains inoculated in sterile silver carp fillets

魚類在貯藏過程中容易受到微生物和酶的作用使蛋白質(zhì)產(chǎn)生分解，生成氨以及胺類等堿性含氮物質(zhì)，有研究表明[11]，微生物增殖與TVB-N值的增加具有很好的一致性。從圖1可以看出，接種熒光假單胞菌的魚塊貯藏初期TVB-N值變化不明顯，2 d后呈直線上升趨勢(shì)，可能是由于熒光假單胞菌經(jīng)過短暫的延滯期后快速生長(zhǎng)，腐敗產(chǎn)物大量積累。接種腐敗希瓦氏菌的魚塊TVB-N的累積速度僅次于熒光假單胞菌，但高出溫和氣單胞菌和對(duì)照組。丁婷等[12]對(duì)0 ℃冷藏三文魚優(yōu)勢(shì)腐敗菌的致腐能力進(jìn)行分析，研究發(fā)現(xiàn)熒光假單胞菌具有較強(qiáng)的致腐能力。

2.2 TMA值分析

氧化三甲胺(trimethylamine oxide，TMAO)廣泛分布于海產(chǎn)硬骨魚類的肌肉中，是海產(chǎn)硬骨魚類具有的一種特殊鮮味物質(zhì)，淡水魚中含量較少，每100 g魚肉中一般含有5～20 mg TMAO[13]。接種不同菌種的鰱魚無(wú)菌魚塊在4 ℃貯藏過程中的TMA值變化如圖2所示。從圖2可以看出，TMA值隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而上升，由于淡水魚類TMAO含量較少，所以整體TMA值較低。其中接種腐敗希瓦氏菌和溫和氣單胞菌的魚塊TMA值呈快速增長(zhǎng)趨勢(shì)，而接種熒光假單胞菌的魚塊TMA變化趨勢(shì)和對(duì)照組幾乎一致，明顯慢于腐敗希瓦氏菌和溫和氣單胞菌。從TMA值變化可以說明假單胞菌還原TMAO能力較弱，與對(duì)照組相似，腐敗希瓦氏菌和溫和氣單胞菌還原TMAO能力要強(qiáng)于熒光假單胞菌，這與MILLER[14]、GRAM[15]等的研究成果相一致。

圖2 接種不同菌種的無(wú)菌魚塊TMA值變化趨勢(shì)圖Fig.2 Changes of TMA of different bacterial strains inoculated in sterile silver carp fillets

2.3 電導(dǎo)率分析

由于微生物蛋白酶的作用，蛋白質(zhì)、脂肪等分解成大量小分子物質(zhì)，產(chǎn)生大量離子，從而使魚肉浸出液產(chǎn)生大量具有導(dǎo)電能力的物質(zhì)[16]。貯藏時(shí)間越長(zhǎng)，魚肉的分解產(chǎn)物越多，導(dǎo)電能力越強(qiáng)，新鮮度越差。接種不同菌種無(wú)菌魚塊的電導(dǎo)率如圖3所示。從圖3可以看出，接種腐敗希瓦氏菌魚塊的電導(dǎo)率值明顯高于其他3組，可以說明腐敗希瓦氏菌蛋白酶具有較強(qiáng)的分解活性。而接種溫和氣單胞菌魚塊的電導(dǎo)率略微高于熒光假單胞菌，空白對(duì)照組電導(dǎo)率值最小，說明三種微生物在增殖過程中都會(huì)分解營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)產(chǎn)生離子致使鰱魚新鮮度下降。SHEN等[17]對(duì)不同貯藏溫度下虹鱒魚魚片的電導(dǎo)率進(jìn)行分析，研究發(fā)現(xiàn)隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，電導(dǎo)率呈上升趨勢(shì)，而貯藏溫度越低電導(dǎo)率增加越緩慢，可能是低溫抑制微生物的活動(dòng)，從而降低了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分解速率。

圖3 接種不同菌種的無(wú)菌魚塊電導(dǎo)率值變化趨勢(shì)圖Fig.3 Changes of electric conductivity of different bacterial strains inoculated in sterile silver carp fillets

2.4 Ca2+-ATPase活性分析

肌球蛋白是肌原纖維蛋白的主要部分，ATPase位于肌球蛋白的頭部，當(dāng)肌球蛋白在冷藏過程中發(fā)生變性時(shí)，ATPase活性已因受到影響而隨之變化，從而失去活性[18]。因此Ca2+-ATPase活性是評(píng)定蛋白質(zhì)品質(zhì)的重要指標(biāo)，測(cè)定ATPase活性的變化可以反映出肌球蛋白的變化情況，繼而反映出肌肉的變化情況[19]。接種不同菌種無(wú)菌魚塊的Ca2+-ATPase活性如圖4所示。由圖4可知，整個(gè)貯藏過程中鰱魚Ca2+-ATPase活性呈下降趨勢(shì)，其中，接種溫和氣單胞菌和熒光假單胞菌的無(wú)菌魚塊Ca2+-ATPase活性在貯藏中后期與對(duì)照組相比出現(xiàn)明顯下降，而接種腐敗希瓦氏菌的魚塊在貯藏中期Ca2+-ATPase活性甚至略高于對(duì)照組，說明微生物活動(dòng)可能不是引起鰱魚Ca2+-ATPase活性變化的主要原因。

圖4 接種不同菌種的無(wú)菌魚塊Ca2+-ATPase活性變化趨勢(shì)圖Fig.4 Changes of Ca2+-ATPase activity of different bacterial strains inoculated in sterile silver carp fillets

2.5 表面疏水性指數(shù)分析

低溫貯藏過程中魚肉蛋白質(zhì)的變性還表現(xiàn)為蛋白質(zhì)疏水性的變化。維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的作用力是疏水基的作用，蛋白質(zhì)疏水性能夠反映蛋白質(zhì)分子疏水性氨基酸的相對(duì)含量，因而可用它來表征蛋白質(zhì)的變性程度[20]。接種不同菌種魚塊的表面疏水性指數(shù)變化如圖5所示，在整個(gè)貯藏過程中，表面疏水性指數(shù)先快速上升后趨于平緩。其中，接菌魚塊表面疏水性指數(shù)在貯藏6 d后趨于平緩，對(duì)照組在貯藏8 d后趨于平緩，可以說明微生物繁殖和活動(dòng)可以明顯加快蛋白質(zhì)的變性速度，導(dǎo)致魚肉新鮮度下降。

圖5 接種不同菌種的無(wú)菌魚塊表面疏水性指數(shù)變化趨勢(shì)圖Fig.5 Changes of surface hydrophobicity of different bacterial strains inoculated in sterile silver carp fillets

2.6 菌落總數(shù)分析

接種3種腐敗菌后，鰱魚魚塊的菌落總數(shù)的變化如圖6所示。從圖6可以看出，經(jīng)過75%酒精擦拭的對(duì)照組魚塊菌落總數(shù)小于102CFU/g，說明無(wú)菌魚塊符合標(biāo)準(zhǔn)。接種后的腐敗希瓦氏菌、熒光假單胞菌和溫和氣單胞菌經(jīng)過短暫的延滯期后均快速增長(zhǎng)，在這個(gè)過程中腐敗產(chǎn)物大量積累，致使魚肉腐敗變質(zhì)。

表1為3種腐敗菌用修正的Gompertz方程擬合所得的動(dòng)力學(xué)參數(shù)，回歸系數(shù)R2都在0.98以上，說明擬合精度較高，其中熒光假單胞菌的延滯期明顯較長(zhǎng)，這也解釋了接種熒光假單胞菌的魚塊各種指標(biāo)貯藏初期變化較慢。

圖6 接種不同菌種的無(wú)菌魚塊菌落總數(shù)變化趨勢(shì)圖Fig.6 Changes of total viable counts of different bacterial strains inoculated in sterile silver carp fillets

表1 鰱魚腐敗菌4 ℃貯藏過程中生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)參數(shù)

2.7 腐敗菌致腐能力分析

表2是接種熒光假單胞菌、腐敗希瓦氏菌和溫和氣單胞菌的無(wú)菌魚塊在4 ℃貯藏過程中初始點(diǎn)及腐敗點(diǎn)的菌落總數(shù)、TMA值、TVB-N值。通過公式(2)、公式(3)可以計(jì)算得出3種腐敗菌在無(wú)菌鰱魚魚塊中的產(chǎn)量因子YTVB-N/CFU和YTMA/CFU。

表2 接菌魚塊貯藏過程中初始點(diǎn)和腐敗點(diǎn)的TVB-N值、TMA值和菌落數(shù)

表3為熒光假單胞菌、腐敗希瓦氏菌和溫和氣單胞菌接種無(wú)菌魚塊后的產(chǎn)量因子。其中，腐敗希瓦氏菌的兩項(xiàng)產(chǎn)量因子最高，說明腐敗希瓦氏菌具有很強(qiáng)的致腐能力，而熒光假單胞菌的TMA產(chǎn)量因子最低，這與許振偉[21]等的研究結(jié)果相一致。溫和氣單胞菌的TVB-N和TMA產(chǎn)量因子并不弱于熒光假單胞菌。由于3種腐敗菌的產(chǎn)量因子都很小，必須在數(shù)量較高時(shí)才能發(fā)揮作用。

表3 三種腐敗菌的產(chǎn)量因子

3 結(jié)論

以鰱魚無(wú)菌魚塊為介質(zhì)，接種鰱魚的特定腐敗菌熒光假單胞菌，腐敗希瓦氏菌和溫和氣單胞菌，研究TVB-N值、TMA值、菌落總數(shù)等指標(biāo)的變化情況，并用修正的Gompertz對(duì)腐敗菌的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，接種腐敗菌的魚塊新鮮度下降速度明顯優(yōu)于無(wú)菌對(duì)照組。以TVB-N和TMA為腐敗產(chǎn)物定量指標(biāo)對(duì)3種腐敗菌進(jìn)行致腐能力分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)腐敗希瓦氏菌致腐因子明顯較高，熒光假單胞菌的TMA產(chǎn)量因子較低。3種腐敗菌都具有一定的致腐能力，但都需要微生物積累到一定數(shù)量才會(huì)產(chǎn)生明顯的致腐效果。

[1] Shi C, Lu H, Cui J, et al. Study on the predictive models of the quality of silver carp (Hypophthalmichthysmolitrix) fillets stored under variable temperature conditions[J]. Journal of Food Processing and Preservation, 2014, 38(1): 356-363.

[2] 張慧芳, 李婷婷, 晉高偉, 等. HS-SPME-GC-MS 技術(shù)對(duì)冷藏鰱魚片揮發(fā)性成分變化的分析[J]. 食品科學(xué), 2014, 35(24): 130-135.

[3] Gram L, Dalgaard P. Fish spoilage bacteria-problems and solutions[J]. Current opinion in biotechnology, 2002, 13(3): 262-266.

[4] 趙二科, 朱軍莉, 馮立芳, 等. 冷藏大黃魚SSO希瓦氏菌致腐能力差異機(jī)制初探[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào), 2015, 39(2): 256-264.

[5] 李學(xué)英, 楊憲時(shí), 郭全友, 等. 大黃魚腐敗菌腐敗能力的初步分析[J]. 食品工業(yè)科技, 2009(6): 316-319.

[6] Parlapani F F, Meziti A, Kormas K A, et al. Indigenous and spoilage microbiota of farmed sea bream stored in ice identified by phenotypic and 16S rRNA gene analysis[J]. Food microbiology, 2013, 33(1): 85-89.

[7] 李琳, 潘子強(qiáng). 水產(chǎn)品特定腐敗菌的確定及生長(zhǎng)模型建立研究進(jìn)展[J]. 食品研究與開發(fā), 2011, 32(6): 152-156.

[8] HERBERT R A, HENDRIE M S, GIBSON D M, et al. Bacteria active in the spoilage of certain sea foods[J]. Journal of Applied Bacteriology, 1971, 34(1): 41-50.

[9] 許龍福, 俞飛蘭, 胡振友, 等. 火腿中三甲胺氮測(cè)定方法的修訂及驗(yàn)證[J]. 預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇, 2001, 11(6): 641-643.

[10] HUANG Y R, HUA Y F, QIU A Y. Soybean protein aggregation induced by lipoxygenase catalyzed linoleic acid oxidation [J]. Food Research International, 2006, 39(2): 240-249.

[11] 晉高偉, 李婷婷, 姜楊, 等. 0 ℃冷藏溫度下草魚新鮮度評(píng)價(jià)[J]. 食品工業(yè)科技, 2014, 35(13): 312-316.

[12] 丁婷, 李婷婷, 鄒朝陽(yáng), 等. 冷藏三文魚片特定腐敗菌致腐能力測(cè)定與分析[J]. 食品工業(yè)科技, 2015, 36(18): 315-319.

[13] CIVERA T, TURI R M, PARISI E, et al. Further investigations on total volatile basic nitrogen and trimethylamine in some Mediterranean teleosteans during cold storage [J]. Sciences des Aliments, 1995, 15(2): 179-186.

[14] Miller A, Scanlan R A, Lee J S, et al. Volatile compounds produced in sterile fish muscle (Sebastesmelanops) by Pseudomonas putrefaciens, Pseudomonas fluorescens, and an Achromobacter species[J]. Applied Microbiology, 1973, 26(1): 18-21.

[15] Gram L, Wedell-Neergaard C, Huss H H. The bacteriology of fresh and spoiling Lake Victorian Nile perch (Latesniloticus) [J]. International Journal of Food Microbiology, 1990, 10(3): 303-316.

[16] 張麗娜, 羅永康, 李雪, 等. 草魚魚肉電導(dǎo)率與鮮度指標(biāo)的相關(guān)性研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2011, 16(4): 153-157.

[17] Shen S, Jiang Y, Liu X, et al. Quality assessment of rainbow trout (Oncorhynchusmykiss) fillets during super chilling and chilled storage[J]. Journal of food science and technology, 2015, 52(8): 5204-5211.

[18] BENJAKUL S, VISESSANGUAN W, AEWSIRI T, et al. ATPase activities and autolysis of kuruma prawn Penaeus japonicus muscle proteins [J]. International Aquatic Research, 2011, 3: 53-61.

[20] BENJAKUL S, BAHER F.Physicochemical and enzymatic changes of cod muscle proteins subjected to different freeze-thaw cycles [J]. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2000, 80(8): 1143-1150.

[21] 許振偉, 許鐘, 楊憲時(shí), 等. 大黃魚中復(fù)合腐敗菌腐敗能力的分析[J]. 食品科學(xué), 2010, 31(23): 118-122.

Analysis of spoilage ability of specific spoilage organism in refrigerated silver carp

LI Ting-ting1,2, CHEN Si3, LI Huan3, ZHAO Qiancheng4, MA Kun1, LI Jianrong3*

1(College of Life Science, Dalian Minzu University，Dalian 116600，China)2(College of Food Science, Southwest University, Chongqing 400715,China)3(College of Food Science and Technology, Bohai University,National & Local Joint Engineering Research Center of Storage, Processing and Safety Control Technology for Fresh Agricultural and Aquatic Products, Jinzhou 121013,China)4(College of Food Science and Engineering, Dalian Ocean University, Dalian 116023,China)

To explore the spoilage abilities of specific spoilage organismPseudomonasfluorescens,AeromonassobiraandShewanellaputrefacienson refrigerated silver carp, freshness indexes including sensory evaluation, TVB-N, TMA, electric conductivity and total viable counts of sterile silver carp tissue respectively inoculated with these three kinds of spoilage bacteria were measured periodically. The yield factor for production of metabolite and the cell concentration at off-odour period were quantitatively measured. Results showed the freshness of sterile silver carp tissue blocks inoculated with spoilage bacteria deteriorated obviously compared with the sterile control group.Shewanellaputrefacienshad the strongest spoilage ability, and YTMA/CFUofPseudomonasfluorescenswas lower than that ofShewanellaputrefaciensandAeromonassobira. Three kinds of spoilage bacteria had certain spoilage abilities. However, the spoilage effect was not significant until the bacteria reached high counts.

Silver carp; specific spoilage organisms; yield factor; spoilage ability

博士，副教授(勵(lì)建榮教授為通訊作者，E-mail：lijr6491@163.com)。

國(guó)家自然科學(xué)基金(31301572，31471639)；重慶市項(xiàng)目博士后資助 (Xm2014041)；國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題(2015BAD16B08)

2016-07-23，改回日期：2016-08-28

10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201706023