麻醉劑對小鼠非手術(shù)胚胎移植效果的影響

薛如冰

（河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 河北 保定 071000）

麻醉劑對小鼠非手術(shù)胚胎移植效果的影響

薛如冰

（河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 河北 保定 071000）

胚胎移植是將著床前的早期胚胎利用器械移植到同種的生理狀態(tài)相同的動物子宮內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，是動物克隆、轉(zhuǎn)基因動物以及試管嬰兒等領(lǐng)域非常重要的一個環(huán)節(jié)。目前胚胎移植技術(shù)主要應(yīng)用于4個物種：小鼠、人類、牛、羊。其中人類和牛主要采用非手術(shù)法胚胎移植，小鼠和羊主要采用手術(shù)法胚胎移植。小鼠手術(shù)法胚胎移植操作繁瑣、費(fèi)用高、難度大、易感染，且不符合實(shí)驗(yàn)動物福利原則。因此，建立高效簡易的非手術(shù)胚胎移植技術(shù)迫在眉睫。

我們研究發(fā)現(xiàn)麻醉狀態(tài)下與非麻醉狀態(tài)下相對比，在麻醉狀態(tài)下進(jìn)行非手術(shù)胚胎移植對小鼠子宮內(nèi)膜的損傷更小，移植效果更好。

1 試驗(yàn)動物

實(shí)驗(yàn)小鼠CD-1品系，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司。所有小鼠均采用12 L∶12 D循環(huán)光照(6：00～18：00光照)，清潔級小鼠房，溫度22℃～25℃，濕度50%～60%，小鼠自由采食和飲水。

2 麻醉方式

我們采用兩種不同的麻醉方式進(jìn)行非手術(shù)胚胎移植。

2.1 阿佛丁全身麻醉

2.2 利多卡因或丁卡因子宮頸局部麻醉

3 試驗(yàn)方法

我們將小鼠分為四組來進(jìn)行對照試驗(yàn)。第一組，在不麻醉狀態(tài)下對其進(jìn)行非手術(shù)法胚胎移植。第二組，利用丁卡因子宮頸局部麻醉法對其進(jìn)行非手術(shù)法胚胎移植。第三組，利用利多卡因子宮頸局部麻醉法對其進(jìn)行非手術(shù)法胚胎移植。第四組，利用阿佛丁全身麻醉法對其進(jìn)行非手術(shù)法胚胎移植。

小鼠在麻醉期間代謝微弱，體溫下降嚴(yán)重，因此移植后最好將小鼠放于熱臺上待體溫回升后放回籠中。

4 試驗(yàn)結(jié)果

在非麻醉狀態(tài)下，小鼠子宮頸口接受刺激后會發(fā)生腫脹且子宮收縮加劇，這可能會導(dǎo)致移入的胚胎被擠出子宮角。而在麻醉狀態(tài)下，子宮的收縮活動相對減弱，有利于胚胎在子宮內(nèi)的沉積，降低了胚胎由于子宮收縮而被擠出子宮角的可能性。同時，子宮頸口松弛、子宮平滑肌的張力和強(qiáng)度降低，也會減少移植器械對子宮內(nèi)膜的損傷。

表1 麻醉劑對小鼠非手術(shù)法胚胎移植的影響

由試驗(yàn)結(jié)果可知，麻醉組的移植效率顯著高于不麻醉組，且阿佛丁組的移植效率最高，為67.1%，不同的麻醉方式之間沒有顯著差異(P＞0.05)，說明小鼠在全身麻醉的狀態(tài)下進(jìn)行胚胎移植，子宮損傷最小，移植效率最高。

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