SPARC表達(dá)水平與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系

崔 凱，李佰營(yíng)

（1. 陜西省第四人民醫(yī)院病理科，西安 710043；2. 陜西省第四人民醫(yī)院胸外科，西安 710043）

SPARC表達(dá)水平與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系

崔 凱1，李佰營(yíng)2

（1. 陜西省第四人民醫(yī)院病理科，西安 710043；2. 陜西省第四人民醫(yī)院胸外科，西安 710043）

目的：分析SPARC表達(dá)水平與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法：以2007年6月～2014年3月在我院接受乳腺手術(shù)治療的137例女性為觀察對(duì)象，根據(jù)其檢查結(jié)果，乳腺癌者65例，乳腺良性病變者72例。觀察兩組乳腺SPARC表達(dá)水平，比較不同臨床病理特征的乳腺癌患者SPARC表達(dá)情況的差異，分析SPARC表達(dá)水平與患者預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果：兩組患者的SPARC表達(dá)情況存在顯著差異：SPARC陽(yáng)性表達(dá)率由高到低分別為乳腺癌組、良性病變組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；分化程度低、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度為T3+T4、TNM分期為Ⅲ+Ⅳ期的乳腺癌患者其SPARC陽(yáng)性表達(dá)率較高，而不同年齡、月經(jīng)狀況的乳腺癌患者SPARC陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)明顯差別；惡化組SPARC陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于好轉(zhuǎn)組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：SPARC表達(dá)水平與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)，且預(yù)后越差的乳腺癌患者SPARC陽(yáng)性表達(dá)率越高。

SPARC；乳腺癌；預(yù)后；病理

據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）統(tǒng)計(jì)資料顯示，乳腺癌在女性惡性腫瘤發(fā)病率中居首位，每年全球新發(fā)病例超過(guò)100萬(wàn)，占因惡性腫瘤死亡患者的16%［1］。富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（secreted protein acidicand rich in cysteine，SPARC）又稱骨連接素，是一種與細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)的小分子糖蛋白，它可由心、腦、腎、胰腺、骨骼肌等組織分泌，可參與新生血管的形成、修復(fù)組織創(chuàng)傷的過(guò)程［2］，既往研究發(fā)現(xiàn)SPARC與腫瘤［3］的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有關(guān)。目前SPARC在乳腺癌中的研究尚處于起步階段，在乳腺癌中的表達(dá)及具體作用少見(jiàn)報(bào)道。本研究通過(guò)免疫組化檢測(cè)SPARC在不同病理情況的乳腺組織中的表達(dá)情況，旨在探討SPARC在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義，為臨床及病理醫(yī)師提供有用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象選取2007年6月～2014年3月在我院接受乳腺手術(shù)治療的女性患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡≥18周歲；（2）臨床資料完整，接受病理檢查者；（3）全部病例經(jīng)病理確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：不符合納入標(biāo)準(zhǔn)者。根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)共納入研究對(duì)象137例，其中乳腺癌者65例，年齡25～59歲，平均45.93± 12.54歲；乳腺良性病變者72例，年齡26～58歲，平均45.75±11.42歲。兩組患者的年齡分布無(wú)明顯差別，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 芯片制作納入的137例病例的組織石蠟病理標(biāo)本進(jìn)行組織芯片制作，XXXX公司完成組織芯片的制備。

1.2.2 試劑鼠抗人SPARC單克隆抗體（工作濃度為1∶500）；免疫組化SP試劑盒、生物素標(biāo)記的羊抗鼠/兔IgG（二抗）、DAB試劑盒及檸檬酸修復(fù)液（100倍）；二甲苯、無(wú)水乙醇、0.01 mol/L磷酸鹽緩沖液、蒸餾水、蘇木素、中性樹(shù)脂等。

1.2.3 檢測(cè)方法采用SP免疫組化法。實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作，用PBS代替一抗作陰性對(duì)照，用標(biāo)準(zhǔn)SPARC陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照。

1.2.4 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)采用半定量積分法判定結(jié)果，胞質(zhì)和間質(zhì)呈黃色視為SPARC陽(yáng)性。先按染色強(qiáng)度計(jì)分：0分，無(wú)色；1分，淺黃色；2分，棕黃色；3分，棕褐色。在高倍鏡下（×40）取5個(gè)不同視野，各計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，再按陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比計(jì)分：0分，陰性；1分，陽(yáng)性細(xì)胞≤10%；2分，11%～50%；3分，51%～75%；4分，>75%。染色強(qiáng)度與陽(yáng)性細(xì)胞百分比的乘積≥3分，為免疫反應(yīng)陽(yáng)性，否則為陰性［4］。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)觀察兩組患者乳腺SPARC表達(dá)水平，比較不同臨床病理特征的乳腺癌患者SPARC表達(dá)情況的差異，分析SPARC表達(dá)水平與患者預(yù)后的關(guān)系。其中好轉(zhuǎn)：TNM分期無(wú)進(jìn)展，且無(wú)新發(fā)病灶，腫瘤標(biāo)志物無(wú)明顯升高，惡化組反之。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)經(jīng)雙人錄入后，采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料采用例或百分率表示，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。一般資料根據(jù)資料類型采用t檢驗(yàn)或卡方檢驗(yàn)進(jìn)行分析，兩組患者乳腺SPARC表達(dá)情況的比較采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行處理，不同臨床病理特征的乳腺癌患者SPARC表達(dá)情況采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。P<0.05記為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者SPARC表達(dá)情況的比較由表1可知，兩組患者的SPARC表達(dá)情況存在顯著差異：SPARC陽(yáng)性表達(dá)率由高到低分別為乳腺癌組、良性病變組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

表1 兩組患者SPARC表達(dá)情況的比較

2.2 不同臨床病理特征的乳腺癌患者SPARC表達(dá)情況的比較由表2可知，分化程度低、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度為T3+T4、TNM分期為Ⅲ+Ⅳ期的乳腺癌患者其SPARC陽(yáng)性表達(dá)率較高（P<0.05），而不同年齡、月經(jīng)狀況的乳腺癌患者SPARC陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)明顯差別。

表2 不同臨床病理特征的乳腺癌患者SPARC表達(dá)情況的比較（例）

2.3 1年內(nèi)不同預(yù)后患者SPARC表達(dá)情況的比較

由表3可知，1年的隨訪結(jié)果顯示：惡化組SPARC陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于好轉(zhuǎn)組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

表3 1年內(nèi)不同預(yù)后患者SPARC表達(dá)情況的比較（例）

3 討論

SPARC是一種32 kDa分泌糖蛋白，其編碼基因位于人類染色體5q31.3～q32，包含10 個(gè)外顯子，全長(zhǎng)25.9 kb［5］。與細(xì)胞外基質(zhì)（extracellu lar matrix，ECM）蛋白相互作用，促進(jìn)細(xì)胞黏附，誘導(dǎo)細(xì)胞遷移［6］。SPARC蛋白也被認(rèn)為在組織重塑、血管生成、胚胎形成及腫瘤形成中起重要作用［7］。已有研究表明，SPARC 在轉(zhuǎn)移性黑色素瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)，在絕大多數(shù)異常痣中呈現(xiàn)中等表達(dá)［8］；在前列腺癌的部分原發(fā)灶中呈現(xiàn)低表達(dá)或中等表達(dá)，在大部分前列腺癌轉(zhuǎn)移灶中高表達(dá)［9］。陳萬(wàn)青等［10］研究表明，SPARC在結(jié)腸癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)。而W itkiewicz AK等［11］研究表明，SPARC在結(jié)直腸癌腫瘤細(xì)胞中低表達(dá)者往往預(yù)后較差。無(wú)論怎樣的結(jié)果，上述研究都說(shuō)明SPARC 具有明顯的組織特異性。同樣在本研究中可以發(fā)現(xiàn)，SPARC在乳腺癌組織和乳腺良性疾病組織以及正常乳腺組織中表達(dá)同樣存在著差異性，在乳腺癌組織中的表達(dá)率（89.23%）高于其在乳腺良性疾病中以及正常乳腺組織中的表達(dá)（分別為16.67%和3.54%），三者間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同樣TABR NER O J［12］的研究得到了類似的結(jié)果。

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織分化程度以及腫瘤的臨床分期對(duì)于惡性腫瘤病人的預(yù)后有重要意義。當(dāng)出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤組織分化程度低以及患者臨床分期較高時(shí)，預(yù)后較差、總生存率較低。已有SPARC 在惡性腫瘤中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。ZHANG D S等［13］研究認(rèn)為在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管鱗癌患者中，SPARC 蛋白陽(yáng)性表達(dá)率較無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組升高；另有學(xué)者研究表明，在肺癌組織［14］及子宮內(nèi)膜癌組織［15］中，SPARC的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。但關(guān)于 SPARC 蛋白與乳腺癌預(yù)后關(guān)系的研究目前尚有爭(zhēng)論。有研究認(rèn)為乳腺癌上皮細(xì)胞中 SPARC 蛋白表達(dá)增加與生存率降低有關(guān)［16］。本組實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)臨床病理結(jié)果較差的乳腺癌患者SPARC陽(yáng)性表達(dá)率明顯增高。且經(jīng)過(guò)一年的隨訪，發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)惡化的病人SPARC陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于病情好轉(zhuǎn)的患者，提示SPARC蛋白的上調(diào)與乳腺癌臨床病理特征以及預(yù)后有著密切的相關(guān)，其機(jī)制可能與Liu Y等［17］研究認(rèn)為的SPARC蛋白通過(guò)降低細(xì)胞侵襲活性及腫瘤血管內(nèi)血小板聚集阻止腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移有關(guān)。Zhang L等［18］評(píng)價(jià)了253例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌術(shù)后腫瘤組織中SPARC蛋白的表達(dá)，未得出SPARC蛋白對(duì)浸潤(rùn)性乳腺癌有預(yù)測(cè)價(jià)值的結(jié)論。但Kohli AG等［19］研究結(jié)果與本研究一致。

結(jié)合上述研究發(fā)現(xiàn)SPARC在乳腺癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)且預(yù)示不良的預(yù)后，其參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過(guò)程。對(duì)SPARC的深入研究有助于揭示乳腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的機(jī)制，為預(yù)防和治療提供新的思路和依據(jù)。在乳腺癌組織中的高表達(dá)預(yù)示著腫瘤的惡性程度，有可能成為判斷腫瘤侵襲力和患者預(yù)后的標(biāo)志物，且通過(guò)對(duì)SPARC基因的抑制可能是治療乳腺癌的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。

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The relationship between the expression level of SPARC and the occurrence, development, invasion and metastasis of breast cancer

Cui Kai1, Li Bai-ying2

(1. Department of Pathology; The Fourth People’s Hospital of Shaanxi Province, Xi'an 710043, China; 2. Department of Thoracic Surgery, The Fourth People’s Hospital of Shaanxi Province, Xi'an 710043, China)

[Abstract] Objective To analyze the relationship between the expression level of SPARC and the occurrence, development, invasion and metastasis of breast cancer. M ethods 137 cases of women to accept breast surgical operation in our hospital from June 2007 to March 2014 were selected as the observation object, according to the results of the examination, which were divided into breast cancer group (65 cases), benign breast lesions group (72 cases). The expression levels of SPARC in the two groups were observed. To compare the difference of SPARC expression in breast cancer patients with different clinicopathological features. Analyzed the relationship between SPARC expression and prognosis of patients. Results There were significant differences in the expression of SPARC in the three groups: SPARC positive expression rate from high to low were breast cancer group, benign lesion group, the difference was statistically significant; The SPARC positive expression rate of breast cancer patients with Low degree of differentiation, lymph node metastasis, depth of invasion, T3, T4, TNM stage III and IV was higher , and the positive expression of SPARC in breast cancer patients of different age and menstrual status rate had no significant difference; The positive expression rate of SPARC in deterioration group was significantly higher than that in the improvement group, and the difference was statistically significant. Conclusion The level of SPARC expression is closely related to the occurrence, development, invasion and metastasis of breast cancer, and the higher the rate of SPARC positive expression in breast cancer patients with worse prognosis.

SPARC; breast cancer; prognosis; pathology

R737.9

A

1673-016X（2017）03-0057-04

2017-01-05

崔凱，E-mail：CKAI004@163.com