幽門螺桿菌感染、焦慮抑郁與口腔扁平苔蘚發(fā)病及癌變的關系研究

藍余煉

（廣東醫(yī)學院附屬深圳市寶安區(qū)中心醫(yī)院社康科，深圳 518102）

幽門螺桿菌感染、焦慮抑郁與口腔扁平苔蘚發(fā)病及癌變的關系研究

藍余煉

（廣東醫(yī)學院附屬深圳市寶安區(qū)中心醫(yī)院社康科，深圳 518102）

目的：分析幽門螺桿菌（Hp）感染、焦慮抑郁與口腔扁平苔蘚（OLP）發(fā)病及癌變的相關性。方法：選取我院收治的OLP患者60例以及同期在我院進行體檢的健康志愿者30例，分別設為OLP組和對照組。兩組人員分別檢測Hp、血清Hp-IgG抗體，CagA-IgG抗體和VacA-IgG抗體，采用醫(yī)院焦慮抑郁量表（HADS）對兩組人員進行焦慮抑郁測評。結果：OLP組Hp強陽性和弱陽性表達數(shù)和對照組比較明顯較高，差異有統(tǒng)計學意義。糜爛型OLP患者Hp陽性率和非糜爛型OLP患者比較，差異無統(tǒng)計學意義。OLP組中Hp-IgG抗體、CagA-Hp IgG 和VacAHp IgG抗體陽性率和對照組比較均明顯較高，差異有統(tǒng)計學意義。糜爛型OLP患者Hp-IgG抗體、CagA-Hp IgG 和VacA-Hp IgG抗體陽性表達例數(shù)，差異無統(tǒng)計學意義。結論：OLP與Hp感染及毒素CagA、VacA以及精神因素均具有一定相關性，進一步研究CagA、VacA這兩種基因，對Hp感染引發(fā)的局部及全身疾病的治療具有重要作用。此外，臨床上還可通過對患者心理進行干預治療，給予不同心理指導并配合適當藥物，使治療效果進一步提高。

幽門螺桿菌；口腔扁平苔蘚；焦慮；抑郁；癌

口腔扁平苔蘚（OLP）屬于一種慢性口腔黏膜病，也是口腔黏膜較常見的癌前狀態(tài)，其發(fā)病機制尚不十分明確的，可能與機體自身及外界環(huán)境等多因素相互作用有關［1］。目前已知口腔扁平苔蘚發(fā)生的機體自身因素包括感染、微循環(huán)障礙、精神、內分泌、免疫、遺傳及微量元素缺乏等［3］。幽門螺桿菌（Hp）是胃癌的一級致癌因子，口腔黏膜與胃腸黏膜組織學特征相似，近年來相關研究顯示［4］，在OLP患者口腔多個部位均能檢測到幽門螺桿菌。另有研究顯示［5］，OLP患者通常伴有焦慮抑郁等情緒障礙，可改變T細胞亞群的遷移性能，引起循環(huán)血液中5-羥色胺，去甲腎上腺素，CD4和CD8等含量升高，從而影響神經(jīng)內分泌及免疫系統(tǒng)。本組研究為進一步分析幽門螺桿菌（Hp）感染、焦慮抑郁與口腔扁平苔蘚（OLP）發(fā)病及癌變的相關性，取我院收治的OLP患者60例以及同期在我院進行體檢的健康志愿者30例為研究對象，對其分析報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料本組納入2014年5月～2015年5月在我院口腔科門診就診的OLP患者60例，由臨床診斷或病理確診。WHO診斷OLP標準［6］：上皮過角化或不全角化；棘層增生或萎縮；基底細胞液化變性；上皮固有層炎癥細胞浸潤帶。60例OLP患者中，男性13例，女性47例；年齡21～75 歲，平均年齡（54.53±6.58）歲；病程2個月～12 年，平均病程（23.74±4.88）個月；糜爛型41例，非糜爛型19例；發(fā)病部位分類：頰部（單側或/和雙側）43例，牙后區(qū)12例，舌部2例，唇部1例。納入標準：①經(jīng)臨床和病理學檢查確診為OLP的患者；②生命體征平穩(wěn)，能理解、執(zhí)行各項指令的患者；③愿意參加本研究的患者。排除標準：①中、重度牙周炎的患者；②嚴重感染、系統(tǒng)性或免疫系統(tǒng)疾病的患者；③近3個月內服用抗生素的患者；④妊娠和哺乳期婦女。從同期在我院進行體檢的健康志愿者中隨機選取30例為對照組，其中男12例，女18例；年齡21～75 歲，平均年齡（54.53±6.58）歲，對照組年齡、性別、排除標準均和口腔扁平苔蘚組匹配，無統(tǒng)計學上的差（P>0.05），具有比較的意義。經(jīng)倫理委員會批準后本組研究開始實施，兩組人員均對本組研究目的和檢測方法知情同意，主動簽署了知情同意書，兩組人員的臨床資料均不公開，保證了患者的隱私性。

1.2 方法采集標本：①采集血清標本：采用專用血清分離管對兩組人員靜脈血進行采集，靜脈血采集3 mL，在37 ℃溫度條件下孵育30 m L，靜置30 min，以2000 r/min的轉速離心15 min，取上清液0.5 mL放入EP管中，置于-80℃冰箱保存。檢測時對血清標本進行常溫解凍，每份血清標本只能解凍檢測一次。②采集齦下菌斑標本：兩組人員禁2 h食水，用清水漱口，刮取磨牙區(qū)齦下的牙菌斑，應用的器材為無菌牙科刮治器，將菌斑均勻涂布在快速尿素酶試紙上。

檢測Hp：用快速尿素酶試驗法，將齦下菌斑標直接置于黃色試紙中央并觀察其變化，黃色試紙含尿素酶和酚紅指示劑，黃色試紙在3min內變紅則判定Hp感染陽性，其中變色時間≤1min為強陽性（++），變色時間為1～3 min即為弱陽性（+），黃色試紙不變色則判定陰性（-）。

血清中Hp-IgG抗體，CagA-IgG抗體和VacA-IgG抗體的檢測采用ELISE（酶聯(lián)免疫法）。血清標本和試劑盒在檢測前放置到20～25 ℃的環(huán)境中，操作步驟嚴格按照試劑說明進行；標準品孔中依次加入6個100μL濃度不同標準品；10μL待測樣本加入到每個待測樣本孔中，用封板膜封住，37 ℃恒溫30 min；反應板用洗滌液充分洗滌3次，濾紙印干；生物素化抗體稀釋液加入到空白孔中，其余孔中加入100μL生物素化抗體工作液，用封板膜封住，37 ℃恒溫加熱30 min；洗板同前；每孔加入100μL顯色底物；置入20～25 ℃室溫條件下避光孵育30 min；每孔中加入100μL終止液，混勻；測OD450值，計算樣本OD值，以上標準孔及待查樣品均做3次復孔。

對兩組人員進行焦慮抑郁測評，采用醫(yī)院焦慮抑郁量表（HADS）。兩組人員要獨立并快速答題，不得有他人干預，對于具有讀題困難的患者，由醫(yī)護人員或患者家屬進行協(xié)助作答，答題完畢后將所有人員問卷進行回收，共發(fā)放180份測評量表，收回180份，回收率 100%。HADS分為醫(yī)院焦慮抑郁量表焦慮分表（HADS-A）和醫(yī)院焦慮抑郁量表抑郁分表（HADS-D），共14個項目，HADS-A、HADS-D各七個項目，每項0～3分，4級評定，計算焦慮及抑郁的分值，≤7分屬于正常，8～10分為輕度，11～14分為中度，15～21分為重度，得分越高，說明焦慮及抑郁的程度越嚴重。

1.3 統(tǒng)計學處理用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件分析表中數(shù)據(jù)，計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗，用±s來表示計量資料，采用t檢驗，采用雙側檢驗所有統(tǒng)計分析，認為P<0.05為有顯著性差異，具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 將兩組快速尿素酶檢測Hp結果進行比較OLP組Hp強陽性和弱陽性表達數(shù)和對照組比較明顯較高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。60例OLP患者中，41例糜爛型OLP患者陽性37例、陰性4例，陽性率為90.24%；19例非糜爛型OLP患者陽性17例、陰性2例，陽性率為89.47%，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。如表1所示。

表1 兩組快速尿素酶檢測Hp結果對比［n（%）］

2.2 將兩組血清中Hp-IgG抗體、CagA-Hp IgG和VacA-Hp IgG抗體陽性例數(shù)進行比較OLP組中Hp-IgG抗體、CagA-Hp IgG 和VacA-Hp IgG抗體陽性率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。糜爛型OLP患者Hp-IgG抗體陽性表達32例、CagA-Hp IgG陽性表達27例、VacA-Hp IgG抗體陽性表達25例，非糜爛型OLP患者Hp-IgG抗體陽性表達8例、CagAHp IgG陽性表達7例 、VacA-Hp IgG抗體陽性表達7例，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），如表2所示。

表2 兩組血清中Hp-IgG抗體、CagA-HpIgG和VacA-HpIgG抗體陽性例數(shù)對比［n（%）］

2.3 將兩組人員焦慮和抑郁狀態(tài)進行比較OLP組焦慮抑郁發(fā)生率76.7%（47/60）和對照組13.33%（4/30）比較明顯較高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。OLP組HADS-A與HADS-D評分和對照組比較明顯較高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。糜爛組HADS-A（13.75± 3.11）分與HADS-D（13.62±2.89）分評分均高于非糜爛組［（7.43±2.05）分，（7.58±2.13）分］，差異有統(tǒng)計學意義（P>0.05），如表3所示。

表3 兩組人員焦慮和抑郁狀態(tài)對比（±s，分）

表3 兩組人員焦慮和抑郁狀態(tài)對比（±s，分）

對照組比較，▼P<0.05。

分組 例數(shù) HADS-A HADS-D對照組 例數(shù) 5.45±1.28 5.38±1.06 OLP組 30 12.67±2.55▼12.46±2.69▼t值 60 3.6638 3.4759 P值 —— 0.0124 0.014

3 討論

OLP的發(fā)病機至今尚不清楚，有研究［7］稱該疾病發(fā)病可能與局部慢性刺激、精神因素、免疫因素、細菌或病毒感染等多因素有關。幽門螺桿菌是微生物中的一種，以人類為主要宿主，只能從人胃中分離培養(yǎng)［8］。有學者［9］在胃炎患者的牙菌斑中首次分離培養(yǎng)出Hp，Hp釋放出的尿素酶，能夠使細菌周圍維持中性環(huán)境，使其在口腔黏膜定植。口腔黏膜與胃腸黏膜同屬于機體的消化系統(tǒng)，口腔環(huán)境適宜Hp生長，幽門螺桿菌以牙菌斑中居多［10］。大量研究顯示［11］，Hp可能與OLP等疾病相關。

Hp能分泌多種毒素因子，如CagA和VacA，這些基因在Hp致病過程中起重要作用。每種Hp所分泌的毒性因子是不同的，但研究發(fā)現(xiàn)含CagA和VacA基因的Hp具有最強的致病力［12］。CagA蛋白被公認為癌蛋白，有助于Hp引起細胞毒性，大量研究顯示［13］，CagA蛋白的EPIYA基序，是細胞內產生毒性作用的重要序列。所有Hp菌株中均存在VacA基因，VacA蛋白屬于空泡毒素，是促使靶細胞發(fā)生空泡樣變的媒介。有研究顯示［14］，不同VacA基因類型表達不同VacA蛋白毒性，VacA基因通過s區(qū)和m區(qū)，和介于兩者之間的i區(qū)表現(xiàn)為多態(tài)性。

檢測Hp方法包括侵襲性和非侵襲性兩種，其中侵襲性檢查包括快速尿素酶試驗、細菌培養(yǎng)、切片染色、PCR等；非侵襲性檢查包括13C-尿素、14C-尿素呼氣試驗、Hp-IgG系列抗體血清學檢測［15］。本組采用快速尿素酶試驗和Hp-IgG系列抗體血清學檢測，快速尿素酶方法較為簡便、靈敏高，檢測時間迅速，但易于出現(xiàn)假陽性。本組研究結果顯示，OLP組Hp陽性率及Hp-IgG抗體、CagA-Hp IgG和VacA-Hp IgG抗體陽性率明顯高于對照組。這就提示OLP患者口腔中Hp及相關毒素的存在率明顯高于對照組。本組研究將OLP分為糜爛型和非糜，但結果顯示，糜爛型和非糜爛型OLP患者Hp-IgG抗體、CagA-Hp IgG 和VacA-Hp IgG抗體陽性表達例數(shù)差異無統(tǒng)計學意義，提示OLP分型對研究結果并沒有明顯影響。

多項臨床研究顯示［16］，多數(shù)OLP患者合并焦慮和抑郁等不良心理情緒，焦慮患者主要臨床特征為軀體表現(xiàn)生理性緊張癥狀，情緒表現(xiàn)為對未來憂慮。抑郁患者主要表現(xiàn)為情緒低落、思維緩慢、言語減少，遲緩，是應激導致的常見情緒反應，焦慮適度對人類有益，但過度焦慮對人們對正常生活工作有害無益，還會對家庭和社會造成沉重的負擔［17-18］。焦慮抑郁還會降低機體的免疫功能，進而增加疾病的發(fā)生率。OLP發(fā)病原因并不明確，發(fā)病機制目前也無統(tǒng)一意見，多數(shù)研究［19］認為OLP病因與局部免疫有關，屬于T細胞介導的局部細胞免疫性慢性炎癥。近幾年，隨著國內外對神經(jīng)與免疫系統(tǒng)的不斷研究發(fā)展，使人們逐漸認識到黏膜病發(fā)病與精神因素有重要相關性［20］。本組對兩組人員焦慮抑郁程度評價采用簡便可行、題量小，易于被患者接受的HADS與HADS量表對OLP患者心理及精神狀態(tài)進行評價。本組研究結果顯示，OLP組HADS-A與HADS-D評分和對照組比較明顯較高，并且焦慮抑郁發(fā)生率和對照組比較也明顯較高，這就提示OLP患者存在明顯焦慮抑郁情緒。糜爛組HADS-A與HADS-D評分均高于非糜爛組，這也進一步證實了OLP發(fā)生發(fā)展與精神因素有關，尤其對于糜爛型患者的二者相關性更大。

總之，OLP與Hp感染及毒素CagA、VacA以及精神因素均具有一定相關性，進一步研究CagA、VacA兩種基因，對Hp感染引發(fā)的疾病的治療具有重要的臨床意義。此外，臨床上還可通過對患者心理進行干預治療，給予不同心理指導并配合適當藥物，使治療效果進一步提高。

［1］ 孫佳, 法永紅, 楊永進, 等. 幽門螺桿菌與口腔疾病的相關性研究進展［J］. 國際口腔醫(yī)學雜志, 2015, 42(1): 93-96.

［2］ 陳凌軻, 盧銳, 張靜, 等. 口腔扁平苔蘚病情復發(fā)加重影響因素調查［J］. 口腔醫(yī)學研究, 2014, 30(3): 226-229.

［3］ 楊鍇毓, 李雨慶, 周學東. 口腔幽門螺桿菌與胃幽門螺桿菌感染關系的研究進展［J］. 華西口腔醫(yī)學雜志, 2014, 32(3): 314-318.

［4］ 陳珊, 柳志文, 尹麗芬, 等.1659例口腔黏膜病臨床分析［J］. 臨床口腔醫(yī)學雜志, 2014, 30(7): 409-411.

［5］ 仇永樂, 賈楠, 史婷婷, 等. 幽門螺桿菌及其相關毒素與口腔扁平苔蘚關系的研究［J］. 北京口腔醫(yī)學, 2015, 23(6): 309-311.

［6］ Payeras MR, Cherubini K, Figueiredo MA, et al. Oral lichen planus: focus on etipathogenesis［J］. Arch Oral Biol, 2013, 58(9): 1057-1059.

［7］ 王璇, 黃錦葉, 陳昌偉, 等. NF-KB、COX-2在口腔扁平苔蘚和口腔癌中的表達及意義［J］. 海南醫(yī)學院學報, 2013, 19(3): 307, 310.

［8］ 董紅, 龍明生, 劉彩云, 等. 口腔扁平苔蘚70例臨床分析［J］. 臨床誤診誤治, 2015, 28(2): 88-90.

［9］ Cover T, Peek RM. Diet, microbial virulence, and Helicobacter pyloriinduced gastric cancer［J］. Gut Microbes, 2013, 4(6): 482-493.

［10］ 黎春暉, 宋萍萍, 譚丹, 等. 口腔扁平苔蘚患者焦慮抑郁情況分析［J］. 中國全科醫(yī)學, 2014, 17(35): 4263-4265.

［11］ 桑濤, 許韓美, 楊艷杰, 等. A型人格行為類型與口腔扁平苔蘚的相關性分析［J］. 上?？谇会t(yī)學, 2014, 23(1): 91-94.

［12］ 杜勇, 李浩渤. E-cadherin在口腔扁平苔蘚中的表達及意義［J］. 河北醫(yī)藥, 2015, 37(16): 2426.

［13］ Grimm M, Munz A, Exarchou A, et al. Immunohistochemical detection of Helicobacter pylori without association of TLR5 expression in oral squamous cell carcinoma［J］. J Oral Pathol Med, 2014, 43(1): 35-44.

［14］ 姚小武, 林敏校, 陳仕生, 等. 幽門螺桿菌感染與口腔扁平苔蘚和鱗狀細胞癌相關性的初步探討［J］. 中華口腔醫(yī)學研究雜志 (電子版), 2014, 8(5): 364-369.

［15］ 滿昭昭, 王秀梅. 口腔扁平苔蘚癌變的研究進展［J］. 北京口腔醫(yī)學, 2013, 21(5): 298-300.

［16］ 高巖. 從病理學角度看關于口腔扁平苔蘚潛在惡性性質的爭論［J］.中華口腔醫(yī)學雜志, 2015, 50(10): 577-580.

［17］ 劉鐵軍, 史婷婷, 劉健, 等. 口腔扁平苔蘚患者血清梅毒螺旋體、人類免疫缺陷病毒感染的檢測［J］. 河北醫(yī)科大學學報, 2016, 37(1): 44-45, 53.

［18］ Czerninski R, Zeituni S, Maly A, et a1. Clinical characteristics of 1ichen and dysplasia vs 1iehen planus cases and dysplasia cases［J］. Oral Dis, 2015, 21(4): 478-482.

［19］ 劉靜. 口腔念珠菌病、單純皰疹性口炎與HIV患者相關性的研究［J］.湖南師范大學 (醫(yī)學版), 2016, 13(4): 62, 65.

［20］ 周紅梅, 郭宜青, 危常磊. 口腔扁平苔蘚癌變研究進展及爭議［J］.中國實用口腔科雜志, 2012, 5(3): 146-149.

Correlation of Helicobacter pylori infection, anxiety and depression w ith the pathogenesis and carcinogenesis of oral lichen p lanus

Lan Yu-lian
(Baoan District Central Hospital Affiliated to Guangdong Medical College, Shenzhen 518102, China)

Objective To analyze the correlation between Helicobacter pylori (Hp) infection, anxiety and depression, and the pathogenesis and carcinogenesis of oral lichen planus (OLP). M ethods Sixty OLP patients an 30 healthy volunteers in our hospital were involved in this study, serving as OLP group and control group. Hp, serum Hp-IgG, CagA-IgG and VacA-IgG antibody of patients in two groups were detected. The anxiety and depression of the involved patients were measured by Hospital Anxiety and Depression Scale (HADS). Results The strong positive and weak positive expression of Hp in OLP group were significantly higher than those in control group. There was no significant difference in Hp positive rate between non-erosive OLP patients and erosive OLP patients. The positive rates of Hp-IgG, CagA-HpIgG and VacA-HpIgG antibodies in the OLP group were significantly higher than those in the control group. . The positive expression of Hp-IgG, CagA-HpIgG and VacA-HpIgG antibodies in erosive OLP patients was not statistically significant. Conclusion OLP is associated with Hp infection, toxin CagA, VacA and mental factors. Further study of CagA and VacA genes plays an important role in the treatment of local and systemic diseases caused by Hp infection. In addition, clinical psychological intervention is suggested for patients, different psychological guidance and appropriate drugs can improve the therapeutic effect.

helicobacter pylori; oral lichen planus; anxiety; depression; carcinoma

R781.4

A

1673-016X（2017）03-0048-04

2017-01-02

藍余煉，E-mail：lanyisheng1@163.com