兒童幽門螺桿菌感染檢測(cè)方法臨床適用性分析

張 燕，岳玉林，張之烽， 王 賢，沈 瀚

·臨床經(jīng)驗(yàn)·

兒童幽門螺桿菌感染檢測(cè)方法臨床適用性分析

張 燕1，岳玉林2，張之烽1， 王 賢1，沈 瀚1

目的 分析13C-尿素呼氣試驗(yàn)(13C-UBT)、血清幽門螺桿菌-IgG抗體、糞便幽門螺桿菌抗原和幽門螺桿菌培養(yǎng)試驗(yàn)方法檢測(cè)兒童幽門螺桿菌感染的適用性。 方法 92例懷疑幽門螺桿菌感染患兒進(jìn)行幽門螺桿菌培養(yǎng)，其中41例(44.57%)培養(yǎng)出幽門螺桿菌。將41例幽門螺桿菌感染患兒和30例健康體檢兒童同時(shí)行13C-UBT、血清幽門螺桿菌-IgG抗體檢測(cè)、糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)。 結(jié)果 糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)敏感性為46.34%，13C-UBT和血清幽門螺桿菌-IgG檢測(cè)敏感性較高，分別為92.68%和90.24%。13C-UBT和血清幽門螺桿菌-IgG檢測(cè)相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，13C-UBT和血清幽門螺桿菌-IgG檢測(cè)敏感性均高于糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)(P<0.05) ；13C-UBT和糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)特異性和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均高于血清幽門螺桿菌-IgG檢測(cè) (P<0.05)；糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)的陰性預(yù)測(cè)值明顯小于其他方法(P<0.05)。結(jié)論13C-UBT檢測(cè)的敏感性及特異性均較高，更能反映幽門螺桿菌感染的變化狀況，可作為臨床診斷幽門螺桿菌感染的首選方法。血清幽門螺桿菌-IgG特異性較低，不宜單獨(dú)作為幽門螺桿菌感染的診斷依據(jù)，可用于幽門螺桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查。

幽門螺桿菌；兒童；檢測(cè)方法

兒童為幽門螺桿菌的易感人群，幽門螺桿菌感染的流行病學(xué)情況與成人有所不同，感染后組織病理學(xué)改變、臨床表現(xiàn)、機(jī)體的免疫機(jī)制和細(xì)菌致病及治療等均與成人有所不同，對(duì)兒童幽門螺桿菌感染檢測(cè)方法的研究具有重要的意義。提高檢驗(yàn)人員和臨床醫(yī)師對(duì)兒童幽門螺桿菌感染試驗(yàn)診斷的充分正確認(rèn)識(shí)，從而探索出合理、經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)方法非常有必要。本文通過分析13C-尿素呼氣試驗(yàn)(13C-UBT)、血清幽門螺桿菌-IgG抗體、糞便幽門螺桿菌抗原和幽門螺桿菌培養(yǎng)試驗(yàn)方法檢測(cè)兒童幽門螺桿菌感染的適用性，研究尋求快速簡(jiǎn)便、敏感性及特異性高的兒童幽門螺桿菌感染檢測(cè)方法，為臨床兒童幽門螺桿菌感染提供可靠的檢測(cè)結(jié)果，促進(jìn)幽門螺桿菌感染的早期診斷及治療[1-3]。

1 資料與方法

1.1 對(duì)象 2014年5月至2015年12月在南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院消化科住院的最近1個(gè)月內(nèi)未使用過抗生素、質(zhì)子泵抑制劑、H2受體阻滯劑的92例懷疑幽門螺桿菌感染患兒，其中男48例，女44例，年齡3～14歲。92例均進(jìn)行幽門螺桿菌培養(yǎng)，其中41例(44.57%)培養(yǎng)出幽門螺桿菌。2015年5-12月在南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院健康體檢兒童30例作為陰性對(duì)照，其中男16例，女14例，年齡3～14歲，無血液系統(tǒng)疾病、腫瘤、結(jié)核、消化不良、營(yíng)養(yǎng)不良、消化系統(tǒng)疾病及自身免疫性疾病。將41例幽門螺桿菌感染患兒和30例健康體檢兒童同時(shí)行13C-UBT、血清幽門螺桿菌-IgG抗體檢測(cè)和糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 細(xì)菌培養(yǎng) 常規(guī)插入胃鏡，用活檢鉗在患兒胃竇部距幽門2～3 cm處及胃體中部前壁各取胃黏膜組織1塊，將其研磨后直接種于含選擇性抗生素添加劑和10%馬血的哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基，37℃微氧環(huán)境(含5%的O2，15%的CO2，85%的N2)，培養(yǎng)4～5 d后觀察分離效果，鏡下查找到幽門螺桿菌為幽門螺桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性，為幽門螺桿菌感染診斷金標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.213C-UBT 患者清晨空腹時(shí)在相應(yīng)的儀器上進(jìn)行13CO2檢測(cè)，試劑盒由北京勃然制藥有限公司提供，儀器為北京華亙安邦科技有限公司提供的HG-IRIS200型紅外光譜儀。

1.2.3 血清幽門螺桿菌-IgG抗體檢測(cè)(膠體金法) 間接固相免疫層析法，測(cè)試時(shí)血清中抗體從樣本孔向上遷移與固定在膜上的幽門螺桿菌抗原結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物，接著復(fù)合物與金標(biāo)記的抗人IgG結(jié)合而被檢出。質(zhì)控線含有蛋白A，與人IgG結(jié)合，做為質(zhì)控指標(biāo)。試劑由MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司提供，嚴(yán)格按照說明書要求操作。

1.2.4 幽門螺桿菌抗原檢測(cè) 患兒糞便2～4 g經(jīng)稀釋后采用雙抗體夾心法檢測(cè)幽門螺桿菌抗原,操作步驟嚴(yán)格按說明書進(jìn)行,試劑盒由北京協(xié)和藥業(yè)有限公司提供。

1.3 觀察指標(biāo) 比較幽門螺桿菌感染3種檢測(cè)方法的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值。計(jì)算公式：靈敏性=a/(a+b)；特異性=d/(c+d)；陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=a/(a+c)；陰性預(yù)測(cè)值= d /(b+d)。a為呈陽(yáng)性結(jié)果的幽門螺桿菌感染數(shù),b為呈陰性結(jié)果的幽門螺桿菌感染數(shù),c為呈陽(yáng)性結(jié)果的非幽門螺桿菌感染數(shù),d為呈陰性結(jié)果的非幽門螺桿菌感染數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兒童幽門螺桿菌感染檢測(cè)結(jié)果 41例幽門螺桿菌感染患兒的13C-UBT陽(yáng)性檢出率[92.68%(38/41)]最高，糞便幽門螺桿菌陽(yáng)性抗原檢出率[46.34%(19/41)]最低。見表1。

表1 41例幽門螺桿菌感染患兒和30例健康體檢兒童幽門螺桿菌感染3種檢測(cè)方法結(jié)果

檢測(cè)方法幽門螺桿菌感染患兒(n=41)健康體檢兒童(n=30)+-+-13C?UBT383228血清幽門螺桿菌?IgG檢測(cè)374624糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)1922129

2.2 靈敏度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值比較13C-UBT和血清幽門螺桿菌-IgG檢測(cè)敏感性較高，分別為92.68%和90.24%，兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；13C-UBT和血清幽門螺桿菌-IgG檢測(cè)敏感性均高于糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)(P<0.05) ；13C-UBT和糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)特異性和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均高于血清幽門螺桿菌-IgG檢測(cè)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而3C-UBT與糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)特異性和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)的陰性預(yù)測(cè)值明顯小于其他方法(P<0.05)。見表2。

表2 幽門螺桿菌感染3種檢測(cè)方法的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值比較(%)

檢測(cè)方法敏感性特異性陽(yáng)性預(yù)測(cè)值陰性預(yù)測(cè)值13C?UBT92 68?93 33#95 00#90 32?血清幽門螺桿菌?IgG檢測(cè)90 24?80 0086 0485 71?糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)46 3496 67#95 00#56 86與糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)比較，?P<0 05；與血清幽門螺桿菌?IgG檢測(cè)，#P<0 05

3 討 論

流行病學(xué)研究顯示在發(fā)達(dá)國(guó)家30%～50%的成年人有幽門螺桿菌感染,而發(fā)展中國(guó)家的幽門螺桿菌感染率則高達(dá)80%[1]。眾多研究發(fā)現(xiàn)幽門螺桿菌與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴樣組織(MALT)淋巴瘤等疾病的關(guān)系密切。1994年幽門螺桿菌被世界衛(wèi)生組織確定為第Ⅰ類致癌因子。我國(guó)屬于發(fā)展中國(guó)家，幽門螺桿菌感染率為40%～90%，平均為54.76%[1-3]。成人幽門螺桿菌感染往往始于兒童期，如不給予根除治療，可持續(xù)終身。因此，兒童幽門螺桿菌感染狀況的研究對(duì)控制和消除人群幽門螺桿菌感染有不可忽視的意義。國(guó)內(nèi)外幽門螺桿菌感染檢測(cè)方法很多，各有優(yōu)缺點(diǎn)。細(xì)菌培養(yǎng)是金標(biāo)準(zhǔn)，幽門螺桿菌為微需氧苛養(yǎng)菌，培養(yǎng)條件較為嚴(yán)格，一般醫(yī)院缺少相應(yīng)的技術(shù)和設(shè)備，污染菌及污染物會(huì)抑制幽門螺桿菌的生長(zhǎng)[4-5]，陽(yáng)性率較低(本文僅為44.57%)，同時(shí)取標(biāo)本檢查時(shí)具有創(chuàng)傷性、易受胃黏膜病變及取樣誤差的影響。13C是一種穩(wěn)定性較高的同位素，無放射性污染，13C-UBT檢測(cè)的敏感性和特異性均較高，更能反映幽門螺桿菌感染的變化狀況，具有準(zhǔn)確、快速、可反復(fù)檢測(cè)、無痛苦等優(yōu)點(diǎn)，價(jià)格低廉、不易受胃黏膜病變及取樣誤差的影響，在兒童幽門螺桿菌感染檢查及療效判斷評(píng)價(jià)中發(fā)揮重要作用[6-7]。

幽門螺桿菌-IgG抗體一般都不能自行消失，血清抗幽門螺桿菌-IgG在幽門螺桿菌根治后6～8個(gè)月內(nèi)仍可持續(xù)存在，故有較高的假陽(yáng)性率。敏感性與13C-UBT比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。幽門螺桿菌-IgG陽(yáng)性不能肯定患者是否有活動(dòng)性感染，陰性不能排除是否為初期感染[8-10]。所以幽門螺桿菌-IgG不能作為幽門螺桿菌感染的診斷指標(biāo)和療效監(jiān)測(cè)，但其具有高的敏感性可用于流行病學(xué)調(diào)查，還有不愿意或不能配合呼氣試驗(yàn)的兒童可以選擇此方法。糞便幽門螺桿菌抗原檢測(cè)敏感性不是很理想，可能和取材的因素有關(guān)，用于檢測(cè)的糞便僅為2～4 g，這可能是陽(yáng)性率偏低的因素之一。

總之13C-UBT檢測(cè)的敏感性及特異性均較高，更能反映幽門螺桿菌感染的變化狀況，更適合臨床，是臨床診斷幽門螺桿菌的首選方法。幽門螺桿菌-IgG敏感性、特異性雖然也較高，不宜單獨(dú)作為幽門螺桿菌感染的診斷依據(jù)，更不宜用于根除幽門螺桿菌藥物的療效監(jiān)測(cè)，可用于幽門螺桿菌感染兒童的流行病學(xué)調(diào)查[11-13]。

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(本文編輯：葉華珍)

1.210008 南京,南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院檢驗(yàn)科：2. 210008南京,南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科

沈 瀚，E-mail：shenhan10366@sina.com

張 燕，岳玉林，張之烽, 等.兒童幽門螺桿菌感染檢測(cè)方法臨床適用性分析[J].東南國(guó)防醫(yī)藥，2017,19(3): 302-304.

R725.7

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1672-271X(2017)03-0302-03

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2016-12-30;

2017-02-15)