中蜂蜂王人工授精效果分析

楊 娟 苗春輝 宋文菲 胡宗文 羅衛(wèi)庭 王艷輝 張學(xué)文

（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所，蒙自 661101）

中蜂蜂王人工授精效果分析

楊 娟 苗春輝 宋文菲 胡宗文 羅衛(wèi)庭 王艷輝 張學(xué)文

（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所，蒙自 661101）

中蜂蜂王人工授精是中蜂育種工作的重要部分。為了更好地進(jìn)行中蜂的育種工作，本文就中蜂蜂王人工授精工作的相關(guān)因素進(jìn)行了研究與探討。研究結(jié)果表明，蜂王的授精日齡、授精后蜂王的置放方法、放王的過程與時(shí)間及后期管理是中蜂蜂王人工授精成功的關(guān)鍵。

中蜂；人工授精；蜂王；授精效果

蜜蜂人工授精是近40年發(fā)展起來的一門新技術(shù)，為蜜蜂育種和蜜蜂遺傳研究提供了可靠、有效的實(shí)驗(yàn)手段。人工授精（instrumental insemination）也稱器械授精，即通過器械裝置把1只或多只雄蜂的精液注射入蜂王輸卵管內(nèi)使其受精[1]。

該項(xiàng)技術(shù)真正發(fā)展于1926~1947年，美國科學(xué)家R.L.沃森被世界公認(rèn)為現(xiàn)代蜜蜂人工授精技術(shù)的創(chuàng)始人。而中國開展這項(xiàng)技術(shù)的研究始于1959年，20世紀(jì)80年代后，開始在中蜂上進(jìn)行試驗(yàn)，目前已達(dá)到國際先進(jìn)水平，利用該技術(shù)取得了單雄授精、單雄多雌授精和自體授精的新突破，在育種及保種工作中占有重要的地位。

蜜蜂人工授精技術(shù)在西方蜜蜂育種工作應(yīng)用比較廣泛，在中蜂育種方面應(yīng)用較少，起步較晚。1983年廣州昆蟲所研究指出中蜂蜂王所需精液遠(yuǎn)高于西蜂，對(duì)成熟雄蜂需求量大，并且即使人工受精后蜂王也會(huì)再次婚飛。

1984年姜妧姣指出通過小核群的組織、管理可以提高蜂王授精及誘入成功率[2]。1985年福建農(nóng)學(xué)院研究表明參與授精的雄蜂約為10~14日齡，蜂王為5~7日齡最佳，授精量為6 μl[3]。

與西方蜜蜂蜂王人工授精相比，中蜂蜂王人工授精的難度較大，精液采集、授精后對(duì)蜂王的管理等都有一定難度，易導(dǎo)致授精失敗

本文就中蜂蜂王人工授精工作成功的主要因素進(jìn)行研究與探討，為更好地進(jìn)行中蜂的育種工作提供前期基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)蜂種為中華蜜蜂（Apis cerana cerana）；試驗(yàn)蜂群共4群，每群初始群勢為0.5~1.5脾成蜂。

1.2 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

2015年4月21日中蜂處女王出房，4月27日進(jìn)行人工授精，5月1日先后將蜂王介紹入無王群中；地點(diǎn)為云南省紅河州蒙自市草壩鎮(zhèn)云南省農(nóng)科院蠶蜂所內(nèi)的中蜂試驗(yàn)蜂場。

1.3 試驗(yàn)器材

20ml一次性注射器2支，100 μl采精器（改裝過的進(jìn)樣器）2支，500 ml 75%醫(yī)用酒精1瓶，長方形毛巾3條，自制捕雄蜂籠4~5個(gè)，滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，醫(yī)用酒精棉1包，滅菌鑷子1把，250 ml生理鹽水1~2瓶，醫(yī)用氧氣瓶1個(gè)（內(nèi)部充滿二氧化碳），針式王籠4個(gè)。

1.4 試驗(yàn)方法與步驟

首先，對(duì)試驗(yàn)操作間及人工授精儀進(jìn)行15 min的紫外滅菌消毒，滅菌的同時(shí)，捕捉巢脾邊緣及蜂箱邊緣的雄蜂（這些雄蜂接近性成熟，易于采集精液）；放置15 min后進(jìn)入操作間，用75%醫(yī)用酒精浸濕毛巾，將儀器和操作臺(tái)擦拭干凈，用75%醫(yī)用酒精清洗所有器材；將生理鹽水與抗生素以30%的比例配比混勻，用混勻液清洗采精器4~5遍，然后注入整管的混勻液，管內(nèi)不允許留有氣泡，將采精器擺放在儀器上。

開始采集精液，先將采精器吸入一小段空氣（即兩個(gè)空格，4 μl），取雄蜂，用大拇指、食指揉捏胸部進(jìn)行刺激，另一食指從后面向前推，取成熟雄蜂的精液，不能吸到粘液，精液與混勻液間留有一點(diǎn)空隙，不能混合在一起[4]，中蜂性成熟雄蜂精液顏色較西蜂的略深些，且量少，與粘液緊密粘合在一起，取時(shí)要格外小心。待精液采集完，用75%醫(yī)用酒精擦拭背腹鉤，將儀器擺正調(diào)節(jié)好，將蜂王放入麻醉室內(nèi)，用背腹鉤將其蜇針腔拉開，找到陰道口，用探針輔助著將裝有精液的注射管伸入進(jìn)去，注射5 μl左右，然后將蜂王翅膀剪掉三分之一并放回扣王籠里。

第二天，將第一天人工授精的蜂王進(jìn)行二次麻醉，每只持續(xù)40 s左右。

1.5 授精后的管理

第二次麻醉后，將蜂王放入準(zhǔn)備好的裝有隔王柵的無王群內(nèi)，用針式王籠將蜂王扣于巢蜜較集中的位置，待工蜂不圍王并接受后放出，定期對(duì)蜂群進(jìn)行查看，確保無新王臺(tái)出現(xiàn)及不發(fā)生圍王現(xiàn)象。

2 結(jié)果與分析

2.1 蜂王存活情況

試驗(yàn)的4只蜂王，在第二次麻醉后，在蜂場內(nèi)進(jìn)行扣王時(shí)，1只蘇醒并飛逃，不明原因死亡1只，剩下2只蜂王，存活率為50%。

2.2 蜂王產(chǎn)卵情況

表1 中蜂蜂王人工授精后產(chǎn)卵情況

2.3 蜂王存活時(shí)間

從2015年5月1日，將王放出，并產(chǎn)卵封蓋，到6月30日因群勢發(fā)展及其他因素，將王換掉。授精后蜂王存活了兩個(gè)月。

3 討論

動(dòng)物的性行為是對(duì)一系列刺激做出具有種屬特性的反應(yīng)，這種反應(yīng)是通過前完成行為、主行為、后完成行為而動(dòng)態(tài)表現(xiàn)出來的。這種順序出現(xiàn)的行為組分是自發(fā)的，是動(dòng)物生存所必需的[1]。

蜜蜂人工授精是一種非自然交配行為，蜂王自然也就沒有達(dá)到完成自然交配所需的承前啟后的一系列行為要求。這種蜂王在生理狀態(tài)方面會(huì)存在一些與自然交尾蜂王不同的反應(yīng)，因此，授精后的蜂王及蜂群管理就至關(guān)重要，尤其是中蜂。

本文在西蜂蜂王人工授精的基礎(chǔ)上進(jìn)行的中蜂蜂王人工授精實(shí)驗(yàn)，蜂王存活率及產(chǎn)卵情況與之前研究的西蜂相近[4]。研究結(jié)果顯示，適宜的蜂王授精日齡、授精后的蜂王關(guān)放方式及時(shí)間是中蜂蜂王人工授精成功的關(guān)鍵因素。

本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果為今后中蜂人工授精工作提供了一些參考經(jīng)驗(yàn)，中蜂蜂王人工授精的成功取決于以下四點(diǎn)：

一是蜂王授精的日齡。中蜂蜂王授精的日齡相對(duì)于西蜂要小一些，一般為5~6日齡為最佳[3]；

二是授精后蜂王的置放方法。用針式扣王籠將蜂王扣于蜜脾上，有利于扣王籠內(nèi)工蜂飼喂蜂王；

三是放王過程及時(shí)間，中蜂蜂王要在第二次麻醉后，馬上用針式王籠扣于蜜脾上，于3日后放出；

四是每隔3日查看1次蜂群，在外界蜜粉源不足時(shí)，還要進(jìn)行補(bǔ)助飼喂。同時(shí)，針對(duì)圍王情況要反復(fù)誘王，直至不圍上?？傊?，抓住以上幾點(diǎn)，基本可以保證中蜂蜂王人工授精的成功，保證中蜂育種工作順利開展。

非自然交配的蜂王仍有交尾沖動(dòng)，如果管理不善，既會(huì)影響授精效果，又會(huì)出現(xiàn)授精王丟失或過早被替代的現(xiàn)象，必須十分重視授精后至開始產(chǎn)卵這段時(shí)間的管理。

有兩點(diǎn)細(xì)節(jié)還需研究與探討，即蜂王剪翅與否、剪翅的長短對(duì)中蜂蜂王人工授精工作的影響程度。本文中飛逃的蜂王就是由于翅膀留的稍長而跑掉，同時(shí)，在相對(duì)密閉的空間進(jìn)行放王操作是必要的。

[1]陳國宏,王麗華.蜜蜂遺傳育種學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社, 2010.

[2]姜妧姣.人工授精蜂王的飼養(yǎng)管理技術(shù)[J].中國蜂業(yè)，1984,(2):14.

[3]福建農(nóng)學(xué)院養(yǎng)蜂系研究室.中華蜜蜂人工授精技術(shù)研究的進(jìn)展[J].中國蜂業(yè),1985,（1）:8～9.

[4]宋文菲,楊娟,余玉生,等.蜂螨防治對(duì)西方蜜蜂人工授精蜂群的影響[J].中國蜂業(yè),2016,（1）:36～37.

國家蜂產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)資助CARS-45-SYZ17)；云南省科技廳“云南蜂王漿高產(chǎn)蜂種應(yīng)用示范項(xiàng)目”（2015BB010）

楊 娟(1989-)，女，研究實(shí)習(xí)員，主要從事蜜蜂生物學(xué)研究。

張學(xué)文(1965-)，男，副研究員，主要從事蜜蜂資源、飼養(yǎng)及授粉研究。