魔芋多糖抗氧化性研究

魏杰

【摘 要】本試驗(yàn)在一定條件下對(duì)魔芋多糖的抗氧化性進(jìn)行研究，采用稀堿提取法提取魔芋多糖。采用DPPH法對(duì)其抗氧化能力進(jìn)行檢測(cè)。研究結(jié)果顯示：魔芋具有抗氧化活性，對(duì)DPPH、羥基（·OH）自由基均有較高的清除作用。

【關(guān)鍵詞】魔芋；多糖；抗氧化

一、前言

魔芋是天南星科魔芋屬多年生草本植物的地下塊莖。魔芋在工業(yè)、醫(yī)藥、食品等方面之所以有廣泛的用途。魔芋含有多種氨基酸、多種礦物質(zhì)微量元素和豐富的食物纖維，對(duì)防治糖尿病、高血壓有特效；魔芋低熱、低脂、低糖，對(duì)預(yù)防和治療結(jié)腸癌、乳腺癌、肥胖癥的人群可以說是一種上等的既飽口福、又治病健體的食品，還可以防治多種腸胃消化系統(tǒng)的多種常見慢性疾病，是有益的堿性食品，對(duì)食用動(dòng)物性酸性食品過多的人，搭配吃魔芋，可以達(dá)到食品酸堿平衡。此外，魔芋還具有水平降血糖、降血脂、降壓、散毒、養(yǎng)顏、通脈、減肥、通便、開胃等多功能由此可見，魔芋是一種“天賜良藥”，食用起來有百利而無(wú)一害?？傊?，由于魔芋精粉具有多種營(yíng)養(yǎng)、保健功能，逐漸引起了國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥、保健品、食品等各界及關(guān)心自身保健的人們的關(guān)注。我國(guó)的魔芋精粉，從十幾年前開始向日本出口，繼而發(fā)展到向日本、東南亞一帶及歐美國(guó)家吃口。出口量逐年加大，國(guó)際市場(chǎng)價(jià)格也不斷上揚(yáng)。

研究表明多糖具有多種生物功能如：增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗腫瘤、抗病毒、降血糖等，因此對(duì)多糖的研究愈來愈引起國(guó)內(nèi)外生物學(xué)家、化學(xué)家和藥理學(xué)家的興趣，有關(guān)專家預(yù)言“21世紀(jì)將是多糖的時(shí)代”。多糖具有多種生物活性，某些多糖不但具有抗癌、抗病毒、抗衰老等作用，還是理想的免疫增強(qiáng)劑，因此，關(guān)于魔芋多糖的研究具有十分重要的意義。

二、試驗(yàn)方法

（一）多糖提取方法

經(jīng)過資料查詢與預(yù)實(shí)驗(yàn)，提取結(jié)果以稀堿提取魔芋多糖結(jié)果最優(yōu)。故選用稀堿提取法提取魔芋多糖。

新鮮魔芋經(jīng)切片、烘干、粉碎（過40目篩），備用。

1g魔芋粉→加入100mL 0.5mol/L氫氧化鈉溶液→80℃熱水（料液比1：100）浸提→5000r/min4離心15min，合并上清液→濃縮5倍→Sevage法去蛋白質(zhì)3次→脫蛋白堿提濃縮液→加入3倍體積濃度95%的乙醇→冷凍干燥→抽濾→收集醇沉淀物→依次用75%乙醇、無(wú)水乙醇、丙酮濾洗→魔芋粗多糖→真空冷凍干燥→稱重→測(cè)定多糖提取率。

（二）苯酚硫酸法測(cè)定多糖的方法

參照苯酚-硫酸法，測(cè)定多糖。

0.1%葡萄糖溶液：準(zhǔn)確稱取干燥葡萄糖0.1000g，定容至100mL，再分配成10、20、40、60、80、100mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2g/L的蒽酮試劑：溶解蒽酮0.2g于100mL 95%硫酸中，置于棕色瓶中冷暗處保存。

分別吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL葡萄糖溶液并用蒸餾水補(bǔ)至2.0mL，然后加入1.0mL 6%苯酚及5.0mL濃硫酸，立即搖勻，室溫放置20min后再于490nm測(cè)光密度，以2.0mL水按同樣顯色操作空白對(duì)照，橫坐標(biāo)為多糖微克數(shù)，縱坐標(biāo)為光密度值，得標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，葡萄糖溶液在0.4mg/mL-1.2mg/mL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。

吸取已定容的水解樣0.2mL置于10mL比色管中，加6%苯酚試劑1.0mL及濃硫酸5.0mL，搖勻后在室溫下靜置20min，每個(gè)樣品做三個(gè)平行樣，于490nm處用空白調(diào)零測(cè)吸光度，然后代入標(biāo)準(zhǔn)曲線算出其總糖含量。

（三）抗氧化活性的檢測(cè)方法

1.DPPH自由基清除能力測(cè)定

在10mL比色管中依次加入4mLDPPH溶液和4mL樣品溶液，再加入無(wú)水乙醇至刻度，混勻后在517nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光值（A），吸光值記為Ai，再在室溫避光保存30min后測(cè)吸光值，記為Aj，對(duì)照試驗(yàn)為只加DPPH的乙醇溶液，吸光值記為Ac。（用無(wú)水乙醇調(diào)百分百）

按公式計(jì)算自由基清除率（K）：K（%）=[1-（Ai-Aj）/Ac]×100%

其中Ai為樣液+DPPH的吸光值，Aj為樣液+蒸餾水的吸光值，Ac為蒸餾水+DPPH的吸光值。

2.OH清除能力的測(cè)定

在比色管中依次先加入2mL 3mmol/LFeSO4，2mL 3mmol/L乙醇-水楊酸，接著加入適量去離子水（蒸餾水代替），然后加入2mL3mmol/LH2O2，最后加入樣液，搖勻，37℃水浴加熱15min，取上清液，以維生素C為陽(yáng)性對(duì)照于510nm測(cè)其吸光度。A0測(cè)定時(shí)，參比溶液為不加雙氧水的體系。Ax和Ax0測(cè)定時(shí)，參比溶液為去離子水。

按公式計(jì)算自由基清除率（K）：K （%）=[1-（AX-AX0）/A0]×100%

其中A0 為空白對(duì)照的吸光值，AX為加樣品的吸光值，AX0為不加顯色劑H2O2，并測(cè)其吸光度值。

三、試驗(yàn)結(jié)果

（一）抗氧化能力的檢測(cè)結(jié)果

通過對(duì)魔芋多糖提取物的抗氧化能力進(jìn)行測(cè)定，試驗(yàn)結(jié)果如表1所示：

表1結(jié)果顯示，兩種不同的方法全部顯示魔芋多糖物質(zhì)具有很強(qiáng)的抗氧化能力。其中羥基（·OH）自由基清能力和DPPH自由基清除能力都很強(qiáng)。

四、總結(jié)

本試驗(yàn)以魔芋為原料，通過稀堿法提取魔芋多糖。試驗(yàn)中先對(duì)魔芋多糖提取物組分進(jìn)行抗氧化活性的定性測(cè)定，研究結(jié)果顯示：

1.魔芋多糖具有一定的清除自由基能力，具有抗氧化性；

2.總抗氧化能力最強(qiáng)的提取條件下獲得的魔芋多糖提取物，對(duì)DPPH自由基清除率為71.73%，·OH自由基清除率為85.46%，抗氧化效果顯著。

我國(guó)魔芋資源豐富，長(zhǎng)期以來我國(guó)民間就有栽培和食用魔芋的歷史。本試驗(yàn)證明魔芋具有良好的抗氧化能力，將魔芋多糖添加至食品中，不僅可以增加食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，還可起到一定的抗氧化的效果。在未來食品和化工等領(lǐng)域具有有廣泛的應(yīng)用前景和價(jià)值。

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