積雪草的開發(fā)研究

王翕+李早慧+孫旭

摘要：對積雪草的提取、化學成分、生理活性、加工生產(chǎn)等方面進一步的開發(fā)研究。本文依據(jù)對近年來的相關(guān)文獻進行總結(jié)和分析，綜合調(diào)查積雪草的產(chǎn)地、主要化學成分、藥理作用與提取方法等內(nèi)容，發(fā)現(xiàn)積雪草對皮膚組織有很好的修復作用，并能消腫解毒、防治皮膚水腫，其開發(fā)利用空間較大。

關(guān)鍵詞：積雪草；積雪草苷；生理功能；提取方法

中圖分類號： R282.71 文獻標識碼： A DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.13.043

積雪草，學名Centella asiatica （L.） Urban，別稱：銅錢草、馬蹄草、錢齒草、崩大碗等，最早收載于《神農(nóng)本草經(jīng)》?！侗静菥V目》記載，其全草入藥，性甘、辛、涼，主要功效用于止痛、活血化瘀、促進皮膚生長、暑瀉、痢疾，有醒腦提神等。

1積雪草的產(chǎn)地

世界上存在20種積雪草類植物，在南、北半球的熱帶地區(qū)存在較多，南非、印度、馬來西藥、澳大利亞等國家為主要產(chǎn)地。積雪草在我國僅存1個品種，華南、華東、中南及西南地區(qū)為主要的分布地區(qū)，主要產(chǎn)地為江蘇、江西、福建、四川、陜西、云南等省區(qū)，其主要生長于海拔2000米以下的山路旁、田邊和草地等處，大多生于陰濕的草地或水溝旁。

2積雪草的化學成分

積雪草所含化學成分中三萜類、黃酮類、多炔烯烴類，以及揮發(fā)油類成分占絕大部分。

2.1三萜皂苷類

積雪草中含量比較豐富的化學成分為為三萜皂苷類。這類屬于五環(huán)三萜皂苷類，包括羥基積雪草苷、異參枯尼苷、積雪草苷和波熱米苷等。除此類外，還包括馬達積雪草酸、積雪草酸、波熱米酸和羥基積雪草酸等一些處于游離狀態(tài)的三萜酸。近幾年，隨著對積雪草的研究逐步加深，還發(fā)現(xiàn)了其他三萜類的成分，如：28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-O-β-D-吡喃葡糖基-（1→6）。-β-D-吡喃葡糖酯、2α，3β，6β-三羥基烏蘇-12-烯-28-酸等[1]。

2.2多炔烯烴類

在對積雪草的進一步研究中，還發(fā)現(xiàn)了14種多炔烯烴類組成的化合物，通過儀器分析與結(jié)構(gòu)的鑒定，主要分為C19H28O3，C16H21O2，C17H21O3，C19H27O和C15H20O2。

2.3揮發(fā)油類

目前，已檢測鑒定的揮發(fā)油種類超過45種，主要有石竹烯、長葉烯、法尼烯、欖香烯等。其中，含量相對比較高的成分為石以竹烯和長葉烯[2]。

3積雪草苷的提取方法

積雪草各種提取物中都有一定的藥理活性，積雪草苷為主要作用的代表成分，經(jīng)過現(xiàn)代藥理學研究，積雪草苷對皮膚組織有修復作用，能治療皮膚潰腸、促進傷口愈合、抗焦慮免疫調(diào)節(jié)等。常見的積雪草苷的提取方法主要有以下幾種。

3.1醇提法提取

李濤等[3]采用乙醇回流法及正交試驗設計獲得積雪草苷的最優(yōu)提取工藝，最終確定提取條件為積雪草粉碎粒度140目，乙醇濃度70%，料液比1∶10（克/毫升），提取時間為6小時。提取條件穩(wěn)定，有實踐意義。但所得的積雪草苷提取物需要進一步分離純化。

3.2超聲法提取

侯文硯等通過超聲提取法與傳統(tǒng)的提取方法比較，最終確定積雪草粉碎至80～100目，乙醇濃度60%，料液比1∶12，超聲時間1小時，浸泡時間10小時，在經(jīng)過重結(jié)晶純化，所得的積雪草苷純化至97.94%[4]。

3.3酶提取法

由于傳統(tǒng)提取法，水、酸、堿、有機溶劑等提取方法需要使用大量溶劑，時間長，產(chǎn)率有限。韓偉等[5]采用酶提取法及正交試驗，對酶的種類，用量、料液比、pH值等因素進行考察，最終確定提供工藝為纖維素酶：底物（1∶50）、料液比1∶25、pH值為6.0，酶解溫度40℃，酶解時間1.5小時。此法提取率高，提取溫度低，重復性好、工藝穩(wěn)定。

4積雪草的藥理作用

4.1 促進創(chuàng)傷愈合

Jeong-Hyun Lee 等通過實驗研究表明，積雪草苷主要是通過干預人皮膚成纖維細胞積來改變細胞的粘附和遷徙，使人皮膚成纖維細胞產(chǎn)生增殖，從而促進傷口的愈合[6]。LUL等通過在體外的人皮膚成纖維細胞上試驗和 cDNA微陣列技術(shù)檢測基因表達譜，實驗結(jié)果表明負責細胞增殖及細胞外基質(zhì)合成的基因，在不同的時間點上調(diào)、編碼I型和III型的膠原蛋白mDNA 水平和蛋白水平也明顯增加[7]。

4.2 抑制皮膚疤痕的形成

研究發(fā)現(xiàn)，積雪草苷濃度在0.1～1.0毫克/毫升時能使瘢痕成纖維細胞的增殖受到抑制，也會抑制人皮膚成纖維細胞的增殖。其主要原理是積雪草苷抑制成纖維細胞來減少肉芽組織與膠原等細胞外基質(zhì)的合成，從而減少瘢痕形成[8]。王德堅[9]等通過對21例痤瘡瘢痕的病人采取積雪草苷的治療，觀察癥狀及體征變化，發(fā)現(xiàn)積雪草苷有較好的抑制瘢痕增生和軟化瘢痕的作用。

4.3 抗腫瘤的作用

在對積雪草現(xiàn)代藥理學研究中發(fā)現(xiàn)，積雪草中的藥效成分積雪草苷可以誘導腫瘤細胞的凋亡，阻斷腫瘤細胞DNA的合成以及減少腫瘤細胞的增殖[9]。王錦菊等[10]曾對積雪草苷的抗腫瘤作用進行初步的試驗，主要是觀察積雪草苷對體外培養(yǎng)的L929細胞和CNE細胞的增殖的影響，以及移植S80細胞和荷瘤小鼠生存時間，其結(jié)果表明，積雪草苷能夠抑制體外培養(yǎng)的L929細胞和CNE細胞增殖，對移植S80細胞也存在抑制作用，并能夠延長荷瘤小鼠的生存時間，說明積雪草苷具有抗腫瘤的作用。

4.4 抗纖維化的作用

王策等通過干預大鼠心梗后的模型，發(fā)現(xiàn)積雪草苷可改善心梗大鼠非梗死區(qū)心肌組織膠原的表達，使細胞外基質(zhì)聚積減少，從而使抗心肌間質(zhì)纖維化發(fā)揮作用。究其原因是通過調(diào)節(jié)細胞外基質(zhì)轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1的表達來實現(xiàn)[11]。

4.5 抗炎及肺臟保護

Jing Yuan Wan等將脂多糖注射到大鼠體內(nèi)制作發(fā)熱及炎癥模型，并給予積雪草苷干預，發(fā)現(xiàn)其具有退熱和抗感染的作用，作用機制為抑制腫瘤壞死因子-α、白介素-6 的水平，環(huán)氧合酶-2及前列腺素E2炎癥前因子的表達，經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)其抑制機制為調(diào)節(jié)血紅素氧合酶-1的表達。其主要試驗流程為血紅素氧合酶-1的抑制劑ZnPPIX干預，發(fā)現(xiàn)該阻斷劑能阻斷積雪草苷的退熱作用，部分改變積雪草苷抑制腫瘤壞死因子-α、白介素-6水平[12]。

5 積雪草的利用價值

5.1地被植物

積雪草可以用來當做茶園雜草，是一種有益的、能夠覆蓋茶園和土壤的植物，可以達到防治土壤侵蝕的目的，是一種很好的地被植物。

5.2食用性

積雪草其口感較好，可以直接生食，味道與薄荷相似。在印度、巴基斯坦等地，也常將積雪草作為蔬菜食用。我國南方也常將其作為茶飲。

5.3草坪植物

積雪草也可當做觀賞植物來使用，主要是因為其葉優(yōu)美、草層平整，可用于草坪建植中，具有較高的美化和凈化環(huán)境的作用。

6結(jié)語

積雪草含有多種類的化學成分，并且具有多種多樣的藥理活性，因此是一味很有臨床應用價值的中藥，在對多種疾病及病理生理過程的臨床作用表現(xiàn)良好。且中藥本身具有創(chuàng)傷小，對患者毒副作用小的特點，能夠有效改善治療的效果，減輕患者的痛苦。目前，在我國對積雪草的研究和應用還應該增加深度和廣度，對其進行開發(fā)利用還有待提高，為積雪草產(chǎn)品的開發(fā)利用提供相應的理論基礎。

參考文獻

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[3]李濤，朱慧娟. 正交試驗優(yōu)化乙醇回流提取積雪草苷的工藝研究[J]. 氨基酸和生物資源，2016，（02）：71-74.

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[5]韓偉，陳惠丹，樊亮，王春麗. 酶法提取積雪草苷[J]. 南京工業(yè)大學學報（自然科學版），2009，（03）：18-22.

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[9]王德堅，車斌，黃超芬.積雪甙治療痤瘡后疤痕的臨床觀察[J]. 海峽藥學，2003，（06）：62-63.

[10]王錦菊，王瑞國，王寶奎，余祥彬. 積雪草甙抗腫瘤作用的初步實驗研究[J]. 福建中醫(yī)藥，2001，（04）：39-40.

[11]黃云虹，張勝華，甄瑞賢，等.積雪草甙誘導腫瘤細胞凋亡及增強長春新堿的抗腫瘤作用[J].癌癥，2004， 23（02）：1599.

[12]王策，積雪草苷對心梗大鼠心肌纖維化影響的實驗研究[J].中國生化藥物雜志，2014，34（08）：19.

作者簡介：王翕，在讀本科生，研究方向：新藥的研究與開發(fā)。

通訊作者：李早慧，碩士，講師，研究方向：中藥現(xiàn)代給藥系統(tǒng)和中藥新藥的研究。