細(xì)胞室的布局、管理與日常維護(hù)探析

李晶晶++劉磊++潘艷++鄧林紅

摘要：指出了細(xì)胞室是生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域科研產(chǎn)出的重要平臺，如何建立、管理和維護(hù)好細(xì)胞室一直是研究的重要問題。從常州大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程與健康科學(xué)研究院細(xì)胞培養(yǎng)室的建設(shè)、運(yùn)行的實(shí)際經(jīng)驗(yàn)出發(fā)，探討了細(xì)胞室的建設(shè)布局、人才培養(yǎng)及管理制度、日常監(jiān)管及維護(hù)等問題。以促進(jìn)相關(guān)領(lǐng)域科研水平的提升及實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展。

關(guān)鍵詞：細(xì)胞室；管理；維護(hù)

中圖分類號：R318

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：16749944（2017）10023202

1 引言

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是指將活體的一小部分組織用機(jī)械或消化的方法分散成單個細(xì)胞懸液，然后進(jìn)行培養(yǎng)、繁殖的技術(shù)[1]。現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展幾乎都離不開細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，尤其是在生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域的發(fā)展，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)更具有特殊的作用。許多重要的生物產(chǎn)品如疫苗、單克隆抗體、生長因子等都是通過細(xì)胞得來的，因此細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的價值不言而喻。如今，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已然成為生命科學(xué)領(lǐng)域必備的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一[2，3]。

細(xì)胞室是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞相關(guān)研究活動的重要場所，由于細(xì)胞培養(yǎng)要求無菌操作，因此細(xì)胞室的建設(shè)布局、維護(hù)管理也就有別于一般的實(shí)驗(yàn)室。筆者根據(jù)常州大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程與健康科學(xué)研究院（醫(yī)工院）中細(xì)胞室的建設(shè)經(jīng)驗(yàn)，探討細(xì)胞室的布局、管理與維護(hù)的方法。

2 細(xì)胞室的布局

細(xì)胞培養(yǎng)的區(qū)域劃分一般涉及以下幾方面：無菌操作，細(xì)胞培養(yǎng)用液配制，細(xì)胞孵育，儲存，清洗、包裝和滅菌。其中無菌操作，細(xì)胞培養(yǎng)用液配制、細(xì)胞孵育和儲存區(qū)域?qū)Νh(huán)境的要求嚴(yán)格，清洗、包裝和滅菌區(qū)只需正常實(shí)驗(yàn)室環(huán)境即可。因此，細(xì)胞培養(yǎng)區(qū)域的布局可以按照操作類型和潔凈要求進(jìn)行劃分。醫(yī)工院實(shí)驗(yàn)室將細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)區(qū)域做如下規(guī)劃：清洗、包裝和滅菌工作在準(zhǔn)備間中進(jìn)行；細(xì)胞培養(yǎng)用液配制，儲存，無菌操作及細(xì)胞孵育區(qū)在細(xì)胞室進(jìn)行；準(zhǔn)備間與細(xì)胞室相鄰，以便進(jìn)行物品傳遞。

準(zhǔn)備間無特殊要求，劃分清洗、包裝和滅菌三個區(qū)域即可；細(xì)胞室要求較高，一般都裝有高效空氣過濾裝置及專業(yè)恒溫恒濕空調(diào)系統(tǒng)以保證室內(nèi)環(huán)境清潔，細(xì)胞室頂部裝有紫外燈以便進(jìn)行日常無菌維護(hù)，墻面也多為易于消毒滅菌的彩鋼板[4]。

醫(yī)工院細(xì)胞室的區(qū)域布局如下：①日常服裝存放區(qū)，用于存放外套、鞋、包等日常物品；②潔凈室鞋服存放區(qū)，用于更換細(xì)胞室專用潔凈服、潔凈鞋及佩戴口罩等，該區(qū)域頂部裝有紫外燈，以便對日常維護(hù)潔凈物品；③風(fēng)淋區(qū)，對潔凈服外進(jìn)行再次清潔，風(fēng)淋區(qū)地面設(shè)有粘塵地墊，以保證除塵效果；④潔凈走廊，潔凈走廊內(nèi)設(shè)有傳遞窗，以便遞送滅菌物品等，另外潔凈走廊可通向培養(yǎng)室；⑤培養(yǎng)室，細(xì)胞培養(yǎng)操作的區(qū)域，室內(nèi)設(shè)有廢液缸和消毒桶等。

3 細(xì)胞室的管理

細(xì)胞室建成以后，應(yīng)從人才培養(yǎng)、制度建設(shè)、日常監(jiān)管三方面加強(qiáng)細(xì)胞室的管理。

3.1 人才培養(yǎng)

細(xì)胞是一種特殊的生命，很多因素都能導(dǎo)致其發(fā)生微妙的變化，其中人員復(fù)雜同時缺乏系統(tǒng)技術(shù)培訓(xùn)是引起細(xì)胞室經(jīng)常性污染的主要原因之一，一旦細(xì)胞室發(fā)生污染，那么就會造成科研工作的嚴(yán)重滯后，因此，要注重細(xì)胞室實(shí)驗(yàn)人員及學(xué)生的技能培訓(xùn)。

醫(yī)工院通過引進(jìn)、培訓(xùn)等手段建設(shè)一支具有專業(yè)素養(yǎng)的細(xì)胞室技術(shù)人員隊(duì)伍，然后由細(xì)胞室技術(shù)人員對進(jìn)入細(xì)胞室的人員進(jìn)行統(tǒng)一培訓(xùn)和考核，考核合格后方能進(jìn)入細(xì)胞室工作，盡可能的減少人為因素造成的細(xì)胞培養(yǎng)室污染，平時醫(yī)工院內(nèi)部細(xì)胞室技術(shù)人員舉辦討論交流活動，也參加相關(guān)講座、培訓(xùn)班及外出參觀學(xué)習(xí)等活動，不斷提高細(xì)胞室技術(shù)人員的技術(shù)水平。

3.2 制度建設(shè)

3.2.1 細(xì)胞室日常管理制度

醫(yī)工院細(xì)胞室的日常管理制度涵蓋了安全、衛(wèi)生、公共事務(wù)等幾方面內(nèi)容。安全方面包括用電安全、用水安全、用火安全及用氣安全；衛(wèi)生方面包括個人衛(wèi)生、實(shí)驗(yàn)室值日安排、消毒滅菌安排等內(nèi)容；公共事務(wù)方面包括洗滌、包裝、滅菌、配置消毒液、配置或分裝細(xì)胞用液等內(nèi)容。

3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)室人員準(zhǔn)入制度

細(xì)胞培養(yǎng)室采取刷卡進(jìn)入制度，非細(xì)胞培養(yǎng)室管理技術(shù)人員在進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)室前必須進(jìn)行一段時間嚴(yán)格的安全與技術(shù)培訓(xùn)，經(jīng)考核合格后方能開放臨時卡進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)室開展工作，開展工作后有三個月實(shí)習(xí)期，實(shí)習(xí)期內(nèi)無安全事故、無污染事故、認(rèn)真履行職責(zé)、服從安排者可開卡長期出入細(xì)胞培養(yǎng)室，若實(shí)習(xí)期未達(dá)標(biāo)則不允許進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)室或重新進(jìn)行培訓(xùn)。

3.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)備管理制度

細(xì)胞培養(yǎng)室內(nèi)的設(shè)備一般包括超凈臺、細(xì)胞培養(yǎng)箱、離心機(jī)、液氮罐、倒置顯微鏡、冰箱、鋼瓶等設(shè)備，這些設(shè)備應(yīng)具備操作流程及注意事項(xiàng)，由專人維護(hù)，醫(yī)工院細(xì)胞室設(shè)備采用預(yù)約制度保證日常工作有序開展。

3.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)室意外事故應(yīng)急預(yù)案

任何實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)該準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)室意外事故應(yīng)急預(yù)案，細(xì)胞室也不例外，但由于細(xì)胞室本身結(jié)構(gòu)的特殊性導(dǎo)致其事故應(yīng)急預(yù)案更具有針對性。

細(xì)胞培養(yǎng)室容易發(fā)生二氧化碳泄露，酒精燈起火或爆炸，培養(yǎng)箱長期不斷電運(yùn)轉(zhuǎn)造成的起火等風(fēng)險，因此，要建立專門的應(yīng)急預(yù)案應(yīng)對消防安全事故的發(fā)生。

對于細(xì)胞培養(yǎng)室來說，生物安全也是必須引起重視的。對于細(xì)胞的原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)來說，經(jīng)常接觸到動物組織、尸體等生物廢棄物，如操作處理不當(dāng)，易引起生物安全事故。這不僅要求我們實(shí)驗(yàn)過程中嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，做好實(shí)驗(yàn)防護(hù)工作，還要根據(jù)實(shí)際情況建立生物安全應(yīng)急預(yù)案，以便應(yīng)對突發(fā)生物安全事故。

另外，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中容易出現(xiàn)細(xì)胞污染的情況，細(xì)胞污染大致可以分為細(xì)菌污染、真菌污染、根據(jù)細(xì)胞污染的類型建立細(xì)胞培養(yǎng)室污染應(yīng)急預(yù)案有利于降低細(xì)胞培養(yǎng)室損失。

3.3 日常監(jiān)管

細(xì)胞培養(yǎng)室的日常監(jiān)管主要包括學(xué)生的操作技術(shù)，細(xì)胞培養(yǎng)試劑耗材，細(xì)胞培養(yǎng)室環(huán)境監(jiān)控等內(nèi)容。醫(yī)工院檢查學(xué)生的操作技術(shù)是通過隨機(jī)抽查某個學(xué)生的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的方式來進(jìn)行，以便及時糾正學(xué)生在細(xì)胞培養(yǎng)過程中不正確操作；細(xì)胞培養(yǎng)用的試劑耗材按價值分為不同的管理類型，由不同的人員負(fù)責(zé)，保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行及避免浪費(fèi)；細(xì)胞培養(yǎng)室內(nèi)的環(huán)境監(jiān)控主要是檢查細(xì)胞培養(yǎng)室內(nèi)空氣的潔凈程度及氧氣濃度，因此細(xì)胞培養(yǎng)室內(nèi)要定期采用沉降法測定菌落數(shù)量及配備氧濃度檢測器。

4 細(xì)胞培養(yǎng)室的維護(hù)

細(xì)胞培養(yǎng)室的維護(hù)分為細(xì)胞培養(yǎng)室環(huán)境維護(hù)和細(xì)胞的維護(hù)。細(xì)胞培養(yǎng)室的環(huán)境維護(hù)分為“硬件”維護(hù)和“軟件”維護(hù)兩類，“硬件”維護(hù)主要是指定期檢查、更換細(xì)胞培養(yǎng)室高效過濾系統(tǒng)、超凈臺過濾器、紫外燈管等設(shè)備配件；“軟件”維護(hù)主要是指細(xì)胞培養(yǎng)室的值日安排、大掃除安排等。細(xì)胞的維護(hù)就是要規(guī)范細(xì)胞的儲存，做好細(xì)胞的名稱、數(shù)量、位置、儲存日期、儲存者等相關(guān)信息的記錄存檔工作，長期儲存的細(xì)胞應(yīng)取出復(fù)蘇，以便檢查細(xì)胞狀態(tài)，定期檢查液氮罐、超低溫冰箱等細(xì)胞存儲設(shè)備，確保設(shè)備能夠正常運(yùn)行。

5 結(jié)語

作為生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域科研成果產(chǎn)出的重要場所，細(xì)胞培養(yǎng)室的重要性不言而喻，建立科學(xué)合理的實(shí)驗(yàn)室布局，提升細(xì)胞培養(yǎng)室管理、技術(shù)人員的技術(shù)水平，建立完善的細(xì)胞培養(yǎng)室管理制度，做好細(xì)胞室的日常維護(hù)，可以促進(jìn)相關(guān)領(lǐng)域科研水平的提升及實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

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