GC-MS法分析紅皮云杉針葉揮發(fā)油成分①

趙宏博，沈 宇，方洪壯

(1.佳木斯大學康復醫(yī)學院，黑龍江 佳木斯 154003；2佳木斯大學藥學院，黑龍江 佳木斯 154007)

GC-MS法分析紅皮云杉針葉揮發(fā)油成分①

趙宏博1，沈 宇2，方洪壯2

(1.佳木斯大學康復醫(yī)學院，黑龍江 佳木斯 154003；2佳木斯大學藥學院，黑龍江 佳木斯 154007)

目的：初步分析出紅皮云杉針葉揮發(fā)油中的化學成分。方法：以水蒸氣蒸餾法提取紅皮云杉針葉揮發(fā)油，用GC-MS技術，采用自動解卷積定性系統(tǒng)(AutomatedMassSpectralDeconvolutionandIndentificationSystem,AMDIS)結合色譜保留指數(shù)進行定性分析。結果：在紅皮云杉針葉揮發(fā)油中共得到74個色譜峰，最終確定了58種化學成分，峰面積總和占總含量的92.58%，其中含量最高的物質(zhì)為乙酸龍腦酯。結論：用GC-MS方法，結合AMDIS和色譜保留指數(shù)能夠高效快捷的分析重疊峰體系，使定性更加準確。

紅皮云杉；GC-MS；水蒸氣蒸餾法；AMDIS；色譜保留指數(shù)

紅皮云杉(PiceakoraiensisNakai)為松科云杉屬植物，又名虎尾松，高麗云杉，其耐蔭，喜冷濕環(huán)境，抗病力強，主要分布在我國小興安嶺、長白山林區(qū)一帶?，F(xiàn)已被證實松針揮發(fā)油具有重要的藥用價值，能夠發(fā)揮鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌、鎮(zhèn)咳、化痰、降血脂和降血壓等作用，同時也是香料、化妝品、食品及化學工業(yè)上的重要原料[1～6]。國內(nèi)有學者研究發(fā)現(xiàn)，紅皮云杉揮發(fā)油中的化學成分在數(shù)量和含量上與其他幾種松科植物存在一定差異[7]，尚未有人將自動質(zhì)譜解卷積定性系統(tǒng)(AMDIS)結合色譜保留指數(shù)對其揮發(fā)油樣本總離子流圖的重疊色譜峰進行解析，更加準確的對其化學成分進行定性分析。本研究首次采用GC-MS技術對黑龍江省蘿北產(chǎn)紅皮云杉針葉揮發(fā)油樣品進行測定，對比質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫，應用自動質(zhì)譜解卷積系統(tǒng)并結合色譜保留指數(shù)，對紅皮云杉針葉揮發(fā)油成分進行解析，為紅皮云杉的開發(fā)和利用提供科學的理論依據(jù)。

1 儀器和材料

HP7890A-5975型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國安捷倫科技有限公司)；標準玻璃揮發(fā)油提取器(上海滿賢經(jīng)貿(mào)有限公司)。正己烷(天津市大茂化學試劑廠，分析純)；無水硫酸鈉(上海綠源精細化工廠，色譜純)；正構烷烴混合對照品C8～C40(美國AccuStandard公司，編號：DRH-008S-R2)。紅皮云杉新鮮針葉于2015年8月采于黑龍江省蘿北市，經(jīng)形態(tài)和顯微鑒定為松科、云杉屬植物紅皮云杉(PiceakoraiensisNakai)的針葉。

2 實驗方法

2.1 供試品溶液制備

取陰干粉碎后的紅皮云杉針葉約50g，置1000mL圓底燒瓶中，加入10倍量的蒸餾水及少許沸石，采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，加熱回流6h，分離油層，加適量無水硫酸鈉進行脫水，得淡黃色揮發(fā)油，即得。

2.2GC-MS條件

色譜柱為HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)石英毛細管柱，進樣口溫度280℃，初始柱溫50 ℃，以3 ℃·min-1升至140℃，保持10min，以15℃·min-1升至215℃，以5℃·min-1升至260 ℃，保持2min。載氣為高純氦氣，分流比為40:1，進樣量1μL。EI溫度：230℃，接口溫度280℃，四級桿溫度150℃，掃描范圍30～500aum，溶劑延遲時間為：3.75min。

2.3 化學成分分析

取紅皮云杉針葉揮發(fā)油樣品，按照上述實驗條件進樣，獲得樣品的總離子流圖，利用AMDIS解析其中的重疊色譜峰并提取出每個成分的“純凈”質(zhì)譜圖和相關色譜信息，并將這些信息與目標物譜庫中化合物進行比較，利用質(zhì)譜工作站通過NIST08質(zhì)譜庫結合色譜保留指數(shù)對各個色譜峰進行結構確定。采用峰面積歸一化法進行定量分析，計算紅皮云杉針葉揮發(fā)油中各揮發(fā)性成分的相對百分含量。

3 結果與討論

3.1 結果

在設定條件下對紅皮云杉針葉揮發(fā)油進行測定，獲得紅皮云杉針葉揮發(fā)油總離子流圖見圖1。通過GC-MS色譜工作站積分，采用AMDIS結合保留指數(shù)的方法，從供試品樣品中，共得到74個色譜峰，峰面積百分含量大于0.1的有69個化合物，占總含量的99.40%，最終確定了58個化合物見表1。其中，乙酸龍腦酯、龍腦、樟腦等成分的含量較高，分別占26.67%、11.68%和11.10%。所鑒定的化合物中，有40個化合物是采用質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫進行比對確定；有18個化合物經(jīng)過AMDIS解析并結合保留指數(shù)輔助定性確定。

表1 紅皮云杉針葉揮發(fā)油化學成分

＊利用保留指數(shù)解析成分；#利用AMDIS辨別重疊峰。

圖1 紅皮云杉針葉揮發(fā)油的總離子流圖

3.2 討論

AMDIS軟件能夠高效、快捷的分析重疊峰體系，提取“純凈”的質(zhì)譜圖，降低了質(zhì)譜庫檢索的不確定性。同時結合保留指數(shù)，對揮發(fā)油中同分異構體的區(qū)分將更加方便、準確。本研究共確定了供試品中58個化合物，應用AMDIS解析出6個化合物；應用保留指數(shù)解析出12個化合物。實踐表明GC-

MS結合自動質(zhì)譜解卷積定性系統(tǒng)和保留指數(shù)輔助定性方法可以提高對重疊色譜峰的辨別和鑒定能力，準確的分析出黑龍江蘿北產(chǎn)紅皮云杉針葉揮發(fā)油樣品中的化合物，促進了紅皮云杉的開發(fā)與利用。

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佳木斯大學科學技術研究項目，編號：S2014-011。

趙宏博(1986～)男，黑龍江佳木斯人，碩士，主管藥師。

沈宇(1986～)女，黑龍江佳木斯人，碩士，講師。E-mail:shenyu0406@126.com。

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