黃顙魚胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1基因的克隆及表達分析

梁宏偉，李忠，羅相忠，鄒桂偉*

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黃顙魚胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1基因的克隆及表達分析

梁宏偉1,2，李忠1，羅相忠1，鄒桂偉1*

(1.中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所，湖北武漢 430223；2.淡水水產(chǎn)健康養(yǎng)殖湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心，湖北武漢 430070)

為研究黃顙魚()胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1基因()的特征，闡明基因在不同性別黃顙魚組織中的表達特征和IGFBP1蛋白在雌、雄黃顙魚肌肉中的表達差異，克隆基因的cDNA全長，并進行實時熒光定量PCR檢測和Western Blot分析。結(jié)果表明：黃顙魚基因cDNA全長為1 259 bp，其開放閱讀框長度為714 bp，編碼237個氨基酸，3端和5端非翻譯區(qū)分別為407 bp和138 bp；黃顙魚基因核苷酸序列與鲇形目斑點叉尾鮰的相似度(89%)較高，與鰱、鯉、鯽、草魚和團頭魴等的差異較大；肝臟是黃顙魚基因mRNA表達最豐富的組織，基因在雄性個體心臟、腎臟、肌肉和腸組織中的表達量顯著高于雌性的(<0.05)；IGFBP1蛋白在雌、雄黃顙魚肌肉組織中都有表達，且在雄性個體中的表達量高于在雌性個體中的表達量。

黃顙魚；胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1基因；心臟；腎臟；肌肉；腸

胰島素樣生長因子(Insulin–like growth factors，IGFs)包括IGF、IGF受體(IGFR)、IGF結(jié)合蛋白(IGF binding proteins，IGFBPs)和IGFBP水解酶等，在動物生長發(fā)育過程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用[1]。IGF系統(tǒng)包括一系列的多功能細胞增殖調(diào)控因子，IGFBP與IGF結(jié)合后抑制IGF與其受體結(jié)合，發(fā)揮調(diào)控作用[2]。IGFBP還可以通過延長IGF半衰期來調(diào)節(jié)IGFs 的生物活性[2–3]。動物體內(nèi)存在的6種IGFBPs[3]雖然在結(jié)構(gòu)上高度同源，但其各自發(fā)揮的功能和組織表達結(jié)構(gòu)[4]不同。IGFBP1與其他幾種結(jié)合蛋白有著明顯的差異，它通過運輸和調(diào)節(jié)IGF與受體結(jié)合而參與機體的生長、發(fā)育和生殖等生理過程[5]。關(guān)于魚類基因的功能研究越來越受到重視，草魚[6]、鰱[7]、建鯉[8]和花鱸[9]等的基因已被克隆和研究。

黃顙魚()在中國廣泛分布，由于具有肌間刺少、肉質(zhì)細嫩、營養(yǎng)豐富、經(jīng)濟價值較高等優(yōu)點，已成為中國重要的淡水經(jīng)濟養(yǎng)殖魚類之一。不同性別黃顙魚表現(xiàn)出明顯的生長差異，雄性比雌性生長快，同齡性成熟黃顙魚雄性的個體明顯大于雌性的，具有明顯的雄性偏倚性。脊椎動物個體的差異主要由生長速率決定的，而生長速率又受到下丘腦—垂體—性腺軸及其他組織分泌的生長激素或類胰島素生長因子的調(diào)控[10]。鑒于基因參與魚類的生長和發(fā)育，筆者分析黃顙魚基因的序列特點和表達特征，并分析IGFBP1蛋白在雌、雄個體肌肉組織中的表達，旨在為研究基因在黃顙魚生長中的作用提供參考。

1　材料與方法

1.1材料

黃顙魚采自中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所試驗場。隨機選取18月齡健康無傷的雌、雄性個體各10尾，雌性個體體質(zhì)量為(50±5) g，全長為(14±2) cm；雄性個體的體質(zhì)量為(70±8) g，全長為(18±3) cm。將試驗魚用MS–222麻醉后，迅速采集其鰓、肌肉、心臟、腦、肝臟、脾臟、胃和腸等組織置于液氮中冷凍保存。

1.2方法

1.2.1總RNA的提取和cDNA第一鏈的合成

用Trizol Reagent(Introvigen)進行不同組織總RNA的提取。以總RNA為模板，按照RNA PCR Kit(AMV) Ver3.0 (TaKaRa)試劑盒的方法合成cDNA第一鏈，–20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2基因的克隆

通過Clustalx對從GenBank獲得的已有魚類基因mRNA序列進行比對。用Primer 5.0軟件設(shè)計保守區(qū)域引物(IGFBP1F/ IGFBP1R)。引物信息見表1。

表1　黃顙魚IGFBP1基因克隆及表達分析的引物

以制備的cDNA第一鏈為模板進行PCR擴增。反應(yīng)體系總體積為50 μL，包括1×Buffer 5 μL，10 μmol/L上、下游引物各1 μL，10 μmol/L的dNTPs 1 μL，5 UDNA聚合酶0.3 μL，約100 ng cDNA模板。反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性3 min；94 ℃變性1 min，56 ℃退火1 min，72 ℃延伸90 s，共進行32個循環(huán)；最后72 ℃延伸10 min。PCR擴增產(chǎn)物用2%瓊脂糖凝膠電泳進行檢測，并用AxyPrep DNA凝膠回收試劑盒(Axygen)進行膠回收，然后以pMD–18T為載體轉(zhuǎn)化插入的大腸桿菌感受態(tài)細胞。將經(jīng)鑒定為陽性的克隆送武漢擎科生物科技有限公司進行測序?；讷@得的黃顙魚基因的保守序列，設(shè)計3′ RACE和5′ RACE特異性引物(表1)，用SMART RACE cDNA Amplification Kit試劑盒(Clontech)進行3′末端和5′末端的擴增，并克隆測序。

1.2.3黃顙魚基因的序列分析

用軟件DNASTAR 6.0將克隆得到的基因保守區(qū)序列、3′末端和5′末端序列進行拼接，得到cDNA序列全長，并查找開放閱讀框和預(yù)測氨基酸編碼序列、相對分子質(zhì)量和等電點。將cDNA序列在NCBI中進行Blast同源比對，并預(yù)測蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域和細胞定位。用在線工具ExPASy(http://www.expasy.org/)預(yù)測信號肽和疏/親水性。通過MEGA 6.0軟件構(gòu)建基于基因氨基酸序列的Neighbor– Joining(NJ)系統(tǒng)發(fā)育樹。

1.2.4基因在不同性別黃顙魚組織中的表達特征

基于克隆得到的黃顙基因cDNA序列設(shè)計實時熒光定量PCR引物(表1)，以黃顙魚基因為內(nèi)參(引物β–actin1/β–actin2，表1)，對基因在雌、雄黃顙魚腦、鰓、心臟、肝臟、腎臟、胃、腸和肌肉組織中的表達特征進行分析。反應(yīng)體系：2×SYBR Premmix Ex(TakaRa) 12.5 μL，10 μmol/L上、下游引物各0.5 μL，2 μL模板cDNA，9.5 μL ddH2O。反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性30 s；95 ℃變性5 s，60 ℃退火30 s，40個循環(huán)。試驗設(shè)置3個重復(fù)。

1.2.5IGFBP1蛋白在雌、雄黃顙魚肌肉中的表達

取雌、雄黃顙魚各2尾，分別向其肌肉組織中加入蛋白抽提液，裂解后離心，將上清液轉(zhuǎn)移至離心管，通過BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒(TIANGEN)進行蛋白定量，校正，使其均一化。向蛋白中加入上樣緩沖液，煮沸3 min，迅速進行冰浴，然后進行10% SDS–PAGE凝膠電泳分離，隨后將分離的蛋白轉(zhuǎn)至聚偏氟乙烯樹脂(PVDF)膜上，用5%牛血清蛋白(BSA)于室溫封閉1 h，用TBS/T溶液漂洗3次。將兔anti–IGFBP1 (ab4242，Abcam)抗體密封后于4 ℃過夜，用TBS漂洗3次。加入山羊抗兔的用辣根過氧化酶(HRP)標記的二抗(Santa Cruz Biotechnology)，于室溫孵育1 h，再漂洗3次。用ECL Plus Detection Kit試劑盒進行檢測，并用GK–330C+凝膠成像系統(tǒng)進行圖像分析。

2　結(jié)果與分析

2.1黃顙魚基因的cDNA克隆與序列分析

克隆獲得的黃顙魚基因cDNA序列全長為1 259 bp(GenBank登錄號為HM210741)，其中，開放閱讀框(open reading frame，ORF)為714 bp，3′和5′ 非翻譯區(qū)分別為407 bp和138 bp，堿基A+T的含量為55.1%，G+C的含量為44.9%。其核苷酸序列包含了4個3′端與mRNA瞬時表達相關(guān)的快速降解信號ATTTA和1個低氧誘導(dǎo)因子1的輔助順式原件(HAS)序列CAGGT。核苷酸序列同源性比較結(jié)果表明，基因核苷酸序列與同屬鲇形目斑點叉尾鮰的同源性最高(89%)，與鰱的同源性為73%，與鯉、鯽、草魚和團頭魴的同源性均為72%。

“·”為終止密碼子；“↓”為信號肽切割位點；“ mRNA”為快速降解信號；“ ”為HAS 序列。

黃顙魚基因編碼237個氨基酸，由20種氨基酸組成，其中亮氨酸(Leu)含量最高，為12.2%。蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量為26 100，等電點(pl)為8.01。編碼蛋白質(zhì)信號肽序列的長度為29個氨基酸(AA)，切割位點位于N端29位L(Leu)和30位E(Glu)之間。蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)預(yù)測結(jié)果表明，黃顙魚基因編碼的蛋白在N端和C端分別包含保守結(jié)構(gòu)域IGFBP 超家族(IGFBP superfamily)和超家族(TY superfamily)結(jié)構(gòu)域。黃顙魚編碼氨基酸序列的同源性比對結(jié)果表明，黃顙魚與同為鲇形目的斑點叉尾鮰的相似性最高，達80%，與草魚和鰱的同源性為59%，與團頭魴和斑馬魚的同源性為58%，與其他魚類的序列同源性也在60%左右。黃顙魚IGFBP–1蛋白序列在不同魚類中的差異較大。

2.2黃顙魚基因的進化分析

用黃顙魚基因的氨基酸序列與GenBank中獲得的其他16個物種的氨基酸序列構(gòu)建NJ系統(tǒng)進化樹(圖2)。結(jié)果顯示，17個物種分為兩大類群，魚類為單獨一個類群，與其進化地位一致，黃顙魚基因首先與同屬鲇形目的斑點叉尾鮰聚為一支，然后與鯉科的草魚、鰱、團頭魴、鯽、鯉和斑馬魚聚為一支，同屬鱸形目的花鱸和黃金鱸聚在一起；在另外一個大類群中，人和小鼠聚為一支，牛和豬聚為一支，然后再與非洲爪蟾聚在一起。

圖2　基于IGFBP1基因氨基酸序列的系統(tǒng)發(fā)育樹

2.3黃顙魚基因在雌、雄個體組織中的表達特征

實時熒光定量PCR分析結(jié)果(圖3)表明，黃顙魚基因mRNA在腦、鰓、心臟、肝臟、腎臟、胃、腸和肌肉組織中的表達量差異較大，在肝臟組織的表達量最大，其次是在腸道、肌肉和腎臟中的表達，在心臟、腦和腮組織中的表達量相當?；蛟诖?、雄黃顙魚中的表達分析結(jié)果(圖3)表明，雄性心臟、腎臟、肌肉和腸組織中的表達量顯著高于雌性的(<0.05)，而雌性鰓中的表達量顯著大于雄性的(<0.05)；在腦、肝臟和胃組織中的表達雌、雄差異沒統(tǒng)計學意義(>0.05)。

組織

2.4IGFBP1蛋白在雌、雄黃顙魚肌肉組織中的表達特征

以甘油醛–3–磷酸脫氫酶(glyceraldehyde–3– phosphate dehydrogenase，GAPDH)蛋白作為內(nèi)參，檢測IGFBP1蛋白在雌、雄黃顙魚肌肉組織中的表達情況(圖4)，結(jié)果表明，IGFBP1蛋白在雌、雄黃顙魚肌肉組織中均有表達，且在雄性中的表達高于在雌性中的。

M　雄性個體；F　雌性個體。

3 結(jié)論與討論

包括魚類在內(nèi)的脊椎動物的生長主要受胰島素樣生長因子(IGFs)信號通路的調(diào)控[11]。IGFBP1是IGFs通路中的一個重要組成蛋白。近年來，一些硬骨魚類的基因全序列或部分序列被克隆和研究[12–18]。本研究中成功克隆了黃顙魚基因的cDNA全長序列，其核苷酸序列與同屬鲇形目的斑點叉尾鮰的同源性較高，而與其他物種的同源性較低?；蛩幋a的AA序列也呈現(xiàn)相似的特征，即在同目物種間相對保守，而與其他物種序列相比差異較大。

魚類序列存在一些保守結(jié)構(gòu)[19]。在IGFBP1蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中，N端是與IGF–1結(jié)合的重要區(qū)域；中心區(qū)決定了IGFBP的特異性；C端部分參與與IGF–1的結(jié)合，并與細胞粘附相關(guān)。IGFBP1作為一個重要的結(jié)合蛋白，通過這些保守結(jié)構(gòu)序列與其他蛋白結(jié)合，從而發(fā)揮IGFBP1的生物學作用。首先，動物IGFBP1氨基酸序列N–端存在保守的CGCCXXC結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)是IGFBP1與IGFs結(jié)合的重要序列結(jié)構(gòu)[20]；其次，在IGFBP1的C端有一個CWCV保守區(qū)域結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)在LGFBPs蛋白與IGFs以及與細胞外相關(guān)結(jié)構(gòu)的結(jié)合中有重要作用[9]。與其他物種的IGFBP1氨基酸結(jié)構(gòu)相比，黃顙魚的N端和C端同樣存在這2種保守序列，其中黃顙魚IGFBP1氨基酸序列CGCCXXC的結(jié)構(gòu)為CGCCLAC。此外，在多數(shù)物種基因的非編碼區(qū)還含有AT富集區(qū)，存在多個ATTTA序列，此序列可參與選擇性的mRNA降解過程[21]。花鱸序列包含3個ATTTA結(jié)構(gòu)，1個存在于5端非翻譯區(qū)，2個存在于3端非翻譯區(qū)[9]。黃顙魚基因的5端非翻譯區(qū)有2個ATTTA序列，分別位于90~94 nt和98~102 nt，3端非翻譯區(qū)有4個ATTTA序列，分別位于965~969、1 097~1 101、1 120~1 124、1 167~1 171 nt，表明黃顙魚的更容易啟動選擇性的mRNA降解過程。

硬骨魚肝臟是IGFBP1合成的主要場所[22]。基因在肝臟組織中的表達最豐富。在大菱鲆中，基因在肝臟中的表達量最高，在脾臟中的表達量次之，而在心臟、胃、腎臟中的表達量較低，在腸中只有微量表達[3]。mRNA在花鱸肝臟中的表達量最高，在肌肉和脾臟中有較高表達，而在腦、垂體、腸、頭腎中只有少量的表達，在其他組織中的表達量極少[9]。本研究中，黃顙魚基因在肝臟中的表達量最高，在肌肉、腎臟和腸中的表達量次之，在心臟、腦和鰓中的表達量較低。魚類的mRNA除在肝臟中有豐富的表達外，在肌肉、腸和腎等組織中也有表達，但在不同物種間的表達特征不同。這可能與物種的生理狀態(tài)、生活環(huán)境和生活習性等有關(guān)。黃顙魚雄性個體的表達量高于雌性個體的。這與黃顙魚雄性的生長比雌性快相一致。魚類的生長受GH /GHR/IGF軸的調(diào)控[23]，IGFs是生長軸中的關(guān)鍵因子。魚類 IGFs的基本功能是促生長。IGFBPs 家族成員與IGFs結(jié)合，調(diào)節(jié)IGFs的作用效率，并用其運送 IGFs到靶組織，從而發(fā)揮IGFs的生物學效應(yīng)[24]。

本研究結(jié)果表明，基因在雌、雄黃顙魚不同組織中的表達存在差異，無論是mRNA還是蛋白的表達，在肌肉組織中的表達均是雄性高于雌性。這與雄性個體的生長快于雌性個體的研究結(jié)果相一致，因此，基因可能與不同性別個體的生長調(diào)控有關(guān)。關(guān)于基因?qū)S顙魚生長的調(diào)控作用還有待研究。

[1] HAKUNO F，F(xiàn)UKUSHIMA T，YONEYAMA Y，et al. Novel functions of high–molecular–mass complexes containing insulin receptor substrates in mediation and modulation of insulin–like activities：emerging concept of diverse functions by irs–associated proteins[J]．Frontiers in Endocrinology，2015，6：73．DOI：10.3389/fendo. 2015.00073.

[2] KIM M S，LEE D Y．Insulin–like growth factor (IGF)–I and IGF binding proteins axis in diabetes mellitus[J]. Annals of Pediatric Endocrinology & Metabolism，2015，20(2)：69–73．DOI：10.6065/apem.2015.20.2.69.

[3] 胡健，溫海深，關(guān)健，等．大菱鲆2種類胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白基因的克隆及其在成魚和早期發(fā)育期中的表達[J]．海洋學報(中文版)，2012，34(5)：139–146.

[4] GUPTA M B．The role and regulation of IGFBP–1 phosphorylation in fetal growth restriction[J]．J Cell Commun Signal，2015，9(2)：111–123．DOI：10.1007/ s12079–015–0266–x.

[5] UWAIFO G I，Parikh S J，Keil M，et al．Comparison of insulin sensitivity，clearance，and secretion estimates using euglycemic and hyperglycemic clamps in children[J]．J Clin Endocrinol Metab，2002，87(6)：2899–2905．DOI：10.1210/jcem.87.6.8578.

[6] 陶洋，鄒曙明．草魚胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白基因的全長cDNA克隆及表達[J]．上海海洋大學學報，2011，20(1)：15–21.

[7] 丁為群，梁宏偉，鄒桂偉，等．鰱基因全長cDNA的克隆及表達分析[J]．西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版)，2013，41(5)：1–8.

[8] 魏可鵬，俞菊華，李紅霞，等．建鯉基因的克隆及與增重相關(guān)的SNP位點分析[J]．華北農(nóng)學報，2012，27(3)：75–80．DOI：10.3969/j.issn.1000–7091.2012. 03.015.

[9] 錢焜，溫海深，遲美麗，等．海產(chǎn)花鱸基因的克隆及表達分析[J]．中國海洋大學學報(自然科學版)，2014，44(9)：37–45.

[10] MEI J，GUI J F．Genetic basis and biotechnological manipulation of sexual dimorphism and sex determina- tion in fish[J]．Sci China Life Sci，2015，58(2)：124–136. DOI：10.1007/s11427–014–4797–9.

[11] ZOU S，KAMEI H，MODI Z，et al．Zebrafish IGF genes：gene duplication，conservation and divergence，and novel roles in midline and notochord development[J]．PLoS ONE，2009，4(9)：e7026．DOI：10.1371/journal.pone. 0007026.

[12] GRACEY A Y，TROLL J V，SOMERO G N．Hypoxia– induced gene expression profiling in the euryoxic fish[J]．Proc Natl Acad Sci USA，2001，98(4)：1993–1998．DOI：10.1073/pnas.98.4.1993.

[13] MAURES T J，DUAN C．Structure，developmental expression，and physiological regulation of zebrafish IGF binding protein–1[J]．Endocrinology，2002，143(7)：2722–2731．DOI：10.1210/endo.143.7.8905.

[14] KAJIMURA S，AIDA K，DUAN C．Understanding hypoxia–induced gene expression in early development：and in vivo analysis of hypoxia–inducible factor 1–regulated zebra fish insulin–like growth factor binding protein 1 gene expression[J]．Mol Cell Biol，2006，26(3)：1142–1155．DOI：10.1128/MCB.26.3.1142–1155.2006.

[15] KAMEI H，LU L，JIAO S，et al．Duplication and diversification of the hypoxia–induciblegene in zebrafish[J]．PLoS ONE，2008，3(8)：e3091．DOI：10.1371/journal.pone.0003091.

[16] RAHMAN M S，THOMAS P．Characterization of three IGFBP mRNAs in Atlantic croaker and their regulation during hypoxic stress：potential mechanisms of their upregulation by hypoxia[J]．Am J Physiol Endocrinol Metab，2011，301(4)：E637–E648．DOI：10.1152/ajpendo. 00168.2011.

[17] SUN C F，TAO Y，JIANG X Y，et al．IGF binding protein 1 is correlated with hypoxia–induced growth reduce and developmental defects in grass carp () embryos[J]．Gen Comp Endocrinol，2011，172(3)：409–415．DOI：10.1016/j. ygcen.2011.04.005.

[18] ZHAI W，ZHANG J，SHI Z，et al．Identification and expression analysis ofgene from Japanese flounder ()[J]．Comp Biochem Physiol B，Biochem Mol Biol，2012，161(4)：413–420. DOI：10.1016/j.cbpb.2012.01.007.

[19] CHEN W，ZHANG Z，DONG H，et al．Insulin–like growth factor–binding protein–1 (IGFBP–1) in goldfish，：molecular cloning，tissue expression，and mRNA expression responses to periprandial changes and cadmium exposure[J]．Fish Physiol Biochem，2016，42(3)：1043–1052．DOI：10.1007/s10695–015–0195–x.

[20] DUAN C．Specifying the cellular responses to IGF signals：roles of IGF–binding proteins[J]．J Endocrinol，2002，175(1)：41–54．DOI：10.1677/joe.0.1750041.

[21] SHAW G，KAMEN R．A conserved A U sequence from the 3untranslated region of GM–CSF mRNA mediates selective mRNA degradation[J]．Cell，1986，46(5)：659–667．DOI：10.1016/0092–8674(86)90341–7.

[22] PEDROSO F L，F(xiàn)UKADA H，MASUMOTO T. Molecular characterization，tissue distribution patterns and nutritional regulation of IGFBP–1，–2，–3 and –5 in yellowtail，[J]．Gen Comp Endocrinol，2009，161(3)：344–353．DOI：10.1016/j.ygcen.2009.01. 010.

[23] REINECKE M．Influences of the environment on the endocrine and paracrine fish growth hormone–insulin– like growth factor–I system[J]．J Fish Biol，2010，76(6)：1233–1254．DOI：10.1111/j.1095–8649.2010.02605.x.

[24] 楊慧榮，趙會宏，陳彥珍．胰島素樣生長因子IGF系統(tǒng)與魚類性腺的研究進展[J]．動物學雜志，2013，48(2)：306–313.

責任編輯：王賽群

英文編輯：王庫

Expression and expression analysis ofgene in yellow catfish ()

LIANG Hongwei1,2, LI Zhong1, LUO Xiangzhong1, ZOU Guiwei1*

(1.Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Wuhan 430223, China; 2.Freshwater Aquaculture Collaborative Innovation Center of Hubei Province, Wuhan 430070, China)

To analyze the characteristics of insulin–like growth factor–binding protein 1(), and to reveal its expression pattern in different gender tissues and the expression difference of its protein between male and female muscles, thecDNA was cloned from the. The mRNA expression ofwas studied using florescent quantitative real–time PCR and the protein expression pattern of IGFBP1 was detected using western blot method. The full–length of cDNA ofis 1 259 bp which included a 138 bp complete 5untranslated region (5′ UTR), a 407 bp 3′ UTR and a 714 bp open reading frame (ORF) region which encoded a 237 amino acid of peptides. The results indicated that nucleotide sequences ofwere obvious difference from other species (such as,,,and,etc.)except for, which was identical to Siluriformes ofThe highest abundance expression oftranscript was detected in liver, and mRNA level ofin heart, kidney, muscle and intestine from male was higher than that from female (<0.05). The IGFBP1 protein expression from male was higher than that from female. The results provided data support for further functional investigation ongene in

;; gender differences; heart; kidney; muscle; intestine

10.13331/j.cnki.jhau.2017.03.014

S917.4

A

1007-1032(2017)03-0298-06

2016–09–01

2017–04–20

“十二·五”農(nóng)村領(lǐng)域國家科技計劃項目(2011AA100401)；水產(chǎn)種質(zhì)資源平臺項目(2016DKA30470)

梁宏偉(1978—)，男，副研究員，博士，主要從事水產(chǎn)動物遺傳育種研究，lianghw@yfi.ac.cn；

，鄒桂偉，研究員，zougw@yfi.ac.cn

投稿網(wǎng)址：http://xb.hunau.edu.cn