血流感染病原菌分布、耐藥性及與降鈣素原相關(guān)性分析

樊海燕,葉綏艷,劉曉鶯

陜西省榆林市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科(榆林 719000)

△通訊作者

血流感染病原菌分布、耐藥性及與降鈣素原相關(guān)性分析

樊海燕,葉綏艷,劉曉鶯△

陜西省榆林市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科(榆林 719000)

目的：探討血培養(yǎng)病原菌的分布及藥敏特點(diǎn)，分析血流感染患者降鈣素原 (PCT)與非血流感染者的差別。方法：收集住院患者血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本所分離的病原菌，鑒定菌株，并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)；同時(shí)以血培養(yǎng)陽(yáng)性患者為感染組，350例血培養(yǎng)陰性患者作為對(duì)照組，檢測(cè)并比較兩者PCT結(jié)果。結(jié)果：共分離病原菌472株，革蘭陰性桿菌278株(58.9%)，其中馬耳他布魯菌21株；革蘭陽(yáng)性球菌176株(37.2%)；念珠菌18株(3.8%)。大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs菌株58株(54.7%)，肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株20株(45.5%)；MRCNS的41株(45.5%)，MRSA的4株(18.2%)，兩者均無(wú)對(duì)利奈唑安、替考拉寧、萬(wàn)古霉素耐藥菌株。感染組PCT為(6.21±5.62)μg/L高于對(duì)照組PCT的(0.26±0.17)μg/L(P<0.01)。結(jié)論：血培養(yǎng)病原菌分布呈多樣性，革蘭陰性菌多于革蘭陽(yáng)性菌，并且具有地域特色；細(xì)菌多重耐藥率高，主要以產(chǎn)ESBLs陰性桿菌及耐甲氧西林的葡萄球菌為主；感染組PCT結(jié)果明顯高于對(duì)照組。

血流感染是病原菌進(jìn)入血液循環(huán)所引起的危及生命的全身感染性疾病。隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，抗生素及侵入性檢查的廣泛應(yīng)用，引起血流感染病原菌數(shù)量和種類(lèi)不斷增加[1]。血培養(yǎng)是診斷血流感染的主要方法，血培養(yǎng)陽(yáng)性時(shí)結(jié)合血涂片染色結(jié)果、降鈣素原 (PCT)等檢查可及時(shí)提示臨床采取相應(yīng)措施，以減少感染性休克的發(fā)生及降低病死率[2]。本研究對(duì)我院2014年9月至2016年9月血培養(yǎng)所分離病原菌分布及藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，同時(shí)選取血流感染患者PCT結(jié)果與血培養(yǎng)陰性患者PCT結(jié)果進(jìn)行比較，以期對(duì)臨床用藥提供參考。

資料與方法

1 一般資料 菌株來(lái)源于我院2014年9月至2016年9月住院患者血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本共472例，其中男283例，女189例，平均年齡(40.5±16.8)歲，剔除同一患者重復(fù)菌株及單次單瓶陽(yáng)性菌株，對(duì)所收集菌株進(jìn)行培養(yǎng)、分離、鑒定及藥物敏感性試驗(yàn)；將472例血培養(yǎng)陽(yáng)性患者全部納為感染組，另選350例血培養(yǎng)陰性患者為對(duì)照組，對(duì)照組中男221例，女129例，平均年齡(35.6±12.3)歲，檢測(cè)并比較兩組患者PCT結(jié)果。

2 儀器與試劑 血培養(yǎng)儀為美國(guó)Remel公司的VERSA TREK血培養(yǎng)儀，梅里埃公司VITEK-2compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀及配套試劑；藥敏試驗(yàn)采用K-B紙片擴(kuò)散法法，紙片購(gòu)自溫州康泰生物科技公司；CO2培養(yǎng)箱(HH-CP-7W型上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠(chǎng))；血瓊脂平板及MH平板為鄭州安圖生物科技公司產(chǎn)品；PCT測(cè)定試劑盒為德國(guó)B.R.A.H.M.S GmbH產(chǎn)品，檢測(cè)用深圳市華瑞科技有限公司免疫定量分析儀。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923、銅綠假單胞菌ATCC27853和大腸埃希菌ATCC25922。

3 研究方法 ①血培養(yǎng)瓶陽(yáng)性報(bào)警后記錄各項(xiàng)信息，涂片革蘭染色并轉(zhuǎn)種相應(yīng)的瓊脂平板，置5%CO2培養(yǎng)箱孵育24～48 h。血培養(yǎng)陰性為培養(yǎng)瓶在放入血培養(yǎng)儀5×24 h未報(bào)陽(yáng)性，涂片革蘭染色未見(jiàn)細(xì)菌。②按照細(xì)菌鑒定的SOP對(duì)病原菌進(jìn)行生化試劑鑒定、VITEK-2compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀鑒定。③采用紙片擴(kuò)散法(K-B法)對(duì)所分離病原菌進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，結(jié)果折點(diǎn)參照CLSI文件。④PCT檢測(cè)方法：患者抽取血培養(yǎng)標(biāo)本同時(shí)抽取3 ml靜脈血注入促凝管送至實(shí)驗(yàn)室，分離血清檢測(cè)PCT。檢測(cè)原理為免疫色譜法分別收集血流感染組PCT結(jié)果與血培養(yǎng)陰性患者PCT結(jié)果，以PCT濃度大于0.5 μg/L為陽(yáng)性。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用WHONET 5.6和SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 菌株分布 分離出病原菌472株，其中革蘭陰性桿菌278株(58.9%)，革蘭陽(yáng)性球菌176株(37.2%)；念珠菌18株(3.8%)。革蘭陰性菌中分離率前3位的為大腸埃希菌106株(22.5%)、肺炎克雷伯菌44株(9.3%)、木糖氧化產(chǎn)堿桿菌28株(5.9%)，其中檢出1株非O1非139型霍亂弧菌及21株馬耳他布魯菌。革蘭陽(yáng)性菌中主要檢出凝固酶陰性葡萄球菌共90株,其中包括溶血葡萄球菌48株(10.2%)、人葡萄球菌28株(5.9%)、表皮葡萄球菌14株(3.0%)，金黃色葡萄球菌22株(4.7%)，糞腸球菌及屎腸球菌各16株(3.4%)。

2 血培養(yǎng)主要革蘭陰性細(xì)菌耐藥情況 見(jiàn)表1。大腸埃希菌對(duì)阿米卡星、磷霉素、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢西丁及頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率較低均小于10%，耐藥率最高的為氨芐西林(81.1%)。肺炎克雷伯菌對(duì)阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、左氧氟沙星、頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率較低均小于10%，耐藥率最高的為氨芐西林(100%)。

3 血培養(yǎng)主要革蘭陽(yáng)性細(xì)菌耐藥情況 見(jiàn)表2。共檢出凝固酶陰性葡萄球菌90株，金黃色葡萄球菌22株。耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)41株(45.5%)，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)4株(18.2%)。凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)阿米卡星及磷霉素耐藥率較低；兩者均未分離出對(duì)利奈唑安、替考拉寧、萬(wàn)古霉素耐藥的菌株。

表1 血培養(yǎng)主要革蘭陰性細(xì)菌耐藥情況

表2 血培養(yǎng)主要革蘭陽(yáng)性細(xì)菌耐藥情況

4 血流感染組與對(duì)照組PCT濃度比較 血流感染組472例，PCT濃度為(6.21±5.62)μg/L，對(duì)照組350例，PCT濃度為(0.26±0.17) μg/L，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

討 論

血流感染是臨床常見(jiàn)的高病死率的疾病，包括菌血癥和敗血癥，其病死率高達(dá)27%～28%[3]。故而及時(shí)發(fā)現(xiàn)患者血流感染病原菌，提供病原菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果幫助臨床醫(yī)生盡早進(jìn)行目標(biāo)抗菌治療，可大大降低血流感染患者危重狀況的發(fā)生，同時(shí)檢測(cè)患者PCT，對(duì)于評(píng)估嚴(yán)重?cái)⊙Y患者的預(yù)后有很大的臨床價(jià)值[4]。

本次研究革蘭陰性細(xì)菌所占比高于革蘭陽(yáng)性細(xì)菌，與強(qiáng)雪芹[5]等研究的數(shù)據(jù)接近。此次統(tǒng)計(jì)的菌株中檢出馬耳他布魯菌21株，占所檢出陰性桿菌的7.2%。這與榆林市地處陜蒙交界處、醫(yī)院的病源有一部分是來(lái)自榆林北部農(nóng)村及與內(nèi)蒙接壤的牧區(qū)，這些患者均有飼養(yǎng)牲畜或與牲畜皮毛接觸史。布魯菌是一種可引起人畜共患病的動(dòng)物源性病原菌，此菌為革蘭陰性的球桿菌，染色較弱，生長(zhǎng)繁殖速度較慢，血培養(yǎng)時(shí)3 d左右報(bào)陽(yáng)性,布魯菌有極強(qiáng)的致病力，可引起實(shí)驗(yàn)室感染[6-8]。

選取分離菌株較多的兩種革蘭陰性桿菌進(jìn)行耐藥性分析，我院分離自血液的大腸埃希菌和肺炎克雷伯均未發(fā)現(xiàn)CRE菌株。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的主要耐藥機(jī)制是產(chǎn)生ESBLs酶。兩種菌均對(duì)加酶抑制劑哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率較低，說(shuō)明加酶抑制劑對(duì)產(chǎn)ESBLs菌株是有效的。大腸埃希菌對(duì)喹諾酮類(lèi)(環(huán)丙沙星及左氧氟沙星)耐藥率較高，故應(yīng)參考藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇有效抗生素，相對(duì)而言，肺炎克雷伯菌對(duì)喹諾酮類(lèi)藥物敏感性較高，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果可以作為臨床選用的藥物。革蘭陽(yáng)性菌中凝固酶陰性葡萄球菌及金黃色葡萄球菌均未分離出萬(wàn)古霉素耐藥菌株，未檢出對(duì)利奈唑安和替考拉寧耐藥菌株。金黃色葡萄球菌對(duì)甲氧西林耐藥機(jī)制主要有耐藥相關(guān)基因mecA、細(xì)胞壁粘肽結(jié)構(gòu)的和酶系統(tǒng)的改變。MRCNS的分離率為45.5%，MRSA的分離率為16.2%，與之前我院相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道相比均有下降，尤其是MRSA由之前的57.3%下降至16.2%[9]。MRCNS高于MRSA與凝固酶陰性葡萄球菌的定植率高，經(jīng)過(guò)了多種抗生素的篩選，產(chǎn)生了較多的耐藥菌株有關(guān)。

PCT作為血流細(xì)菌感染的指標(biāo)，已廣泛應(yīng)用。有報(bào)道顯示[10]：PCT濃度與炎性程度呈正相關(guān)，同時(shí)也可作為判斷病情、觀察療效的可靠指標(biāo)[11]。本次研究血流感染組PCT明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，表明血流感染與PCT濃度的升高有相關(guān)性。由于血培養(yǎng)檢測(cè)時(shí)間較PCT檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，故而可根據(jù)患者PCT結(jié)果提示臨床醫(yī)生調(diào)整抗生素,更有利于控制患者病情發(fā)展。

綜上所述,我院血培養(yǎng)病原菌分布呈多樣性,與國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道大致相同,也具有地域特色性,細(xì)菌的耐藥率較高，多重耐藥菌株較多。血清PCT濃度與血流感染有相關(guān)性，在發(fā)現(xiàn)感染指標(biāo)時(shí)要及時(shí)提示臨床醫(yī)生采取有效措施。同時(shí)，對(duì)于臨床分離病原菌進(jìn)行連續(xù)不斷的監(jiān)測(cè)與分析是給臨床醫(yī)生提供用藥指導(dǎo)的必要條件。

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(收稿：2016-10-21)

細(xì)菌感染 微生物敏感性試驗(yàn) 抗藥性, 細(xì)菌 降鈣素

R446.5

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.06.035