CD31、CD105、血管內(nèi)皮生長因子表達與胃腸道間質(zhì)瘤患者預(yù)后的關(guān)系

袁 征 李 珍 孫彥珍

(南陽市中心醫(yī)院病理科，河南 南陽 473000)

CD31、CD105、血管內(nèi)皮生長因子表達與胃腸道間質(zhì)瘤患者預(yù)后的關(guān)系

袁 征 李 珍 孫彥珍

(南陽市中心醫(yī)院病理科，河南 南陽 473000)

目的 探討血管標志物CD31、CD105、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在胃腸道間質(zhì)瘤(GIST)中的表達與患者臨床預(yù)后的關(guān)系。方法 56例行手術(shù)切除的GIST患者的病理標本進行免疫組織化檢測；分析GIST患者VEGF表達情況，CD31、CD105標記的微血管密度數(shù)目(IMVD)與患者臨床預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果 ①VEGF陽性表達中12例預(yù)后良好，17例預(yù)后差，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.002)；②預(yù)后好和預(yù)后差的患者CD105-IMVD值分別為(17.34±1.71)和(27.49±2.67)；CD31-IMVD值分別為(13.67±2.39)和(19.57±4.86)，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)；③相關(guān)性分析顯示腫瘤患者預(yù)后與VEGF陽性、CD31-IMVD、CD105-IMVD值呈負相關(guān)，多因素分析提示腫瘤N分期、腫瘤直徑、CD105-IMVD值是預(yù)后的獨立風險因素(P<0.05)。結(jié)論 血管標志物CD31、CD105、VEGF可作為GIST患者的預(yù)后指標，CD105可作為獨立預(yù)測指標。

血管標志物；免疫組化；CD105；血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)；胃腸道間質(zhì)瘤

胃腸道間質(zhì)瘤(GIST)是胃腸道最常見的間葉源性腫瘤，發(fā)病機制尚不明確，臨床表現(xiàn)為良性或惡性〔1〕。雖然GIST的診斷標準及治療方案均比較明確，但尚無明確的生物學(xué)標志預(yù)測其預(yù)后〔2〕。GIST病理組織學(xué)分為梭形細胞型、類上皮型和梭形細胞-上皮樣細胞混合型三型，雖然腫瘤風險度對GIST預(yù)后有一定的預(yù)測價值，但少數(shù)風險度極低患者亦可以發(fā)生轉(zhuǎn)移或切除后再發(fā)〔3〕。近年來，許多免疫組化學(xué)標準已經(jīng)被運用于預(yù)測腫瘤預(yù)后〔4〕。血管標志物CD105、CD31、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)被認為是腫瘤血管形成的標志，有研究提示腫瘤組織高表達VEGF患者預(yù)后較差〔5〕。目前關(guān)于GIST腫瘤組織免疫組化表達VEGF、CD105與其預(yù)后的研究結(jié)論存在一定的差異性，本研究探討CD105、CD31和VEGF在GIST腫瘤組織中表達及與患者預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 我院2005～2013年410例GIST標本，根據(jù)光鏡下組織形態(tài)及免疫組化染色CD117、DOG1、CD34、α平滑肌蛋白(SMA)、Desmin及S-100結(jié)果篩選病理學(xué)診斷符合GIST病理診斷標準〔6〕的病例56例，平均年齡(57.34±13.71)歲，胃31例，小腸17例，結(jié)腸6例，直腸和食管各1例。34例存活且無腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)預(yù)后良好，22例有腫瘤轉(zhuǎn)移或死亡預(yù)后差。隨訪1～126(中位時間37)個月。VEGF、CD105、CD31 多克隆抗體、SP試劑盒和顯色液均購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司。

1.2 染色方法及結(jié)果判定 病理診斷符合GIST診斷標準的標本均采用SP法檢測CD31、CD105、VEGF的表達情況，采取同樣的方法用已知表達抗體做陽性對照，磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對照，染色方法和步驟均按說明書進行。微血管密度計數(shù)(IMVD)：采用CD105和CD31標記法監(jiān)測腫瘤組織中微血管密度(MVD)，GIST組織中的微血管均被染成黃棕色，IMVD計數(shù)方法采用Weidner法〔7〕，在100倍鏡下觀察切片，找到微血管密集區(qū)后，在200倍鏡下隨機選取5個視野進行血管計數(shù)，取平均值；VEGF表達的判定：細胞質(zhì)或細胞膜出現(xiàn)黃色或褐色顆粒視為VEGF表達陽性，切片首先根據(jù)顏色強度進行評分：無著色0分，淺黃色1分，深黃色2分，褐色3分，進行染色強度評分后，再根據(jù)陽性細胞率進行評分：400倍鏡下隨機選取5個視野計算陽性細胞數(shù)，陽性細胞數(shù)<10% 0分，10%～25% 1 分，26%～50% 2分，51%～75% 3分，>75% 4分，最后將兩項評分結(jié)果相乘：<4分者為VEGF表達陰性，>4分者為VEGF表達陽性。

1.3 隨訪 最后一次隨訪事件截止到2015年5月1日，隨訪預(yù)后指標分為良好與差，良好：患者生存狀態(tài)良好，無腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移；差：因GIST死亡或腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行t、χ2、秩和檢驗，Spearman相關(guān)分析，Logistic多元回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1 CD31、CD105、VEGF表達與GIST臨床病理特點的關(guān)系 CD31陽性表達27例(48.2%)、CD105陽性表達19例(33.9%)、VEGF陽性表達29例(51.8%)；三者表達在不同腫瘤直徑和核分裂個數(shù)的患者中差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)，見表1。

2.2 免疫組化結(jié)果

2.2.1 VEGF表達 VEGF陰性中22例預(yù)后良好，5例預(yù)后差，VEGF陽性表達中12例預(yù)后良好，17例預(yù)后差，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.002)。

2.2.2 CD31和CD105表達 預(yù)后好和預(yù)后差的患者CD105-IMVD值和CD31-IMVD值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)，見表2和圖1。

2.3 免疫組化結(jié)果與腫瘤預(yù)后的關(guān)系 相關(guān)性分析顯示腫瘤患者預(yù)后與VEGF表達陽性、CD31-IMVD、CD105-IMVD呈負相關(guān) (r=-0.595，P<0.001；r=-0.325，P<0.05；r=-0.371，P<0.05)，Logistic多元回歸分析結(jié)果提示CD105-IMVD值(P=0.04)、腫瘤的N分期(P=0.002)、腫瘤直徑(P=0.02)均是預(yù)后的獨立風險因素。見表3。

表1 不同臨床因素CD31、CD105、VEGF陽性表達〔n(%)〕

表2 不同預(yù)后患者CD105和CD31表達關(guān)系

圖1 GIST組織CD31、CD105免疫組化結(jié)果(DAB，×400)

變量轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)HR95%CIP值N分期3.51.54～2.350.002CD105-IMVD值3.21.12～3.210.04腫瘤直徑3.61.36～3.750.02

3 討 論

近60%的GIST腫瘤直徑>5 cm，這部分腫瘤患者20%～50%會復(fù)發(fā)，預(yù)后一般較差〔8〕。GIST屬于交界性腫瘤，積極探討GIST患者預(yù)后標志物預(yù)測腫瘤的危害性，早期采取相應(yīng)措施積極應(yīng)對意義重大。血管形成是判斷多腫瘤預(yù)后的重要指標，血管形成是腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移的必要，VEGF可以促進淋巴管形成，促進脈管系統(tǒng)生長〔9〕。CD105與血管內(nèi)皮細胞關(guān)系密切，在血管生長過程起重要作用。VEGF是血管形成的重要標志物，VEGF可以通過旁分泌作用于VEGF受體(R)-3刺激淋巴內(nèi)皮細胞激活、增殖、遷移以促進淋巴管形成，也可以促進原有的淋巴管增生、遷移進而有助于腫瘤細胞進入淋巴管，促進腫瘤轉(zhuǎn)移〔9〕。免疫組化VEGF陽性表達可能提示血管形成過程，血管形成在腫瘤生長、浸潤及轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮一定作用。本研究提示高VEGF表達患者對化療反應(yīng)較差，也從另一方面反映了高VEGF表達的危害性〔10〕。

實體腫瘤的生長依賴血管，新生的血管網(wǎng)為腫瘤的生長、浸潤提供充養(yǎng)分，因此血管形成一定程度上決定腫瘤的生物學(xué)行為，許多研究中證實IMVD可以作為判斷實體腫瘤預(yù)后的重要指標〔11〕。腫瘤組織的IMVD不僅可以反映腫瘤的生長情況，可能還可以預(yù)測腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)趨勢。采用血管內(nèi)皮標記物檢測IMVD是病理學(xué)常用的方法，既往常用CD31和CD34作為血管內(nèi)皮標記物，CD105在腫瘤新生血管中表達明顯，近年逐漸被運用于腫瘤組織中血管內(nèi)皮的鑒定〔12〕。本研究提示CD105-IMVD對腫瘤預(yù)后的預(yù)測價值更大。

研究提示CD105參與腫瘤血管形成是腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)〔13〕，在正常組織血管內(nèi)皮中檢測不到CD105表達，但在腫瘤血管內(nèi)皮細胞中CD105高度表達，提示CD105是未成熟血管的特異性標志〔14〕。CD105可能是比CD34、CD31更敏感的血管標記物，反映惡性腫瘤組織中血管形成的活躍程度，因此CD105很有可能作為判斷GIST預(yù)后的重要指標。

1 Dumont AG，Rink L，Godwin AK，etal.A nonrandom association of gastrointestinal stromal tumor (GIST) and desmoid tumor (deep fibromatosis)：case series of 28 patients〔J〕.Ann Oncol，2012；23(5)：1335-40.

2 Rubin BP.Gastrointestinal stromal tumours：an update〔J〕.Histopathology 2006；48：83-96.

3 Weidner N，Semple JP，Welch WR，etal.Tumor angiogenesis and metastasis-correlation in invasive breast carcinoma〔J〕.N Engl J Med，1991;324(1)：1-8.

4 孟慶彬，于健春，康維明.Doublecortin樣激酶-1 在胃癌組織中的表達及其與預(yù)后關(guān)系〔J〕.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報，2013;35(6)：639-44.

5 董 鋒，燕善軍.VEGF-C及CDl05在胃癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用研究〔J〕.胃腸病學(xué)和肝臟病學(xué)雜志，2014;23(3)：241-3.

6 2013年中國胃腸道間質(zhì)瘤病理診斷共識專家組.中國胃腸道間質(zhì)瘤病理診斷共識(2013年版)解讀〔J〕.中華病理學(xué)雜志，2015;44(1)：3-8.

7 Folkman J.Angiogeneis〔J〕.Annu Rev Med，2006;57：1-18.

8 Nilsson B，Bümming P，Meis-Kindblom JM，etal.Gastrointestinal stromal tumors：the incidence，prevalence，clinical course，and prognostication in the preimatinib mesylate era--a population based study in western Sweden〔J〕.Cancer,2005；103：821-9.

9 Karkkainen MJ，Haiko P，Sainio K，etal.Vascular endothelial growth factor C is required for sprouting of the first lymphatic vessels from cmbryonic veins〔J〕.Nat Immunol，2004;5(1)：74-80.

10 Mineo TC，Ambrogi V.Prognostic impact of VEGF，CD31，CD34，and CD105 expression and tumour vessel invasion after radical surgery for IBIIA non-small cell lung cancer〔J〕.J Clin Pathol,2004；57：591-7.

11 郄 碩，張詩武，張丹芳，等.胃腸道間質(zhì)瘤中血管生成擬態(tài)初步研究〔J〕.中國腫瘤臨床，2007;34(2)：68-71.

12 鄧文喻，張江宇，吳愛武，等.子宮頸癌中CD105、CD31標記的微血管密度的變化及意義〔J〕.臨床與實驗病理雜志，2011;27(12)：1359-61.

13 Lopez Novoa JM，Bernabeu C.The physiological role of endoglin in the cardiovascular system〔J〕.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2010;299(4)：H959-74.

14 Wikstrom P，Lisshrant IF，Stattin P，etal.Endoglin(CDl05)is expressed on immature blood vessels and is a marker for survival in prostate cancer〔J〕.Prostate，2002;51(4)：268-75.

〔2016-10-27修回〕

(編輯 苑云杰)

袁 征(1982-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事消化系統(tǒng)腫瘤研究。

R445.3

A

1005-9202(2017)11-2722-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.11.053