EGFR與VEGF在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及意義

馮傳寶

[摘要] 目的 探討表皮生長因子受體（EGFR）與血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義。方法 選擇2014年1月～2016年12月在我院手術(shù)切除的三陰性乳腺癌標(biāo)本52例為觀察組，另選擇同期在我院手術(shù)治療的非特殊類型乳腺浸潤性導(dǎo)管癌標(biāo)本50例為對(duì)照組。檢測(cè)兩組標(biāo)本中EGFR與VEGF的陽性率，分析三陰性乳腺癌患者的年齡、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小等與EGFR及VEGF陽性率的關(guān)系。 結(jié)果 觀察組VEGF陽性率、EGFR陽性率均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。三陰性乳腺癌組織中EGFR陽性率在不同年齡、腫瘤直徑、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；臨床分期Ⅲ-Ⅳ期的EGFR陽性率顯著高于Ⅰ-Ⅱ期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。三陰性乳腺癌組織中VEGF陽性率在不同年齡、腫瘤直徑、臨床分期的比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織的VEGF陽性率顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 三陰性乳腺癌組織中EGFR與VEGF陽性表達(dá)率增加，且與腫瘤的發(fā)展密切相關(guān)。

[關(guān)鍵詞] 表皮生長因子受體；血管內(nèi)皮生長因子；三陰性乳腺癌；表達(dá)

[中圖分類號(hào)] R737.9 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2017）14-0032-03

[Abstract] Objective To investigate the expression and clinical significance of EGFR and VEGF in triple negative breast cancer. Methods A total of 52 cases of triple-negative breast cancer specimen surgically resected in our hospital from January 2014 to December 2016 were selected as the observation group， and 50 cases of non-special type breast invasive ductal carcinoma specimen surgically resected in our hospital in the same period were chosen as the control group. The positive rates of EGFR and VEGF in the two groups were detected. The relationship between the age， clinical stage， lymph node metastasis， tumor size and the positive rate of EGFR and VEGF was analyzed in triple negative breast cancer patients. Results The positive rate of VEGF and the positive rate of EGFR in the observation group were significantly higher than those in the control group（P<0.05）. There was no significant difference in EGFR positive rate among triple negative breast cancer tissues with different age and tumor diameter and between tissues with or without lymph node metastasis（P>0.05）. The positive rate of EGFR in clinical stage Ⅲ-Ⅳ was significantly higher than that in stage Ⅰ-Ⅱ， and the difference was statistically significant（P<0.05）. There was no significant difference in the positive rate of VEGF between triple-negative breast cancers with different age， tumor diameter and clinical stage（P>0.05）. The positive rate of VEGF in patients with lymph node metastasis was significantly higher than that in patients without lymph node metastasis， and the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The positive expression rate of EGFR and VEGF in triple negative breast cancer tissue is increased and closely related to the development of tumor.

[Key words] Epidermal growth factor receptor； Vascular endothelial growth factor； Triple-negative breast cancer； Expression

三陰性乳腺癌是指癌組織免疫組織化學(xué)檢查結(jié)果為雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）和原癌基因Her-2均為陰性的乳腺癌，占所有乳腺癌病理類型的10.0%～20.8%，具有特殊的生物學(xué)行為和臨床病理特征，預(yù)后較其他類型差[1，2]。表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）是表皮生長因子受體（HER）家族成員之一，該家族包括HER1（erbB1，EGFR）、HER2（erbB2，NEU）、HER3（erbB3）及HER4（erbB4）。HER家族在細(xì)胞生理過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用[3，4]。血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是最有效的促血管生長因子，在腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過程中發(fā)揮重要的作用[5，6]。本研究分析三陰性乳腺癌中EGFR和VEGF的表達(dá)水平及其在三陰性乳腺癌發(fā)生及發(fā)展中的意義?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年1月～2016年12月在我院手術(shù)切除的乳腺癌標(biāo)本52例為觀察組，重新進(jìn)行ER、PR以及C-erbB2免疫組化染色，證實(shí)為三陰性乳腺癌。另選擇同期在我院手術(shù)治療的非特殊類型乳腺浸潤性導(dǎo)管癌標(biāo)本50例為對(duì)照組。所有患者均為女性，年齡21～75歲，術(shù)前均未進(jìn)行放療或化療治療。觀察組平均年齡（54.1±11.3）歲，對(duì)照組平均年齡（53.8±10.8）歲。兩組患者平均年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 研究方法

標(biāo)本福爾馬林固定，石蠟包埋，HE染色，免疫組化SP法染色，已知陽性片作為陽性對(duì)照，磷酸鹽緩沖液做陰性對(duì)照。EGFR濃縮型多克隆抗體，Zymed公司提供；VEGF鼠抗人單克隆抗體由北京中杉生物科技有限公司提供。所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。VEGF陽性染色定位在細(xì)胞漿，可見棕黃色顆粒，陽性細(xì)胞<30%為陰性，≥30%為陽性。EGFR陽性染色定位在細(xì)胞膜，陽性細(xì)胞數(shù)>1%為陽性。

1.3分析方法

比較觀察組與對(duì)照組VEGF與EGFR陽性率。記錄患者一般資料及臨床資料，包括年齡、腫瘤直徑、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期等，分析不同年齡、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期VEGF與EGFR陽性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組VEGF與EGFR陽性率比較

觀察組VEGF陽性率以及EGFR陽性率均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2三陰性乳腺癌患者不同年齡、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期的EGFR陽性率比較

三陰性乳腺癌組織中EGFR陽性率在不同年齡、腫瘤直徑、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；臨床分期為Ⅲ-Ⅳ期的EGFR陽性率顯著高于Ⅰ-Ⅱ期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 三陰性乳腺癌患者不同年齡、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期的VEGF陽性率比較

三陰性乳腺癌組織中VEGF陽性率在不同年齡、腫瘤直徑、臨床分期的比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的VEGF陽性率顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

3討論

乳腺癌是一種異質(zhì)性腫瘤，包含多種生物學(xué)行為，臨床病例特點(diǎn)與分子特征各不相同，其對(duì)治療的反應(yīng)及預(yù)后也明顯不同。近年來隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展以及在乳腺癌研究中的應(yīng)用，越來越多的能夠評(píng)估預(yù)后、提供治療靶點(diǎn)的標(biāo)記物被鑒定，例如雌激素受體（Estrogen receptor，ER）、孕激素受體（Progesterone receptor，PR）、人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor-2，Her-2），其已經(jīng)成為乳腺癌病理檢查的常規(guī)項(xiàng)目，并廣泛用于指導(dǎo)臨床治療。三陰性乳腺癌是指ER、PR以及HER-2均為陰性的乳腺癌，是一種特殊類型的乳腺癌亞型，具有特殊的生物學(xué)行為及臨床病理特征，目前尚無針對(duì)性的治療指南，預(yù)后也較其他類型乳腺癌差，因而引起了國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注，是近幾年乳腺癌研究的熱點(diǎn)之一。目前研究顯示三陰性乳腺癌有六種表型：基底細(xì)胞樣型1，基底細(xì)胞樣型2，免疫調(diào)節(jié)型，間質(zhì)型，間質(zhì)干細(xì)胞型，官腔雄激素樣型。三陰性乳腺癌常見于較為年輕的患者，多有乳腺癌家族史，臨床腫塊相對(duì)較大，腫瘤分期偏晚，容易復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，侵襲性明顯[7，8]。其與其他類型乳腺癌比較，總生存率、無病生存期最差，腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率低，但肺部轉(zhuǎn)移發(fā)生早；與骨轉(zhuǎn)移比較，內(nèi)臟轉(zhuǎn)移率高，腦轉(zhuǎn)移率也高；局部復(fù)發(fā)率較高，復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)多發(fā)生在治療后1～3年內(nèi)；多數(shù)患者在5年內(nèi)死亡[9，10]。最常見的組織病理學(xué)類型為浸潤性導(dǎo)管癌以及生化性癌；多為低分化、高增殖活性、高組織學(xué)分級(jí)，腫瘤直徑較大，腫瘤中心膠原化瘢痕，伴緞帶樣結(jié)構(gòu)及地圖樣壞死，有不同程度的淋巴細(xì)胞浸潤。

表皮生長因子受體具有酪氨酸激酶活性，是一種膜表面?zhèn)鞲衅?，在人表皮?xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞上廣泛存在，在多種人類惡性腫瘤中高表達(dá)。其介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)包括增殖、遷移、細(xì)胞分化、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定等多向性，與細(xì)胞再生、惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[11，12]。表皮生長因子受體是原癌基因C-erbB-1的表達(dá)產(chǎn)物，包括4個(gè)成員，均在細(xì)胞膜定位，廣泛分布在哺乳動(dòng)物的上皮細(xì)胞。表皮生長因子受體共有6種配體，是表皮生長因子，轉(zhuǎn)化生長因子α以及ampjireguin的唯一的受體，也是BCT、HBEGF以及EPR的受體之一。EGFR與配體的結(jié)合具有高親和性、可飽和性以及特異性。表皮生長因子是一種多功能生長因子，通過與受體結(jié)合，在體內(nèi)體外都對(duì)多種組織細(xì)胞具有誘導(dǎo)細(xì)胞生長、遷移，促使分化基因表達(dá)的作用，從而發(fā)揮維持上皮細(xì)胞正常新陳代謝的作用[13]。EGFR與配體結(jié)合后受體形成同源二聚體，或者與其他酪氨酸激酶受體形成二聚體，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶區(qū)激活，結(jié)合ATP分子，二聚體發(fā)生自磷酸化或者轉(zhuǎn)磷酸化，使6個(gè)特異的受體酪氨酸殘基磷酸化，識(shí)別SH2蛋白底物，將信號(hào)向細(xì)胞內(nèi)傳遞，啟動(dòng)一系列的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，將信號(hào)傳遞至細(xì)胞核，激活增殖，增強(qiáng)細(xì)胞移動(dòng)性。已經(jīng)有大量的研究顯示EGFR參與了惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過程。研究顯示，EGFR及其配體表達(dá)失調(diào)所導(dǎo)致的異常EGFR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與腫瘤的發(fā)生具有密切的關(guān)系。并且EGFR高表達(dá)與患者的生存時(shí)間縮短有關(guān)。EGFR高表達(dá)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、血管生成、腫瘤細(xì)胞粘附、侵襲以及轉(zhuǎn)移，抑制腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡。因EGFR及其配體在多種腫瘤發(fā)生發(fā)展中的重要作用，將其作為腫瘤治療靶點(diǎn)成為近年來的研究熱點(diǎn)。在本次研究中，三陰性乳腺癌組織中EGFR的陽性率顯著高于非特殊類型乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織，并且臨床分期越晚，其表達(dá)水平越高。這提示EGFR與三陰性乳腺癌的發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)。血管內(nèi)皮生長因子又成為血管通透性因子或者促血管素，其增加微血管、小靜脈血管的通透性，作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖。血管內(nèi)皮生長因子的結(jié)構(gòu)高度保守。血管內(nèi)皮細(xì)胞上廣泛分布著兩種特異性的血管內(nèi)皮生長因子結(jié)合位點(diǎn)。含激酶插入?yún)^(qū)受體與frns樣酪氨酸激酶-1是血管內(nèi)皮生長因子的特異性受體，只存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞中，為膜受體類，同屬于受體酪氨酸激酶，與配體結(jié)合后，形成二聚體，引發(fā)一系列的磷酸化反應(yīng)。血管內(nèi)皮生長因子在正常組織中廣泛分布。研究證實(shí)，在諸多腫瘤組織中血管內(nèi)皮生長因子呈高表達(dá)[14，15]。血管內(nèi)皮生長因子參與了腫瘤生長過程中的血管形成過程，對(duì)腫瘤的發(fā)展以及轉(zhuǎn)移都具有重要的意義。在本次研究中，三陰性乳腺癌組織中血管內(nèi)皮生長因子陽性率顯著高于非特殊類型乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織，并且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者水平越高，這提示血管內(nèi)皮生長因子，與三陰性乳腺癌的發(fā)生及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。因此EGFR與VEGF有望成為治療三陰性乳腺癌的新靶點(diǎn)。

綜上所述，三陰性乳腺癌組織中EGFR與VEGF陽性表達(dá)率增加，與腫瘤的發(fā)展密切相關(guān)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 洪進(jìn)，陳小松，吳佳毅，等.三陰性乳腺癌輔助化療決策的影響因素分析[J]. 中華腫瘤雜志，2017，39（1）：39-43.

[2] 田新慶，王文珍，王小娜.吉西他濱聯(lián)合順鉑治療三陰性晚期乳腺癌的療效觀察[J].腫瘤研究與臨床，2015， 30（1）：57-59.

[3] 張連美，仲紀(jì)祥，孫蘇安，等. EGFR、ALK和Ki-67在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及相關(guān)性分析[J]. 臨床肺科雜志，2017，22（1）：4-7.

[4] 曾珠，吳一龍.EML4-ALK與EGFR基因突變共存型非小細(xì)胞肺癌研究進(jìn)展[J].中國肺癌雜志，2011， 14（11）：880-884.

[5] 吳濤，徐亮，楊志惠.結(jié)直腸癌中CEACAM1、VEGF的表達(dá)及與血管生成的關(guān)系和意義[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2016，25（33）：3666-3669.

[6] 田建虎，胡江，宋曉彪，等.CD105和血管內(nèi)皮生長因子-C在結(jié)腸癌中的表達(dá)及臨床意義[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2016，32（9）：18-20.

[7] 朱德淼，李錦成.TP 新輔助方案治療三陰性乳腺癌療效的臨床研究[J].醫(yī)學(xué)與哲學(xué)：臨床決策論壇版，2015，36（4）：31-33.

[8] 劉娜，馬天江，支衛(wèi)國，等.吉西他濱聯(lián)合順鉑治療三陰性晚期乳腺癌的臨床觀察[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2015，23（16）：2308-2310.

[9] 張文霞，張一卓，鄒富琴.三陰和非三陰性乳腺癌吉西他濱聯(lián)合順鉑治療對(duì)照研究[J].中華腫瘤防治雜志，2013， 20（22）：1751-1754.

[10] 張明，高嫦娥，鄒天寧，等.不同新輔助化療方案對(duì)三陰性乳腺癌治療療效臨床分析[J].昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015， 36（1）：65-68.

[11] 吳霞，李代強(qiáng).ALK和EGFR蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及意義[J].國際病理科學(xué)與臨床雜志，2013，33（2）：120-123.

[12] 王杰，衣素琴，王歡，等.非小細(xì)胞肺癌中c-Met、EGFR、K-Ras和EML4-ALK基因的檢測(cè)分析[J].臨床腫瘤學(xué)雜志，2015，20（10）：902-908.

[13] Keedy VL，Temin S，Somerfield MR，et al. American society of clinical oncol-ogy provisional clinical opinion：Epidermal growth factor receptor（EGFR）mutation testing for patients with advanced non-small-cell lung cancer considering first-line EGFR tyrosine kinase inhibitor therapy[J]. J Clin Oncol，2011，29（15）：2121-2127.

[14] 丁紅玲.硒對(duì)肝癌細(xì)胞的生長抑制及VEGF表達(dá)實(shí)驗(yàn)研究[J].中國地方病防治雜志，2016，31（9）：1051-1052.

[15] 王智勇，袁嫻，宋敏.砷化物聯(lián)合吉西他濱對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞COX-2、VEGF表達(dá)的影響[J].中國地方病防治雜志，2016，31（9）：978.

（收稿日期：2017-04-06）