血清雙調(diào)蛋白、轉(zhuǎn)化生長因子-α預(yù)測晚期非小細(xì)胞肺癌表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑治療效果的價值

張競競 王 秀 韓 嘯 韓正全 王子安

(蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，安徽 蚌埠 233003)

血清雙調(diào)蛋白、轉(zhuǎn)化生長因子-α預(yù)測晚期非小細(xì)胞肺癌表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑治療效果的價值

張競競 王 秀 韓 嘯 韓正全 王子安

(蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，安徽 蚌埠 233003)

目的 探討治療前血清雙調(diào)蛋白(AR)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-α對晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者接受表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKIs)治療療效的預(yù)測價值。方法 ELISA法檢測30例接受EGFR-TKIs治療的晚期NSCLC患者化療前血清AR和TGF-α的水平，根據(jù)實體瘤療效評價標(biāo)準(zhǔn)1.1版(RICIST 1.1)評價近期療效，比較分析血清AR和TGF-α與近期療效之間的關(guān)系。結(jié)果 全組30例患者的有效率(RR)為33.3%，疾病控制率(DCR)為56.7%，AR濃度為(85.74±84.63)pg/ml，TGF-α濃度為(14.56±11.02)pg/ml。AR陽性與臨床分期及病理類型相關(guān)，ⅢB期和鱗癌患者的AR明顯高于Ⅳ期和腺癌的患者；TGF-α陽性則與吸煙史和腺癌相關(guān)。AR或TGF-α陽性與療效差相關(guān)，AR和TGF-α均陰性的患者，EGFR-TKIs療效更好。結(jié)論 治療前AR、TGF-α可單獨或聯(lián)合用來預(yù)測晚期NSCLC接受EGFR-TKIs治療的療效。

雙調(diào)蛋白(AR)；轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-α；表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKIs)

大多數(shù)非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者在確診時已為晚期，失去根治手術(shù)的機(jī)會，第3代化療藥物與鉑類聯(lián)合的一線治療有效率約25%～35%，僅能增加3個月左右的中位生存期。分子靶向藥物因其靶點較明確，特異性強(qiáng)，而成為近年來的研究熱點。表皮生長因子受體(EGFR)是具有配體依賴性的酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白家族，其在40%～80%的NSCLC中過度表達(dá)〔1〕。近90%的EGFR突變集中于19外顯子的缺失突變和21外顯子點突變，這種突變使得腫瘤對酪氨酸激酶抑制劑(TKIs)高度敏感。然而，在不經(jīng)選擇的NSCLC患者中應(yīng)用EGFR-TKIs，其有效率只在30%以下〔2〕。如何有針對性地選擇對EGFR-TKIs治療有效的患者顯得尤為重要。雙調(diào)蛋白(AR)和轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-α是天然的EGFR的配體，通過自分泌的形式促進(jìn)腫瘤生長，并在多種腫瘤組織中過度表達(dá)〔3,4〕。Kakiuchi等〔5〕應(yīng)用 cDNA 微陣列技術(shù)檢測晚期NSCLC患者的基因表達(dá)圖譜，確定了數(shù)十個與EGFR-TKIs治療敏感性相關(guān)的基因，其中AR和TGF-α在對EGFR-TKIs耐藥的組織中過度表達(dá)，而在對EGFR-TKIs治療有效的腫瘤組織中卻很難檢測到。亦有研究表明，AR的過度表達(dá)與NSCLC患者生存期縮短有關(guān)〔6〕。本研究擬通過檢測晚期NSCLC患者治療前血清AR和TGF-α水平，分析其與EGFR-TKIs療效之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年2月至2014年12月蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院收治的ⅢB/Ⅳ期NSCLC患者符合標(biāo)準(zhǔn)30例。男19例，女11例；年齡30～78歲，其中<60歲17例，≥60歲13例；腺癌18例，鱗癌12例；ⅢB期6例，Ⅳ期24例；吸煙者17例，不吸煙者13例；PS評分0～1分23例，2分7例；EGFR-TKIs作為一線治療的10例，二線及以上者20例。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理組織學(xué)證實的ⅢB期或Ⅳ期NSCLC患者；②經(jīng)CT或磁共振成像(MRI)證實，至少有一個符合實體瘤的療效評價標(biāo)準(zhǔn)1.1(RECIST 1.1)的可測量病灶；③PS評分≤2分；④一線或二線及以上接受吉非替尼或厄洛替尼單藥治療30 d以上；⑤無EGFR-TKIs治療禁忌證；⑥患者簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①入組前30 d內(nèi)接受過放療或抗腫瘤治療；②研究過程中可能需要接受其他抗腫瘤治療者。

1.3 研究方法

1.3.1 EGFR-TKIs治療 患者口服吉非替尼(250 mg，1次/d)或厄洛替尼(150 mg，1次/d)，直至疾病進(jìn)展或出現(xiàn)不可耐受的毒性。

1.3.2 血清AR和TGF-α檢測 于治療前1 w內(nèi)抽取患者清晨空腹靜脈血約3 ml，離心后留取血清凍存。酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測血清AR和TGF-α濃度。

1.4 評價近期療效 服藥30 d后進(jìn)行影像學(xué)檢查，根據(jù)RECIST 1.1評價近期療效，分為完全緩解(CR)；部分緩解(PR)；疾病穩(wěn)定(SD)；疾病進(jìn)展(PD)。以CR+PR計算有效率(RR)，以CR+PR+SD計算疾病控制率(DCR)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行Spearman等級秩相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 近期療效 全組30例患者CR 0例，PR 10例，SD 7例，PD 13例，RR為33.3%，DCR為56.7%。不同臨床病理特征組間DCR比較結(jié)果顯示不吸煙患者的DCR明顯優(yōu)于吸煙患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而其他各組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2 治療前血清AR和TGF-α與臨床病理特征的關(guān)系 ELISA法檢測結(jié)果顯示，EGFR-TKIs治療前30例患者的AR濃度為(85.74±84.63)pg/ml，TGF-α的濃度為(14.56±11.02)pg/ml。將AR和TGF-α濃度>85.74 pg/ml 和>14.56 pg/ml定義為陽性。治療前患者血清AR水平與疾病分期及病理類型顯著相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而與患者的年齡、性別、吸煙狀況、PS評分等無關(guān)。TGF-α在腺癌和吸煙的患者中陽性率高于鱗癌和不吸煙患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而與患者的年齡、性別、分期、PS評分等無關(guān)。見表2。

表1 EGFR-TKIs近期療效與臨床病理特征之間的關(guān)系〔n(%)〕

表2 治療前血清AR和TGF-α與臨床病理特征的關(guān)系(n)

2.3 血清AR和TGF-α水平與EGFR-TKIs治療療效的關(guān)系 AR與EGFR-TKIs治療療效間有相關(guān)性(r=0.551，P<0.05)，提示AR值越高患者療效越差，AR值越低EGFR-TKIs治療的療效越好。TGF-α與EGFR-TKIs治療療效間有相關(guān)性(r=0.573，P<0.05)，提示TGF-α值越高患者療效越差，TGF-α值越低EGFR-TKIs治療的療效越好。

2.4 AR和TGF-α聯(lián)合檢測與EGFR-TKIs治療療效的關(guān)系 AR 陽性/TGF-α 陽性組中，PR 0例，SD 1例，PD 4例；AR陽性/TGF-α 陰性組中，PR 1例，SD 0例，PD 3例；AR陰性/TGF-α 陽性組中，PR 1例，SD 0例，PD 4例；AR 陰性/TGF-α 陰性組中，PR 8例，SD 6例，PD 2例。AR 陰性/TGF-α 陰性組的有效率與其他三組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示AR 和TGF-α 同時陰性時，療效最好。

3 討 論

近年來，肺癌的分子靶向治療研究進(jìn)展迅速，無論在臨床試驗還是實際應(yīng)用中均取得了不錯的療效。肺癌分子靶向治療常用的治療靶點有：細(xì)胞受體、信號傳導(dǎo)和抗血管生成等，其中EGFR是目前最為主要的靶點。吉非替尼和厄洛替尼即是針對此靶點的，它們都屬于EGFR-TKIs，該類藥物通過抑制腫瘤發(fā)生、發(fā)展中必需的表皮生長因子受體酪氨酸激酶的活性而阻斷腫瘤細(xì)胞的信號傳導(dǎo)，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移、血管生成，并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡〔7〕。NCCN指南推薦非鱗型NSCLC患者常規(guī)檢測EGFR，根據(jù)EGFR突變情況一線選擇EGFR-TKIs治療。目前常通過PCR、免疫組化、DNA測序等方法〔8〕，分析腫瘤組織中EGFR基因突變或蛋白表達(dá)，并據(jù)此預(yù)測患者對EGFR-TKIs治療的反應(yīng)和臨床獲益。

EGF及其受體是一個大家族，EGF家族成員主要包括：AR、TGF-α及肝素結(jié)合表皮生長因子(HB-EGF)等。AR和TGF-α作為EGFR的配體，在多種腫瘤細(xì)胞及惡性人上皮細(xì)胞中表達(dá)，其表達(dá)與多種惡性腫瘤的不良預(yù)后因素相關(guān)〔4,9〕。在NSCLC中，AR和TGF-α的過表達(dá)與吸煙、非腺癌相關(guān)〔10〕。本研究顯示，AR陽性與臨床分期及病理類型相關(guān)，ⅢB期和鱗癌患者的AR明顯高于Ⅳ期和腺癌的患者；TGF-α陽性則與吸煙史和腺癌相關(guān)。結(jié)果的誤差可能與樣本量小有關(guān)。

多個研究結(jié)果認(rèn)為AR過表達(dá)與EGFR-TKIs療效差有關(guān)〔11,12〕。本研究發(fā)現(xiàn)，EGFR-TKIs治療前AR和(或)TGF-α越高，療效越差；而AR和(或)TGF-α越低，療效越好。進(jìn)展的13例患者中，AR陽性的7例，占53.8%，TGF-α陽性的8例，占61.5%，與文獻(xiàn)報道的結(jié)果相似〔11,12〕。

根據(jù)EGFR突變狀態(tài)選擇合適的NSCLC患者接受EGFR-TKIs治療是普遍的治療模式，晚期NSCLC患者大多失去手術(shù)機(jī)會，患者常很難耐受侵入性的內(nèi)鏡檢查以獲得足夠數(shù)量的腫瘤組織來供基因檢測。本研究利用外周血檢測AR和TGF-α，結(jié)果顯示治療前AR和TGF-α水平與EGFR-TKIs的療效有關(guān)。AR和TGF-α均陰性的患者，EGFR-TKIs療效較好；AR和TGF-α均陽性的患者，則考慮需要更換其他藥物。外周血AR和TGF-α檢測，安全性好、創(chuàng)傷小、可重復(fù)性及可行性高，對預(yù)測EGFR-TKIs的療效有很好的臨床價值。當(dāng)然，本研究的樣本量有限，還需要更大的樣本量來進(jìn)一步證實。

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2 Hirsch FR,Varella-Garcia M,Cappuzzo F,etal.Combination of EGFR gene copy number and protein expression predicts outcome for advanced non-small-cell lung cancer patients treated with gefitinib〔J〕.Ann Oncol,2007;18(4):752-60.

3 Zhou Y,Lee JY,Lee CM,etal.Amphiregulin,an epidermal growth factor receptor ligand,plays an essential role in the pathogenesis of transforming growth factor-β-induced pulmonary fibrosis〔J〕.J Biol Chem,2012;287(50):41991-2000.

4 Hobor S,Van Emburgh BO,Crowley E,etal.TGF α and amphiregulin paracrine network promotes resistance to EGFR blockade in colorectal cancer cells〔J〕.Clin Cancer Res,2014;20(24):6429-38.

5 Kakiuchi S,Daigo Y,Ishikawa N,etal.Prediction of sensitivity of advanced non-small cell lung cancers to gefitinib(Iressa,ZD1839)〔J〕.Hum Mol Genet,2004;13(24):3029-43.

6 Shash E,Peccatori FA,Azim HA Jr.Optimizing the use of epidermal growth factor receptor inhibitors in advanced non-small-lung cancer(NSCLC)〔J〕.J Thorac Dis,2011;3(1):57-64.

7 Lin Y,Wang X,Jin H.EGFR-TKI resistance in NSCLC patients:mechanisms and strategies〔J〕.Am J Cancer Res,2014;4(5):411-35.

8 韓 宇,徐建明,段海清,等.EGFR基因突變及HER2/HER3蛋白表達(dá)水平與吉非替尼治療晚期非小細(xì)胞肺癌療效的關(guān)系〔J〕.癌癥,2010;29(1):69-75.

9 So WK,Fan Q,Lau MT,etal.Amphiregulin induces human ovarian cancer cell invasion by down-regulating E-cadherin expression〔J〕.FEBS Lett,2014;588(21):3998-4007.

10 Busser B,Coll JL,Hurbin A.The increasing role of amphiregulin in non-small cell lung cancer〔J〕.Pathol Biol(Paris),2009;57(7-8):511-2.

11 Masago K,Fujita S,Hatachi Y,etal.Clinical significance of pretreatment serum amphiregulin and transforming growth factor-alpha,and an epidermal growth factor receptor somatic mutation in patients with advanced non-squamous,non-small cell lung cancer〔J〕.Cancer Sci,2008;99(11):2295-301.

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〔2015-12-30修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

蚌埠醫(yī)學(xué)院自然科學(xué)項目(by0914)

王子安(1960-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤學(xué)研究。

張競競(1981-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤學(xué)研究。

R734.2

A

1005-9202(2017)10-2462-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.10.051