不同廠家豬O型口蹄疫合成肽苗免疫效果分析

肖翠娥+彭鵬++胡時均

摘 要：為分析A、B、C 3個廠家O型口蹄疫合成肽苗的免疫效果，將80頭蘇太雜交仔豬隨機(jī)分成4組，I組為空白對照，II～I(xiàn)V組按廠家推薦劑量分別肌肉注射3種不同的O型口蹄疫合成肽苗，每組編號為1～10的供試豬45日齡免疫一次，編號為11～20的供試豬45日齡和73日齡分別免疫一次。結(jié)果表明，3個廠家合成肽苗免疫副反應(yīng)均較小；3種合成肽苗抗體合格率二免較一免均無顯著差異（P>0.05），但B、C廠家合成肽苗可使機(jī)體在短時間內(nèi)獲得較高水平的抗體滴度，且維持時間較長。

關(guān)鍵詞：豬；O型口蹄疫；合成肽苗；抗體

中圖分類號 S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2017）10-0133-02

豬口蹄疫是目前危害養(yǎng)豬業(yè)較為嚴(yán)重的一種烈性傳染病。近年來，我國口蹄疫推行強(qiáng)制免疫制度，但由于免疫效果并不理想，應(yīng)激反應(yīng)大，導(dǎo)致重復(fù)加強(qiáng)免疫，工作量大，養(yǎng)殖戶積極性不高，使得推行口蹄疫免疫遇到了一定困難。為此，本研究對當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖戶常用的O型口蹄疫合成肽苗進(jìn)行免疫效果評估，以期從中篩選出一種或多種免疫副反應(yīng)小、免疫抗體效價高的疫苗，為O型口蹄疫防控提供科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料 A廠家豬O型口蹄疫合成肽苗、B廠家豬O型口蹄疫合成肽苗、C廠家豬O型口蹄疫合成肽苗。VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測試劑盒（上海優(yōu)耐特，批號：201604001）、口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體檢測試劑盒（蘭州獸醫(yī)研究所，批號：2016012031）。注射器、保定繩索、采血管、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、單多道移液器、80頭蘇太雜交仔豬。

1.2 方法

1.2.1 供試豬分組 80頭仔豬隨機(jī)分成4組，每組20頭，組編號分別為I、II、III、IV。所有供試豬統(tǒng)一飼養(yǎng)管理，禁用免疫抑制和免疫增強(qiáng)類藥物。

1.2.2 供試豬免疫 為減少免疫抑制對實驗的干擾，所有供試豬28日齡免疫高致病性豬藍(lán)耳病疫苗，35日齡免疫豬圓環(huán)病毒疫苗。I組為空白對照，II～I(xiàn)V組按廠家推薦劑量分別肌肉注射3種不同的O型口蹄疫合成肽苗，每組編號為1～10的供試豬免疫1次（45日齡免疫一次，簡稱一免），編號為11～20的供試豬免疫2次（45日齡首免，73日齡再次免疫，簡稱二免）。

1.2.3 供試豬的抗體效價檢測 45日齡、73日齡、101日齡、129日齡、157日齡分別采血。先用口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測試劑盒對血樣進(jìn)行檢測，如口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測呈陽性，則說明該供試豬已感染口蹄疫，該血樣予以排除，然后用相應(yīng)試劑盒檢測陰性血樣的抗體效價。供試豬免疫O型口蹄疫合成肽苗后7d內(nèi)連續(xù)觀察豬只出現(xiàn)的不良反應(yīng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同廠家O型口蹄疫合成肽苗免疫副反應(yīng)情況 由表1可知，B廠家合成肽苗對豬只未產(chǎn)生副反應(yīng)，A、C廠家合成肽苗雖對豬只產(chǎn)生副反應(yīng)（10.00%、13.33%），但與B廠家合成肽苗無顯著差異（P>0.05）。從一免和二免來看，C廠家合成肽苗二免較一免的副反應(yīng)率顯著升高（P<0.05），其他廠家合成肽苗一免和二免的副反應(yīng)率無顯著（表1）。

2.2 不同廠家O型口蹄疫合成肽苗免疫抗體檢測情況 45日齡抗體檢測結(jié)果顯示，供試豬均存在一定滴度的母源抗體，除B廠家合成肽苗二免實驗組的母源抗體平均滴度略高于陽性臨界值，其他各組均低于陽性臨界值。從一免來看，A、B、C三廠家合成肽苗抗體平均滴度均隨供試豬日齡呈增長態(tài)勢，并于157日齡達(dá)到峰值（表2）。B、C兩廠家合成肽苗一免后各階段抗體合率均維持在80%以上，A廠家合成肽苗一免后抗體滴度雖呈增長趨勢，但73日齡抗體合格率僅50%，直到101日齡抗體合格率才達(dá)到 90%，那么45～101日齡期間可能存在免疫保護(hù)率不高的問題。從二免來看，A、B、C三廠家合成肽苗抗體平均滴度均隨供試豬日齡呈增長態(tài)勢，并于157日齡達(dá)到峰值。3種合成肽苗二免較一免抗體平均滴度均有所升高，其中A、B兩廠家合成肽苗二免較一免抗體平均滴度顯著升高（P<0.05），但3種合成肽苗抗體合格率二免較一免均無顯著差異（P>0.05）。

3 討論

試驗過程中，A、C兩廠家合成肽苗對少數(shù)供試豬產(chǎn)生了諸如短時間發(fā)熱和減料等輕微副反應(yīng)[1]，但副反應(yīng)均在短時間內(nèi)消除，且三廠家合成肽苗副反應(yīng)率無顯著差異，這說明3種合成肽苗用于豬口蹄疫預(yù)防免疫是相對安全、穩(wěn)定的。

三廠家合成肽苗在一免或二免后，抗體滴度均隨供試豬日齡呈增長態(tài)勢，B、C兩廠家合成肽苗一免和二免兩種免疫程序均能達(dá)到較為理想的免疫效果，但從經(jīng)濟(jì)和勞動強(qiáng)度角度出發(fā)，進(jìn)行一免即可。A廠家合成肽苗雖101日齡以后能達(dá)到較高的抗體滴度和抗體合格率，但前期抗體平均滴度和抗體合格率均不高，存在感染O型口蹄疫病毒的風(fēng)險。

試驗過程中，筆者發(fā)現(xiàn)無論是一免或二免后，抗體滴度隨供試豬日齡呈緩慢增長，直至整個試驗結(jié)束，這似乎不符合抗體動態(tài)變化的規(guī)律[2]，可能原因，一是母源抗體的影響，但許多研究已表明，母源抗體的半衰期為20d左右，而本實驗45日齡開始接種，同時檢測結(jié)果也表明供試豬45日齡的母源抗體水平都不是很高；另一個原因可能是供試豬患有免疫抑制性疫病，影響了機(jī)體的免疫應(yīng)答，個別疫苗的效果不佳可能與此有關(guān)。

參考文獻(xiàn)

[1]朱玉華，陳亮.生豬注射口蹄疫滅火苗引起免疫應(yīng)激的防治[J].安徽農(nóng)學(xué)通報，2007，13（18）：223.

[2]司興奎，羅汝灶，戴宜發(fā)，等.豬O型合成肽與油乳滅活疫苗免疫后抗體水平的比較[J].中國獸醫(yī)雜志，2010，46（5）：6-9.

（責(zé)編：張宏民）