免疫組化法和qPCR技術(shù)檢測FBP1在結(jié)直腸腺癌中的表達及臨床意義

劉家有，鄧世山，朱劍軍，侯令密，謝少利，黃波

( 1.川北醫(yī)學院人體解剖學教研室；2.川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院普外科；3.川北醫(yī)學院臨床技能培訓中心，四川 南充 637000)

免疫組化法和qPCR技術(shù)檢測FBP1在結(jié)直腸腺癌中的表達及臨床意義

劉家有1，鄧世山1，朱劍軍1，侯令密2，謝少利2，黃波3

( 1.川北醫(yī)學院人體解剖學教研室；2.川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院普外科；3.川北醫(yī)學院臨床技能培訓中心，四川 南充 637000)

目的：探討果糖-1，6-二磷酸酶1 (fructose-1，6-bisphosphatase 1,FBP1)基因在結(jié)直腸腺癌的表達水平及其與臨床病理特征的聯(lián)系。方法：qPCR技術(shù)檢測川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院2014年9月至2016年2月 新鮮結(jié)直腸腺癌組織及癌旁正常組織46 例中FBP1基因的表達水平。 免疫組化方法檢測川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院2015年7月至2016年6月結(jié)直腸腺癌及癌旁對照組織的蠟塊標本30例中FBP1的表達及分布情況。結(jié)果：qPCR技術(shù)檢測結(jié)果表明，F(xiàn)BP1 基因在結(jié)直腸腺癌組織中的表達水平低于在癌旁正常組織中的表達水平(t=2.934，P=0.006)；FBP1基因在結(jié)直腸腺癌組織中的表達水平隨著結(jié)直腸腺癌腫瘤的惡性程度的增加(F=13.267,P=0.000)、Duke’s 分期的增加(F=15.864,P=0.000)、遠處淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移(t=14.285,P=0.000)而降低；FBP1基因在男性患者的結(jié)直腸腺癌組織中的表達水平高于其在女性患者的表達水平，但差異無統(tǒng)計學意義(t=1.294,P=0.165)。 免疫組化結(jié)果顯示FBP1在結(jié)直腸腺癌組織中低表達甚至缺失，而在癌旁正常組織中高表達，二者差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=19.461,P=0.000)。結(jié)論：FBP1 基因及蛋白質(zhì)的低表達可能在結(jié)直腸腺癌的發(fā)生發(fā)展中有著重要的作用，是其潛在的治療靶標。

結(jié)直腸腺癌；果糖-1，6-二磷酸酶1；免疫組化法；qPCR

結(jié)直腸腺癌是消化道第二位的常見惡性腫瘤，位居癌癥死亡率第四位，嚴重威脅人類的健康[1]，探索與結(jié)直腸腺癌發(fā)病的相關(guān)基因，對結(jié)直腸腺癌的早期預防和診治具有重要意義。果糖-1，6-二磷酸酶1 (fructose-1，6-bisphosphatase 1,FBP1)是葡萄糖異生的關(guān)鍵酶之一，在機體內(nèi)源性葡萄糖的合成、輸出及調(diào)控中發(fā)揮重要作用[2]。研究發(fā)現(xiàn)FBP1與許多腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，如FBP1基因表達水平的降低或缺失導致腎透明細胞癌的惡性程度增加、患者的預后變差[3]；FBP1在乳腺癌中和在肝細胞癌中的表達水平也降低，且隨著惡性程度的增加而降低[4-5]。但在結(jié)直腸腺癌中FBP1基因的表達情況如何，目前尚未見相關(guān)文獻報道。本文通過免疫組化方法和qPCR技術(shù)檢測FBP1在結(jié)直腸腺癌中的表達情況，探討FBP1與臨床病理特征之間的關(guān)系，為結(jié)直腸腺癌早期診斷、治療及尋找潛在的靶標提供理論基礎(chǔ)。

1 材料及方法

1.1 研究對象

收集川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院2014年9月至2016年2月 新鮮結(jié)直腸腺癌(該診斷均經(jīng)病理證實)及對照癌旁正常組織(距腫瘤邊緣大于5 cm以上，病理未發(fā)現(xiàn)癌細胞)標本46例，年齡37～79歲，平均年齡57.5歲，中位年齡59歲。標本收集后立即置于液氮中速凍，及時提取組織總RNA并進行逆轉(zhuǎn)錄。收集川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院2015年7月至2016年6月結(jié)直腸腺癌及癌旁正常組織標本30例，年齡28～77歲，平均年齡56.8歲，中位年齡58歲。

1.2 主要試劑

Trizol試劑購自Ambion公司；Revert Aid first strand cDNA Synthesis Kit 反轉(zhuǎn)錄試劑盒購自Thermo Scientific公司；SYBR ?Premix ExTMTaq Ⅱ試 劑購 自TaKaRa 公司；瓊脂糖購自碧云天公司；Goldenview購自于碧云天公司；Marker Ⅰ 購自 Tiangen 公司；MS anti-FBP1 購自abcom 公司，Goat anti-MS購自abcom 公司，免疫組化(SP)試劑盒與DAB 顯色試劑盒均購自北京中杉金橋公司。

1.3 RNA 提取及反轉(zhuǎn)錄

取新鮮組織 50～80 mg， 液氮中研磨均勻成末， 按照Trizol說明書操作提取組織總RNA，按照 Revert Aid first strand cDNASynthesis Kit 反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書將細胞總RNA逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA。

1.4 qPCR引物設(shè)計

按照qPCR引物設(shè)計原則，運用 Primer 3.0 軟件設(shè)計引物，經(jīng)驗證成功設(shè)計的基因序列見表1。qPCR 反應條件：95 ℃預變性3 min， 94 ℃變性10 s，54 ℃退火10 s，72 ℃延伸10 s， 40個循環(huán)，每個循環(huán)結(jié)束后進行熒光信號收集。為判斷PCR產(chǎn)物的特異性，在擴增程序結(jié)束后，加設(shè)一個溶解程序，來形成熔解曲線， 溶解溫度設(shè)置為65～90 ℃,每0.5 ℃為一個梯度，進行熒光信號收集。每個樣本設(shè)置3個復孔，取Ct平均值進行計算。ΔCt=Ct FBP1-Ct GAPDH， ΔCt值越小說明該目的基因的表達量越高，反之亦然。2-ΔCt表示目的基因相對于內(nèi)參基因的表達量；本實驗用2-ΔCt來表示46個樣本中FBP1基因的表達量。

表1 qPCR引物(5’to 3’)

1.5 免疫組化檢測

所有蠟塊由川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院病理科代為切片，SP 法染色，按試劑盒說明書操作，其中 一抗和二抗的濃度均為1∶200 ，DAB 顯色，蘇木素復染。高倍鏡下選取 9個視野計數(shù)細胞，按著色深淺評分：無顯色0分，弱著色1分，中等著色2分和強著色3分。根據(jù)陽性細胞數(shù)占同類細胞數(shù)的百分比評分：<25%為1分，25%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分。取兩項評分的乘積作為總積分，>5分為高表達，≤4分則為低表達。以高表達判為陽性。

1.6 統(tǒng)計學分析

SPSS 19.0 軟件對數(shù)據(jù)進行分析。 卡方檢驗檢測FBP1蛋白在30例結(jié)直腸腺癌組織與對照癌旁組織中表達陽性率的差異；配對t檢驗檢測FBP1 基因在結(jié)直腸腺癌中與對照癌旁組織中表達水平的差異；獨立樣本t檢驗檢測FBP1 基因表達水平差異與結(jié)直腸腺癌患者的年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性；方差檢驗檢測FBP1表達水平差異與結(jié)直腸腺癌患者Duke’s 分期、腫瘤分化類型的相關(guān)性。P< 0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 FBP1蛋白在組織中的表達情況

免疫組化的結(jié)果(圖1)顯示，F(xiàn)BP1在結(jié)直腸細胞中主要分布于細胞核和細胞膜，其在30例癌旁正常組織中表達為陽性有25例，陽性表達率為83.33%；FBP1在30例結(jié)直腸腺癌組織中表達為陽性有8例，陽性表達率為26.67%(表2)?？ǚ綑z驗檢測結(jié)果顯示，二者陽性率表達差異有統(tǒng)計學意義(χ2=19.461,P=0.000)，這提示FBP1的低表達可能與結(jié)直腸腺癌的發(fā)生有關(guān)。

表2 FBP1在結(jié)直腸腺癌及癌旁正常組織中的表達情況

組別FBP1的表達陽性陰性總計陽性率(%)結(jié)直腸腺癌8223026．67癌旁正常組織2553083．33

2.2 qPCR結(jié)果與臨床病理特征

2.2.1 擴增曲線及溶解曲線 qPCR實驗結(jié)果顯示，內(nèi)參基因 GAPDH 及目的基因FBP1 的擴增曲線均有明顯的四個時期呈現(xiàn)為S型且Ct值均小于40，提示基因均得到擴增；陰性對照組(CN)Ct值0～40幾乎為一條直線，說明陰性對照組沒有擴增。擴增曲線符合實驗要求(圖2A、2B)。內(nèi)參基因 GAPDH 及目的基因FBP1 的溶解曲線均只有一個峰值，說明擴增產(chǎn)物是單一的，符合實驗的要求(圖2C、2D)。

2.2.2 qPCR 結(jié)果與臨床病理特征的關(guān)系 qPCR 實驗結(jié)果顯示，F(xiàn)BP1基因在結(jié)直腸腺癌組織的表達水平(0.257 5±0.035 7)低于其在癌旁正常組織中的表達水平(0.469 9±0.095 1)，配對t檢驗結(jié)果顯示二者的差異具有統(tǒng)計學意義(t=2.934，P=0.006)，提示FBP1低表達與結(jié)直腸腺癌的發(fā)生有關(guān)。 FBP1 基因在46 例結(jié)直腸腺癌組織中及癌旁正常組織中的表達水平見圖3；FBP1基因表達水平差異與患者的臨床病理特征之間的關(guān)系詳見表3。

通過檢測FBP1 基因在不同分化程度的結(jié)直腸腺癌組織中的表達水平發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)BP1在12例高分化結(jié)直腸腺癌組織中表達水平為(0.463±0.036)，在22例中分化結(jié)直腸腺癌組織中為(0.254±0.023)，在12例低分化結(jié)直腸腺癌組織中為(0.059±0.009)，且其表達水平差異有統(tǒng)計學意義(F=13.267,P=0.000) (圖4B)，提示FBP1 在結(jié)直腸腺癌組織中的表達水平隨著結(jié)直腸腺癌腫瘤惡性程度的增加而降低 。

FBP1 基因在不同Duke’s 分期的結(jié)直腸腺癌中的表達水平如下：Duke’s B 期(16例)中為(0.422±0.034)，Duke’s C 期(22例)中為(0.229±0.038)，Duke’s D 期(8例)中為(0.004±0.001)。方差檢驗的結(jié)果顯示，F(xiàn)BP1 在不同Duke’s 分期的結(jié)直腸腺癌中表達水平差異有統(tǒng)計學意義(F=15.864,P=0.000) (圖4C)， 提示FBP1 在結(jié)直腸腺癌組織中的表達水平隨著結(jié)直腸腺癌腫瘤Duke’s 分期的增加有逐漸降低的趨勢。

FBP1 基因在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移結(jié)直腸腺癌組織的表達水平低于其在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸腺癌組織中的表達水平[(0.004 5±0.000 4)VS(0.310 8±0.021 9)]，且差異有統(tǒng)計學意義(t=14.285,P=0.000)(圖4D)，提示FBP1 基因與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。

FBP1 基因與結(jié)直腸腺癌患者的年齡無相關(guān)性(t=0.622，P=0.547) ，同時，在男性患者的結(jié)直腸腺癌組織中FBP1 基因的表達水平有高于女性患者的趨勢[(0.309± 0.057)vs.(0.206±0.047)]，但其表達水平差異無統(tǒng)計學意義(t=1.483,P=0.165)(圖4A)。

表3 FBP1 基因的表達水平與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

因素FBP1上調(diào)下調(diào)性別 男814 女420年齡(歲) ≥601014 <60220Duke s分期 B412 C715 D17分化類型 高48 中616 低210淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 無1226 有08

3 討論

結(jié)直腸腺癌的早期不易診斷，確診時多伴有局部淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，導致大部分患者因之復發(fā)甚至死亡，嚴重威脅人類的健康。目前，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)部分基因與結(jié)直腸腺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，如Skep2、Cdc37、p53、HER-2、Ki-67、Cyclin E、P27kipl等基因[1,6-8]，但結(jié)直腸腺癌的發(fā)病機制仍有待闡明，因此，尋找與結(jié)直腸腺癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)靶基因具有重要的意義。

腫瘤代謝重組相關(guān)基因被認為是尋找新興腫瘤標志物[9]，腫瘤細胞以其糖代謝的改變尤為明顯，即由正常細胞的有氧氧化為主變?yōu)橐援a(chǎn)能效率較低的無氧糖酵解為主[4]。FBP1作為葡萄糖異生的限速酶之一，能夠?qū)⒐?1，6-二磷酸分解為6-磷酸果糖和磷酸，F(xiàn)BP1在機體葡萄糖的合成、輸出及調(diào)控中發(fā)揮重要作用[2]，F(xiàn)BP1基因的缺陷將導致果糖-1,6-二磷酸酶缺乏癥，患者表現(xiàn)為嚴重的低血糖、高乳酸血癥、代謝性酸中毒及酮癥等一系列癥狀，F(xiàn)BP1基因突變導致的表達降低在臨床病案中也陸續(xù)報道[10-11]。FBP1與許多腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

FBP1基因在超過600例腎透明細胞癌(ccRCC)患者中的表達水平均一致性的降低，在FBP1基因表達缺失的患者中，其腫瘤的惡性程度更高、預后更差，因此FBP1能抑制ccRCC的進展，其機制可能為FBP1抑制了腎小管上皮細胞(被認為是ccRCC的起源)中的糖酵解；其次，F(xiàn)BP1在缺乏VHL的ccRCC中具有的獨立催化活性，能夠直接作用于細胞核的缺氧誘導因子(HIF)功能區(qū)，從而抑制細胞的增值、糖酵解、磷酸戊糖途徑等[3]；臨床病理研究顯示，F(xiàn)BP1在ccRCC中的表達水平與患者的年齡、性別、T 分期、 Fuhrman 分級，以及HIF-2α和CA9的表達水平?jīng)]有相關(guān)性，但是與HIF-1α和促紅細胞生成素的表達水平顯著相關(guān)，這表明FBP1與缺氧相關(guān)基因的表達具有一定的關(guān)聯(lián)[12]。

研究表明FBP1在基底細胞樣乳腺癌(BLBC)細胞中低表達，F(xiàn)BP1表達的降低導致線粒體復合酶I的活性受抑，誘導糖酵解發(fā)生、葡萄糖攝取增加、M2型丙酮酸激酶形成、ATP在低氧條件下持續(xù)合成，這一系列的代謝重組使BLBC細胞具有干細胞的特點[4]。同時，F(xiàn)BP1與Wnt/β-catenin信號通路也有相關(guān)性，當FBP1高表達時Wnt/β-catenin信號通路的活性度較低；當FBP1低表達時Wnt/β-catenin信號通路的活性度較高，其下游的靶點c-myc和MMP7的表達水平也增高[13]。

FBP1基因在肝細胞癌(HCC)中低表達，且與腫瘤分期、總生存率、腫瘤復發(fā)率相關(guān)[5]，沉默F(xiàn)BP1基因后，能顯著促進HCC細胞集落的形成，提高肝癌細胞的遠處轉(zhuǎn)移和侵潤的能力；過表達FBP1基因后，HCC細胞的遠處轉(zhuǎn)移和侵潤能力受到抑制；Warburg效應特異性抑制劑FX11能夠降低FBP1基因缺失介導的HCC細胞遠處轉(zhuǎn)移和侵潤能力，這提示FBP1可能是HCC的一個抑癌基因[9]。FBP1基因在非小細胞肺癌和胰腺導管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)中的表達均降低，且與患者的不良預后相關(guān)，在PDAC中的機制可能為核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin 1，NPM1)通過抑制FBP1的表達從而促進PDAC的發(fā)生發(fā)展[14-15]。

但FBP1基因在結(jié)直腸腺癌組織中的表達情況如何，目前未見相關(guān)報道。本文通過免疫組化方法和qPCR技術(shù)探討FBP1在結(jié)直腸腺癌中的表達情況，及其與臨床病理特征之間的關(guān)系。免疫組化結(jié)果顯示，F(xiàn)BP1在結(jié)直腸腺癌中的表達水平明顯低于其在癌旁正組織中的表達水(P<0.05)，這與前期FBP1相關(guān)的報道結(jié)果相一致。FBP1在癌旁正常組織標本中有5例(總30例，16.67%)呈陰性表達，這可能是FBP1對腫瘤侵潤和遠處轉(zhuǎn)移能力的體現(xiàn)，其機制可能為腫瘤的代謝重組波及了周圍癌旁正常組織，使這5例癌旁正常組織有潛在的高癌變風險，導致其高復發(fā)率[5]，F(xiàn)BP1是否導致了結(jié)直腸腺癌復發(fā)率增高需要進一步的探討。

FBP1在8例(共30例，26.67%)結(jié)直腸腺癌組織標本中呈陽性表達，同時，qPCR技術(shù)檢測結(jié)果顯示，F(xiàn)BP1在12例(共46例，26.09%)結(jié)直腸腺癌組織中高表達，這可能與FBP1基因的突變相關(guān)。FBP1基因在食管鱗狀細胞癌中也表現(xiàn)為高表達，但是具體原因還不明確[16]；有關(guān)FBP1的基因突變導致其表達水平降低已有報道[10-11]，但是不排除新的FBP1突變類型，其并不影響抗原抗體反應進行(抗原決定簇和分子空間結(jié)構(gòu)未改變)，在代償性的高表達該基因之后而被檢測到，但是在結(jié)直腸腺癌在中是否存在新的突變有待進一步的驗證。

FBP1在結(jié)直腸腺癌中的表達水平隨著結(jié)直腸腺癌惡性程度、Duke’s分期、遠處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的增加呈逐漸降低的趨勢(P=0.000)，因此我們推測， FBP1的低表達可能與結(jié)直腸腺癌的分期分化、腫瘤的侵潤轉(zhuǎn)移有關(guān)。FBP1的低表達可能在結(jié)直腸腺癌的發(fā)生發(fā)展中有著重要作用，是結(jié)直腸腺癌治療的潛在靶標。

[1] 劉家有,熊東,王卓娜,等.Cdc37在結(jié)直腸腺癌中的表達及臨床意義的研究[J].實用腫瘤雜志,2014，29(5):436-440.

[2] 張曄.鋅指蛋白ZBTB20對胰島β細胞表達果糖-1,6-二磷酸酶FBP1和分泌胰島素的調(diào)節(jié)作用[D].上海：第二軍醫(yī)大學,2013.

[3] Li B,Qiu B,Lee DS,etal.Fructose-1,6-bisphosphatase opposes renal carcinoma progression[J].Nature,2014,513(7517):251-255.

[4] Dong C,Yuan T,Wu Y,etal.Loss of FBP1 by Snail-mediated repression provides metabolic advantages in basal-like breast cancer[J].Cancer Cell,2013,23(3):316-331.

[5] Hirata H,Sugimachi K,Komatsu H,etal.Decreased Expression of Fructose-1,6-bisphosphatase Associates with Glucose Metabolism and Tumor Progression in Hepatocellular Carcinoma[J].Cancer Res,2016,76(11):3265-3276.

[6] 董亮,錢震,施蓉蓉,等.結(jié)直腸腺癌組織中p53、HER-2和Ki-67的表達及其臨床病理意義[J].診斷病理學雜志,2015，22(1):19-22.

[7] 張庚,李偉,姜國勝.結(jié)腸鏡取組織聯(lián)合檢測Cyclin E、p27kipl和Ki67的表達在結(jié)直腸癌中的臨床意義[J].河北醫(yī)藥,2012，34(20):3077-3079.

[8] Bochis OV,Irimie A,Pichler M,etal.The role of Skp2 and its substrate CDKN1B (p27) in colorectal cancer[J].J Gastrointestin Liver Dis,2015,24(2):225-234.

[9] Yang J,Wang C,Zhao F,etal.Loss of FBP1 facilitates aggressive features of hepatocellular carcinoma cells through the Warburg effect[J].Carcinogenesis,2016，37 (3):280-289.

[10]徐可,劉雪芹,張春雨,等.果糖-1,6-二磷酸酶缺乏癥基因診斷1例[J].北京大學學報(醫(yī)學版),2014，46(5):681-685.

[11]Faiyaz-Ul-Haque M,Al-Owain M,Al-Dayel F,etal.Novel FBP1 gene mutations in Arab patients with fructose-1,6-bisphosphatase deficiency[J].Eur J Pediatr,2009,168(12):1467-1471.

[12]Ning XH,Li T,Gong YQ,etal.Association between FBP1 and hypoxia-related gene expression in clear cell renal cell carcinoma[J].Oncol Lett,2016,11(6):4095-4098.

[13]Li K,Ying M,Feng D,etal.Fructose-1,6-bisphosphatase is a novel regulator of Wnt/beta-Catenin pathway in breast cancer[J].Biomed Pharmacother,2016,84:1144-1149.

[14]Zhu Y,Shi M,Chen H,etal.NPM1 activates metabolic changes by inhibiting FBP1 while promoting the tumorigenicity of pancreatic cancer cells[J].Oncotarget,2015,6(25):21443-21451.

[15]Sheng H,Ying L,Zheng L,etal.Down Expression of FBP1 Is a Negative Prognostic Factor for Non-Small-Cell Lung Cancer[J].Cancer Invest,2015,33(5):197-204.

[16]鮑柏軍,朱雋雅,李振興,等.果糖-1,6-二磷酸酶1在食管鱗狀細胞癌的表達及意義[J].臨床檢驗雜志,2014，32(7):502-504.

(學術(shù)編輯：羅春英)

Immunohistochemistry and qPCR to detect the expression of FBP1 in colorectal adenocarcinoma and its clinical significance

LIU Jia-you1，DENG Shi-shan1， ZHU Jian-jun1，HOU Ling-mi2，XIE Shao-li2，HUANG Bo3

( 1．AnatomyDepartment，NorthSichuanMedicalCollege;2．GeneralSurgeryDepartment，AffiliatedHospitalofNorthSichuanMedicalCollege；3.ClinicalSkillsTrainingCenterofNorthSichuanMedicalCollege，Nanchong637000,Sichuan,China)

Objective：To explore the expression of FBP1 in colorectal adenocarcinoma and its clinical significance.Methods：46 pairs of fresh human colorectal adenocarcinoma tissues and its adjacent normal tissues were collected from the Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College from September 2014 to February 2016 ,Quantitative RT-PCR was used to detect the expression level of FBP1 mRNA in tissues.30 specimens of human colorectal adenocarcinoma tissues and its adjacent normal tissues were collected from the Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College from July 2015 to June 2016,immunohistochemical was used to exam the level of FBP1.Results：Quantitative RT-PCR show that the expression level of FBP1 mRNA in colorectal adenocarcinoma tissues was remarkably lower than that in adjacent normal colorectal tissues (t=2.934，P=0.006) .The expression level of FBP1 decreased as the increase of malignancy degree and Duke’s stages and distant lymph metastases in colorectal adenocarcinoma (P=0.000).The expression level of FBP1 mRNA in male patients was higher than that in those females,but the difference was not significant (t=1.294,P=0.165).Immunohistochemical results show that the expession level of FBP1 in colorectal adenocarcinoma tissues was lower than that in adjacent normal colorectal tissues (χ2=19.461,P=0.000).Conclusion：The decreased expression level of FBP1 mRNA and its protein may act a critical role in colorectal adenocarcinoma and may be used as a potential therapeutic target for colorectal adenocarcinoma.

Colorectal adenocarcinoma;Fructose-1，6-bisphosphatase 1;Immunohistochemistry;qPCR

10.3969/j.issn.1005-3697.2017.02.004

四川省教育廳基金項目(13ZB0242)；川北醫(yī)學院科研發(fā)展計劃項目(CBY12-A-QN01)

2016-08-02

劉家有(1986-) ， 男， 碩士，助教。

黃波， E-mail:88207635@qq.com

時間：2017-5-5 16∶46

http://kns.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20170505.1646.008.html

1005-3697(2017)02-0167-05

R735.3

A