蒙藥嘎木朱爾對壓瘡缺血再灌注損傷大鼠局部病理學(xué)改變的影響Δ

包蘇布道 阿古拉

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)2013級博士研究生,北京 100029;2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110)

蒙藥嘎木朱爾對壓瘡缺血再灌注損傷大鼠局部病理學(xué)改變的影響Δ

包蘇布道1，2阿古拉2*

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)2013級博士研究生,北京 100029;2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110)

目的：觀察蒙藥嘎木朱爾對壓瘡缺血再灌注損傷模型大鼠局部病理學(xué)改變的影響，探討蒙藥嘎木朱爾治療壓瘡的作用及其機(jī)制。方法:將32只SD大鼠隨機(jī)分為4組，每組8只。正常組、模型組、云南白藥組和嘎木朱爾組，治療7天，最后1次給藥后，10%水合氯醛麻醉大鼠，取受壓處皮膚組織，進(jìn)行病理學(xué)改變觀察。結(jié)果:正常組為復(fù)層鱗狀上皮，上皮組織結(jié)構(gòu)較清晰，肌纖維排列緊密有序，未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤。模型組為表面不完整，復(fù)層鱗狀上皮較正常組薄，結(jié)構(gòu)不清，部分上皮結(jié)構(gòu)出現(xiàn)斷裂，肌纖維明顯水腫，組織間充血嚴(yán)重，真皮內(nèi)見較多炎癥細(xì)胞浸潤。蒙藥嘎木朱爾組與云南白藥對照組上皮結(jié)構(gòu)較清晰，肌纖維水腫減輕，組織間無充血，真皮內(nèi)可見少量炎性細(xì)胞浸潤。而且蒙藥嘎木朱爾組炎癥細(xì)胞浸潤情況較云南白藥組減輕，表明蒙藥嘎木朱爾作用更明顯。結(jié)論：蒙藥嘎木朱爾能有效減輕局部組織病理學(xué)改變，為蒙藥嘎木朱爾臨床壓瘡治療提供良好的動物實(shí)驗(yàn)的依據(jù)。

蒙藥；嘎木朱爾；缺血再灌注損傷；病理

壓瘡(pressureulcer)俗稱褥瘡，又稱壓力性潰瘍，是皮膚或皮下組織由于壓力或復(fù)合有剪切力或/和摩擦力作用而發(fā)生在骨隆突處的局限性損傷。多見于老年、骨折或重癥患者[1]。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，住院患者的壓瘡發(fā)生率為5.1%～32.1%[2]。壓瘡一旦發(fā)生，遷延難愈，給患者帶來極大的痛苦，甚至?xí)蚶^發(fā)感染而危及生命。蒙藥嘎木朱爾由寒水石、朱砂、石決明、雄黃、銀朱、冰片、麝香等7味藥構(gòu)成，臨床長期應(yīng)用效果較好，能安全有效地治療壓瘡。本研究通過復(fù)制壓瘡大鼠模型，探討嘎木朱爾治療壓瘡的局部病理學(xué)改變的影響，為進(jìn)一步臨床推廣應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動物：SPF級SD大鼠，雄性，32只，體重280±20g，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司提供，許可證號：SCXK(京)2014-0013。

1.2 主要儀器：圓形鐵片：直徑25mm，厚度1.5mm硬幣大小。圓形磁鐵：直徑25mm，厚度2.5mm，硬幣大小。電子天平：賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司提供。器械：剪刀、鑷子、眼科剪、持針器、刀柄、刀片、4號手術(shù)線。RM2235石蠟輪轉(zhuǎn)切片機(jī)：德國Leica公司提供。電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱：上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司提供。組織包埋盒：江蘇世泰實(shí)驗(yàn)器材有限公司提供。TEC2500病理組織漂烘儀：常州市郝思琳醫(yī)用器械有限公司提供。光學(xué)CX4I微鏡：OLYMPUS提供。

1.3 藥物與試劑：嘎木朱爾散：呼衛(wèi)制注字(97)001-141號，內(nèi)蒙古國際蒙醫(yī)醫(yī)院國際蒙藥制劑中心提供。云南白藥散：國藥準(zhǔn)字Z53020798，批號：ZJA1502，云南白藥集團(tuán)股份有限公司提供。水合氯醛：用0.9%生理鹽水稀釋配置成10%水合氯醛，天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開發(fā)有限公司提供。硫化鈉：用0.9%生理鹽水稀釋配置成8%硫化鈉溶液，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司提供。4%多聚甲醛液：上海索寶生物科技有限公司提供。無水乙醇：天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開發(fā)有限公司提供。伊紅染液：北京索萊寶科技有限公司提供，批號：20160105。蘇木素染液：北京索萊寶科技有限公司提供，20161222。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 分組與模型的復(fù)制：大鼠喂養(yǎng)房間溫度保持在24℃左右，濕度保持在50%左右，明暗周期12h，自由飲水和進(jìn)食，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。正常組不做任何手術(shù)處理，其余3組大鼠實(shí)驗(yàn)前8h禁食和禁水，實(shí)驗(yàn)當(dāng)日稱體質(zhì)量，用10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔注射麻醉后，用8%硫化鈉溶液在臀部進(jìn)行脫毛備皮，消毒。除正常組外，其余組大鼠在其臀部做一深至筋膜的切口，鈍性分離，將鐵片(直徑25mm，厚度1.5mm)植入臀部，層次位于深筋膜下方，最后用4-0帶針絲線縫合全層切口。術(shù)后24小時(shí)，體外采用磁鐵(直徑25mm，厚度2.5mm)間歇性施加壓力，造成局部皮膚缺血，每次缺血2h后，將外源磁鐵取下，讓局部血流恢復(fù)30mim，作為1個循環(huán)。每只鼠每天進(jìn)行5個連續(xù)的循環(huán)，持續(xù)5d。期間每只大鼠單籠飼養(yǎng)，自由飲水與進(jìn)食。大鼠皮膚變黑、變硬，針刺不出血作為判斷Ⅲ期壓瘡的標(biāo)準(zhǔn)[3，4]。

2.2 給藥：大鼠分為正常組、模型組、蒙藥嘎木朱爾組和云南白藥對照組。正常組：未作任何手術(shù)處理,麻醉后取創(chuàng)面皮膚組織。模型組：造模后不給予任何方式的治療。蒙藥嘎木朱爾組：基礎(chǔ)護(hù)理后創(chuàng)面上撒嘎木朱爾散，1次/天，連續(xù)7天。云南白藥對照組：基礎(chǔ)護(hù)理后創(chuàng)面上撒云南白藥散，1次/天，連續(xù)7天。基礎(chǔ)護(hù)理：從造模次日起，造模組和治療組大鼠均采用2%碘酒及75%乙醇消毒壓瘡創(chuàng)面周圍皮膚。

2.3 取材：末次給藥后，10%水合氯醛麻醉大鼠，迅速取下大鼠壓瘡創(chuàng)面的皮膚組織，標(biāo)本的大小約1×1×0.5cm，放置于4%多聚甲醛液中固定，送至病理科進(jìn)行HE染色，觀察皮膚病理變化。

3 結(jié)果

正常組大鼠皮膚為復(fù)層鱗狀上皮，上皮組織結(jié)構(gòu)較清晰，肌纖維排列緊密有序，未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤。模型組大鼠皮膚表面不完整，復(fù)層鱗狀上皮較正常組薄，結(jié)構(gòu)不清，部分上皮結(jié)構(gòu)出現(xiàn)斷裂，肌纖維明顯水腫，組織間充血嚴(yán)重，真皮內(nèi)見較多炎癥細(xì)胞浸潤。蒙藥嘎木朱爾組與云南白藥對照組上皮結(jié)構(gòu)較清晰，肌纖維水腫減輕，組織間無充血，真皮內(nèi)可見少量炎性細(xì)胞浸潤。說明蒙藥嘎木朱爾能有效減輕局部損害(見圖1)。

圖1 各組大鼠局部組織HE染色(×400)

A：正常組；B：模型組；C：嘎木朱爾組；D：云南白藥組

4 討論

蒙醫(yī)學(xué)認(rèn)為壓瘡屬于“瘡瘍”病范圍，故治療時(shí)應(yīng)以調(diào)整三素平衡、活血通脈、清熱解毒、燥黃水，防腐生肌為治法[5]。嘎木朱爾散是蒙醫(yī)傳統(tǒng)驗(yàn)方，又稱哈它各其-7散，由寒水石、朱砂、石決明、雄黃、銀朱、冰片、麝香等7味藥構(gòu)成，該方以雄黃防腐、消腫、愈傷為主；寒水石以解毒、滋補(bǔ)、調(diào)理體素為輔，配合銀珠與珠砂以防腐收斂；石明決以愈合創(chuàng)傷，燥黃水；冰片以清熱；麝香以殺黏，因此本方具有消炎止痛、清熱解毒、活血消腫、改善局部血液循環(huán)、生肌收斂、促進(jìn)肉芽組織增生、加速傷口愈合等作用[6]，適合于壓瘡的治療。

通過實(shí)驗(yàn)，蒙藥嘎木朱爾組和云南白藥組大鼠的創(chuàng)面皮膚組織與模型組比較，上皮結(jié)構(gòu)較清晰，肌纖維水腫明顯減輕，組織間無充血，真皮內(nèi)可見少量炎性細(xì)胞浸潤。與云南白藥對照組比較，嘎木朱爾組炎性細(xì)胞浸潤程度明顯減輕。說明嘎木朱爾對減輕III期壓瘡炎癥浸潤作用更為明顯。

綜上所述，蒙藥嘎木朱爾對III期壓瘡模型大鼠創(chuàng)面的炎癥浸潤具有較好的改善作用，說明嘎木朱爾對III期壓瘡模型大鼠創(chuàng)面的修復(fù)作用主要是通過其抗炎作用來實(shí)現(xiàn)的，然而其具體的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步探索。

[1]韓斌如,王欣然.壓瘡護(hù)理[M]．北京:科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2013:5-6

[2]鞠桂芳，佟峰，劉欣，等.磁力壓迫持續(xù)缺血損傷壓瘡模型的構(gòu)建及應(yīng)用[J].山東醫(yī)藥，2011，51(51):33-34

[3]Peirce SM，Skalak TC，Rieger JM，et al.Select ive A( 2A) adenosine recept or act ivation reduces skin pressure ulcer format ion and inflammat ion[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol，2001，281(1):H67-H74.

[4]黃倩，島玉芳，魏雨麗,等．大鼠壓瘡缺血再灌注模型構(gòu)建及相關(guān)指標(biāo)觀察[J]．齊魯醫(yī)學(xué)雜志，2013，28(4)，365-367

[5]馬燕，倪燕，張娜.蒙藥嘎木朱爾散與增強(qiáng)型透明貼聯(lián)合應(yīng)用治療Ⅲ、Ⅳ期壓瘡的臨床研究[J]，中國民族醫(yī)藥雜志，2013，10:21-22

[6]韓玉寶，白彥滿都拉，烏恩畢力格等.哈它各其-7在大鼠傷口愈合過程中對白細(xì)胞介素-1β影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]．內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2014，29(1)：62-62

Δ項(xiàng)目來源：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)青年創(chuàng)新基金項(xiàng)目“蒙藥嘎木朱爾對壓瘡缺血再灌注損傷大鼠血清SOD、MDA的影響”項(xiàng)目編號：YKD2015QNCX010

R291.2

A

1006-6810(2017)04-0050-03

*通訊作者