茶多酚對(duì)抗精神病藥物奧氮平誘致肥胖大鼠作用與機(jī)制研究

鐘滿群　呂俊華

[摘要]目的探討茶多酚對(duì)抗神經(jīng)病藥物奧氮平誘致肥胖大鼠的作用以及機(jī)制。方法本次研究選取64只健康的雌性大鼠作為研究對(duì)象，對(duì)其進(jìn)行茶多酚對(duì)抗神經(jīng)病藥物奧氮平治療，觀察其對(duì)大鼠肥胖的作用以及機(jī)制。結(jié)果模型對(duì)照組和正常組進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)大鼠在體重、食物的攝取量、Lees指數(shù)、脂肪系數(shù)、脂肪濕重、5-HT、DA、DOPAC含量、血清瘦素含量、FFA含量方面均有所增加，夜晚距離和平均速度、脂聯(lián)素含量明顯降低，相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；飲水量、白天自主行為、夜晚慢速運(yùn)動(dòng)時(shí)間和快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間及休息時(shí)間、Tc、TG、LDL-C、HDL-C含量、血糖、胰島素含量、ALT、AST、SOD活性、MDA含量無(wú)明顯變化，相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；高劑量和低劑量組與模型對(duì)照組相比，在體重、飲食量、飲水量、白天休息時(shí)間、Lees指數(shù)、脂肪系數(shù)、脂肪濕重、DA、DOPAC含量、FFA含量、LDL-C含量、血糖、胰島素含量、ALT、AST、MDA含量方面均有所減少，相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；5-HT含量、血清瘦素含量無(wú)明顯變化，相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；白天時(shí)距離和快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間及平均速度、夜晚距離和平均速度、5-HIAA、NA含量、脂聯(lián)素含量、SOD活性明顯增加，相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；其中低劑量組夜晚快速運(yùn)動(dòng)的時(shí)間顯著增加，并且休息的時(shí)間相對(duì)減少，體內(nèi)TC含量降低，相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論茶多酚能夠有效的抑制肥胖大叔的食物攝取量，減少了它的飲水和進(jìn)食量，引導(dǎo)肥胖大鼠多進(jìn)行自主活動(dòng)，縮短了其休息時(shí)長(zhǎng)，增加在黑暗時(shí)的運(yùn)動(dòng)量以及運(yùn)動(dòng)速度，促進(jìn)下丘腦遞質(zhì)對(duì)5-HT的誘導(dǎo)分泌，拉升5-HIAA和NA水平，降低DA的水平，抑制食欲提高了運(yùn)動(dòng)量，通過脂肪細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)，體內(nèi)血清脂聯(lián)素的含量增加，并且體美高脂肪酸的氧化程度和能量消耗更多，脂代謝速度加快，體內(nèi)FFA、LDL-C和TC的含量明顯降低，在提升SOD活性的同時(shí)，降低MDA的含量，達(dá)到提升機(jī)體抗氧化能力的效果。

[關(guān)鍵詞]茶多酚；神經(jīng)病藥物；奧氮平；肥胖大鼠

[中圖分類號(hào)]R977.9

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]2095-0616（2017）03-34-04

肥胖癥與體內(nèi)脂肪不正常和堆積過多有著直接的關(guān)系，受內(nèi)分泌疾病、遺傳、運(yùn)動(dòng)和飲食的直接影響。肥胖癥的顯著特點(diǎn)為體重過重，并與高脂血癥、高血壓、腦血管疾病、冠心病和糖尿病等發(fā)生過程相互影響。大量的臨床試驗(yàn)證明，長(zhǎng)時(shí)間服用抗精神病藥物會(huì)導(dǎo)致肥胖和體重增加，給患者治療的依從性造成一定的影響。國(guó)外學(xué)者系統(tǒng)的研究了抗精神病藥誘發(fā)的肥胖問題，并使用奧氮平等藥物創(chuàng)建了大鼠肥胖模型。綠茶的主要活性成分就是茶多酚（TP），茶多酚（TP）的主要作用為抗衰老、預(yù)防癌癥、預(yù)防心腦血管疾病和抗氧化性，能夠調(diào)節(jié)食物攝入和脂肪代謝，從而使肥胖逆轉(zhuǎn)和體重減輕。因此，本次研究選取64只健康的雌性大鼠作為研究對(duì)象，對(duì)其進(jìn)行茶多酚對(duì)抗神經(jīng)病藥物奧氮平治療，觀察其對(duì)大鼠肥胖的作用以及機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1材料

本組資料共計(jì)64只，均為本次研究隨機(jī)選取健康的雌性大鼠，由廣州市某實(shí)驗(yàn)室所提供，體重160～280g，平均（205±15）g。

1.2模型建立及分組

大鼠在晝夜規(guī)律的模擬環(huán)境中生活1d，依據(jù)體重將其劃分成兩組，造模組為57只，正常對(duì)照組為7只。在造模的時(shí)間里，大鼠自由攝取水分和普通飼料，造模組在天黑前進(jìn)行奧氮平（1.2mg/kg）灌胃。2d稱重一次，連續(xù)喂養(yǎng)2周以后將體重增長(zhǎng)不合格和死亡的大鼠剔除。最后，造模組中的模型共有37只，其中，模型對(duì)照組11只，高劑量組9只，低劑量組8只，陽(yáng)性藥物組9只，所有大鼠均無(wú)死亡情況。

1.3給藥

天黑之前對(duì)高劑量組、茶多酚低組、鹽酸西布曲明組和模型對(duì)照組進(jìn)行奧氮平（1.2mg/kg）灌胃，將等容量的蒸餾水給予正常對(duì)照組；第2天上午，茶多酚低組灌胃150mg/kg、高劑量組灌胃300mg/kg、鹽酸西布曲明灌胃2.5mg/kg，將等容量的蒸餾水給予模型對(duì)照組和正常對(duì)照組，按照此計(jì)量連續(xù)喂養(yǎng)5周進(jìn)行宰殺，宰殺前12h內(nèi)禁食禁水。

1.4檢測(cè)方法

（1）在藥物干預(yù)治療以前，對(duì)大鼠的體重每周監(jiān)測(cè)2次，連續(xù)監(jiān)測(cè)2周左右；藥物干預(yù)治療以后，對(duì)大鼠的體重每周監(jiān)測(cè)1次，連續(xù)監(jiān)測(cè)5周左右。（2）對(duì)大鼠白天和黑夜的自主活動(dòng)情況進(jìn)行測(cè)定時(shí)，使用SMART video-tracking system進(jìn)行監(jiān)測(cè)。實(shí)驗(yàn)裝置使用的是有底正方形鐵箱，底面各邊的長(zhǎng)度為1米，高度為半米。大鼠每隔45min給藥一次，連續(xù)給藥3d，將大鼠放在實(shí)驗(yàn)裝置的中心位置，適應(yīng)時(shí)間為系統(tǒng)默認(rèn)的時(shí)間，大鼠自主活動(dòng)的客觀靈敏指標(biāo)包括快運(yùn)動(dòng)時(shí)間、慢運(yùn)動(dòng)時(shí)間、休息時(shí)間、路程和平均速度。（3）對(duì)大鼠下丘腦中的5-HIAA（5-羥吲哚乙酸）、DOPAC（3，4-二羥基苯乙酸）、5-HT（5-羥色胺）、DA（多巴胺）和NE（去甲腎上腺素）的含量情況使用HPLC-ECD（高效液相色譜一電化學(xué)檢測(cè)）進(jìn)行測(cè)定。大鼠麻醉時(shí)采取腹腔注射的方法，使用的藥物為3%戊巴比妥鈉（40mg/kg），麻醉后立即斷頭并迅速將全腦取出，將下丘腦分離后，使用冷卻的生理鹽水進(jìn)行漂洗，將水分瀝干以后進(jìn)行稱重，將其放入到圓形的離心管中，加入300mL的生理鹽水之后進(jìn)行攪拌再借助勻漿機(jī)進(jìn)行研磨，設(shè)置2000r/min的速度進(jìn)行15min離心處理，將上清液取出后將高氯酸去蛋白液（300mL）注入其中。流速為0.7mL/min，柱溫控制在37°C。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

選擇SPSS20.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)量數(shù)據(jù)采用（x±s）的形式表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1大鼠體重、飲食量、飲水量的變化

模型組和正常對(duì)照組的大鼠在體重方面均有所增加，但是模型組的大鼠體重增長(zhǎng)更明顯，飲食量增加顯著，飲水量無(wú)顯著變化（P>0.05），模型對(duì)照組大鼠在體重方面增加明顯，而高劑量組和低劑量組大鼠在體重、飲食量、飲水量均出現(xiàn)明顯降低情況，相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1～2。

2.2大鼠白天和夜晚自主行為的變化

白天，模型對(duì)照組中大鼠的自主行為方面無(wú)顯著變化（P>0.05），相比較而言，高劑量組、低劑量組大鼠在距離、快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間、平均速度方面明顯增加，但其休息時(shí)間相對(duì)減少，相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。夜晚時(shí)，模型對(duì)照組大鼠在距離和平均速度方面均有減少的趨勢(shì)，但是大鼠在慢速運(yùn)動(dòng)時(shí)間、快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間、休息時(shí)間方面無(wú)顯著變化（P>0.05），相比較而言，高劑量組、低劑量組大鼠在距離和平均速度方面顯著增加，其中低劑量組的快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間增加，休息時(shí)間減少，相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.3奧氮平誘致大鼠肥胖的各項(xiàng)指標(biāo)比較

模型對(duì)照組與正常對(duì)照組相比，大鼠體內(nèi)的Lees指數(shù)、脂肪系數(shù)、脂肪濕重、5-HT、DA、DOPAC含量、血清瘦素含量、FFA含量方面都有顯明的增加趨勢(shì)，但是體內(nèi)的脂聯(lián)素含量呈下降趨勢(shì)，相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），TC、TG、LDL-C、HDL-C含量、血糖、胰島素含量、ALT、AST、SOD活性、MDA含量無(wú)明顯變化（P>0.05），高劑量和低劑量組與模型對(duì)照組相比，在Lees指數(shù)、脂肪系數(shù)、脂肪濕重、DA、DOPAC含量、FFA含量、LDL-C含量、血糖、胰島素含量、ALT、AST、MDA含量方面均有所減少，相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），5-HT含量、血清瘦素含量無(wú)明顯變化，5-HIAA、NA含量、脂聯(lián)素含量、SOD活性明顯增加，其中低劑量組TC含量明顯減少，相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3.討論

活動(dòng)量太少或者飲食過多均會(huì)導(dǎo)致肥胖，主要是下丘腦來(lái)對(duì)其進(jìn)行控制和調(diào)節(jié)。下丘腦在對(duì)飲食量進(jìn)行操控時(shí)，主要起調(diào)節(jié)作用的物質(zhì)是細(xì)胞所分泌的5-HT和DA等神經(jīng)遞質(zhì)。奧氮平是一種非典型性抵抗神經(jīng)性疾病的藥物，能夠有效的阻斷5-HT和DA等神經(jīng)遞質(zhì)的分泌，從而大大降低神經(jīng)遞質(zhì)5-HT和DA對(duì)動(dòng)物系統(tǒng)功能的影響，但是，患者在長(zhǎng)期服用此類藥物的過程中，會(huì)出現(xiàn)鮮明的體重增加或者肥胖的現(xiàn)象。

通過實(shí)驗(yàn)可以看出，奧氮平能夠明顯的增大鼠的食欲，使得大鼠的自主活動(dòng)減少，并且提高飼料的轉(zhuǎn)化率，導(dǎo)致大鼠出現(xiàn)肥胖癥狀。在黑暗條件在進(jìn)行飼養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)大鼠的平均速度、路程明顯減少，并且大鼠身體上脂肪的重量和脂肪系數(shù)顯著增加。由此可以看出，奧氮平是通過增加大鼠食物的攝取量，減少大鼠的自主活動(dòng)來(lái)引發(fā)大鼠肥胖的。與此同時(shí)，通過實(shí)驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)，肥胖大鼠下丘腦組織中，5-HT、DA、DOPAC含量顯著增加，由此可見，奧氮平能夠有效的阻斷5-HT、DA受體的產(chǎn)生，從而減弱5-HT、DA對(duì)系統(tǒng)功能的影響，增強(qiáng)大鼠的食物攝取量，從而出現(xiàn)肥胖癥狀。大鼠細(xì)胞內(nèi)血清瘦素的含量也在不斷的增加，但是細(xì)胞內(nèi)脂聯(lián)素的含量卻在下降。由此可以看出，肥胖的大鼠可以分泌出抵抗血清瘦素的物質(zhì)，降低瘦素信號(hào)傳導(dǎo)的功能，引起大鼠肥胖。

本次試驗(yàn)，以鹽酸西布曲明為陽(yáng)性藥物來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。鹽酸西布曲明是一種能夠降低動(dòng)物食欲的藥物，其中，抑制藥物是5-HT和NA，這兩種藥物能夠有效的降低動(dòng)物對(duì)食物的攝取量，減輕自身的體重。奧利司是國(guó)家認(rèn)可的可以用來(lái)治療肥胖癥的藥物，但是對(duì)藥物的價(jià)格和使用量進(jìn)行考慮之后，決定采用鹽酸西布曲明來(lái)作為陽(yáng)性藥物進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，鹽酸西布曲明能夠有效的降低大鼠的飲水量、食物的攝取量、體重、脂肪系數(shù)等，加大大鼠的活動(dòng)量，由此可以看出，鹽酸西布曲明能夠起到減肥的功效。

5-HT能夠有效的調(diào)節(jié)動(dòng)物對(duì)食物的攝取量，作用在不同的受體上，所產(chǎn)生的作用不完全相同。但是，從總體來(lái)言，5-HT能夠有效的抑制動(dòng)物對(duì)食物的攝取量。奧氮平是5-HT受體的拮抗劑，通過實(shí)驗(yàn)可以觀察發(fā)現(xiàn)，奧氮平減弱了受體5-HT的作用，使得動(dòng)物對(duì)食物的攝取量增加，從而引發(fā)肥胖。

成熟脂肪細(xì)胞可以自身進(jìn)行瘦素激素蛋白的分泌，一旦體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)聚集，體內(nèi)就會(huì)自動(dòng)分泌出瘦素來(lái)進(jìn)行抵抗，從而出現(xiàn)人體肥胖的現(xiàn)象。瘦素抵抗是引入動(dòng)物或者人體肥胖癥的關(guān)鍵，在實(shí)驗(yàn)中，模型對(duì)照組的大鼠采用奧氮平進(jìn)行灌胃處理之后，發(fā)現(xiàn)大鼠對(duì)食物的攝取量增加，活動(dòng)量減少，腹部的脂肪不斷的堆積，血液中瘦素含量增加，從而出現(xiàn)肥胖癥。大鼠進(jìn)行茶多酚處理之后，與模型對(duì)照組進(jìn)行比對(duì)，發(fā)現(xiàn)大鼠的體重呈現(xiàn)明顯的下降趨勢(shì)，血液中瘦素的含量基本持平，由此可見，奧氮平引發(fā)動(dòng)物肥胖與血清中瘦素的含量無(wú)明顯的關(guān)系。

脂聯(lián)素基因在白色脂肪組織中體現(xiàn)，脂聯(lián)素是由脂肪細(xì)胞分泌的激素蛋白。實(shí)踐證明，脂聯(lián)素的功效體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：能夠增強(qiáng)動(dòng)物對(duì)葡萄糖的攝取，加快脂肪酸氧化速率、提高動(dòng)物的胰島素抵抗力等。通過研究發(fā)現(xiàn)，這有可能有肥胖者體內(nèi)脂肪組織分泌的腫瘤壞死因子有關(guān)。因此，有專家認(rèn)為，動(dòng)物體內(nèi)脂聯(lián)素含量降低主要是由于脂肪含量增加后反饋制約調(diào)節(jié)所產(chǎn)生的結(jié)果。

與對(duì)照組進(jìn)行比較之后發(fā)現(xiàn)，模型對(duì)照組大鼠體內(nèi)的血清脂聯(lián)素水平在不斷的降低，由此可以看出，脂聯(lián)素在肥胖癥患者體內(nèi)具有一種負(fù)向的反饋形式。采用茶多酚對(duì)大鼠進(jìn)行處理之后，與模型對(duì)照組對(duì)比，茶多酚低劑量組血清脂聯(lián)素水平微微有所緩和。

胰島素抵抗也是造成肥胖的又一因素，胰島素抵抗會(huì)代償性增加胰島素分泌。數(shù)據(jù)顯示，對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃奧氮平處理之后，大鼠體內(nèi)的胰島素水平和血糖水平并沒有受到任何的影響；肥胖大鼠進(jìn)行茶多酚處理之后，體內(nèi)的胰島素水平和血糖水平并沒有鮮明的變化。

奧氮平處理之后的大鼠，肝功能會(huì)有一定的損傷，肝細(xì)胞壞死之后，體內(nèi)的AST會(huì)相應(yīng)的增高，其增高的水平和肝細(xì)胞受到損傷的水平成正比，也就是最常見的肝功能檢測(cè)指標(biāo)。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，模型對(duì)照組與對(duì)照組相比，其并沒有顯著的變化。大鼠經(jīng)過茶多酚處理之后，與模型對(duì)照組相比，稍微有所下降。

一種能夠清除超氧陰離子的抗氧化酶，會(huì)對(duì)奧氮平誘導(dǎo)出來(lái)的肥胖大鼠的抗氧化能力產(chǎn)生重要影響。這種酶存在于細(xì)胞液中，能夠微妙地影響機(jī)體的氧化與抗氧化之間的平衡性，進(jìn)而使得機(jī)體不會(huì)受到超氧陰離子的損害，并且動(dòng)物體內(nèi)酶的活性和含量也直接反映出細(xì)胞的抗氧化能力。并且由于它也是脂質(zhì)過氧化的反應(yīng)結(jié)果，所以它的含量也代表著機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的水平。

綜上所述，茶多酚能夠增加肥胖大鼠的血清活性，可以提高機(jī)體抗氧化能力，改善機(jī)體在低氧狀態(tài)以及應(yīng)激狀態(tài)的炎癥反應(yīng)，所以茶多酚能夠有效的減肥。