FT—IR法鑒定中藥海金沙正品及其摻偽品

張道英 陳嬌婷 王妙飛 吳琪 劉海

摘要[目的]利用傅里葉變換紅外光譜法（FT-IR法）鑒別中藥材海金沙的正品及其摻偽品。[方法]在合適的條件下（光譜范圍：4000～400 cm-1；分辨率：4 cm-1；透過率：0～100%；掃譜次數(shù)：32次；速度：0.632 9 cm/s；檢測器：DTGSKBr；Thermo scientific EZ OMNIC儀器系統(tǒng)操作軟件；圖譜修正：水和二氧化碳；背景光譜管理：采集樣品前采集背景），利用FT-IR法測定海金沙樣品及其摻偽品的紅外吸收譜圖，并做比較。[結(jié)果]各海金沙樣品的紅外光譜圖基本一致，海金沙的黃土摻偽品和海金沙的蒲黃摻偽品的紅外吸收圖譜與海金沙的紅外吸收圖譜存在明顯差別。該試驗方法的精密度、重復(fù)性及穩(wěn)定性考察合格。[結(jié)論]此方法簡便、準(zhǔn)確，可用于中藥材海金沙正品及其摻偽品的鑒別。

關(guān)鍵詞FT-IR法；海金沙；海金沙摻偽品

中圖分類號R282.5文獻(xiàn)標(biāo)識碼

A文章編號0517-6611（2017）10-0115-03

Identification of Quality Goods and Adulterants of Traditional Chinese Medicine Lygodium japonicum（Thunb.）Sw by FTIR

ZHANG Daoying，CHEN Jiaoting，WANG Miaofei，LIU Hai* et al（Gannan Medical University，Ganzhou，Jiangxi 341000）

Abstract[Objective] The research aimed to identify quality goods and its adulterant of traditional Chinese medicine Lygodium japonicum by FTIR method.[Method] Under the right conditions （spectral range：4000-400 cm-1； resolution：4 cm-1； transmittance：0-100%；sweep frequency spectrum：32 times； speed：0.6329 cm/s； detector：DTGSKBr； Thermo scientific EZ OMNIC instrument system operating software； spectrum correction：water and carbon dioxide； background spectrum management：sampling samples before background） using FT-IR to measure the infrared absorption spectrums of Lygodium japonicum samples and its adulterant，and then compare them.[Result] The infrared spectra of each sample of Lygodium japonicum were basically the same.There were obvious difference between infrared spectra of quality goods and its adulterants.The precision，repeatability and stability test of the experimental method were qualified.[Conclusion] This method is simple and accurate and could use to identify quality goods and its adulterants of Lygodium japonicum.

Key wordsFTIR method；Lygodium japonicum（Thunb.）Sw；Adulterants of Lygodium japonicum

海金沙為海金沙科海金沙屬蕨類植物海金沙[Lygodium japonicum（Thunb.） Sw]的干燥成熟孢子，別名左轉(zhuǎn)藤、鐵線藤、蛤蟆藤等[1]。秋季孢子未脫落時采割藤葉，曬干，揉搓或打下孢子，除去藤葉[2]。海金沙主要分布于我國華南及西南地區(qū)，喜生于陰涼山坡灌叢或林緣，具有清利濕熱、通淋止痛的功效，對于各種淋癥療效顯著，現(xiàn)在臨床上主要用于治療尿路結(jié)石、尿路感染、腎結(jié)石、腎炎水腫、帶狀皰疹等[3]。

正品海金沙孢子為棕黃色或淺棕黃色粉末，極輕，滑潤，手捻光滑，置于手掌中即由指縫滑落，撒于火上即發(fā)出輕微爆鳴聲及明亮的火焰[3]。由于海金沙藥用價值較高，又屬于極易摻假的品種[4]，部分商家為了牟取更大的利潤，經(jīng)常會在海金沙中摻入與海金沙相似的細(xì)砂土、蒲黃、松花粉和植物纖維[5]等制成摻偽品。因此，為了避免誤用摻偽品，提高海金沙的臨床用藥療效，需要準(zhǔn)確地鑒別海金沙及其摻偽品。目前，有關(guān)海金沙鑒別的方法多用手試、火試、水試、口嘗、顯微鑒別、熾灼殘渣法及薄層色譜法[2-8]等進(jìn)行鑒別，也有用近紅外光譜法對海金沙摻偽情況進(jìn)行定量分析的[9-10]。徐海星等[11-12]用紅外光譜法及X射線衍射Fourier指紋圖譜法對海金沙的甲醇、氯仿、石油醚提取物進(jìn)行了鑒別，但還未見有用傅里葉變換紅外光譜法（FT-IR法）對海金沙藥材及其摻偽品直接進(jìn)行鑒別的文獻(xiàn)報道。FT-IR法具有很強(qiáng)的特征性，不同的化合物具有不同的紅外光譜圖，它具有方便、快捷、直觀、無毒副作用等特點(diǎn)[13]，現(xiàn)在也越來越多地應(yīng)用在中藥材及其制劑的鑒別上。筆者采用FT-IR法測定不同藥店購買的海金沙樣品的FT-IR光譜圖，得出正品海金沙的FT-IR光譜圖，并與其摻偽品的紅外光譜圖進(jìn)行比較。

1材料與方法

1.1主要儀器

NICOLET 380 FT-IR儀（Thermo Electron Corporation）；101-2-5-H型電熱恒溫干燥箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）；標(biāo)準(zhǔn)藥典篩（浙江上虞市道墟張興紗篩廠）；YP-2壓片機(jī)（上海山岳科學(xué)儀器有限公司）。

1.2試驗試劑溴化鉀（優(yōu)級純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所）；丙酮（分析純，江蘇強(qiáng)盛功能化學(xué)股份有限公司）。

1.3試驗藥品海金沙藥材均購買于江西省贛州市各個藥店，經(jīng)贛南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥學(xué)教研室李加林副教授鑒定為海金沙正品。購買蒲黃和自采細(xì)黃土，人為制成海金沙摻蒲黃的摻偽品和海金沙摻黃土的摻偽品。海金沙藥品及蒲黃、黃土的編號和購買地見表1。

1.4儀器參數(shù)

光譜范圍：4 000～400 cm-1；分辨率：4 cm-1；透過率：0～100%；掃譜次數(shù)：32次；速度：0.632 9 cm/s；檢測器：DTGSKBr；Thermo scientific EZ OMNIC儀器系統(tǒng)操作軟件；圖譜修正：水和二氧化碳；背景光譜管理：采集樣品前采集背景。

1.5樣品前處理

1.5.1海金沙樣品前處理。

所有海金沙樣品均過200目篩后，分別置于燒杯中，放入烘箱，在溫度80 ℃的條件下烘 4 h，然后將樣品置于干燥器中冷卻，再分別裝入有相應(yīng)標(biāo)記的封口袋中，置于干燥器中備用。

1.5.2海金沙摻偽樣品前處理。

取適量過200目篩的海金沙，分別與蒲黃和黃土混合均勻，置于燒杯中，與海金沙樣品同條件烘干、保存，制成海金沙摻蒲黃的摻偽品和海金沙摻黃土的摻偽品。

1.6FT-IR光譜圖的采集

取處理后的海金沙樣品和海金沙摻偽品，分別按照藥品與溴化鉀粉末1∶150～200的比例置于瑪瑙研缽中研磨混勻，取少量研磨均勻的粉末，置于壓片模具中鋪平，并用壓片機(jī)壓片，得含藥窗片。按照“1.4”的儀器參數(shù)，以空氣為空白對照，采集背景吸收光譜；并將含藥窗片置于紅外光譜儀中，采集海金沙樣品及其摻偽品的紅外吸收光譜圖。

2結(jié)果與分析

2.1海金沙樣品FT-IR光譜圖從圖1和表2可看出，11個不同藥店購買的海金沙樣品的FT-IR光譜圖基本一致，特征吸收峰峰位相差無幾。其中有些譜圖在2 360 cm-1附近有吸收峰，有些譜圖沒有，經(jīng)判斷，此峰為二氧化碳的吸收峰，對測定結(jié)果無影響。由此可確定，F(xiàn)T-IR法鑒別海金沙準(zhǔn)確、可靠，此海金沙紅外吸收圖譜可作為海金沙的標(biāo)準(zhǔn)紅外吸收光譜圖。

2.2海金沙摻偽樣品FT-IR光譜圖從圖2～3可以看出，海金沙摻蒲黃的摻偽品和海金沙摻黃土的摻偽品的FT-IR光譜圖與海金沙正品的FT-IR光譜圖相比存在較大差別。其中，海金沙摻蒲黃的摻偽品FT-IR光譜圖中，位于波數(shù)3 100、1 400 cm-1附近的特征吸收峰與海金沙正品FT-IR光譜圖相比明顯增大，位于610～400 cm-1的吸收峰與海金沙正品紅外圖譜中此范圍吸收峰存在明顯差別；海金沙摻黃土的摻偽品FT-IR光譜圖中，位于波數(shù)3 100、1 400、1 000 cm-1附近的特征吸收峰與海金沙正品紅外圖譜相比明顯增大，處于610～400 cm-1的吸收峰與海金沙正品紅外圖譜此范圍吸收峰也存在明顯的差別。由此可見，F(xiàn)T-IR法可鑒別海金沙與海金沙的摻偽品。

2.3方法學(xué)考察

2.3.1精密度試驗。取同一海金沙樣品供試片（HJS02），連續(xù)測定5次，所得的FT-IR光譜圖完全一致，說明該方法的精密度試驗考察合格。

2.3.2重復(fù)性試驗。

取一份海金沙樣品，重復(fù)壓5個供試片，分別測定，所得圖譜基本相同，說明該方法的重復(fù)性好。

2.3.3穩(wěn)定性試驗。

取同一海金沙供試品片，放入干燥器中保存，分別于0、10、20、30、40、50、60 min測定，所得FT-IR光譜圖比較一致，說明穩(wěn)定性良好。

3討論

利用FT-IR法在給定的條件下測定海金沙正品及其摻偽品的FT-IR光譜圖，得到各海金沙樣品的紅外光譜圖基本一致，海金沙的黃土摻偽品與海金沙的蒲黃摻偽品的紅外吸收圖譜與海金沙的紅外吸收圖譜存在明顯差別。該試驗方法的精密度、重復(fù)性及穩(wěn)定性考察合格，測定結(jié)果準(zhǔn)確，操作簡便、易行，可用于鑒別海金沙正品及其摻偽品。

參考文獻(xiàn)

[1]

余希成，盧俊.超臨界CO2萃取海金沙中黃酮的研究[J].食品研究與開發(fā)，2007，28（12）：33-35.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典： 一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：294.

[3] 侯曉蘋，王滬榮.海金沙摻偽品鑒別2例[J].陜西中醫(yī)，2013，34（11）：1545-1546.

[4] 李瑞，李魁.海金沙摻偽的鑒別[J].醫(yī)藥前沿，2014（6）：376-377.

[5] 賈荷麗，查道成.海金沙摻偽的鑒別檢驗[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2012，8（7）：36-37.

[6] 習(xí)克儉.海金沙的摻偽鑒別[J].湖北中醫(yī)雜志，2012，34（2）：69-70.

[7] 趙鵬輝，鞏江，高昂，等.海金沙的鑒別及藥學(xué)研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（14）：8380-8381.

[8] 袁曉林.海金沙與炒蒲黃的鑒別[J].天津藥學(xué)，2012，24（4）：23-24.

[9] 方彩飛.近紅外光譜法對海金沙摻偽情況的定量分析[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2012，8（2）：47-48.

[10] 余馳，劉愛萍.紅外光譜法對海金沙摻偽情況的定量分析[C]//中國藥學(xué)雜志.島津杯第九屆全國藥物分析優(yōu)秀論文評選交流會論文集.廣州：中國藥學(xué)會，2009.

[11] 徐海星，劉小平，張成偉.中藥材海金沙的紅外光譜鑒別[J].武漢理工大學(xué)學(xué)報，2006，28（2）：137-140.

[12] 徐海星，劉小平，瞿國義，等.中藥材海金沙X射線衍射Fourier指紋圖譜鑒定[J].中藥材，2006，29（2）：123-126.

[13] 趙花榮，王曉燕，陳冠華，等.利用傅里葉變換紅外光譜法鑒定小麥品種 [J].光譜學(xué)與光譜分析，2004，24（11）：1338-1341.