白羽肉雞葡萄球菌分離鑒定

劉苗苗

DOI：10.3969/j.issn.2096-3637.2017.10.010

摘要：某肉雞養(yǎng)殖場，養(yǎng)殖42日齡白羽肉雞7萬只，40多只白羽肉雞出現(xiàn)了采食減少，關(guān)節(jié)腫大，腹瀉，個別的出現(xiàn)了急性死亡。為了確定引起白羽肉雞發(fā)死亡的病原菌，無菌病死肉雞的肝臟、心血、關(guān)節(jié)滲出液等病料組織進行病原菌分離鑒定，得到1株病原菌，被鑒定為葡萄球菌。動物回歸試驗結(jié)果表明，分離到的葡萄球菌具有很強的致病性。藥敏試驗結(jié)果顯示，藥敏結(jié)果顯示，白羽肉雞源葡萄球菌對恩諾沙星、氧氟沙星、頭孢曲松、氟苯尼考、頭孢克肟、頭孢拉啶、大觀霉素、林可霉素8種藥物高度敏感；對頭孢他啶、丁胺卡娜、多西環(huán)素、氨芐西林、青霉素、阿莫西林、慶大霉素7種藥物耐藥。

關(guān)鍵詞：白羽肉雞； 葡萄球菌；藥敏試驗

中圖分類號：S858.23 文獻標識碼：B 文章編號：2096-3637（2017）10-0014-01

葡萄球菌是人類和動物正常菌群，廣泛的存在與空氣、飲水、飼料各種物體內(nèi)，還存在與、人的體表面皮膚、黏膜、呼吸道和腸道中等，是環(huán)境中一種條件性致病菌，其中，、葡萄球菌是雞舍及雞體內(nèi)外的常在菌，當外界條件改變時，如飼養(yǎng)過大、通風不良、轉(zhuǎn)群等不良的因素，均導致雞抵抗力下降時，引發(fā)葡萄球菌的發(fā)生。雞致病性葡萄球菌病臨床表現(xiàn)為急性敗血癥、關(guān)節(jié)炎、滲出性皮炎、皮膚壞死和骨膜炎等癥狀，以雛雞最易感，且具有發(fā)病率高、死亡性快的特點，一般的成年雞感染后多呈慢性病程，是危害肉雞養(yǎng)殖業(yè)的主要細菌性疾病之一。是由金黃色葡萄球菌引起雞的急性敗血性或慢性傳染性疾病，該病發(fā)生無明顯的季節(jié)性，一年四季均可發(fā)病。本實驗通過采集無菌病死白羽肉雞的肝臟、心血、關(guān)節(jié)滲出液等病料組織進行病原菌分離鑒定，得到1株病原菌，被鑒定為葡萄球菌。動物回歸試驗結(jié)果表明，分離到的葡萄球菌具有很強的致病性。因此，對分離的葡萄球菌進行了藥敏試驗，分析其耐藥性，為白羽肉雞的葡萄球菌的防治提供指導意義。

1發(fā)病情況

2017年5月，某肉雞養(yǎng)殖場，養(yǎng)殖42日齡白羽肉雞7萬只，40多只白羽肉雞出現(xiàn)了采食減少，關(guān)節(jié)腫大，腹瀉，個別的出現(xiàn)了急性死亡。

2細菌的分離鑒定

無菌采集病死白羽肉雞的肝臟、心血、關(guān)節(jié)滲出液等病料組織接種于7%脫纖兔血培養(yǎng)基上，置37℃恒溫箱培養(yǎng)12h，選取7%脫纖兔血培養(yǎng)基單個優(yōu)勢菌落再接種于甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)上培養(yǎng)后。挑取純化的培養(yǎng)的分離菌株進行革蘭氏染色鏡檢觀察其形態(tài)學。結(jié)果顯示，在7%脫纖兔血培養(yǎng)基長出了光滑邊緣整齊的菌落，形成透明的溶血環(huán)；在甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基上長出了中等大小的桔黃色菌落；在普通培養(yǎng)基上生長出圓形、隆起金黃色菌落；革蘭氏染色鏡檢可見，呈圓形，單個短鏈和成堆的葡萄串狀排列陽性菌。

3細菌生化試驗

取純化培養(yǎng)的分離菌株接種于營養(yǎng)肉湯中，37℃震蕩箱培養(yǎng)12h后，調(diào)整菌液濃度為2～3個麥氏濁度后，按照說明加入陽性菌鑒定試條中，置37℃培養(yǎng)48h后，觀察生化特性結(jié)果。結(jié)果顯示，分離菌分解葡萄糖、半乳糖、甘露糖，且產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不分解阿拉伯糖、棉籽糖、菊糖和肌醇、纖維二糖、并水解淀粉；不產(chǎn)生H2S，靛基質(zhì)試驗陰性；VP試驗和過氧化氫酶試驗陽性；與報道的葡萄球菌生化特性一致。

4動物回歸試驗

取純化培養(yǎng)的分離菌株接種于營養(yǎng)肉湯中，37℃震蕩箱培養(yǎng)12h后，調(diào)整菌液濃度（1×106CFU/mL）。將42日齡健康的白羽肉雞10只成2組，每組5只，第1組肌肉注射分菌株0.5mL（1×106CFU/mL）；第2組肌肉注射等量的生理鹽水。每組實驗雞攻毒12h后，記錄每組實驗雞的的發(fā)病及死亡情況，觀察期為7d，并對于死亡的實驗雞進行病原學鑒定。結(jié)果顯示，第1組試驗雞攻毒后的24～48h，均出現(xiàn)了發(fā)病，死亡率為100%，對死亡的試驗雞剖檢后，從肝臟中分離到葡萄球菌。第2組試驗雛雞無明顯的癥狀，證實了葡萄球菌白羽肉雞具有很強的致病性。

5藥敏試驗

取純化培養(yǎng)的分離菌株接種于營養(yǎng)肉湯中，37℃震蕩箱培養(yǎng)12h后，調(diào)整菌液濃度（1×106CFU/mL）。無菌的條件下均勻涂布在普通培養(yǎng)基上，貼上藥敏紙片，置37℃恒溫箱培養(yǎng)12h后，測量抑菌圈直徑，判斷標準按照美國臨床檢驗標準委員會（NCCLS）推薦的標準K-B紙片進行結(jié)果判斷。藥敏結(jié)果顯示，白羽肉雞源葡萄球菌對恩諾沙星、氧氟沙星、頭孢曲松、氟苯尼考、頭孢克肟、頭孢拉啶、大觀霉素、林可霉素8種藥物高度敏感；對頭孢他啶、丁胺卡娜、多西環(huán)素、氨芐西林、青霉素、阿莫西林、慶大霉素7種藥物耐藥。

小結(jié)

本文通過采集無菌病死白羽肉雞的肝臟、心血、關(guān)節(jié)滲出液等病料組織進行病原菌分離鑒定，分離菌株被鑒定為致病性葡萄球菌。藥敏結(jié)果顯示，白羽肉雞源葡萄球菌對恩諾沙星、氧氟沙星、頭孢曲松、氟苯尼考、頭孢克肟、頭孢拉啶、大觀霉素、林可霉素8種藥物高度敏感。當白羽肉雞發(fā)生葡萄球菌，應該根據(jù)藥敏試驗，選擇敏感藥物進行治療。

參考文獻

[1]喬獻軍. 皮炎型雞葡萄球菌病的診斷[J]. 今日畜牧獸醫(yī)，2008，（10）：9-10.

[2]史曉濤，陳立功，翟文棟，等.皮炎型雞葡萄球菌病的診斷[J]. 養(yǎng)禽與禽病防治，2009，（02）：35-36.