米糠熱解產(chǎn)物米糠油的抑菌作用研究

徐清瑩 崔素萍

摘要[目的]提高米糠的綜合利用率及其經(jīng)濟(jì)效益。[方法]以米糠為原料，用高溫裂解法制備米糠油，以浸在滅菌水中的濾紙碟進(jìn)行對照，對米糠油的抑菌作用進(jìn)行研究。[結(jié)果]米糠油對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠球菌等細(xì)菌，青霉、黃曲霉、黑曲霉等真菌均有抑制作用。其中米糠油對真菌的抑制效果優(yōu)于對細(xì)菌的抑制效果。[結(jié)論]米糠油具有一定的抑菌作用。

關(guān)鍵詞米糠；高溫裂解；米糠油；抑菌

中圖分類號TS209文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2017）12-0070-03

Abstract[Objective] In order to improve the utilization ratio and enhance the economic benefit of rice bran. [Method] Rice bran was used as raw materials， “the rice bran oil”was prepared by hightemperature pyrolysis， meanwhile， the bacteriostatic activity of “the rice bran oil” was researched with filter paper soaked in sterilized water as control. [Result] The results indicated that there were obviously antilbacterial and antilfungal effects， the bacteria such as Staphylococcus aureus， Escherichia coli， Candida albicans， and fungi such as Penicillium fungi， Aspergillus flavus and Aspergillus niger， were inhibited by “the rice bran oil”. The inhibitory effect of “the rice bran oil” to fungi was better than that of bacteria. [Conclusion] “The rice bran oil”has a certain inhibitory effect on bacteria and fungi.

Key wordsRice bran；Hightemperature pyrolysis；Rice bran oil；Antibacterial

米糠是稻谷加工的副產(chǎn)品之一，統(tǒng)計資料顯示，2011 年我國稻谷產(chǎn)量約為 20 100萬t，據(jù)此推算我國年產(chǎn)米糠約1 200 萬t[1] 。目前，米糠常被用于生產(chǎn)米糠油[2]、谷維素[3]、生育酚[4]、膳食纖維[5]等，其余大部分米糠主要是用來做動物飼料。米糠被聯(lián)合國工業(yè)發(fā)展組織稱為“一種未充分利用的原料”。如能充分利用這些米糠資源，將會創(chuàng)造可觀的經(jīng)濟(jì)效益[6]。

我國民間流傳著一種利用米糠油治療皮炎、腳氣病的偏方，即每次取少量米糠油涂抹患處。此方法對由真菌引起的皮癬、腳氣等疾病療效顯著。張宏光等[7]在米糠油對皮膚致病真菌抑制試驗研究中發(fā)現(xiàn)，米糠油對石膏樣小孢子癬菌、紫色毛癬菌、鐵銹色小孢子癬菌、許蘭氏毛癬菌、紅色毛癬菌等有高度抑制作用，由此可見米糠油對某些皮膚真菌病確有治療價值。

筆者擬用民間方法制備米糠熱裂解產(chǎn)物米糠油，并對米糠油的抑菌活性進(jìn)行研究，為研究米糠油對人類致病真菌的抑制作用的機(jī)理以對米糠油進(jìn)一步開發(fā)利用，提高米糠的綜合利用率以及稻谷的經(jīng)濟(jì)效益奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1材料

米糠：肇原制米廠提供。菌種：真菌（青霉、黃曲霉、黑曲霉 ）、細(xì)菌（白色念珠球菌、納豆芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌），均由黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)食品學(xué)院食品微生物實驗室保藏。

主要試劑：

足爽腳凈王，漳州市健源堂生物工程有限公司；牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、蔗糖（或葡萄糖），均為分析純級。

儀器設(shè)備：

DHG-9145型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、DNP-9052型電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海一恒科技有限公司；

LDZX-40SCI型立式自動電熱壓力蒸汽滅菌器，上海申安醫(yī)療器械廠；

DHG-9145型電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海精宏實驗設(shè)備有限公司。

1.2方法

1.2.1米糠油的制備。

從制米廠取新鮮的米糠除雜后，取一個搪瓷容器，將黃包裝紙平鋪在搪瓷容器口上，固定并封住瓷器口，將適量米糠放在黃包裝紙上端堆成圓錐型，從頂端引燃，使米糠慢慢燃燒，待米糠將要燃盡且燒至接近黃包裝紙時棄去米糠灰燼和殘余米糠，然后收集到一種棕黃色油樣液體，即米糠油（棕黃色油樣液體），然后將米糠油用細(xì)菌過濾器除菌后，冷藏備用。

1.2.2米糠油的抑菌試驗。

1.2.2.1紙碟的抑菌圈試驗。

分別制備細(xì)菌、真菌培養(yǎng)基，然后鋪平板。將已滅菌的濾紙碟浸泡在米糠油中，以浸在滅菌水中的濾紙碟做對照。將浸過米糠油的濾紙碟分別放入涂過細(xì)菌和真菌的培養(yǎng)皿中，把在滅菌水中的濾紙碟分別放入涂過真菌和細(xì)菌的培養(yǎng)基中做對照。

細(xì)菌培養(yǎng)基配制：

取牛肉膏 1.5 g，蛋白胨 10.0 g，NaCl 2.5 g，瓊脂 10.0 g，純凈水 500 mL，調(diào)節(jié)pH至7.2～7.4，121 ℃滅菌 20 min，倒制平板。

真菌培養(yǎng)基：

取馬鈴薯100.0 g，蔗糖（或葡萄糖）10.0 g，瓊脂 7.5～10.0 g，純凈水500 mL，pH自然，121 ℃滅菌 20 min，倒制平板。

接種培養(yǎng)：

在無菌條件下，將各菌種挑取到滅菌的生理鹽水中，用移液槍反復(fù)混勻。再用移液槍移取0.2 mL菌懸液接種到平板中，每個菌種涂3個平板，其中1個作對照樣，均勻涂布1～2 min并進(jìn)行編號，靜置10～30 min，待菌懸液完全吸收后，將浸泡過米糠油和蒸餾水的濾紙碟分別放入各平板中，再靜置10 min。將靜置后的平板倒置放入相應(yīng)的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)菌放入37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，真菌放入28 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)結(jié)束后進(jìn)行接種，分別在接種后24、48 h觀察抑菌圈的大小，并測量抑菌圈的直徑，記錄接種后不同時間抑菌圈的大小。

1.2.2.2足爽腳凈王、米糠油的抑制真菌效果研究。

將足爽腳凈王、米糠油分別與PDA培養(yǎng)基配制成不同濃度梯度的培養(yǎng)基，將平板中培養(yǎng)的真菌打菌碟，放入含有足爽腳凈王、米糠油的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，觀察抑菌效果。

培養(yǎng)基的配制：

將米糠油和足爽腳凈王藥品分別加入滅菌后的PDA培養(yǎng)基中制成濃度為2%、5%、10%、20%、30%的培養(yǎng)基，充分混勻后倒制平板，以基礎(chǔ)PDA培養(yǎng)基做為對照。然后依次將每個培養(yǎng)皿進(jìn)行編號。

接種培養(yǎng)并觀察抑菌效果：

在無菌條件下將平板上的青霉菌種打菌碟（直徑8 mm），分別放入含有米糠油和足爽腳凈王的平板的中心，將接種后的真菌平板放入28 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細(xì)菌放入37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，然后觀察抑菌效果，有抑菌效果的記做“+”，無抑菌效果的記做“-”。

2結(jié)果與分析

2.1紙碟的抑菌圈試驗

2.1.1米糠油對真菌的抑制效果。

圖1為黃曲霉受抑制效果圖，其中圖1a是以無菌水浸泡的紙碟作為對照樣，圖1b和1c是用米糠油浸泡的紙碟抑制黃曲霉的效果圖。圖1表明，無菌水對黃曲霉沒有抑制作用，而米糠油對黃曲霉有一定的抑制作用。

圖2為黑曲霉受抑制效果圖，其中圖2a是以無菌水浸泡的紙碟作為對照樣，圖2b和2c是用米糠油浸泡的紙碟抑制黑曲霉的效果圖。圖2表明，無菌水對黑曲霉沒有抑制作用，而米糠油對黑曲霉有一定的抑制作用。

圖3為青霉受抑制效果圖，其中圖3a是青霉涂布對照樣，圖3b和3c是用米糠油浸泡的紙碟抑制青霉的效果圖。圖3表明，無菌水對青霉沒有抑制作用，而米糠油對青霉有一定的抑制作用。由以上分析可知，無菌水對以上真菌無抑制作用，而米糠油對這些真菌有明顯的抑制作用，并且對不同的真菌菌種的抑制效果不同。其中，米糠油對青霉的抑制效果要優(yōu)于對黃曲霉和黑曲霉的抑制效果。

2.1.2米糠油對細(xì)菌的抑制效果。

由圖4可知，米糠油對白色念珠球菌、納豆芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌等細(xì)菌均有一定的抑制作用。但對不同的細(xì)菌菌種，米糠油的抑菌效果不同。對白色念珠球菌的抑制效果要優(yōu)于對枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌及納豆芽孢桿菌的抑菌效果。

以上試驗結(jié)果表明，米糠油對真菌和細(xì)菌都有抑制作用，并且米糠油的對真菌的抑菌效果要優(yōu)于對細(xì)菌的抑菌效果。這對后期選取濃度梯度試驗的代表性菌種奠定了基礎(chǔ)。

2.2不同濃度的米糠油和足爽腳凈王抑制青霉作用

由表1可知，米糠油和足爽腳凈王都對青霉具有抑制效果。

3結(jié)論與討論

該試驗結(jié)果表明，無菌水對真菌和細(xì)菌沒有抑制作用，米糠油對真菌和細(xì)菌都有抑制作用。在對真菌幾個菌種的抑制效果中，對青霉的抑制效果最佳；在對細(xì)菌幾個菌種的〖CM（25〗抑制效果中，對白色念珠球菌的抑制效果最佳。米糠油對真菌的抑制效果優(yōu)于對細(xì)菌的抑制效果。米糠油和足爽腳凈王均對青霉有抑菌效果。

米糠在200～500 ℃高溫下加熱能裂解成一種棕黃色油樣液體[8]，民間用燃燒法從米糠中得到的棕黃色油樣液體應(yīng)該是米糠熱裂解的產(chǎn)物，應(yīng)是多種成分的混合物，但混合物中具體含有何種有效成分，對人類致病真菌的抑菌效果和抑制機(jī)理如何，是否有快速、高效的制備方法可以替換民間的制備方法以獲取更多的米糠油，提高米糠油的提取率等方面在國內(nèi)外未見詳細(xì)報道。民間利用米糠治療疾病的偏方已廣泛流傳，今后如能將其中有效的偏方進(jìn)行科學(xué)的研究，使之規(guī)范化、科學(xué)化、安全化，再進(jìn)一步地研制開發(fā)出能夠商品化的藥物投放市場，滿足更多患者的需要，造福于社會，在帶來社會效益的同時，又能帶來一定的經(jīng)濟(jì)效益。

參考文獻(xiàn)

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[8] 羅婕，戴玉春，劉敏.兩種我國常見生物質(zhì)的熱解特性研究[J].株洲師范高等專科學(xué)校學(xué)報，2006，11（5）：45-47.