瑤藥白花丹炮制前后急性毒性的研究△

陳少鋒 趙湘培 余勝民 鐘 鳴

(廣西壯族自治區(qū)民族醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530001)

瑤藥白花丹炮制前后急性毒性的研究△

陳少鋒 趙湘培 余勝民 鐘 鳴

(廣西壯族自治區(qū)民族醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530001)

目的：比較白花丹藥材及炮制品的急性毒性大小，為探討白花丹炮制機理提供依據(jù)。方法：采用測定半數(shù)致死量的方法對白花丹藥材及炮制品的急性毒性進行研究。結(jié)果：白花丹生品及炮制品的LD50分別為88.7g/kg(95%置信區(qū)間為84.1～93.5g/kg)、99.5 g/kg(95%置信區(qū)間為93.7～105.7g/kg)。結(jié)論：白花丹炮制后急性毒性有明顯降低，表明用黃酒炮制能夠降低白花丹的毒性。

白花丹；炮制；急性毒性;瑤藥

瑤藥白花丹為白花丹科植物白花丹Plumbago zeylanica L.的干燥全草，在廣西分布較廣，是常用特色藥材。廣西壯醫(yī)稱“巔邦”(dien bang)或“裸端”(godon)，瑤族民間稱之為“猛老虎”(mongv ndormh maauh，蒙冬卯)或“三錢三”，主要用于治療風(fēng)濕骨痛、骨質(zhì)增生、跌打損傷、肝硬化和肝脾腫大。具有散瘀消腫，祛風(fēng)除濕，消炎止痛和殺蟲解毒作用[1]。文獻及臨床應(yīng)用表明白花丹藥材有毒，其中毒癥狀為：皮膚與其液接觸引起紅腫，脫皮，誤食后會出現(xiàn)麻痹，孕婦誤食會引起流產(chǎn)；家畜誤食會引起瀉下[2]。

白花丹還具有抗乙肝病毒[3]、抗生育[4]、抗動脈粥樣硬化[5]、抗高血糖[6]、增加中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性[7]等作用。白花丹根和葉主要成分為白花丹素(白花丹醌、礬松素)(plumbagin)、氫化蘭雪苷(tydroplumbagin glucoside)、氨基酸及有機酸等。藥理作用試驗表明：白花丹全草的水煎液或乙醇提取液對溶血性鏈球菌有較強的抑菌作用，對金黃色葡萄球菌、傷寒桿菌、福氏痢疾桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌有抑制作用。礬松素對革蘭氏菌、流感病毒、結(jié)核桿菌有廣譜抗菌作用，對利什曼原蟲亦有對抗作用。礬松素或白花丹酸給小鼠灌胃，有明顯祛痰作用[8]。由于白花丹主要用于風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，跌打損傷及皮廯，并且白花丹根莖不是很堅硬，而酒制法 “通血脈”“祛風(fēng)”“殺腥” “酒制升提，引藥上行” ，多用于活血化瘀藥、祛風(fēng)通絡(luò)和苦寒類藥物，故采用先伴酒再炒藥的酒制法進行炮制。

本實驗觀察白花丹提取物及白花丹炮制后提取物是否具有毒副作用。通過毒理學(xué)研究，為確定白花丹及白花丹炮制品的最大安全劑量，指導(dǎo)臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥材： 白花丹藥材，采自廣西金秀瑤族自治縣，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)韋松基教授鑒定為白花丹科植物白花丹的全草，烘干切片。白花丹的炮制品，取白花丹藥材，加黃酒適量，拌勻后放置一下，置于鍋內(nèi)炒制至無酒味，放涼。

1.2 實驗動物： 昆明種小鼠，SPF級，體重18～22g，雌雄各半。購自廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心，許可證號：SXK桂2003-0003。動物購回后，雌雄分飼，由專人飼養(yǎng)管理，動物室溫度控制在18～25℃，相對濕度控制在50～60%，動物室按常規(guī)定期消毒。

2 方法

2.1 提取物的制備： 分別取白花丹藥材及炮制品，將其粉碎為粗粉末，加水浸泡2 h，以武火煮沸后改文火煎煮90 min，冷卻30 min后濾渣取汁。將濾渣再煎煮2次取汁。將藥汁混合，濃縮制得每毫升含生藥2.5 g的白花丹生品及炮制品水煎液，置冰箱4℃?zhèn)溆谩?/p>

2.2 白花丹的急性毒性試驗[9]： 以改進寇氏法設(shè)計，經(jīng)預(yù)試，分別找出引起動物0%(Dn)和100%(Dm)死亡的白花丹水提物的劑量。根據(jù)預(yù)試結(jié)果在測得Dn 和Dm 劑量范圍內(nèi)設(shè)4個劑量組，分別為114.4g/ Kg，97.2 g/ Kg，87. g/ Kg，78.7 g/ Kg,70.8 g/ Kg，每組10只小鼠，組間劑量比值1:0.9，禁食12h后不禁水，分別灌服不同劑量的受試藥物(每只小鼠用藥體積均為0 .4ml/10g 體重)，連續(xù)觀察7天各小鼠的毒性反應(yīng)情況。

3 結(jié)果

小鼠給藥后自發(fā)活動減少、倦臥不動、嗜睡，動物皮毛光澤，無震顫、驚厥、運動失調(diào)、流涎、流淚、流鼻涕、呼吸困難等現(xiàn)象發(fā)生。給藥半天后開始有小鼠死亡。給藥7d后觀察，5個劑量組的小鼠都出現(xiàn)不同的死亡情況，結(jié)果如表1，表2。

表1 白花丹水提物毒性實驗動物死亡結(jié)果

經(jīng)改進寇氏法計算，白花丹水提物小鼠口服給藥可測得LD50值為88.7g/kg，其95%置信區(qū)間為84.1～93.5g/kg。

表2 白花丹炮制品水提物毒性實驗動物死亡結(jié)果

經(jīng)改進寇氏法計算，白花丹炮制品水提物小鼠口服給藥可測得LD50值為99.5g/kg，其95%置信區(qū)間為93.7～105.7g/kg。

4 討論

白花丹為白花丹科植物白花丹的干燥全草。白花丹的主要成分是白花丹琨，白花丹提取物具有抗瘧原蟲，抗菌，抗過敏，抗高血糖癥，抗腫瘤及抗肝纖維化等作用[10]。白花丹藥材有小毒，經(jīng)先伴酒再炒藥的酒制法進行炮制，白花丹的毒性從88.7g/kg降低到99.5g/kg。說明酒制白花丹有效。

[1]廣西藥檢所.廣西民族藥簡編[M].南寧：廣西民族出版社,1980:52.

[2]中國藥品生物制品檢定所,等.中國民族藥志[M].第二卷.北京:人民衛(wèi)生出版社,1990:152.

[3]Chen W， Yu Z， Li S.Effects of the water-soluble extracts from the single herb of ganduqing against hepatitis B virus in vitro[J]. Zhong Yao Cai,1999 Sep；22(9)：463-5.

[4]Azad Chowdhury AK， Sushanta KC， Azad Khan AK.Antifertility activity of Plumbago zeylanica Linn. Root[J].Indian J Med Res. 1982 Dec；76 Suppl：99-101.

[5]Sharma I， Gusain D， Dixit VP.Hypolipidaemic and antiatherosclerotic effects of plumbagin in rabbits[J]. Indian J Physiol Pharmacol. 1991 Jan；35(1)：10-4

[6]Olagunju JA,Jobi AA,Oyedapo OO,An investigation into the biochemical basis of the observed hyperglycaemia in rats treated with ethanol root extract of plumbago zeylanica[J].Phytother Res. 1999 Jun;13(4):346-8.

[7]Bopaiah CP, Pradhan N.Central nervous system stimulatory action from the root extract of Plumbago zeylanica in rats[J]..Phytother Res. 2001 Mar；15(2):153-6.

[8] Durga R， Sridhar P， Polasa H.Effects of plumbagin on antibiotic resistance in bacteria[J]..Indian J Med Res. 1990 Jan；91：18-2.

[9]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社.1994.112.

[10]陳少鋒，黃琳蕓，鐘鳴，等.瑤藥“猛老虎”對大鼠免疫性肝纖維化影響的實驗研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2008，19(8)：1813.

2016年11月7日收稿

廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳中醫(yī)藥科技專項課題：GZBZ14-13

陳少鋒(1970- )，男,漢族，廣西博白人，廣西壯族自治區(qū)民族醫(yī)藥研究院副主任藥師，學(xué)士學(xué)位，主要從事中藥，民族藥藥理研究工作。

R295.1

A

1006-6810(2017)02-0065-02